内毒素作用下淋巴细胞中CD4＋CD25＋调节性T细胞变化及连翘对其的影响

目的探讨不同时间点内毒素（LPS）对CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋regulatory T cell,Treg）的影响及连翘（forsythia suspensa,FS）干预后CD4＋CD25＋调节性T细胞的变化。方法体外培养Wistar大鼠脾脏淋巴细胞,分为对照组、LPS（10ng/ml）组、LPS（10ng/ml）＋多黏菌素B组（10ng/ml）、LPS（10ng/ml）＋连翘（12．5、25、50mg／ml）组,分别于3、6、12h收集标本．流式细胞术检测CD4＋CD25＋调节性T细胞在淋巴细胞中的百分比,荧光定量RT—PCR法检测Foxp3mRNA表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测TNF—a、IL-10分泌水平。结果脾脏淋巴细胞中CD4＋CD25＋Treg的百分比和Foxp3mRNA的表达在12h较3、6h明显升高（P〈0．01）;TNF—a、IL-10的分泌随时间点的延长均显著升高（P〈0．01）;随连翘剂量增加,TNF-a、IL-10分泌水平,Foxp3mRNA表达和CD4＋CD25＋Treg百分比均明显降低（P〈0．05）。结论内毒素参与并诱导了CD4＋CD25＋Treg在淋巴细胞中的变化,其随内毒素作用时间延长呈上升趋势。连翘能显著降低CD4＋CD25＋Treg在淋巴细胞中的百分比。     

黄芩甙对重症急性胰腺炎TNF-α、IL-6及IL-10的影响

目的：研究黄芩甙对重症急性胰腺炎（SAP）中组织TNF-α、IL-6、IL-10及TNF-α／IL-10动态变化的影响。方法：雄性SD大鼠45只,随机分为假手术组、模型组、干预组,每组各15只。假手术组仅行开腹翻动胰腺十二指肠后关腹,其余两组开腹后均行3.5％牛黄胆酸钠逆行胰胆管注射,制作SAP模型。造模后10min,干预组经股静脉给予5％黄芩甙,其余两组给予等量生理盐水。给药3、6、12h后测定血清淀粉酶、脂肪酶;观察胰腺组织病理改变;测定胰腺组织中TNF-α、IL-6、IL-10的含量。结果：（1）模型组血清淀粉酶、脂肪酶较假手术组显著增高（P〈0．01）;除3h脂肪酶外,干预组各时间点血清淀粉酶、脂肪酶较模型组显著降低（P〈0．01～0．05）;（2）模型组胰腺及周围有皂化斑的形成,胰腺水肿、出血、炎细胞浸润,胰腺组织结构破坏明显,有大片坏死区;干预组与模型组比较显著改善;（3）模型组胰腺组织中TNF-α、IL-6、IL-10水平较假手术组显著升高（P〈0．01）,而干预组较模型组显著降低（P〈0．01～0．05）;（4）模型组TNF-α/IL-10随时间先升高,6h后逐渐减低;干预组较模型组降低早,3h已开始明显降低。结论：黄芩甙可能通过减少TNF-α和IL-6的产生和释放,下调TNF-α/IL-10发挥对胰腺组织的保护作用。     

鼻咽癌中白细胞介素-10、白细胞介素-12检测及其意义

目的检测鼻咽癌患者白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）及白细胞介素-12（interleukin-12,IL-12）浓度。方法用酶联免疫法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA）检测43例鼻咽癌患者血清IL-10及IL—12浓度,并用22例健康成年人血清作为对照。结果鼻咽癌组IL—10浓度明显高于对照组,鼻咽癌组IL—12浓度明显低于对照组,IL-10浓度在晚期T分期组（T3／T4）明显高于早期T分期组（Ⅰ／Ⅱ）W〈0．01）、晚期临床分期组（Ⅲ/Ⅳ）明显高于早期临床分期组（Ⅰ／Ⅱ）,但在不同性别、年龄组及有无淋巴结转移组浓度差异无统计学意义（P〉0．05）。而IL-12在晚期T分期组（T3／T4）N显低于早期T分期组（Ⅰ／Ⅱ）（P〈0．01）、晚期临床分期组（Ⅲ/Ⅳ）明显低于早期临床分期组（Ⅰ/Ⅱ）,但在不同性别、年龄组及有无淋巴结转移组浓度差异无统计学意义（P〉0．05）。且IL-10及IL-12浓度呈负相关关系。结论鼻咽癌中高浓度的IL-10可能抑制IL-12的产生,帮助肿瘤细胞免疫逃避,损害机体肿瘤免疫,从而促进肿瘤发展。     

白藜芦醇对重症急性胰腺炎大鼠炎性细胞因子的影响

目的观察白藜芦醇对重症急性胰腺炎（severeacutepancreatitis,SAP）大鼠血清炎性细胞因子的影响。方法取SD大鼠,经胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠制备SAP模型,分为假手术组、模型组、白藜芦醇组（20、10、5ms／kg）,每组16只。采用尾静脉注射给药,术后6h和12h分别于光镜下观察胰腺组织的病理学改变,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白介素-1（IL-1）和IL-6水平。结果白藜芦醇各剂量均能减轻胰腺组织的炎性反应,病理评分与模型组比较,明显降低（P〈0．01）;术后6h各剂量对应TNF-α[（89．0±19．2）、（84．7±16．0）、（105．6±22．3）ns／L]、IL-1[（109．3±19．8）、（114．5±30．2）、（135．5±29．2）ns／L]和IL-6[（185．3±28．8）、（201．5±44．0）、（213．0±30．7）ns／L],水平均明显低于模型组（P〈0．05或P〈0．01）。术后12h情况同术后6h。结论白藜芦醇通过减少炎性细胞因子的过度释放,对大鼠SAP具有保护作用。     

ω-芋螺毒素SO3对大鼠慢性神经痛镇痛作用及对血清IL-6浓度影响

目的 观察持续鞘内注射新型特异性N型电压依赖性钙通道阻滞剂-ω-芋螺毒素SO3对慢性压迫性损伤所致的神经痛大鼠的长期镇痛效果,及其对神经痛大鼠血清IL-6浓度的影响。方法 建立大鼠CCI模型,比较观察连续鞘内注射ω-芋螺毒素SO3后大鼠热刺激爪退缩阈值和冷水中抬足次数变化以及血清IL-6水平的改变。结果 CCI大鼠术后出现热刺激爪退缩阈值缩短（P〈0．01）、冷水中抬足次数增加（P〈0．01）;血清中IL-6水平明显升高（P〈0．01）。持续鞘内注射生理氯化钠溶液对这两种阈值变化以及血清中IL-6水平无明显影响;持续鞘内注射ω-芋螺毒素SO3（60ng／h）能明显提高CCI大鼠热刺激爪退缩阈值（P〈0．01）,减少冷水中抬足次数（P〈0．01）;并显著降低血清中IL-6水平（P〈0．01）。结论 长期持续鞘内注射ω-芋螺毒素SO3可有效地治疗CCI大鼠的冷、热痛觉过敏,并显著降低CCI大鼠血清IL-6浓度。     

肢体缺血预处理对肺缺血再灌注兔细胞因子和肺细胞凋亡的影响

研究肢体缺血预处理对肺缺血再灌注兔细胞因子和肺细胞凋亡的影响。方法：18只日本大耳白兔随机分为假手术组（S组）、肺缺血再灌注组（I／R组）、肢体缺血预处理组（L组）,每组6只。分别测定肺缺血前后各时间段兔血清及实验结束时兔左肺组织中TNF-a、IL-6、IL-10的含量和细胞凋亡指数（AI）,观察肺组织病理学变化和肺损伤定量评价（IQA）。结果：与I／R组比较,L组肺缺血再灌注后各时间段血清和肺组织TNF-仅、IL-6浓度明显降低（P〈0．05或P〈0．01）,IL-10浓度明显升高（P〈0．01）。L组光镜下肺组织病理学改变较I／R组明显减轻,且IQA及AI明显低于I／R组（P〈0．01）。结论：肢体缺血预处理能有效的减少肺缺血再灌注后血清和肺组织中促炎细胞因子浓度,增加抗炎细胞因子浓度,从而减少肺组织细胞凋亡的发生。     

脓毒症大鼠肝脏组织Toll样受体4和髓样分化蛋白-2基因表达的变化规律

目的探讨脓毒疗人鼠肝脏组织内毒素复合受体—Toll样受体4（TLR4）／髓样分化蛋白-2（MD-2）mRNA的表达变化，研究其与肝脏组织肿瘤坏死因子-α（TNF—α）mRNA表达的父系。方法腹腔注射内毒素（LPS）5mg／kg制作大鼠脓毒症模型。动物分为正常对照组（20只）及内毒素注射后1h、2h、6h组（各20只）．检测肝脏组织TLR4／MD-2以及TNF-α mRNA的表达。结果LPS注射后1h，TLR4／MD-2及TNF-α mRNA表达开始升高并达高峰．伤后2～6h逐渐下降，各时间点的表达量均显著高于对照组（P〈0．01）．TLR4与MD-2 mRNA的表达呈明显正相关（P〈0．05）．且分别与TNF—α mRNA的表达呈显著正相关（P〈0．05）。结论LPS可迅速上调肝脏组织TLR4／MD-2的基闪表达并诱导早期炎症细胞因子TNF-α的基因表达。脓毒症时TLR4识别LPS是可能以TLR4／MD-2复合体的形式完成的．且在识别过程中MD-2是TLR4必需的作用分子。     

塞来昔布超前镇痛对围术期IL-1β和IL-2的作用

目的观察塞来昔布是否有超前镇痛的作用，同时监测其对围术期细胞因子水平的影响。方法60例骨科下肢择期手术患者，随机分为对照组（A组，安慰剂术前1h口服）、术前镇痛组（B组，塞来昔布200mg术前1h口服）、术后镇痛组I（C组，塞来昔布200mg术后即刻口服）、术后镇痛组Ⅱ（D组，塞来昔布200mg术后1h口服）。分别于术后2h、4h、6h、12h、24h、48h进行可视痛觉评分（VAS）测定和观察术后应用曲马多镇痛总量。术前、术毕即刻、术后24小时、术后48小时分别抽取静脉血检测细胞因子IL-1β、IL-2的水平。结果A组VAS在术后各个时点均最高（P〈0．05），B组的VAS最低（P〈0．05）。术后12h、24h曲马多用量A组用量最大（P〈0．01），B组最低（P〈0．01）。A组IL-1β水平术后升高的程度最高（P〈0．05），余三组没有显著区别（P〉0．05）。A组IL-2术后水平下降的程度最高（P〈0．01），C、D组次之．B组下降程度最低（P〈0．05）。结论下肢手术中塞来昔布（200mg，术前1h）有明显地超前镇痛效果，同时影响围术期机体血清IL-1β和IL-2水平。     

认知障碍程度对阿尔茨海默病患者脑脊液各类炎性细胞因子表达影响

目的：观察认知障碍程度对阿尔茨海默病（AD）患者脑脊液（CSF）各类炎性细胞因子表达影响。方法：连续选择近期在我院住院的AD患者39例,对照组选择同期参加体检的健康中、老年人25例,入选对象接受了CSF促炎性细胞因子（IL-1B、IL-6和TNF—d）及抗炎性细胞因子（IL-4、IL-10和TGF—t31）检测,还对AD患者进行了AD评定量表认知部分”（ADAS—Cog）评估。结果：AD组CSF促炎性细胞因子IL-1B、IL-6及TNF-α表达水平均显著高于对照组,而抗炎性细胞因子IL-10及TGF-81表达水平明显低于对照组（P均〈0．05—0．01）;轻度认知损害组（ADAS—Cog总分〈20分,22例）CSF促炎性细胞因子IL-1B、IL-6及TNF-α表达水平均显著低于中、重度认知损害重组（ADAS—Cog总分≥20分,17例）,但明显高于对照组（P均〈0．05～0．01）;轻度认知损害轻组CSF抗炎性细胞因子IL-4、IL-10及TGF—B1表达水平均显著高于中、重度认知损害重组,但明显低于对照组（P均〈0．05—0．01）。结论：AD患者存在明确的CSF各类炎性细胞因子表达异常,且随着认知损伤严重而进一步活跃。     

维甲酸对人乳腺癌细胞NIS基因表达和摄碘功能的影响

目的探讨9-顺-维甲酸（9-cis—RA）对人乳腺癌细胞钠／碘同向转运体（NIS）基因功能表达的影响。方法应用9-cis—RA和全反式维甲酸（ATRA）分别在不同浓度下对雌激素受体（ER）阳性的乳腺癌细胞（MCF-7）和ER阴性的乳腺癌细胞（MDA—MB-231）进行干预，于不同时间点提取细胞总RNA，通过半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测乳腺癌细胞NIS mRNA表达水平的变化；在体外培养条件下研究RA刺激后乳腺癌细胞对放射性碘的摄取情况。结果9-cis—RA处理后，MCF-7细胞NIS mRNA表达增强，呈浓度依赖性（F=114．17，P〈0．001），在10^-6mol／L浓度下NIS mRNA的表达随时间上调，16h时达到最高，是对照组（0h）的8．2倍（q=8．32，P〈0．01），此后随时间逐渐下调；且9-cis—RA（10^-6mol／L，24h）的作用强于ATRA（t=6．572，P〈0．01）。MDA—MB-231基础状态下几乎无NIS表达，9-cis—RA刺激后可上调其表达（t=20．195，P〈0．001），但表达量（NIS／B—actin）远低于MCF-7（t=10．395，P〈0．001）。碘摄取实验表明，10^-6mol／L 9-cis—RA干预12h后，MCF-7细胞摄碘开始增加，干预24h时碘摄取达最大，是基础状态下的3．2倍，其摄碘能力可被KCl0。抑制。结论9-cis—RA能明显增强ER阳性的MCF-7细胞NIS基因的表达及摄碘功能。     

1,25（OH）2D3对人血管平滑肌细胞TLR4基因及炎症因子表达的抑制作用

目的探讨1,25（OH）2D3（1,25-dihydroxyvitamin D3）对人主动脉血管平滑肌细胞（human aortic vascular smooth muscle cell,HA-VSMC）果蝇样受体（Toll like receptor 4,TLR4）基因及其下游炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用。方法不同浓度1,25（OH）2D3干预HA-VSMC后,采用实时荧光定量PCR法检测细胞TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mR-NA的表达水平。结果 1,25（OH）2D3在浓度为1-20nmol/L之间抑制TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mRNA水平的表达且具有明显的剂量依赖关系。在浓度为1nmol/L时1,25（OH）2D3下调TLR4和MCP-1mRNA表达的作用最明显,浓度为10nmol/L时,1,25（OH）2D3下调IL-6mRNA表达的作用最明显,浓度为20nmol/L时,1,25（OH）2D3下调IL-8mRNA表达的作用最明显。TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1mRNA表达的最大下调幅度分别为对照组的3.08、2.39、3.19、2.23倍（均P〈0.05）。结论 1,25（OH）2D3通过下调TLR-4信号抑制了人主动脉血管平滑肌细胞的炎症反应。     

C反应蛋白、白细胞介素-6在2型糖尿病合并冠心病患者中的水平和关系

目的：探讨C反应蛋白（CRP）、白细胞介素（IL）-6在2型糖尿病合并冠心病患者中的水平及其关系。方法：2型糖尿病合并冠心病患者34例、冠心病患者42例和正常对照20例,测定血清CRP和IL-6水平。结果：2型糖尿病合并冠心病组CRP为5．21±1．89mg／L、IL-6水平为7．40±2．98ng／L,均显著高于冠心病组（3．30±1．10mg／L和5．22±2．03ng／L）和正常对照（1．68±0．54mg／L和3．38±1．85ng／L）,并且在2型糖尿病合并冠心病患者中二者呈正相关（r=0．708）。结论：2型糖尿病合并冠心病患者中活跃的动脉粥样硬化病变进程可能与CRP、IL-6有关,二者可能在其机制中发挥协同作用。     

绝经后妇女骨关节炎、骨质疏松的性激素与细胞因子的变化

目的：探讨绝经后妇女骨关节炎（OA）、骨质疏松（OP）患者性激素与细胞因子血浆水平的变化;讨论绝经后妇女OA、OP的相关细胞因子,寻找这两种疾病重要的生物学指标。方法：设立病例对照组,病例组：OA组（32例绝经后OA患者）,OP组（30例绝经后OP患者）;对照组（30例绝经后健康体检者）,检测92例受检者的雌二醇（E2）、睾酮（T）、促卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、金属蛋白酶（MMF）等的血浆水平,并进行相关性分析。结果：性激素E2、T、FSH和LH与绝经后妇女OA、OP呈负相关性;OA组患者血浆IL-10水平降低,血浆MMP水平增高,较对照组、OP组有显著性差异（P〈0.05）;而OP组的血浆IL-6水平较对照组、0A组增高,有显著性差异（P〈0.05）。结论：提示性激素不平衡是绝经后OA、OP的发病共同因素之一;血浆IL-10、MMP可能是绝经后OA发病过程中较重要的生物学指标,IL-6可能是绝经后OP发病过程中较重要的生物学指标。     

急性肺损伤小鼠血糖水平与支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β的关系

目的：观察脂多糖（LPS）所致急性肺损伤小鼠血糖、支气管肺泡灌洗液（βALF）中TNF—OL、IL-1β的变化规律,并初步探讨它们间的关系。方法：雄性βALβ／c小鼠45只,随机分为正常对照组、麻醉对照组、LPS组（气管内给予LPS1mg／kg）,每组15只。分别于处理后1、3、6、12、24h采血,检测血糖;获取各组小鼠βALF,采用ELISA法检测其中TNF—a和IL-1β的浓度。数据结果用统计学软件SPSS17．0进行分析。结果：与正常对照组及麻醉对照组比较,LPS组小鼠血糖明显升高,12h时与正常对照组比较仍有统计学意义（P〈0．05）;βALF中TNF-α及IL-1β浓度均明显升高,24h时与正常对照组比较仍有统计学意义（P〈0．05）。LPS组小鼠血糖水平与相应时间段βALF中TNF—d浓度呈正相关（L=0．738,P〈0．05）;与相应时间段βALF中IL-1β浓度呈正相关（0=0．618,P〈0．05）。结论：LPS诱导的急性肺损伤血糖、TNF-α、IL-1β均明显升高,且血糖水平与TNF-α、IL一1β浓度有相关性。     

脉冲电磁场对去势大鼠腰椎局部细胞因子及骨组织学影响

目的：探讨脉冲电磁场对去势大鼠腰椎局部细胞因子及骨组织学的影响。方法：选用健康Wistar雌性大白鼠共18只,随机分为A组（双侧卵巢切除＋脉冲电磁场治疗组）,B组（双侧卵巢切除组）,C组（伪去势组）,每组6只。A组于术后3d置脉冲电磁场治疗,每天1次,1h／次,共治疗3个月,电磁场频率为2Hz。3个月后处死所有大鼠,取大鼠的全部腰椎和股骨,腰椎匀浆后取上清液,采用放射免疫法测定肿瘤坏死因子（TNF—α）和白细胞介素-6（IL-6）含量。股骨固定,脱钙,常规石蜡切片,HE染色观察骨组织学变化。结果：B组大鼠腰椎TNF—α含量显著高于A、C组（P〈0．01）。B组IL-6含量与A、C组比较显著增高（P〈0．01）。A组同C组比较TNF-α和IL-6含量无统计学差异。骨组织学观察：B组股骨与A、C组比较骨皮质变薄,骨髓腔扩大,骨小梁分布稀疏,骨小梁粗细不均,见断裂现象。A组与C组比较无明显差别。结论：去势大鼠腰椎TNF-α和IL-6含量显著高于正常对照组,大鼠去势后股骨骨小梁明显变细,数量减少,分布稀疏。脉冲电磁场能明显降低去势大鼠腰椎TNF—α和IL-6的含量和抑制骨吸收。     

白藜芦醇对重症急性胰腺炎大鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的：探讨腹腔巨噬细胞（PM）在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）中的作用,并观察白藜芦醇（Res）对SAP大鼠PM功能的影响。方法：36只大鼠随机分为假手术（SO）组、SAP组和Res组3组。制模后4、12h剖杀大鼠。分离PM并培养24h。RT—PCR法检测PM中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA和白介素-1β（IL-1β）mRNA的表达;酶联免疫吸附法（EUSA）检测细胞培养液及血清中TNF-α和IL-1β的水平。取胰腺组织行HE染色及病理学评分。结果：与SAP组比较,Res组胰腺损伤程度明显减轻;SAP组PM中TNF—mnRNA和IL—1βmRNA的表达、细胞培养液及血清中TNF-α和IL-1β水平均高于SO组（P〈0．001）;与SAP组比较,Res组PM中TNF-αmRNA和1L-1βLRNA的表达、细胞培养液及血清中TNF-α和IL-1β水平明显下降（P〈0．001）,但仍高于SO组（P〈0．05）。结论：PM在SAP发病机制中起非常重要的作用;Res能显著减轻SAP时胰腺组织损伤,其机制与抑制PM功能,从而抑制TNF-α和IL-1β的分泌有关。     

肝纤维化与血浆肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6和白细胞介素-10水平的关系

 目的 探讨肝纤维化患者血浆中促炎细胞因子与抗炎细胞因子水平的变化及其与肝纤维化指标的关系.方法 检测137例肝纤维化患者血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6) 、白细胞介素-10(IL-10)及透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原-C(Ⅳ-C)水平,并进行Child-Pugh分级和分析.结果 肝纤维化患者血浆TNF-α、IL-6、HA、LN、PⅢNP、Ⅳ-C水平较对照组均明显升高(P<0.05或P<0.01),IL-10水平较对照组均明显降低(P<0.05),并随Child-Pugh评分增加而递增或递减(P<0.05或P<0.01).TNF-α、IL-6与HA、LN、PⅢNP、Ⅳ-C水平间均呈显著正相关(P<0.05或P<0.01),IL-10与HA、LN、PⅢNP、Ⅳ-C水平间均呈显著负相关(P<0.05).结论 TNF-α、IL-6、IL-10与肝纤维化密切相关,在肝纤维化的早期诊断中具有一定的临床价值;抑制TNF-α、IL-6的活性,加强IL-10的作用,可能是治疗肝纤维化的有效途径和手段.     

原发性胆汁性肝硬化外周血Toll样受体和细胞因子信号转导抑制分子mRNA水平的表达及意义

 目的 探讨cytokine-TLR-SOCS通路在原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)发病机制中的作用.方法 研究对象分为3组:32例PBC,30例慢性乙肝(chronic hepatitis B,CHB)和32例健康人(healthy controls,HC).ELISA测定血清IL-6和IFNγ的变化,RT-PCR测定外周血单个核细胞的TLR和SOCS的表达.结果 与HC组相比,PBC组的IL-6和IFNγ水平显著升高;PBC组的TLR4、TLR9、SOCS1和SOCS3 mRNA的水平均显著性高于HC,为HC组的1.48、2.51、3.43和1.48倍,TLR9和SOCS1的mRNA水平是CHB组的6.85倍和2.99倍(P＜0.05).结论 PBC患者处于炎性状态;TLR的过度激活可能与PBC的发生和发展有一定关系,SOCS作为通路的负调控蛋白可作为疾病免疫治疗的靶点.