人原发性肝癌基因治疗的实验研究：肿瘤坏死因子基因的初步应用

将含人肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）ｃＤＮＡ的不同逆转录病毒载体（ＬＮＳ－ｔｎｆα、Ｌ－ｔｎｆαＳＮ及ＬＮＣ－ｔｎｆα）和质粒型真核细胞载体（ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα），分别用磷酸钙法导入肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１中，观察ＴＮＦ的表达水平。结果：重组质粒型表达载体ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα表达好，２４小时开始分泌ＴＮＦα（５０Ｕ／ｍｌ），４８￣７２小时达最高值（９０Ｕ／ｍｌ），９６小时后下降（４０Ｕ／ｍｌ）。将ｐ     

ENU诱发xy1E,C57BL/6J转基因小鼠体内基因突变及微核效应的实验研究

目的：用诱变剂乙基亚硝基脲（ Ｅ Ｎ Ｕ） 验证基于ｐ Ｕ Ｃ１１８ Ｎ Ｘ 质粒载体的转基因小鼠用于研究体内基因突变的可行性。方法：用酶切、环化方式从经和未经 Ｅ Ｎ Ｕ 诱变处理的ｘｙ１ Ｅ， Ｃ５７ Ｂ Ｌ／６ Ｊ转基因小鼠脾脏组织 Ｄ Ｎ Ａ 中分离ｐ Ｕ Ｃ１１８ Ｎ Ｘ 质粒载体，使其转化 Ｄ Ｈ１０ Ｂ 宿主菌并铺 Ａｍｐｒ 平板培养后喷洒邻苯二酚溶液，通过菌落黄白颜色不同筛选突变体，并对突变靶基因ｘｙ１ Ｅ 测序分析以确定突变类型和位点。同时取该转基因小鼠外周血及骨髓细胞，观察 Ｅ Ｎ Ｕ 对转基因小鼠微核形成率的影响。结果：（１） 转基因小鼠脾脏组织ｘｙ１ Ｅ 基因自发突变率小于４ ．７９ ×１０ － ５ ，经 Ｅ Ｎ Ｕ（５０ｍ ｇ／ｋｇ ×５） 处理后，脾组织诱发基因突变率为１９ ．８３ ×１０ － ５ ，两者相差显著；（２） Ｅ Ｎ Ｕ 诱发小鼠脾组织基因突变的类型包括颠换（５０ ％ ） 、单／ 双碱基插入（３７ ．５ ％ ）和转换（１２ ．５ ％ ） ；（３） 经 Ｅ Ｎ Ｕ（５０ ｍｇ／ｋｇ ×５） 处理后，转基因小鼠外周血和骨髓细胞的微核率均明显增加，分别为７ ．６ ‰和８ ．８ ‰，与溶剂对照组相比有显著性差异（ Ｐ＜ ０ ．０１） ，表明 Ｅ Ｎ Ｕ 可明显诱发     

小鼠Egr-1基因启动子的克隆及其辐射诱导基因表达

目的：研究克隆小鼠Ｅｇｒ－１基因启动子及其辐射诱导基因表达特征。方法：用合成的一对引物,以ＢＡＬＢ／ｃ小鼠基因组为模板,扩增出４４９ｂｐ大小含６个ＣＣ（Ａ／Ｔ）６ＧＧ基序的序列,通过亚克隆技术分别将其插入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡ测序载体和ｐＨＧＦＰ－Ｓ６５Ｔ报告载体中,利用测序载体对克隆的ＤＮＡ序列进行分析。报告质粒载体经Ｌｉ－ｐｏｆｅｃＴＡＭＩＮＥ脂质体介导转染ＣＯＳ－７细胞后给予γ射线照射或Ｈ     

人原发性肝癌基因的实验研究───肿瘤坏死因子基因的初步应用

将含人肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）ｃＤＮＡ的不同逆转录病毒载体（ＬＮＳ－ｔｎｆα、Ｌ－ｔｎｆαＳＮ及ＬＮＣ－ｔｎｆα）和质粒型真核细胞载体（ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα），分别用磷酸钙法导入肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１中，观察ＴＮＦ的表达水平。结果：重组质粒型表达载体ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα表达好，２４小时开始分泌ＴＮＦα（５０Ｕ／ｍｌ），４８～７２小时达最高值（９０Ｕ／ｍｌ），９６小时后下降（４０Ｕ／ｍｌ）。将ｐＳＶＫ３－ｔｎｆα重组ＤＮＡ用磷酸钙包裹后直接进行瘤内注射，发现裸鼠外周血ＴＮＦα水平有一过性增高，３周后测量瘤体大小，发现实验组的肿瘤体积明显小于对照组（２．５±１．６ｃｍ比３．２±１．８ｃｍ，ｎ＝６，Ｐ＜０．０５），实验组荷瘤裸鼠的生存时间亦明显延长（４４．０±３．３ｄ比２８．２±２．０ｄ，ｎ＝６，Ｐ＜０．０１）。结果表明，应用ＴＮＦα基因转移进行肝癌的基因治疗是一条值得探索的途径。     

鼻咽癌中p53基因突变的研究

目的：探讨鼻咽癌中ｐ５３基因突变情况。方法：用非同位素不对称ＰＣＲ－单链构象多态性技术（ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ），分析了鼻咽癌活检组织、细胞株和裸鼠移植瘤中ｐ５３基因第５、６、７和８外显子（ｅｘｏｎ）的基因突变，并对其中ｅｘｏｎ８突变的ＳＵＮＥ－１和ＳＵＮＴ－１进行ＤＮＡ测序。结果：在２０例鼻咽癌活检组织中没有发现突变；但在鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１、ＣＮＥ２、ＳＵＮＥ－１和瘤株ＳＵＮＴ－１中存在第８外显子突变，而ＨＫ１为第５外显子突变。ＤＮＡ测序发现ＳＵＮＥ－１和ＳＵＮＴ－１的突变点在ｅｘｏｎ８的密码子（ｃｏｄｏｎ）２８０上，由ＡＧＡ（精氨酸）→ＡＣＡ（苏氨酸）。结论：ｐ５３基因突变热点的ｅｘｏｎ５、６、７和８可能在鼻咽癌变过程中没有重要意义，而在裸鼠移植瘤和细胞株建立过程中起重要作用。ＥＢＶ由于和鼻咽癌的关系密切，在鼻咽癌中可能存在ＥＢＶ编码蛋白与ｐ５３结合或蛋白表达被ＥＢＶ抑制等其他途径使ｐ５３失活。     

mB7－1基因转染小鼠黑色素瘤细胞诱导的抗瘤效应研究

目的：研究共刺激Ｂ７－１（ＣＤ６０）在诱导有效的抗肿瘤免疫反应反应中所起的作用。方法：在体外,三种肿瘤细胞与同上鼠脾淋巴细胞混合培养（ＭＬＴＣＳ）后,测定淋巴细胞增殖指数（ＭＴＴ法）和特异杀伤活性（ＬＤＨ释放改良法）;ＭＴＴＩ地测定肿瘤细胞体外增殖能力后,将Ｂ１６－ｎｅｏ和Ｂ１６－ｍＢ７－１妆种于Ｃ５７ＢＬ／６小鼠皮下后观察成瘤期、荷瘤小鼠存活以及肿瘤结节生长速度。结果：与野生型Ｂ１６细胞和模拟转     

GM-CSF及B7-1基因修饰的肿瘤细胞疫苗抗肿瘤的研究

目的：研究ＧＭ－ＣＳＦ及Ｂ７－１基因修饰的肿瘤细胞作为瘤苗的有效性。方法：我们将小鼠ＧＭ－ＣＳＦ及ＣＤ８０基因通过逆转录病毒载体分别导入ＥＬ－４淋巴瘤细胞中,进而研究了ＥＬ－４／ＧＭ－ＣＳＦ及ＥＬ－４／Ｂ７－１在同系Ｃ５７Ｂ习中的成瘤性及其诱导抗肿瘤免疫的效果。结果：转Ｂ７－１基因的肿瘤细胞诱发了ＣＤ８０的高表达。转基因的肿瘤细胞在同源小鼠中的成瘤性下降,免疫原笥增强。在肿瘤生长的早期对实验性荷瘤     

自体外周血干细胞移植支持下超大剂量化疗治疗非何杰金氏淋巴瘤的初步报告

目的：报告４例非何杰金氏淋巴瘤（ＮＨＬ）在外周血干细胞移植（ＰＢＰＣＴ）支持下接受超大剂量化疗（ＨＤＣ）的初步经验并评价所用ＰＢＰＣ动员方案的动员效果，预处理方案的耐受性以及ＰＢＰＣ回输后造血重建情况。方法：４例高危ＮＨＬ经常规化疗获首次缓解后，采用ＣＴＸ３５００ｍｇ／ｍ２＋Ｇ－ＣＳＦ３．５－５μｇ／（ｋｇ·次）＋Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ１０ｍｇ作动员方案，经ＣＢＶ＋Ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ（ＣＴＸ３６００ｍｇ／ｍ２，ＶＰ－１６１２００ｍｇ／ｍ２．ＢＣＮＵ３００ｍｇ／ｍ２和Ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ１００ｍｇ／ｍ２）或ＴＢＩ８Ｇｙ＋ＶＰ－１６１２００ｍｇ／ｍ２治疗后回输ＰＢＰＣ。结果：每例患者分离２次，分别采集到ＭＮＣ１．７－４．３×１０８／ｋｇ，ＣＦＵ－ＧＭ１．５－２．８×１０４／ｋｇ和ＣＤ＋３４细胞３．１－８．８×１０６／ｋｇ。回输ＰＢＰＣ后，均获快速重建造血功能，ＡＮＣ＞０．５×１０９／Ｌ和Ｐｔ＞５．０×１０９／Ｌ的时间为８～１２天和８～１６天。非造血系统毒性包括心脏毒性反应，恶心呕吐，轻度肝功能异常和粘膜炎等。结论：ＰＢＰＣＴ支持下超大剂量化疗是治疗ＮＨＬ安全可行的临床手段，值得进一步研究探索。     

小细胞肺癌组织中p53基因改变的研究

为探讨小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）发生的分子机制，应用免疫组化和聚合酶链反应—单链构象多态性分析的方法，对１４例ＳＣＬＣ组织进行ｐ５３基因突变研究。结果显示，有９例出现ｐ５３蛋白阳性，阳性率为６４．３％（９／１４）。ｐ５３基因第５，６，７，８外显子突变率分别为２１．４％（３／１４），１４．３％（２／１４），１４．３％（２／１４），７．１％（１／１４），总突变率为５７．１％（８／１４）。结果表明，ＳＣＬＣ组织中存在较高的ｐ５３基因突变率，故ｐ５３基因可能是人类肺癌发生的关键基因。     

胃癌细胞凋亡与p53蛋白异常相关性研究

采用ＤＮＡ末端转移酶介导的Ｂｉｏ－ｄＵＴＰ原位末端标记技术（ＴＵＮＥＬ）和免疫组织化学技术，分别对６０例胃癌标本的细胞凋亡和ｐ５３蛋白异常作同步研究和相关性分析。结果在６０例胃癌组织中细胞凋亡指数为１．８％～１９．４％（平均９．３±３．９％），ｐ５３蛋白异常表达率为６３．３％（３８／６０）；ｐ５３蛋白阳性组细胞凋亡指数为３．７±１．１％（１．８％～７．９％），而ｐ５３蛋白阴性组细胞凋亡指数１４．７±２．４％（７．４％～１９．４％），两组间有显著性差异。结果表明胃癌中存在较高频率的ｐ５３蛋白异常和细胞凋亡，ｐ５３蛋白异常与胃癌细胞凋亡间存在着负相关性     

Pharmacogénétique des fluoropyrimidines. La méthylènetétrahydrofolate réductase

Résumé: Lefficacité optimale des fluoropyrimidines nécessite des concentrations élevées en 5-10 méthylènetétrahydrofolate (CH₂FH₄), contrôlées par la méthylènetétrahydrofolate réductase (MTHFR) qui convertit irréversiblement le CH₂FH₄ en 5-méthyltétrahydrofolate (CH₃FH₄). Les polymorphismes 677CT et 1298AC du gène MTHFR sont associés à une baisse dactivité de lenzyme. Les tumeurs «MTHFR mutées» devraient donc être plus sensibles aux fluoropyrimidines que les tumeurs «MTHFR sauvages». Les études expérimentales et cliniques publiées à ce jour tendent à montrer une plus grande sensibilité au 5-FU (associé ou non à lacide folinique) dans les tumeurs MTHFR mutées par rapport aux tumeurs sauvages. Ces résultats montrent la nécessité de poursuivre ces recherches afin de confirmer limpact de ces polymorphismes sur lefficacité des fluoropyrimidines.     

Oncogénétique et psycho-oncologie, une collaboration recommandée...

Résumé: La possibilité depuis 1994, de connaître la probabilité individuelle de développer certains cancers a permis de proposer de nouvelles modalités de prévention, de traitements et contribué au développement actuel de loncogénétique. Une meilleure connaissance des répercussions psychologiques tant pour les patients que pour les apparentés est désormais possible et limplication des psycho-oncologues dans ce cadre de la réalisation des tests prédictifs, recommandée. La mission de «messager» qui incombe au «cas-index» doit faire lobjet dune attention particulière. La complexité de linformation et la dimension paradoxale que peut avoir parfois la communication à propos des choix, rend difficile lévaluation de la qualité du consentement. La situation particulièrement délicate dune aide à la décision à légard de la chirurgie prophylactique, exige une collaboration étroite des généticiens et des psycho-oncologues.Les soins de support en oncologie     

The role of papillomaviruses in human cancers

This review comprehensively evaluates the influence of gene-gene, gene-environment and multiple interactions on the risk of colorectal cancer (CRC). Methods of studying these interactions and their limitations have been discussed herein. There is a need to develop biomarkers of exposure and of risk that are sensitive, specific, present in the pathway of the disease, and that have been clinically tested for routine use. The influence of inherited variation (polymorphism) in several genes has been discussed in this review; however, due to study limitations and confounders, it is difficult to conclude which ones are associated with the highest risk (either individually or in combination with environmental factors) to CRC. The majority of the sporadic cancer is believed to be due to modification of mutation risk by other genetic and/or environmental factors. Micronutrient deficiency may explain the association between low consumption of fruit/vegetables and CRC in human studies. Mitochondrial modulation by dietary factors influences the balance between cell renewal and death critical in colon mucosal homeostasis. Both genetic and epigenetic interactions are intricately dependent on each other, and collectively influence the process of colorectal tumorigenesis. The genetic and environmental interactions present a good prospect and a challenge for prevention strategies for CRC because they support the view that this highly prevalent cancer is preventable.     

裘法祖教授生平

Prof.Fazu Qiu,member of the Chinese Communist Party,surgery professor of Tongji Hospital,departed in Tongji Hospital,Wuhan,China,at fourteen to nine a.m,June 14,2008,after a disease.He turns 94 this year.He was the senior academician of the Academia Sinica,the illustrious medical scientist of China,and the Honorary Director of Tongji Medical College,as well as Huazhong University of Science & Technology.     

Antifungal combination therapy in localized candidosis

A mouse model of localized candidosis in air-filled subcutaneous cysts imitating thrush has been developed. We have now tested various antifungal combinations in this animal model. Flucytosine (5-FC) + amphotericin B (Amph B) showed the highest efficacy, a clear additive or even synergistic effect was seen. The combination of 5-FC + imidazole or triazole derivative was less efficacious, an additive effect was rare. The combination of 5-FC + Amph B was also tested against Candida albicans strains showing various degrees of 5-FC-resistance. A significant reduction in 5-FC-resistant mutants was seen after the treatment with the combination.     

Les génériques en cancérologie: à molécule identique, médicaments identiques? Les biosimilaires, des super-génériques?

Résumé: Les biosimilaires vont bientôt voir leur apparition en Europe. Comment un laboratoire peut-il aborder le développement de son dossier dAMM? Quelles sont les bases légales et les recommandations officielles? Comment la similarité et/ou le caractère générique peuvent-ils être démontrés? Les règles sont-elles identiques à celles des produits chimiques conventionnels pour lesquels, notamment en cancérologie, il existe des médicaments génériques? Comment faire pour que la sécurité et lefficacité des médicaments biosimilaires soient assurées pour les patients?     

PSA-Test zur Früherkennung des Prostatakarzinoms

Zusammenfassung Prostatakrebs ist hierzulande seit einigen Jahren die häufigste Krebserkrankung bei Männern. Da über die Ätiologie wenig gesichertes Wissen vorliegt und daher kaum Möglichkeiten zur primären Prävention bestehen, konzentrieren sich die Anstrengungen auf die Suche nach wirksamen Verfahren zur sekundären Prävention. Hierbei gilt die Verwendung des PSA-Tests zur Früherkennung des Prostatakarzinoms als derzeit aussichtsreichstes Verfahren. Bevor ein neues Früherkennungsverfahren zur breiten Anwendung empfohlen oder in das gesetzliche Früherkennungsprogramm aufgenommen wird, muss jedoch seine Wirksamkeit in hierfür geeigneten wissenschaftlichen Untersuchungen nachgewiesen werden. Bis jetzt gibt es bereits eine ganze Reihe epidemiologischer Studien zur Effektivität des PSA-Screenings, doch konnte ein Wirksamkeitsnachweis bisher nicht erbracht werden. Zwei große randomisierte Studien in Europa und den USA lassen für die Jahre 2005–08 erste Ergebnisse erwarten. Da epidemiologische Arbeiten belegen, dass durch PSA-Screening eine nicht unerhebliche Überdiagnostik und Übertherapie eintritt, d. h. Schaden angerichtet werden kann, ist das Ergebnis der genannten randomisierten Studien vor weitergehenden Entscheidungen unbedingt abzuwarten. Bis dahin sollte von der Anwendung des PSA-Tests zur Prostatakrebsfrüherkennung unmissverständlich abgeraten werden. Da für den Test bereits ausgiebig Werbung betrieben wurde, kommt einer gründlichen ärztlichen Aufklärung von an dem Test interessierten Personen eine Schlüsselrolle zu.     

Dermatomycosis in Dogs

During the routine examination of dogs for cutaneous lesions, 205 dogs were screened for fungi other than dermatophytes. Twenty-two dogs (10.8%) revealed the presence of non-dermatophytic fungi suspicious for representing the etiologic agents of the skin lesions. The fungi isolated were Alternaria sp. (2.9%), Penicillium sp. (2.4%), Aspergillus fumigatus (2.0%), Mucor sp. (1.5%), Cladosporium sp. (1.5%) and Fusarium sp. (0.5%). No dermatophyte was isolated in association with these fungi. The incidence of these infections was found to be greater in warm and humid climate.     

Cancer immunotherapy

Unprecedented progress has seen made in the last decade in the field of cancer immunotherapy. The recent approval of nivolumab （Opdivo）, the first anti-programmed cell death-1 （PD-1） antibody, for metastatic melanoma in Japan, marked a milestone in the rapidly advancing field of cancer immunotherapy. Nivolumab together with ipilimumab （Yervoy）, the anti-cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 （CTLA-4） antibody, are the first 2 drugs in the class of ＂immune checkpoint inhibitors＂ that have delivered impressive responses in patients with metastatic melanoma and renal cell cancer （RCC） as well as a variety of solid tumors.