Na^＋—D^＋—ATP酶活性在豚鼠内淋巴囊的细胞化学定位

Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶在Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋离子主动性跨上皮转运过程中起重要作用。应用对硝基苯酚磷酸（ｐ－ＮＰＰ）为底物的柠檬酸铅一步法Ｋ＾＋－ＮＰＰ酶电细胞化学技术，观察了反映Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性的Ｋ＾＋－ＮＰＰ酶在豚鼠内淋巴囊的超微结构定位分布。结果：在透射电镜下观察，内淋巴囊超薄切片上的Ｄ＾＋－ＮＰＰ酶活性反应产物仅分布于上皮细胞底侧面胞膜的胞浆一侧，向上一直延续至上皮细胞间的紧密     

庆大霉素对豚鼠内淋巴囊和血管纹Na~＋－K~＋－ATP酶活性的影响

应用酶细胞化学技术和计算机图像分析，对豚鼠连续肌注庆大霉素（１００ｍｇ·ｋｇ－１／ｄ）２～１５ｄ后内淋巴囊上皮细胞和血管纹边缘细胞的Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性变化进行了定量观察。结果发现，与正常对照组相比，用药２ｄ后两类细胞的Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性反应产物没有明显变化，但连续用药５ｄ后二者的产物均明显减少，１０ｄ和１５ｄ仍呈继续轻微减少趋势。表明庆大霉素既可抑制血管纹边缘细胞Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性，降低其分泌功能；同时也能抑制内淋巴囊上皮细胞的该酶活性，减弱其液体重吸收功能。     

豚鼠内淋巴囊上皮细胞Na^＋,K^＋—ATP酶不同？…

目的 进一步研究同肉淋巴囊上皮细胞Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶不同β亚基的表达。方法 采用豚鼠内淋巴囊冰冻切片、原位杂交的方法检测Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶不同β亚基ｍＲＮＡ在淋巴囊上皮细胞中的表达。结果 在内淋巴囊上皮细胞胞浆内可见Ｎａ＾＋，Ｋ＾－ＡＴＰ酶不同β亚基的阳性颗粒，β１亚基表达较弱，β２亚基表达较强。结论 结合其他报道，内淋巴囊上皮细胞具有多种亚基异构体组成的Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶     

庆大霉素对豚鼠内淋巴囊和血管纹Na^＋—K^＋—ATP酶活性的影响

应用酶细胞化学技术和计算机图像分析，对豚鼠连续肌注庆大霉素２－１５ｄ后内淋巴囊上皮细胞和血管纹边缘细胞的Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性变化进行了定量观察。结果发现，与正常对照组相比，用药２ｄ后两类细胞的Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性反应产物没有明显变化，但连续用药５ｄ后二者的产物均明显减少，１０ｄ和１５ｄ仍呈继续轻微减少趋势。表明庆大霉素既可抑制血管纹边缘细胞Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性，降低其     

鼓阶电刺激后螺旋神经节神经元Na~＋－K~＋－ATP酶和耳蜗传出神经AChE实

用０．１～１．０ｍＡ电流刺激卡那霉素致聋豚鼠耳蜗３小时。三个月后，经组织学处理用积分吸光度定量测定螺旋神经节神经元（ＳＧＮ）Ｎａ￣＋－Ｋ￣＋－ＡＴＰ酶和耳蜗传出纤维乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）。实验结果表明０．１ｍＡ级可增强上述酶的活性；０．４ｍＡ级酶活性无改变；１．０ｍＡ级可显著抑制酶的活性。认为０．１～０．４ｍＡ级电流对豚鼠耳蜗是安全临界域，在人工耳蜗植入电路设计时，有参考意义。     

自身免疫性感音神经性聋的内耳代谢与电生理研究

为探讨自身免疫性感音神经性聋（ＡＳＨＬ）的内耳病理生理学机制，采用听觉电生理技术和酶组织化学方法，观察ＡＳＨＬ模型动物的内耳生理功能与组织内主要酶活性的变化。结果示：听视经复合动作电位和耳蜗微音器电位阈值明显升高，内淋巴电位（包括负相）幅值均有不同程度的降低，并与血管纹和内淋巴囊局部组织内Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和琥珀酸脱氢酶活性改变之间的相关性。表明自身免疫性内耳损伤，进而造成组织内相关酶代谢     

豚鼠膜迷路积水模型耳蜗Ca^2＋ATP酶的变化

目的 了解Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶在耳蜗活动位点及膜迷路积水后耳蜗Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶的变化。方法 选成年健康、Ｐｒｅｙｅｒ反射正常豚鼠１４只，左耳装圆窗电极一阻塞肉淋巴，经声反应阈（ＣＡＰ阀值）证明膜迷路积水形成；右侧为对照耳。用枸橼酸铅细胞组化法测定Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶，在透射电镜下Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶以磷酸铅黑色颗粒显示。结果 对照耳Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活动部位在蜗管前庭膜内淋巴侧、内外毛细胞皮     

鼓阶电刺激后螺旋神经节神经元Na^＋—K^＋—ATP酶和耳蜗传出神…

用０．１～１．０ｍＡ电流刺激卡那霉素致聋豚鼠耳蜗３小时。三个月后，经组织学处理用积分吸光度定量测定螺旋神经节神经元（ＳＧＮ）Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和耳蜗传出纤维乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）。实验结果表明０．１ｍＡ级可增强上述酶的活性；０．４ｍＡ级酶活性无改变；１．０ｍＡ级可显著抑制酶的活性。认为０．１～０．４ｍＡ级电流对豚鼠耳蜗是安全临界域，在人工耳蜗植入电路设计时，有参考意义。     

庆大霉素对豚鼠血管纹Na，K-ATP酶α亚单位异构体表达的影响

目的 观察正常豚鼠血管纹Ｎａ,Ｋ－ＡＴＰ酶α亚单位异构体的表达及庆大霉素对其表达的影响。方法 用鼠抗大鼠Ｎａ,Ｋ－ＡＴＰ酶α亚单位异构体特异性单克隆抗体,采用免疫组化ＳＰ法观察正常豚鼠血管纹中Ｎａ,Ｋ－ＡＴＰ酶α１异构体的表达及庆大霉素作用后表达的变化。结果 正常豚鼠血管纹Ｎａ,Ｋ－ＡＴＰ酶α１异构体表达呈阳性,而α２和α３异构体表达呈阴性。庆大霉素作用后α１异构体表达显著减弱。结论 庆大霉素显著     

豚鼠内淋巴囊Na—K—ATP酶亚基异构体的表达

目的 研究豚鼠内淋巴囊组织中Na,K-ATP酶α、 β亚基各个异构体的表达及其意义。方法 分别采用免疫组化汉和原位杂交法观察豚鼠内淋巴囊组织 Na,K-ATP酶α和β亚基异构体的分布。结果 Na,K-ATP酶不同的亚基异构体在豚鼠内淋巴囊上皮细胞和上皮下组织的表达有差异。内淋巴囊上皮细胞的胞膜主要表达α1、β1和β2异构体，且β2表达较β1表达更强，上皮下组织细胞的胞膜则主要表达α1和α2异构体，且α1表达较α2表达强，而上皮细胞和上皮下组织中均未见有α3 异构体表达。结论 内淋巴囊组织的Na,K-ATP酶由不同亚基异构体组成，它们协同作用参与保持内耳内环境的稳定。     

豚鼠膜迷路积水模型耳蜗Ca2+-ATP酶的变化

目的了解Ｃａ２＋ＡＴＰ酶在耳蜗活动位点及膜迷路积水后耳蜗Ｃａ２＋ＡＴＰ酶的变化。方法选成年健康、Ｐｒｅｙｅｒ反射正常豚鼠１４只,左耳装圆窗电极后阻塞内淋巴,经声反应阈（ＣＡＰ阈值）证明膜迷路积水形成;右侧为对照耳。用枸橼酸铅细胞组化法测定Ｃａ２＋ＡＴＰ酶,在透射电镜下Ｃａ２＋ＡＴＰ酶以磷酸铅黑色颗粒显示。结果对照耳Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活动部位在蜗管前庭膜内淋巴侧、内外毛细胞皮板及静纤毛、血管纹中间细胞指突膜等处;实验性膜迷路积水后,声反应阈提高,前庭膜、内外毛细胞等处之Ｃａ２＋ＡＴＰ酶颗粒明显减少。结论膜迷路积水后声反应阈提高,前庭膜、内外毛细胞等处Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性明显下降,两者呈负相关。     

豚鼠内淋巴囊Na-K-ATP酶亚基异构体的表达

目的研究豚鼠内淋巴囊组织中Na,K-ATP酶α、β亚基各个异构体的表达及其意义。方法分别采用免疫组化法和原位杂交法观察豚鼠内淋巴囊组织中Na,K-ATP酶α和β亚基异构体的分布。结果Na,K-ATP酶不同的亚基异构体在豚鼠内淋巴囊上皮细胞和上皮下组织的表达有差异。内淋巴囊上皮细胞的胞膜主要表达α1、β1和β2异构体,且β2表达较β1表达更强,上皮下组织细胞的胞膜则主要表达α1和α2异构体,且α1表达较α2表达强,而上皮细胞和上皮下组织中均未见有α3异构体表达。结论内淋巴囊组织的Na,K-ATP酶由不同亚基异构体组成,它们协同作用参与保持内耳内环境的稳定。     

水通道蛋白1在小鼠内淋巴囊的超微结构定位

目的研究水通道蛋白1（aquaporin1，AQP1）在小鼠内淋巴囊表达的精确定位，进一步探讨AQP1在内淋巴囊的作用。方法选取正常昆明小鼠30只，断头分离内耳内淋巴囊，应用冰冻切片免疫荧光染色法研究AQP1在内淋巴囊的组织分布情况，借助免疫电镜观察AQP1在内淋巴囊的超微结构定位。结果AQP1在内淋巴囊上皮下结缔组织层有表达。在纤维细胞胞膜特别是细胞突起的胞膜上可见大量胶体金颗粒标记，而上皮细胞的胞膜未见胶体金颗粒的标记。结论富含AQP1的内淋巴囊上皮下组织可能与内淋巴的吸收及平衡调节密切相关。     

鼠耳蜗内淋巴液中单价离子随发育的变化

此研究试图澄清鼠发育过程中内淋巴液中Ｎａ＋、Ｋ＋及Ｃｌ－等单价离子变化和耳蜗内电位（ＥＰ）变化的关系。鼠从出生到成年的发育过程中，在耳蜗基底转中阶用离子敏感的双阻玻璃微电极同步测量ＥＰ和内淋巴离子浓度。观察到鼠出生后７天ＥＰ突然增长，出生后１４天达到大约８０ｍＶ。在出生后最早期，内淋巴Ｎａ离子浓度显著高于成年鼠，然而，Ｋ＋、Ｃｌ－浓度较成年鼠为低。出生后７天，内淋巴中各单价离子浓度均达到成年鼠水平，而此时ＥＰ尚未达到２０ｍＶ。本实验数据有力地表明在鼠发育过程中，内淋巴液中单价离子变化尤其是高Ｋ＋…     

膜迷路积水豚鼠的内、外淋巴液钾、钠离子浓度

本研究测定手术阻断豚鼠内淋巴囊和前庭导水管后的内、外淋巴液Ｋ＋，Ｎａ＋离子的浓度。术后１个月，经组织学观察，８只豚鼠中的７只出现了膜迷路积水（８７．５％）。另一组１０只豚鼠于术后１个月用原子吸收光谱仪分别测定内、外淋巴液中Ｋ＋，Ｎａ＋的浓度。与对照耳组比较无明显差异（Ｐ＞０．０５）。     

内淋巴囊局部用药对内淋巴囊电位的影响

与耳蜗内离子浓度比较，内淋巴囊内的Ｋ＋浓度低，Ｎａ＋浓度高，内淋巴囊电位相对于外淋巴为正值。内淋巴囊离子分泌增多和／或重吸收减少可引起梅尼埃病。临床上有采用利尿剂来治疗梅尼埃病。但内耳，特别是内淋巴囊中的离子和液体转运机制及梅尼埃病内耳病变的性质和位...     

豚鼠内淋巴囊碳酸酐酶组化分布测定和超微定位

用组织化学、细胞化学结合图象分析，观察了豚鼠内淋巴囊（ＥＳ）碳酸酐酶（ＣＡＨ）的分布和超微定位。结果发现：在ＥＳ的近侧部仅少数上皮细胞有阳性反应，中间部和远侧部的大多数上皮细胞着色；中间部和远侧部ＣＡＨ阳性产物灰度值明显高于近侧部（Ｐ＜０．０１）。在ＥＳ上皮细胞的阳性产物主要位于内淋巴腔面细胞膜、微绒毛、细胞浆、侧膜皱褶和基侧膜皱褶处；表明ＣＡＨ在调节内淋巴的容量、离子转运及内环境稳定中起重要作用。     

豚鼠内淋巴囊上皮细胞膜的极性

为了研究内淋巴囊上皮细胞多糖蛋白复合物的结构特征,采用具有高电子密度的胶体针和阳离子铁蛋白作为标记物,来显示豚鼠内淋巴囊上皮细胞多糖蛋白复合物的分布;另外,通过神经氨基酸酶及透明质酸酶消化内淋巴囊上皮的酶化学诊断技术,来观察胶体钍在内淋巴囊上皮中各部分多糖蛋白复合物成分的反     

极化液治疗突发性聋的临床评价

突发性聋指原因不明突然发生的感音神经性听力损失。极化液能促进葡萄糖,钾离子进入细胞内,增加糖原的合成,高能量可改善Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶的活性,稳定细胞膜,有利于最佳膜电位的恢复。自１９８９年以来试用其治疗突发性聋,现将结果报告如下：１资料和方法１９...     

内淋巴囊上皮细胞单克隆抗体的制作和特性

以显微解剖法取出的豚鼠内淋巴囊经超声波处理后，以其提取液作为原始抗原，探讨建立能够分泌识别内淋巴囊表面上皮细胞的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的系列杂交瘤。应用电镜免疫化学和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法和聚丙酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）测定，该抗体显示具有和内淋巴囊上皮细胞进行显著的免疫组织化学反应的活性，类似的反应出现在肾脏的近曲小管和亨氏袢的上皮细胞上，与其它１５个脏器（包括大脑、膀胱、胆囊、肺和肝脏等）