热休克蛋白72在皮肤鳞状细胞癌中的表达

应用免疫组织化学（ＳＡＢＣ法） 和核酸原位杂交技术检测了正常人皮肤、皮肤鳞状细胞癌中热休克蛋白７２ 的表达情况。结果显示,ＨＳＰ７２ 在正常皮肤的表皮层及毛囊外根鞘即有构成性表达, 可能是一种自身保护功能。ＨＳＰ７２ 在皮肤鳞癌中高表达, 可能通过影响细胞生长调控而在肿瘤发生、发展过程中具有重要作用。     

银屑病患者治疗前后表皮细胞中热休克蛋白60的表达研究

为了探讨热休克蛋白60与银屑病的关系，采用LSAB免疫组织化学法，检测16例银屑病皮损、非皮损及治愈后表皮细胞中和6例正常人对照组表皮细胞中HSP60的表达。结果发现HSP60在正常人及银屑病患者非皮损、治愈后表皮细胞中呈阴性表达，在银屑病皮损中表达增强，提示HSP60在银屑病应激保护机制中可能发挥着重要作用。     

热休克蛋白72在皮肤鳞着细胞癌中的表达

应用免疫组织化学（ＳＡＢＣ法）和酸原位杂交技术检测了正常人皮肤、皮肤鳞状细胞癌中热休克蛋白７２的表达情况。结果显示,ＨＳＰ７２在正常皮肤的表怪层及毛囊外根鞘即有构成性表达,可能是一种自身保护功能。ＨＳＰ７２在皮肤鳞癌中高表达,可能通过影响细胞生长调控而在肿瘤发生、发展过程中具有重要作用。     

地塞米松和他克莫司对HaCaT细胞热休克蛋白90表达影响的研究

目的:比较地塞米松和他克莫司对HaCaT 细胞热休克蛋白90(HSP90)表达的影响,并探讨其潜在的临床意义.方法:以含10-6 mol/L 地塞米松或10-6 mol/L 他克莫司的DMEM(高糖)培养基培养细胞,在24 h 和48 h 的不同时相点,采用Real timePCR和Western blotting 检测HSP90 的表达.结果:地塞米松作用24 h 后,HSP90 mRNA和蛋白表达水平均升高,48 h 后进一步升高(P ＜ 0.05);而他克莫司作用于HaCaT 细胞后的不同时相点,HSP90 mRNA 和蛋白水平与未处理组相比差异均无统计学意义(P ＞ 0.05).结论:地塞米松可上调角质形成细胞中HSP90 的表达,他克莫司不影响角质形成细胞HSP90 的表达.     

热休克蛋白在皮肤病领域中的研究现状

热休克蛋白是一组在进化上高度保守的蛋白质 ,广泛存在于自然界原核、真核细胞中 ,正常时在细胞中发挥重要的生理功能 ,应激时呈高表达 ,起到应激保护作用。文中主要就其在皮肤和皮肤病中的表达及意义作一扼要介绍     

角质形成细胞生长因子与银屑病的关系

角质形成细胞生长因子是近年来发现的有着重要生物功能的生长因子,它属于成纤维细胞生长因子家族,由成纤维细胞产生。角质形成细胞生长因子可刺激角质形成细胞的增生、分化、移行,促进上皮细胞的再生、增厚,对银屑病的发病机制及其治疗可能有一定的启示。本文就角质形成细胞生长长因子和的生物学功能及其与角质形成细胞及银屑病的关系做一定综述。     

亚油酸对角质形成细胞屏障相关蛋白表达的影响

目的：检测亚油酸对角质形成细胞屏障相关蛋白Filaggrin、keratin-14和claudin-1表达的影响。方法：选用不同浓度的亚油酸(2 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL)刺激人角质形成细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率,并绘制细胞生存/抑制曲线;qRT-PCR和Western blot分别检测不同浓度亚油酸刺激后角质形成细胞Filaggrin、keratin-14和claudin-1的mRNA及蛋白水平的变化。结果：角质形成细胞生存率随亚油酸样品浓度升高而降低。角质形成细胞中Filaggrin和keratin-14的表达随着亚油酸样品浓度升高表达明显增加。claudin-1表达在2 ng/mL和10 ng/mL亚油酸作用下明显增加,而在20 ng/mL浓度下,claudin-1表达下降。结论：在2 ng/mL和10 ng/mL亚油酸作用下,Filaggrin、keratin-14和claudin-1表达随着亚油酸作用浓度升高而增加。     

16型人乳头瘤病毒E6/E7诱导角质形成细胞表达热休克蛋白70

目的 了解１６型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ１６）Ｅ６／Ｅ７、ＨＳＰ７０与角质形成细胞永生化及转化之间的关系。方法 Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ介导法进行转染,以Ｇ４１８筛选阳性克隆,免疫印迹分析及免疫荧光双标记染色结合激光扫描共聚焦显微镜对ＨＳＰ７０和ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７在转染然质形成细胞中的表达进行了观察。结果 免疫印迹分析显示正常负擀形成细胞和转染角质形成细胞均在相对分子质量７００００处出现一条染色带     

绿色荧光蛋白基因转染角质形成细胞的瞬时表达检测

近来的研究已发现皮肤角质形成细胞具有许多功能和活性,它不仅符合基因治疗中靶细胞的基本条件,而且还具有许多优点,如取材方便、易于回植、便于观察和调控基因表达情况及副作用,因而,角质形成细胞被认为是一种理想的靶细胞。为了证实角质形成细胞作为基因转染、基因表达及基因治疗中靶细胞的可行性,本实验将ｐＥＧＦＰＮ３质粒转染皮肤角质形成细胞,并对其瞬时表达情况进行了检测。一、材料和方法（一）实验材料:质粒:ｐＥＧＦＰＮ３质粒由本校病理学教研室赵利军博士惠赠（ＣｌｏｎｔｅｃｈＬａｂｏｒａｔｏｎｅｓ,Ｉｎｃ产品）,该质粒在…     

银屑病表皮角质形成细胞中白细胞介素8的原位表达

目的 分析ＩＬ－８ｍＲＮＡ在正常健康人表皮及银屑病患者皮损中的表达。方法 用原位杂交（ＩＳＨ）的方法对ＩＬ－８ｍＲＮＡ在正常人表皮及寻常性银屑病不同时期,不同部位表皮的表达进行对照研究。结果 ＩＬ－８ｍＲＮＡ在大多数银屑病皮损标本的表皮层内有特异性杂交信号,而在非皮损区,正常皮肤及临床治愈的银屑病皮肤表皮层无特异性杂交信号。结论 纠正ＩＬ－８在银屑病表皮角质形成细胞中的表达紊乱,可能为该病的防治提     

热休克、PMA对体外培养人角朊细胞表达ENA的影响

ENA在角朊细胞膜表达被认为与 LE的发病有关。为了探讨热休克和 PMA对 ENA表达的影响 ,我们用加热和 PMA刺激体外培养角朊细胞 ,用间接免疫荧光法观察了角朊细胞 ENA的表达。结果 ,4 2℃、4 5℃热休克 90 min后 ,分别可使 9.1± 1.2 %、2 0 .0± 4 .7%的细胞出现 ENA膜表达 ;5μg/ L、10 μg/ L PMA刺激 2 h后 ,2 2 .6± 7.6%、2 3.1± 4 .9%的角朊细胞膜出现 ENA表达。提示 ENA在角朊细胞膜的表达与热刺激和蛋白激酶 C传导路径有关。     

热休克蛋白在尖锐湿疣组织中的检测及其与HPV感染相关性

目的　探讨热休克蛋白 70(HSP70)在尖锐湿疣(CA)组织中的检测及其与人乳头瘤病毒 (HPV)感染的关系。方法　采用免疫组化法检测了 24例CA、46例宫颈癌和 28例正常宫颈组织HSP70,用PCR技术对各组织标本的HPV-DNA进行检测和 6, 1 1, 1 6, 1 8分型。结果　HSP7 0在CA和宫颈癌组的阳性率显著高于正常宫颈对照组 (P<0. 01)。CA组HPV6, 11型DNA阳性者HSP70的检出率显著高于阴性者(P<0. 05),宫颈癌组HPV16, 18型DNA阳性者与阴性者HSP70的检出率差异无显著性(P>0. 05)。结论　HSP70的表达与尖锐湿疣的发病有关,HSP70在尖锐湿疣组织中的表达与HPV的感染明显相关。     

SLE患者外周血单个核细胞ER和HSP90基因的表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中雌激素受体(ER)和热休克蛋白90(HSP90)基因的表达情况。方法分离58例SLE患者和28例正常人新鲜外周血单个核细胞,提取总RNA,利用半定量RT-PCR方法逆转录并扩增ER和HSP90,通过凝胶图像扫描系统对PCR产物的电泳条带进行扫描分析。结果 SLE患者组PBMC中ER和HSP90mRNA表达明显高于正常对照组(P均<0.05),且活动期患者的表达高于稳定期患者(P均<0.05)。结论 SLE患者中存在ER和HSP90基因的过度表达,并与疾病活动性有关。     

Differential expression of heat shock protein 70 (HSP70) and heat shock cognate protein 70 (HSC70) in human epidermis

Autoimmunity and microbial agents have been suggested as playing a pathogenetic role in psoriasis. Since immune responses to microbial infections are often directed towards heat shock proteins (HSP), we investigated the expression of three HSP families in normal and inflamed human skin. Specimens from ten patients with psoriasis and three patients with positive patch tests for nickel and from five healthy volunteers were analysed by means of immunohistochemistry. The patterns observed were qualitatively similar in these conditions showing only minor quantitative differences. Psoriatic epidermis exhibited the highest level of expression. HSP27, HSP70 and heat shock cognate protein 70 (HSC70) were readily detectable. HSP27 was homogeneously distributed throghout the epidermis, whereas HSP70 was restricted to the basal layer and HSC70 primarily to the suprabasal layers. Other HSPs were detected to a lesser degree and showed a more irregular pattern. Thus, the qualitative expression pattern of HSPs seems to be constant between different skin conditions, but the expression of constitutive and inducible HSP70 depends on the differentiation state of keratinocytes.Abbreviations BiP immunoglobulin heavy chain binding protein - GrP glucose regulated protein - HSC70 heat shock cognate protein 70 - HSP heat shock protein - HSP70 heat shock protein 70     

维生素D_3抑制角质形成细胞MCP-1的表达

目的　观察维生素D3 对角质形成细胞单核细胞化学吸引蛋白质 1(monocytechemoattractantprotein 1,MCP 1)的表达影响 ,探讨其在治疗银屑病中的作用机制。方法　培养角质形成细胞株HACAT ,并用不同浓度的维生素D3 处理 2 4h ,通过酶联免疫吸附 (ELISA)法检测上清液中MCP 1的表达 ;通过RT PCR法进一步检测细胞中MCP 1mRNA的水平。结果　经过浓度为 7.8× 10 -12 mol/L～ 6.2 5× 10 -11mol/L的维生素D3 处理过的角质形成细胞株HA CAT ,其分泌至上清中的MCP 1水平明显受到抑制 ,细胞中MCP 1mRNA的水平低于正常对照组。结论　维生素D3 在治疗银屑病过程中很有可能是通过抑制了角质形成细胞中MCP 1的表达 ,从而减弱了银屑病患者角质形成细胞趋化单核细胞及巨噬细胞的能力 ,阻止了银屑病皮损局部的炎症反应。     

人乳头瘤病毒DNA在角化棘皮瘤中的表达

目的 探讨角化棘皮瘤组织中人乳头瘤病毒（HPV）感染率,及HPV DNA阳性细胞的分布特征。方法 原位杂交方法检测46例KA和34例正常人皮肤石蜡切片组织标本中HPV6/11、16/18、31/33亚型。结果 31例角化棘皮瘤黏膜型HPV DNA阳性,总阳性率67.39%,两种以上HPV混合感染达83.87％（26/31）,各亚型均以游离型为主;阳性信号位于细胞核内或核边缘,阳性细胞多分布于火山口底部棘层的浅中部及其周围唇部,分布形式多为带状、片状或灶状聚集。正常皮肤对照组HPV DNA各亚型检测均阴性。结论 角化棘皮瘤患者HPV6/11、16/18、31/33感染率高于正常人群,且以游离形式存在为主,推测HPV感染在角化棘皮瘤的发病机制中起作用。     

Microinjection of an antibody against HSP 72 in keratinocytes to study acute UV injury.

First, a method of microinjection of antibodies in primary human keratinocytes in culture was established. Second, in acute UV irradiation, the physiological role of heat shock protein (HSP) 72 in keratinocytes was studied with this method. Primary human keratinocytes in culture were injected with "controls" as fluorescent dyes, phosphate buffered saline (PBS), an irrelevant secondary antibody and an antibody against a protein with known protective function in UV erythema, HSP 72. UV irradiation was applied and survival, colony forming and immunohistochemistry for injected and non-injected keratinocytes were evaluated in a time course. Puncturing the plasma membrane with injections of "controls" as FITC, PBS and the IgG anti-mouse antibody did not result in reflux of injected material or any alteration in morphology or colony-forming ability for 24 h. Keratinocytes injected with an mAb to HSP 72 without UV irradiation survived microinjection for up to 12 days, while surprisingly, more than double of injected and irradiated ones died after 12 h compared to not injected and irradiated ones. Moreover, microinjection of the antibody to HSP 72 in the nucleus resulted in a loss of the immunohistochemical labeling for HSP 72 in these cells after 12 h. Microinjection of the "controls" did not harm the survival, forming of colonies and expression of HSP 72 in keratinocytes for 24 h. In contrast, microinjection of an mAb against HSP 72 led to an increase in cell death after UV irradiation, confirming that HSP 72 is important for UV protection. Microinjection of antibodies in human keratinocytes in culture might allow the study of the physiological role of some proteins.