肾阳虚大鼠模型的水通道蛋白1改变

目的：探讨中医学肾阳虚证的物质基础。方法：运用腺嘌呤灌服和氢化可的松肌肉注射2种方法制备大鼠肾阳虚模型（分别称为模型Ⅰ和模型Ⅱ）,100只Wistar大鼠随机分为正常对照组,模型Ⅰ组,模型Ⅱ大、中和小剂量组。造模结束后,常规生化法检测血肌酐（serum creatinine,SCr）、血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、尿肌酐（urine creatinine,UCr）含量,冰点比重法检测尿渗透压（urine osmotic pressure,Uosm）、高岭土法检测尿17-羟皮质类固醇含量。实时逆转录聚合酶链式反应检测肾脏组织中水通道蛋白-1表达。结果：两种模型大鼠均出现类似肾阳虚证表现。与正常对照组和模型Ⅱ各剂量组比较,模型Ⅰ组大鼠SCr和BUN含量升高（P〈0.05）,UCr含量和Uosm降低（P〈0.05）。模型Ⅰ组大鼠尿17-羟皮质类固醇含量和肾组织AQP-1表达比正常对照组下降（P〈0.05）。与正常对照组比较,模型Ⅱ中剂量组SCr含量增加（P〈0.05）,尿17-羟皮质类固醇含量降低（P〈0.05）,而模型Ⅱ各剂量组大鼠肾组织AQP-1表达升高（P〈0.05）,并显示出一定的剂量依赖关系,以高剂量组升高最为明显。结论：水通道蛋白可能是肾阳虚证的物质基础之一。     

水通道蛋白在肾脏的表达及意义

目的　了解水通道蛋白在肾脏的表达及生理、病理意义 ,为相关的临床研究提供帮助。方法　收集国内外相关资料 ,对水通道蛋白的研究内容进行综述。结果　肾脏水通道蛋白的类型有AQP1-AQP4、AQP6 -AQP8,主要分布在近曲小管、细段和集合管 ,AQP1-AQP4参与水的重吸收和尿液浓缩 .AQP6 -AQP8的生理与病理意义不明。结论　肾脏水通道蛋白的类型较多 ,提示有重要的生理意义。     

单侧输尿管梗阻肾脏水通道蛋白的变化

目的：探讨单侧输尿管梗阻肾积水时肾小管水通道蛋白（AQP）的变化趋势及其与组织学变化之间的联系。方法：选取20例单侧肾积水伴无功能行肾切除术的临床肾脏标本,应用免疫组化方法分析评估AQP1及AQP2的表达水平;然后建立大鼠单侧输尿管梗阻模型（UUO）,进一步动态观察梗阻后1,2 d及梗阻解除后1,2,7d不同时间点AQP1、AQP2的变化趋势,同时通过HE染色观察其变化与组织病理学之间的联系。结果：单侧肾积水患者肾脏病理标本肾小管水通道蛋白AQP1及AQP2表达下降明显,与正常组比较差异有显著性（AQP1,P〈0.01;AQP2,P〈0.05）;UUO模型中,梗阻后1,2 d及解除梗阻后1 d,AQP1、AQP2表达随时间延长进行性下降（P〈0.05）,解除梗阻后2 d其表达开始回升（P〈0.05）,解除梗阻后7 d逐渐恢复,但仍然没有达到正常水平（P〈0.05）。同时HE染色显示,梗阻1,2 d及解除梗阻1 d时组织学变化以集合管扩张和炎性改变为主,但均于梗阻解除7 d内较快恢复正常,与AQP的大幅变化并不完全一致。结论：输尿管梗阻将导致肾脏AQP1及AQP2表达急剧下降,且恢复十分缓慢;同时这种下降与组织学改变没有直接联系。     

单侧输尿管梗阻肾脏水通道蛋白的变化

目的:探讨单侧输尿管梗阻肾积水时肾小管水通道蛋白(AQP)的变化趋势及其与组织学变化之间的联系。方法:选取20例单侧肾积水伴无功能行肾切除术的临床肾脏标本,应用免疫组化方法分析评估AQP1及AQP2的表达水平;然后建立大鼠单侧输尿管梗阻模型(UUO),进一步动态观察梗阻后1,2 d及梗阻解除后1,2,7d不同时间点AQP1、AQP2的变化趋势,同时通过HE染色观察其变化与组织病理学之间的联系。结果:单侧肾积水患者肾脏病理标本肾小管水通道蛋白AQP1及AQP2表达下降明显,与正常组比较差异有显著性(AQP1,P<0.01;AQP2,P<0.05);UUO模型中,梗阻后1,2 d及解除梗阻后1 d,AQP1、AQP2表达随时间延长进行性下降(P<0.05),解除梗阻后2 d其表达开始回升(P<0.05),解除梗阻后7 d逐渐恢复,但仍然没有达到正常水平(P<0.05)。同时HE染色显示,梗阻1,2 d及解除梗阻1 d时组织学变化以集合管扩张和炎性改变为主,但均于梗阻解除7 d内较快恢复正常,与AQP的大幅变化并不完全一致。结论:输尿管梗阻将导致肾脏AQP1及AQP2表达急剧下降,且恢复十分缓慢;同时这种下降与组织学改变没有直接联系。     

戊四氮点燃大鼠海马水通道蛋白4 和水通道蛋白9的表达

目的:观察戊四氮点燃癫(癎)大鼠海马中水通道蛋白4 (AQP4)和水通道蛋白9 (AQP9)表达的变化,探讨它们在癫(癎)发生发展中的作用.方法:SD大鼠35只,随机分为对照组5只、生理盐水组5只及实验组25只.实验组大鼠腹腔注射戊四氮,制备戊四氮点燃癫(癎)大鼠模型;生理盐水组腹腔注射相应剂量生理盐水;对照组未做处理.实验组大鼠分别于癫(癎)持续发作后3 h、6 h、12 h、24 h和3 d,各取5只大鼠脑组织,免疫组织化学SP法进行AQP4、AQP9检测.结果:实验组大鼠AQP4和AQP9蛋白主要分布于海马CA1、CA3区的锥体细胞层、齿状回颗粒细胞层和多形细胞层;癫(癎)持续状态3 h时,实验组大鼠海马AQP4和AQP9蛋白表达降低,6 h时增大至正常水平,而后逐渐增强,至24 h达高峰,再逐渐降低,至3 d时恢复至正常水平.结论:AQP4和AQP9与癫(癎)的发生发展关系密切.     

加参方对CHF大鼠肾脏水通道蛋白(AQP)mRNA表达的影响

[目的]通过观察加参方对充血性心力衰竭(CHF)大鼠肾脏水通道蛋白(AQP)mRNA表达的影响,探讨加参方改善水钠潴留的机制。[方法]采用结扎大鼠冠状动脉前降支法造成心肌梗死后形成慢性CHF模型,随机将CHF大鼠分为加参方组、模型组和假手术组共3组,每组8只。连续给药4周。[结果]加参方能够减少CHF大鼠异常增加的抗利尿激素(AVP)水平,抑制AVP-2R受体的激活,降低CHF大鼠肾脏内髓AQP-2mRNA表达。[结论]加参方通过调控CHF大鼠肾脏水通道蛋白AQP mRNA表达,使管腔液中的水通透性减少,减轻CHF时水钠潴留,促进尿液排泄,降低心脏容量负荷,可能是加参方增强心功能的机制之一。     

充血性心力衰竭大鼠肺脏通道蛋白的表达

目的　研究在不同程度的充血性心力衰竭时肺脏水通道蛋白 1和 5 (AQP1、AQP5 )和上皮性钠通道(ENaC)表达的情况。方法　将SD大鼠通过腹主动脉 下腔静脉穿刺造瘘和冠脉结扎的方法建成不同的心衰模型。用Doppler超声心动图的方法比较其心功能的各项参数 ,用肺湿 /干质量比和肺脏组织学检查了解各组大鼠肺水肿的情况 ,并以RT PCR的方法检测肺脏AQP1、AQP5和ENaCα亚基的基因表达。结果　穿刺造瘘大鼠心功能损害较轻 ,而冠脉结扎大鼠心功能严重失代偿。各组大鼠肺湿 /干重比无显著性差异 ,但肺脏组织学检查显示冠脉结扎大鼠存在轻度的肺水肿。分子生物学检测发现冠脉结扎大鼠肺脏AQP1和αENCmRNA表达上调 (AQP1:1.4 88vs 0 .775 ,P <0 .0 0 1;αENaC :0 .5 2 4vs 0 .30 6 ,P <0 .0 5 ) ,而AQP5mRNA表达在各组大鼠之间未见显著性差异。结论　在严重的充血性心力衰竭大鼠肺脏存在着AQP1和ENaC基因表达的上调 ,其中AQP1表达增加可能参与了心源性的肺脏液体转运障碍     

多巴胺调控梗阻性黄疸围手术期肾髓质水通道蛋白2的表达

目的：探讨梗阻性黄疸围手术期肾脏水通道蛋白2（aqp2）的变化及小剂量多巴胺对aqp2表达的影响。方法：将大鼠随机分为对照组、梗阻性黄胆组、多巴胺5μg组、多巴胺10μg组,其中对照组10只大鼠行假手术、实验组60只大鼠建立梗阻性黄疸动物模型,7天后实验组大鼠解除梗阻,而对照组大鼠再行假手术;多巴胺5μg组和10μg组在胆道再通时于股静脉分别泵入5μg/（kg.min）和10μg/（kg.min）多巴胺,对照组及梗阻性黄疸组泵入0.9%生理盐水,将各组动物随机均分为立即取材组和24h后取材组分别采集标本并检测有关指标。结果：解除梗阻早期大鼠血清胆红素水平下降,但BUN及Cr水平未见明显改变;多巴胺5μg组较10μg组aqp2表达水平更接近于对照组,而梗阻性黄疸组aqp2表达水平较对照组明显下降。结论：小剂量多巴胺对于增加肾近曲小管上皮细胞aqp2表达具有积极作用,并可能因而改善梗阻性黄疸围手术期的肾功能。     

利尿剂对大鼠肾脏水通道蛋白-2基因表达和尿液水通道蛋白2的影响

目的 探讨临床常用利尿剂呋塞米、双氢克尿噻及安体舒通对正常大鼠肾脏水通道蛋白-2(AQP2)基因表达及尿液水通道蛋白-2浓度的影响.方法 40只健康SD大鼠随机分成4组:对照组、呋塞米组、安体舒通组、双氢克尿噻组.观测尿量、血钠及尿渗量,应用RT-PCR半定量检测肾内髓质AQP2和血管加压素-2型受体(V2-R)mRNA水平,Westernblotting检测肾髓质AQP2蛋白含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测尿液AQP2浓度.结果 ①与对照组比较,利尿剂组大鼠尿量均显著增多(P＜0.05),尿液中AQP2浓度明显增加(P＜0.05).但呋塞米组尿渗量低于对照组(P＜0.05),而双氢克尿噻组和安体舒通组尿渗量高于对照组(P＜0.05).②呋塞米组肾脏AQP2 mRNA、V2-RmRNA和AQP2蛋白表达较对照组明显增加(P＜0.05),而双氢克尿噻组较对照组明显降低(P＜0.05),安体舒通组有所减少但无统计学差异.结论 三类利尿剂均可显著增加正常大鼠尿液AQP2蛋白的排出.但对正常大鼠肾脏水通道蛋白2基因表达的影响并不相同,双氢克尿噻可以抑制正常大鼠肾内髓质AQP2mRNA和蛋白的表达,呋塞米能增加正常大鼠肾内髓质AQP2mRNA和蛋白的表达.     

探讨加味真武汤治疗阳气虚衰型心衰病

真武汤是汉代医圣张仲景《伤寒论》中的经典方剂,其功效为温肾利水。文章在文献研究的基础上利用加味真武汤（制附子10 g,茯苓15 g,白术15 g,白芍15 g,丹参20 g,川芎15 g,当归15 g,泽泻15 g,葶苈子15 g,甘草10 g）治疗阳气虚衰型心衰病,避免了西药的副作用,提高了患者的生活质量,取得了良好的疗效。     

泽泻汤对兔椎基底动脉供血影响的实验研究

目的:研究泽泻汤对实验动物(兔)的脑血流量和脑血管阻力的影响.方法:40只实验兔按体重随机分组为空白对照、泽泻汤小剂量、泽泻汤大剂量和全天麻胶囊组.采用电磁流量计检测脑血流量,计算脑血管阻力,检测血压、心率,分别记录0、5、15、30、60min时的指标变化.结果:泽泻汤大剂量组在第30、60min时脑血流量显著增加,脑血管阻力降低.结论:泽泻汤能提高脑血流量,降低脑血管阻力.     

ALF大鼠eNOSmRNA,iNOSmRNA表达的实验研究

目的：从分子水平探讨急性肝功能衰竭（acute liver failure,ALF)大鼠机体重脏器eNOSmRNA,iNOSmRNA表达的变化,揭示其在ALF时多脏器功能障碍中的作用,方法：通过切除大鼠90％肝脏制备急性肝功能衰竭模型,并在ALF6h及应用NO供体或／和NOS抑制剂6h分别处死动物,取其肝,肺,肾,小肠和大肠制备组织切片,应用原位杂交方法测定每一组织eNOSmRNA和iNOSmRNA活性表达情况,结果：eNOSmRNA表达在ALF6h肺,大肠显示增加,而iNOSmRNA在肝,肺,肾,小肠和大肠表达明显增;ALF12h,应用NO供体和／或NOS抑制剂,肺,大肠表达eNOSmRNA下降,同时肝,肺,肾,小肠和大肠iNOSmRNA表达均明显降低。结论：急笥肝功能衰竭早期（6h)肺,大肠eNOSmRNA和肝,肺,肾,小肠和大肠iNOSmRNA表达显著增高,其翻译合成iNOS诱导产生的大量NO,可能参与早期脏器功能的损害,而应用NO供体和／或NOS抑制剂eNOSmRNA和iNOSmRNA的表达均明显降低,从而减轻对脏器的损害。     

超声辅助VEGF165转染骨髓间充质干细胞的实验研究

目的：探讨骨髓间充质干细胞定向分化血管内皮细胞的可行性研究。方法：采用超声辅助电穿法，将VEGF165基因的质粒PEGFP—Cl转染至骨髓间充质干细胞，转染后于荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况。结果：超声辅助转染5h后可见细胞内有GFP表达，10h后可达高峰。结论：VEGF基因转染骨髓间充质干细胞后，骨髓间充质干细胞内有GFP表达，提示细胞转染成功，骨髓间充质干细胞定向分化为血管内皮细胞具有可行性。     

糖尿病大鼠肾脏病变及其SnoN蛋白表达的变化

目的：复制2型糖尿病动物模型,并观察其肾脏病变及snoN蛋白表达的变化。方法：SD大鼠随机分为正常对照组（NC）、高脂高糖组（HG）。高脂、高糖饮食12周后又随机分为高脂高糖对照组（HC）、糖尿病组（DM）。采用高脂、高糖饮食12周加小剂量链脲佐菌素注射（30mg／kg）的方法复制2型糖尿病动物模型,成模大鼠随机分别于糖尿病8周（DM8）、12周（DM12）和16周（DM16）处死;Western印迹法检测肾皮质SnoN蛋白的水平;牛物化学方法测血糖、血清胰岛素水平、甘油三酯、总胆固醇、血肌酐及24h尿蛋白;光镜检查肾组织形态学改变。结果：DM组大鼠出现高血糖、高血脂、肾功能和肾组织形态学改变;HG组血清胰岛素水平、甘油三酯和总胆固醇明显升高,血糖与NC组相比差异无统计学意义;Western印迹检测发现DM8组肾组织中SnoN蛋白的表达明显低于NC组,且随病程进展逐渐减少,至DM16时减至NC组的64．20％。结论：成功复制了2型糖尿病动物模型;SnoN蛋白的表达变化可能参与了2型糖尿病肾脏病变的发生、发展过程。     

贲门癌切除贲门再造术的临床研究

目的 为减少贲门癌术后吻合口瘘及狭窄与返流性食管炎,观察贲门癌切除贲门再造术疗效。方法 将贲门癌切除贲门再造术42例与同期贲门癌切除胃食管套入式吻合术42例进行对比研究。术后6～12mo,行食管镜检查测定吻合口大小、组织活检和测定食管腔内返流液pH值。结果 两组患术后均无吻合口瘘发生,无手术死亡。结论 该术式减少吻合口瘘及狭窄,预防返流性食管炎发生。     

黄连素联合尼群地平治疗原发性高血压合并心功能不全初步观察

目的:观察黄连素联合尼群地平治疗原发性高血压合并心功能不全的临床疗效。方法:对原发性高血压合并心功能不全患者31例采用黄连素联合尼群地平治疗,6 w后比较治疗前后血压、心功能、心率及心电图变化情况。结果:治疗6 w后观察到血压稳定下降,心功能不全症状改善,总有效率81.3%,反映心功能的指标心电图V1导联P波终末电势(PtfV1)及左室射血分数(LVEF)降低。结论:黄连素与尼群地平联合使用治疗原发性高血压合并心功能不全疗效佳。     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠心肌细胞钙通道基因表达的影响研究

目的研究银杏叶提取物对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌细胞L型Ca2+通道蛋白mRNA表达的影响,探讨银杏叶提取物对T2DM的治疗作用。方法用高糖-高脂肪饲料刺激加小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM大鼠模型,将糖耐量减低的20只大鼠随机分为糖尿病组(10只)和治疗组(10只),另设10只正常大鼠(正常组)作为对照。治疗组大鼠给予银杏叶提取物灌胃,糖尿病组和正常组大鼠给予0.9%氯化钠注射液灌胃。治疗10周后采用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测3组大鼠心肌细胞L型Ca2+通道蛋白mRNA表达量。结果正常组、糖尿病组、治疗组大鼠心肌组织L型Ca2+通道蛋白mRNA表达量分别为(0.157±0.028)、(0.257±0.025)和(0.226±0.029),3组间比较差异有统计学意义(F=28.232,P=0.000);糖尿病组、治疗组大鼠心肌组织L型Ca2+通道蛋白mRNA表达量均显著高于正常组,而治疗组显著低于糖尿病组,差异有统计学意义(P<0.05)。另外,实验10周时,糖尿病组大鼠葡萄糖耐量试验各时点血糖水平较正常组大鼠显著升高,而治疗组大鼠则较糖尿病组显著下降,差异有统计学意义(P<0...