清开灵对家兔内毒素性发热的作用及机制研究

目的:探讨清开灵(QKL)注射液对家兔内毒素性发热的解热作用和机制。方法:复制家兔内毒素(ET)性发热模型, 用数字温度计测量家兔的直肠温度, 用放免法测定下丘脑的IL-1β和cAMP、脑脊液中的cAMP、腹中隔区的AVP含量。结果:QKL+ET组的△T(0.24±0.10)℃、TRI₁(1.02±0.81)、下丘脑IL-1β(3.02±0.58)ng/g、下丘脑cAMP(1.37±0.23)nmol/g、CSF中cAMP(14.13±3.80)nmol/L、腹中隔区AVP(25.24±2.61)ng/g, 分别低于ET组的△T(0.40±0.11)℃、TRI₁(1.78±0.79)、下丘脑IL-1β(6.08±0.79)ng/g、下丘脑cAMP(2.90±0.40)nmol/g、CSF中cAMP(32.10±4.51)nmol/L、腹中隔区AVP(47.32±3.77)ng/g, 两者相比差异显著(P<0.01)。结论:QKL抑制下丘脑内生致热原和中枢发热介质的生成, 促进解热物质的释放, 可能是QKL对内毒素性发热的重要解热机制。     

脑热清对内毒素性发热家兔下丘脑、脑脊液cAMP及腹中隔区AVP含量的影响

目的:探讨脑热清(NRQ)口服液的解热机制。方法:复制家兔内毒素(ET)性发热模型,观察NRQ对家兔体温的影响;用放射免疫法检测下丘脑和脑脊液(CSF)中cAMP及腹中隔区AVP含量的变化。结果:(1)NRQ+ET组的ΔT[(0.82±0.08)℃]、TRI₆(5.73±0.09)、下丘脑cAMP含量[(0.70±0.50)nmol/g]、CSF中cAMP含量[(56.86±1.34)nmol/L]及腹中隔区AVP含量[(11.91±3.47)ng/g],分别低于ET组的ΔT[(1.80±0.16)℃]、TRI₆(11.31±0.20)、下丘脑cAMP含量[(1.35±0.21)nmol/g]、CSF中cAMP含量[(66.69±1.82)nmol/L]、腹中隔区AVP含量[(30.80±9.59)ng/g],两者相比有显著差异(P<0.01)。(2)4组的体温变化分别与下丘脑和CSF中cAMP以及腹中隔区AVP的变化呈正相关(下丘脑:r=0.899,P<0.05;CSF:r=0.991,P<0.01;AVP:r=0.972,P<0.01)。结论:NRQ的解热机制可能是通过抑制下丘脑cAMP的生成与释放,同时通过促进腹中隔AVP释放两种途径发挥作用。     

清开灵对内毒素性发热家兔下丘脑cAMP及腹中隔区AVP含量的影响

目的:探讨清开灵(QKL)注射液的解热机制。方法:建立家兔内毒素(ET)性发热模型,观察清开灵对家兔体温的影响和用放免法检测下丘脑cAMP及腹中隔区AVP含量的变化。结果:①ET组的△T为(1.68±0.46)℃、TRI₆为29.59±10.39、下丘脑cAMP含量为(2.90±0.40)nmol/g、腹中隔区AVP含量为(47.32±3.77)ng/g,分别显著高于NS组的△T、TRI₆(-0.15±4.29)、下丘脑cAMP含量,腹中隔区AVP含量及QKL+ET组的△T、TRI₆(13.71±3.29)、下丘脑cAMP含量、腹中隔区AVP含量(P＜0.01)。②四组下丘脑cAMP含量变化与体温变化呈明显正相关(r=0.904,P＜0.01)。结论:清开灵的解热机制可能是通过抑制下丘脑cAMP生成,同时通过腹中隔AVP而发挥作用。     

解热醒神注射液对内毒素性发热家兔下丘脑cAMP及IL-1β含量的影响

目的观察解热醒神(JRXS)注射液对内毒素(endotoxin,ET)性发热1h家兔体温、下丘脑(hypothalamus,HP)环一磷酸腺苷(cyclicadenosinemonophosphate,cAMP)及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量的影响.方法20只新西兰家兔随机分为4组.NS组NS1.5mL/kgiv;JRXS组JRXS1.5mL/kgiv;ET组ET0.5μg/kgiv;JRXS+ET组JRXS1.5mL/kgiv,30min后,ETiv(剂量同ET组),观察1h后,穿刺小脑延髓池抽取脑脊液,然后取下丘脑组织,并分别按cAMP(上海中医药大学同位素室)及IL-1β放免试剂盒(中国人民解放军总医院科技开发中心产品)说明书进行含量测定.观察指标平均体温变化曲线;最大体温上升高度(△T℃);体温反应指数(thermalresponseindex,TRI);下丘脑、脑脊液的cAMP含量;下丘脑的IL-1β含量.所有实验数据用均数±标准差(眘)trtJRXS(P0.05)JRXSETJRXS+ETT(0.10.13)TRI10.36.62cAMP(1.36.27)nmol/gcAMP(14.40.69)nmol/LIL-1(2.90.37)ng/gETT(0.40.11)TRI11.78.79cAMP(2.90.40)nmol/gcAMP(32.10.51)nmol/LIL-1(6.08.79)ng/g(P0.01)cAMPcAMPIL-1(r1=0.918P0.05r20.926P0.05r3=0.868P0.01)JRXScAMP\,IL-1     

川芎嗪在豚鼠离体气管螺旋条中的作用

目的：研究川芎嗪在豚鼠离体气管螺旋条中的作用。方法：在浴槽内加入川芎嗪从10^-7 mol/L至10^-2 mol/L，观察气管螺旋条张力的变化，并检测浴槽中NO₂^-/NO₃^-含量，气管螺旋条组织cAMP、cGMP含量的变化。结果：加入川芎嗪气管螺旋条张力下降，与川芎嗪浓度呈剂量依赖性，未去皮组舒张度显著大于去皮组（P<0.01）。浴槽内NO₂^-/NO₃^-含量增加，未去皮组(2.3±0.37) mol/L升至(5.4±0.42) mol/L（P<0.05），去皮组(1.12±0.12) mol/L升至(2.29±012) mol/L（P<0 05）。气管螺旋条组织cAMP 含量增加，未去皮组(17.6±1.19) nmol/g protein升至(36.48±7.20) nmol/g protein（P<0.05） , 去皮组(8.20±2.30) nmol/g protein 升至(18.34±2.30) nmol/g protein（P<0.05），cGMP 含量增加，未去皮组(0.33±0.11) nmol/g protein 升至(0.67±0.27) nmol/g protein（P<0.05），去皮组(0.16±0.03) nmol/g protein 升至(0.33±0.16) nmol/g protein（P<0.05）。结论：川芎嗪有舒张气管螺旋条的作用。     

糖尿病肾病患者血清IL-1、IL-6含量测定

目的：检测糖尿病肾病患者血清白介素-1、白介素-6的水平,为进一步探讨与糖尿病肾病的关系提供资料。方法：2型糖尿病69例,尿白蛋白排泄率（UAE）在20-200 μg/min的21例患者为DN₁组,UAE>200 μg/min 22例患者为DN₂组,UAE<20 μg/min的26例为DM组,正常对照组20例,用免疫放射法测定血清IL-1、IL-6水平。结果：DN₂组血清IL-1含量为(31.23±6.69) ng/L,高于正常对照组[(21.37±8.24) ng/L]及DM组[(26.45±7.19) ng/L)], P<0.01, P<0.05。DM组血清IL-6含量为(1.50±0.79) μg/L,明显高于对照组（P<0.01）,DN₁组含量(1.02±0.77) μg/L,DN₂组为(0.97±0.67) μg/L,均低于DM组（两者P<0.05）。结论：糖尿病合并肾病患者血清IL-1水平高于正常对照及DM组,血清IL-6低于DM组提示其与糖尿病肾病的发病可能有一定的关系。     

内毒素、IL-1β对家兔下丘脑神经细胞内游离钙浓度的影响

目的:研究内毒素(ET)性发热家兔下丘脑神经细胞内游离钙([Ca²⁺]i)浓度变化及ET、白介素-1β(IL-1β)对正常家兔离体下丘脑神经细胞 [Ca²⁺]i浓度的影响。方法:采用荧光分光光度法,应用钙离子探针(Fura-2/AM),检测 i浓度。结果:(1)微量ET(2 ng/mL)使正常家兔下丘脑神经细胞内 [Ca²⁺]i浓度显著升高;ET性发热家兔下丘脑神经细胞 [Ca²⁺]i水平也显著高于对照组;(2) 3种剂量IL-1β(100、500、1 000 ng/mL)均未能明显影响下丘脑神经细胞 [Ca²⁺]i 浓度。结论:(1)低Ca²⁺参与ET性发热体温调节的作用部位,可能不是在下丘脑神经细胞内;(2)ET引起下丘脑神经细胞 [Ca²⁺]i 浓度变化,不是通过IL-1β直接引起。     

电刺激VSA对IL-1β作用下兔POAH温敏神经元放电的影响关

目的和方法:本实验采用微电极细胞外记录,在32只新西兰兔下丘脑视前区(POAH)记录温敏神经元单位放电,观察电刺激腹中膈区(VSA)对致热原IL-1_β作用下兔POAH温敏神经元放电的影响。结果:(1)侧脑室注射白介素-1_β(IL-1_β)能使POAH热敏神经元放电减少,冷敏神经元放电增加;而侧脑室注射人工脑脊液(ACSF)对热敏神经元和冷敏神经元的放电均无明显影响。(2)电刺激VSA可反转IL-1_β对POAH热敏神经元和冷敏神经元的上述作用。结论:VSA可能作为负调节中枢参与致热原作用下的体温调节。     

增强型体外反搏对冠心病患者血浆内皮素和一氧化氮的影响

目的:探讨增强型体外反搏对冠心病患者血浆内皮素(ET)和一氧化氮(NO)的影响。方法:把62例确诊冠心病的患者随机分为体外反搏治疗组(29例)和药物治疗组(32例), 反搏组在常规药物治疗的基础上接受增强型体外反搏仪治疗36d(1h/d), 药物组接受常规药物治疗相同天数;分别于治疗前后应用放射免疫法测定患者的血浆ET含量, 应用硝酸盐还原酶法测定患者血浆NO^-₂/NO^-₃含量, 以间接反映NO的浓度;并测定30例健康人的ET和NO^-₂/NO^-₃值作为对照。结果:治疗前反搏组和药物组的ET水平(116.4±44.9)ng/L, (111.9±44.4)ng/L明显高于正常人(65.8±15.6)ng/L(P＜0.01)。治疗后反搏组ET水平(78.9±30.2)ng/L明显低于药物组(148.0±39.5)ng/L(P＜0.01)。NO^-₂/NO^-₃水平, 治疗前反搏组(64.4±14.8)μmol/L和药物组(67.0±24.0)μmol/L, 稍低于正常人(70.1±13.9)μmol/L, 但P＞0.05;治疗后反搏组(89.6±30.3)μmol/L高于正常人(P＜0.01), 药物组NO^-₂/NO^-₃(83.4±23.0)μmol/L与正常人比较无明显差异(P＞0.05)。体现血管收缩和舒张平衡关系的ET/(NO^-₂/NO^-₃)比值, 治疗前反搏组(1.9±0.8)和对照组(1.8±0.9)均高于正常人(1.0±0.3)(P＜0.01), 治疗后反搏组该值(0.9±0.4)下降(P＜0.01), 并接近正常人水平(P＞0.05), 而药物组(1.8±0.7)与治疗前比较无明显差异(P＞0.05)。结论:增强型体外反搏可改善冠心病患者的内皮功能。     

广藿香油对家兔内毒素性发热的作用

 目的:探讨广藿香油对家兔内毒素性发热的解热作用及机制。方法:根据实验当天体重及基础体温将42雄性只家兔随机分为7组,分别为空白对照组、模型对照组、西药阳性组、中药阳性组及广藿香油高、中、低（2%、1%和0.5%）3个剂量组。除空白对照组外,其余6组均按1 mL/kg经耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素（2 mg/L）复制家兔内毒素性发热模型,0.5 h后经耳缘静脉给药,空白和模型对照组注射等量的0.5% 吐温80,西药、中药阳性组和广藿香油高、中、低剂量组分别注射对应剂量药物,观察各组家兔体温变化,采用放射免疫法测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α（TNF-α）以及下丘脑环磷酸腺苷（cAMP）和前列腺素E2（PGE2）的含量。结果:与空白对照组相比,模型对照组家兔体温、IL-1β、TNF-α、cAMP和PGE2显著上升（P<0.01或P<0.05）;广藿香油对发热家兔的体温升高有明显的抑制作用,广藿香油高剂量组给药后1.5～5.5 h,家兔体温分别升高(1.06±1.55)、(1.62±1.36)、(1.38±1.22)、(0.98±0.98)和(0.48±0.95) ℃,广藿香油中剂量组给药后3.5～5.5 h,体温分别升高(1.47±0.73)、(1.15±0.68)和(0.63±0.54) ℃,广藿香油低剂量组给药后各时点均有降低发热家兔体温的趋势;广藿香油可明显抑制血清中TNF-α和下丘脑中cAMP含量的升高,有降低血清中IL-1β和下丘脑中PGE2含量升高的趋势。结论: 广藿香油对家兔内毒性发热有显著解热作用,其机制可能与抑制血清中TNF-α和下丘脑中cAMP含量升高有关。     

电刺激POAH对IL-1β作用下兔VSA温敏神经元放电的影响

目的和方法:为了从细胞水平进一步探讨发热时体温正、负调节中枢的调节机制,本实验采用微电极细胞外记录技术,在26只新西兰兔脑腹中隔区(ventralseptalarea,VSA)记录了温敏神经元单位放电,观察电刺激下丘脑视前区(preopticanteriorhypothalamus,POAH)对致热原IL-1_β作用下兔VSA温敏神经元放电的影响。结果:(1)侧脑室注射的白介素-1_β(IL-1_β)能使VSA热敏神经元放电频率增加,冷敏神经元放电减少,而侧脑室注射等量人工脑脊液(ACSF)对热敏神经元和冷敏神经元的放电均无明显影响。(2)电刺激POAH可反转致热原IL-1_β对VSA热敏神经元和冷敏神经元的上述作用。结论:在致热原作用下的体温调节中,正调节中枢POAH和负调节中枢VSA具有密切的相互作用。     

心通胶囊对心肌缺血大鼠心室肌亚硝酸盐和cGMP含量的影响

目的:探讨心通胶囊对实验性大鼠心肌缺血的预防效果及其与一氧化氮形成的相关机制。方法:应用垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血模型,以心电图上ST段的抬高作为心肌缺血的指标。测定大鼠心肌缺血心室肌组织一氧化氮(NO)代谢产物(NO₂^-/NO₃^-)和cGMP含量。结果:急性心肌缺血组大鼠的心室肌组织NO₂^-/NO₃^-和cGMP含量分别为(486±59)nmol/gprotein和(0.38±0.08)nmol/gprotein,明显低于正常对照组大鼠的NO₂^-/NO₃^-和cGMP含量,有显著差异(P＜0.01);急性心肌缺血前使用心通胶囊组的心室肌组织NO₂^-/NO₃^-和cGMP含量为(845±105)nmol/gprotein和(0.51±0.10)nmol/gprotein明显高于缺血组(P＜0.01)。与正常组比较,缺血组的心电图ST段抬高明显抬高(P＜0.05);心肌缺血前使用心通胶囊,可使心肌缺血得以改善。结论:心通胶囊提高急性心肌缺血大鼠心室肌组织的NO含量,进而使cGMP含量升高,达到改善心肌缺血的作用。     

清开灵对EP性发热家兔下丘脑与脑脊液cAMP及腹中隔区AVP含量的影响

目的观察清开灵(QKL)注射液对内生致热原(endogenouspyrogen,EP)性发热家兔下丘脑与脑脊液cAMP(cyclicadenosinemonophosphate)及腹中隔区(ventralseptalarea,VSA)精氨酸加压素(argininevasopressin,AVP)含量的影响,探讨中药对发热体温的正负调节机制.方法动物选用健康雄性封闭群新西兰白兔.EP制备采用家兔全血加精致大肠杆菌内毒体外培育法.实验分两部分进行,第一部分观察QKL对EP性发热的解热效应.将20只家兔随机分为4组.NS组NS1mL/kgiv;QKL组QKL1mL/kgiv;EP组EP1mL/kgiv;QKL+EP组QKL1mL/kgiv,30min后,EP1mL/kgiv,观察3h.第二部分观察QKL对EP性发热1h下丘脑cAMP及VSA中AVP含量的影响,动物数、分组及给药同第一部分.观察指标平均体温变化曲线;最大体温上升高度(△T℃);体温反应指数(thermalresponseindex,TRI);下丘脑的cAMP含量;VSA的AVP含量.所有实验数据用均数±标准差(眘)trtQKL(P0.05)QKLEPEPT(1.10.16)TRI3(12.28.59)EP+QKLT(0.78.17)TRI3(8.41.84)(P0.01)QKLEP1hcAMPEP+QKLcAMP(1.11.29)nmol/gcAMP(14.23.57)nmol/gEPcAMP(3.32.34)nmol/gcAMP(34.33.46)nmol/g(P0.01)QKLEP1hAVPEP+QKLAVP(16.13.89)ng/gEPAVP(39.94.88)ng/g(P0.01)cAMPcAMPAVP(r1=0.852P0.05r2=0.861P0.05r3=0.840P0.05)     

bFGF促进内皮细胞β1整合素表达及其意义探讨

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子对血管内皮细胞β₁整合素表达的影响。方法:采用WesternBlot法结合图像处理分析,检测bFGF作用前后培养血管内皮细胞β₁整合素的表达。结果:bFGF处理组和对照组平均灰度值分别为166.11±9.86和175.32±5.12,两组免疫酶显色有显著差异。结论:bFGF能够诱导内皮细胞膜表面β₁整合素合成增加。推测bFGF通过上调内皮细胞β₁整合素表达,可能在促进血管生成方面有重要作用。     

肾上腺髓质素对大鼠低氧性肺动脉高压的急性降压作用及机理探讨

目的:观察肾上腺髓质素(ADM)对低氧性肺动脉高压的急性降压作用及其对体循环的影响及机理。方法:雄性Wistar大鼠分成常氧和低氧两大组,每大组分为3个剂量组。经常氧或低氧21d处理后分别经股静脉给予ADM_1-520.1nmol/kg、0.3nmol/kg、1nmol/kg,观察用药前后体循环和肺循环血流动力学的变化情况。雄性Wistar大鼠分成常氧和低氧两组,经股静脉给予ADM_1-520.3nmol/kg,观察用药前后肺循环压、体循环压变化,放免法测定血浆环磷酸腺苷(cAMP)的动态变化。结果:低氧与常氧大鼠经ADM注射后除常氧ADM_1-520.1nmol/kg注射组外肺动脉平均压(mPAP)均有不同程度的降低,低氧性肺动脉高压大鼠组更为明显(P＜0.05),持续时间更长;两组大鼠mPAP对不同剂量ADM呈不同降压效应,低氧组在0.1-0.3nmol/kg间mPAP下降与剂量成正比(P＜0.05),剂量递增至0.3nmol/kg后,mPAP下降趋势减弱,ADM_1-520.1nmol/kg注射下常氧组mPAP无明显降低,在0.3-1.0nmol/kgmPAP显著降低,并随ADM剂量增加进一步降低;两组大鼠体循环平均压(mSBP)均下降(P＜0.01),且与剂量成依赖关系,其中常氧组更显著。静脉注射ADM_1-520.3nmol/kg后血浆cAMP显著增高。结论:ADM对大鼠低氧性肺动脉高压有急性降压作用,其作用方式至少部分通过cAMP途径。     

中枢CRH在大鼠应激性体温升高和LPS性发热机制中的作用

目的:进一步观察中枢促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)在大鼠应激性体温升高和脂多糖(LPS)性发热中枢机制中的作用。方法:第三脑室微量注射CRH受体拮抗剂α-helicalCRH(9-41)和LPS,测定大鼠结肠温度及脑腹中隔区精氨酸加压素(AVP)含量。结果:生理盐水对照组大鼠体温明显升高,最大升幅为(0.88±0.31)℃。第三脑室注射CRH受体拮抗剂α-helicalCRH(9-41)10min后再注射生理盐水组,90min内大鼠结肠温度未见明显波动,90min后体温开始上升,1.5h体温反应指数(TRI_1.5)明显低于生理盐水对照组,而脑腹中隔区AVP含量和TRI_3.5与对照组比较均没有明显差别。第三脑室注射300ng的LPS引起大鼠结肠温度双相性升高,其TRI_3.5明显高于生理盐水对照组。事先向第三脑室注射α-helicalCRH(9-41)(5μg)再注射LPS组,TRI_3.5明显高于LPS组,而脑腹中隔区AVP含量明显低于LPS组。结论:CRH介导应激诱导的早期体温升高。CRH可能通过诱导脑腹中隔区AVP的生成限制大鼠LPS性发热。在大鼠LPS性发热中,CRH可能是一种双相作用分子,一方面本身介导发热体温升高,另一方面又诱生发热体温负调节介质而限制发热体温的升高。     

肾局部内皮素、一氧化氮在尿蛋白产生中的作用

目的:为明确肾局部内皮素(ET)和一氧化氮(NO)在蛋白尿产生中的作用,作者观察了阿霉素肾病鼠血浆及肾皮质ET、NO含量在蛋白尿发生发展过程中的变化及其与尿蛋白含量的关系。方法:(1)一次性注射法复制大鼠阿霉素肾病综合征模型,并隔日留24 h尿测取尿蛋白含量;(2)分别于蛋白尿前期、上升期、高峰期及下降期取血浆及肾皮质匀浆,用放射免疫法检测ET含量,用Griess法检测NO代谢产物NO^-₂代表NO水平;(3)分别研究了血浆及肾皮质中ET 、NO与尿蛋白量两两间的相关性。结果: 正常鼠尿蛋白排泌量4-7(mg/d),肾病鼠4个时间点尿蛋白排泌量分别为5、10、241和201 mg/d,于蛋白尿上升期始有显著意义的增加,32 d为高峰期,56 d有所下降。蛋白尿前期、上升期、高峰期和下降期的血浆ET值分别为134、 150、 538、 445 ng/L,自上升期始明显高于同期对照组(126-129 ng/L);肾皮质ET分别为364.6、 653.3、 1 526.8、 1 393.6 pg/g肾皮质,自蛋白尿前期始均明显高于对照组(235.9-246.1 pg/g,P＜0.05);4个时点血浆NO^-₂值分别为40、36、8、11 μmol/L,自上升期始明显低于对照组(42-46 μmol/L);肾皮质NO^-₂值分别为80、69、8、25 nmol/g肾皮质,自蛋白尿前期始明显低于对照组(114-124 nmol/g,P＜0.05)。上升期血浆ET和下降期血浆NO^-₂与尿蛋白含量密切相关,而肾皮质ET和NO均自蛋白尿前期始便密切相关于尿蛋白排泌量(P＜0.05)。结论: 在蛋白尿发生发展过程中血浆和肾皮质ET、NO均有显著改变,而肾皮质ET、NO含量的改变在蛋白尿的发生发展中起重要作用。     

树鼩血栓性脑缺血中心区及半暗区神经元PAF受体结合特性的研究

目的：观察血栓性局部脑缺血过程中缺血中心区及半暗区血小板活化因子（PAF）受体的消长变化,探讨PAF在脑缺血中心区及半暗区神经元继发性脑损伤中的分子机制。方法：建立光化学诱导树鼩血栓性局部脑缺血模型并提取树鼩脑细胞膜蛋白,用[³H]-PAF放射配体结合试验检测中枢神经细胞膜不同特性的PAF结合位点（受体）。结果：树鼩脑细胞膜上存在两种亲和性不同的PAF受体,即高亲和性和低亲和性受体,其亲和力（kD）分别为(3.61±0.72) nmol/L（kD₁）和17.04±2.41) nmol/L（kD₂）相应的最大结合容量（B_max）分别为(1 457.94±168.01) pmol/g蛋白和(5 017.40±742.16) pmol/g蛋白。脑缺血4、24及72 h中心区、半暗区及对侧区高、低亲和性受体的kD值、B_max值均显著低于假手术组（P<0.01）,中心区及半暗区尤为明显,其中以缺血后24 h的变化最为显著。结论：PAF受体在介导缺血性脑损伤过程中起着重要作用,缺血中心区及半暗区机能代谢的不同与PAF受体亲和特性及最大结合容量改变不同有关,亦是PAF介导继发性脑损伤的重要分子基础。     

大鼠主要水溶性晶体蛋白在老化进程中的时相变化

目的: 研究大鼠老化进程中主要晶体蛋白相对含量的时相变化与晶体老化的关系。方法: 常规饲养不同年龄SD大鼠(出生后1 d、8 d、2周、8周、8个月及1.5年);提取水溶性晶体蛋白,双向电泳(等电聚焦/SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳, IEF/SDS-PAGE)得到大鼠晶体蛋白电泳图形;考马斯亮蓝染色后扫描蛋白图形,分别确认各主要晶体蛋白组分并测定其相对含量百分比组成。 结果:(1)所测各组大鼠18种主要晶体蛋白组分中,7种晶体蛋白相对含量呈渐进性时相改变,但总水溶性晶体蛋白水平未见明显变化。(2)晶体蛋白相对含量时相改变主要有4种形式:升高(βB₄、αB₂、αA₂、βA₁)、降低(β₇、β₈、γ_2,3、γ_5,6)、大致保持稳定(βA₃、βB₅)及无规则性改变。(3)晶体蛋白βB₄ /αA₂比值在大鼠老化进程中呈渐进性升高。结论: 晶体蛋白相对含量的渐进性时相改变反映晶状体老化的程度。     

LPS及IL-1ra对系膜细胞产生一氧化氮及增殖的影响

目的:观察脂多糖(LPS)对体外培养的系膜细胞(GMC)产生NO的影响及这一过程对GMC增殖的影响。方法:用培养的第一、二代SD大鼠肾小球系膜细胞进行实验,分别加入LPS或LPS加白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra),24h后用经典的Griess方法测定培养上清中亚硝酸盐含量,用[³H]-TdR掺入率测定GMC的增殖,狭缝和Northern杂交测定iNOSmRNA表达。结果:LPS刺激后,GMC出现iNOSmRNA的表达及亚硝酸盐增多[(0.64±0.25)nmmol/10⁴细胞vs(0.12±0.06)nmmol/10⁴细胞],GMC增殖(3735±1177.9vs1785±280.6);LPS加IL-1ra组,iNOSmRNA表达比LPS组减少40%,上清亚硝酸盐含量更高[(3.28±0.33)nmmol/10⁴细胞],GMC增殖被抑制(818±77.27)。结论:LPS诱导GMCiNOSmRNA表达及亚硝酸盐增多,并有GMC增殖。IL-1ra部分拮抗iNOSmRNA的表达,但亚硝酸盐产量更高,GMC增殖被抑制。