应用PCR技术诊断新生儿隐匿型先天性弓形虫病

目的 早期、快速诊断新生儿隐匿型先天性弓形虫病，以便早期实施干预治疗，减少或减轻先天性弓形虫病的后发症状。方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测８６例孕中、晚期血弓形虫ＤＮＡ（ＴＯＸ－ＤＮＡ）阳性孕妇所生新生儿脐血、静脉血、尿液和母乳中ＴＯＸ－ＤＮＡ。结果 脐血、静脉血和尿液ＴＯＸ－ＤＮＡ阳性率分别为５３．４９％、４８．８６％和４１．８６％，而母乳中无１例阳性。结论 应用ＰＣＲ技术早期诊断新生儿     

弓形虫病基因诊断的动物实验研究

目的：建立敏感、特异、稳定的PCR法，用于弓形虫病诊断。方法：选择与合成引物并确立最佳扩增条件，用PCR法检测实验感染鼠血液中弓形虫DNA，并与ELISA法检测循环抗原(CAg)作比较。结果：该PCR检测弓形虫DNA法特异性强，对其他7种寄生虫DNA均不扩增；敏感性高，可检测到0．2pg DNA；检测急性感染弓形虫小鼠血液最早于感染后第2天出现用性，与ELISA法查CAg比较。PCK检测弓形虫DNA法阳性出现时间早、检出率高。结论：该PCR法可应用于弓形虫感染的早期诊断。     

荧光定量聚合酶链反应诊断弓形虫感染的实验研究

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）对孕妇与新生儿弓形虫（TOX）感染的诊断价值。方法以完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量PCR方法,检测了产妇的血清标本和新生儿脐血标本,同时与常规 PCR法和酶联免疫吸附法（ELISA）比较。结果 225例产妇中,FQ-PCR阳性28例,平均拷贝数值（ml-1）为 1.68×105,阳性率为12.44％,常规PCR阳性率为12.89％,TOX-IgG阳性29例,阳性率为 12.89％,IgM阳性33例,阳性率为14.67％。179例新生儿中,FQ-PCR阳性7例,平均拷贝数值（ml-1）为2.29×105,阳性率为3.91％,常规PCR阳性率为5.03％,TOX-IgG阳性11例,阳性率为6.15％,IgM阳性3例,阳性率为1.68％。结论FQ-PCR特异性比ELISA法高,可以检测TOX的真实感染和复制情况,对TOX的临床诊断、治疗方案的选择和疗效观察有较大的应用价值。     

先天性弓形虫病

先天性弓形虫病ＣｏｎｇｅｎｉｔａｌＴｏｘｏｐｌａｓｍｏｓｉｓ齐静姣综述（洛阳医学高等专科学校洛阳４７１００３）先天性弓形虫病是指母体的弓形虫通过胎盘使胎儿在宫内感染的弓形虫病。因其临床表现复杂多样，新生儿期治疗困难，病死率极高。现就其发病情况及其机理...     

FQ-PCR评价阿奇霉素治疗儿童弓形虫病疗效的初步观察

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)用于评价阿奇霉素治疗儿童弓形虫(TOX)病的效果。方法采用FQ-PCR技术,对有弓形虫病临床表现者,检测血TOX-DNA,在阳性者22例中,先天性感染12例,获得性感染10例。所有病例均用阿奇霉素在治疗2个疗程和4个疗程后,分别观察其治疗效果。结果全部患儿均有效,病情逐步好转。先天感染组治疗前患儿血TOX-DNA含量(6.21±1.17)copies/ml,治疗2个疗程后TOX-DNA含量(5.46±1.25)copies/ml(P>0.05),4个疗程后TOX-DNA含量(4.12±1.09)copies/ml(P<0.01);获得性感染组治疗前患儿血TOX-DNA含量(6.79±1.05)copies/ml,治疗2个疗程后TOX-DNA含量(6.09±1.04)copies/ml(P>0.01),4个疗程后TOX-DNA含量(4.06±0.95)copies/ml(P<0.01)。结论22例弓形虫感染患儿服用阿奇霉素治疗,效果显著,未见明显毒副作用,患儿依从性好。     

聚合酶链反应检测弓形虫感染的临床应用

本文根据ＤＮＡ复制原理，从弓形基因组保守域选择一对寡聚核苷酸引物，建立检测ＴＯＸ的聚合酶链反应。     

弓形虫感染与先天性弓形虫病

近年来 ,随着围生医学与预防医学的发展 ,妊娠期弓形虫感染引起的胎婴儿先天性异常 ,已受到众多预防及临床工作者的高度重视。它是导致胎儿宫内感染的最重要的生物学因素之一 [1 ,2 ]。弓形虫是一种原虫 ,寄生在除红细胞外的几乎所有有核细胞中 ,可引起人兽共患的弓形虫病 ,尤其在宿主免疫功能低下时 ,可致严重后果 ,是一种重要的机会致病原虫[1 ,3 ] 。弓形虫可寄生在人及 190多种动物体内 ,终宿主是猫。 190 8年法国学者 Nicolle及 Man ccaux在北非的刚地梳趾鼠的肝脾单核细胞中发现弓形虫。 192 3年捷克医生 Jan Ku在布拉格一医院观察…     

先天性弓形虫病的治疗

目的讨论先天性弓形虫病的治疗.方法 根据患儿临床表现结合检查结果进行诊断并治疗.结论 螺旋霉素:毒性小,适用于先天性弓形虫病.磺胺嘧啶和乙胺嘧啶:二者合用是目前治疗本病最常用的方法,可抑制弓形虫滋养体的繁殖,在急性期治疗颇见疗效.     

新生儿先天性疾病早期诊断方法的探讨

建立新生儿先天性疾病的无损伤性早期诊断技术。方法取新生儿分娩时脐动脉血标标,细胞培养,进行染色体核型分析,ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ法查弓形抗体,聚合酶链法监测胎盘组织中弓形虫抗原。结果１４７例研究对象中,５６例孕妇弓形虫感染者中发现染色体异列,９１例正常孕妇中发现染色体异常１例。     

先天性弓形虫病的研究进展

弓形虫病是近代认识的寄生虫病。该病的病因等临床知识尚待进一步完善。笔者就先天性弓形虫病的研究概况、临床表现、预防 ,及防治进行全面综述     

应用PCR技术诊断单纯疱疹病毒性角膜炎

目的探讨聚合酶链反应（PCR）技术诊断单纯疱疹（单疱）病毒性角膜炎的实用价值，为临床诊断提供依据和方法。方法应用PCR技术对60例按临床诊断标准诊断为单疱病毒性角膜炎患者的患眼泪液及角膜上皮进行病毒DNA检测。结果PCR检测60例患者标本结果，阳性46例占76．7％，阴性14例占23．3％。结论对单疱病毒性角膜炎诊断不能只根据其临床特征来诊断；PCR可为临床提供实验诊断依据。     

PCR技术对检测可疑沙眼患者眼分泌物中沙眼衣原体病原的作用

目的探讨聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术诊断眼分泌物中的沙眼衣原体的实用价值,为临床早期沙眼诊断提供依据和方法。方法应用PCR技术,以具有衣原体属性的16S rRNA基因为目的基因,对50例诊断为可疑沙眼患者的眼分泌物进行沙眼衣原体检测。并同时跟踪调查所有病例沙眼的发病情况。结果PCR检测50例可疑沙眼患者,阳性41例,占82%;阴性9例,占18%。病例跟踪调查结果表明,41例PCR检查结果阳性的患者均发生了沙眼典型症状,9例PCR检查结果阴性患者中仅有1例发生了沙眼典型症状。结论对沙眼的诊断不能只根据其临床特征来诊断,PCR检测沙眼衣原体具有特异性高的优点,能为临床早期诊断提供实验诊断依据。     

单核细胞增多性李斯特菌荧光定量PCR检测

目的　探索建立快速、敏感、特异的单核细胞增多性李斯特菌的PCR检验方法。方法　以单核细胞增多性李斯特菌hly A基因作为靶序列设计一对引物,并以单核细胞增多性李斯特菌标准菌株中提取的DNA作为模板,用常规PCR和荧光定量PCR对单核细胞增多性李斯特菌进行鉴定。结果　含有一段特异基因的6 0 0 bp片段,表现出良好的单核细胞增多性李斯特菌种特异性。结论　荧光定量PCR比普通PCR特异性强、灵敏度高、重现性好,可以定量、快捷地应用于检测单核细胞增多性李斯特菌。     

用聚合酶链反应检测乙肝患者血清中的HBV－DNA

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了１１４例传染科门诊病人血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与ＨＢＶ有关的血清学标志（ＨＢＶＭ）进行了比较。结果表明：在９２和ＪＨＢｓＡｇ（＋）病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者５０例，占５４．３４％；在２８例ＨＢｅＡｇ（＋）病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者２６例，占９２．８６％；在２０例ＨＢＶＭ均为阴性的病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者有６例，占３０．００％。证明ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ较用ＥＬＩＳＡ法检测抗原一抗体更加灵敏、可靠。     

慢性牙周炎患者龈下菌斑中齿垢密螺旋体的PCR检测

目的：探讨龈下菌斑中齿垢密螺旋体(Td)的检出率与慢性牙周炎临床指标的关系。方法：取58例慢性牙周炎患者患病部位及相对健康部位龈下菌斑．用终浓度为1％的Triton X-100及100℃水浴10min处理标本从而制备DNA模版．对齿垢密螺旋体16srRNA保守区片段进行扩增。结果：58例患者中47例(81．0％)患病部位PCR为阳性，8例(13．8％)相对健康部位PCR为阳性。结论；(1)齿垢密螺旋体在慢性牙周炎患者龈下菌斑中患病部位检出率高于相对健康部位．是慢性牙周炎致病菌之一．且随Td检出率的增高，慢性牙周炎的严重程度有逐渐加重趋势。(2)PCR检测Td敏感性强、特异性高。     

PCR法与培养法检测儿童肺炎易感细菌结果比较

目的探讨PCR法和培养法对儿童肺炎易感细菌检测的应用价值。方法采用PCR法及细菌培养法对113例呼吸道感染患儿的临床标本进行检测,对两种检测方法的结果进行比较。结果 113例临床标本中,培养法检测阳性率46.9%(53/113),其中流感嗜血杆菌2例,大肠埃希菌8例,肺炎克雷伯菌15例,肺炎链球菌3例,金黄色葡萄球菌12例,表皮葡萄球菌6例,铜绿假单胞菌7例。PCR法检测阳性率69.9%(79/113),在79例阳性标本中检出病原菌85株,其中73例标本检测出单一病原,6例标本为混合感染。流感嗜血杆菌18例,大肠埃希菌8例,肺炎克雷伯菌17例,肺炎链球菌16例,金黄色葡萄球菌10例,表皮葡萄球菌10例,铜绿假单胞菌6例。结论与培养法相比,PCR法可以提高肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等较难培养细菌的检出率,应将PCR法与培养法结合作为肺炎易感细菌的检测方法,为临床医师合理选择抗生素奠定基础。     

新生儿脐膨出的早期诊治

目的：探索新生儿脐膨出早期诊治的特点。方法：回顾性研究10例脐膨出新生儿的诊治结果,并结合文献进行分析。结果：10例脐膨出新生儿,7例3d内就诊。5例I期手术修补,2例Ⅱ期修补。3例病史超过3d,行保守治疗。其中9例治愈,经2月－3年以上的随访生长发育良好。结论：新生儿脐膨出是一种临床上少见的先天性疾病,是新生儿外科中的急症。早期准确的诊治是挽救患儿生命的关键。早期诊断中需特别注意仔细鉴别,并了解是否合并其它畸形。治疗应越早越好,一般3d内就诊者可考虑急症手术,超过3d者行保守治疗为好。     

人类D1S80位点的Amp-FLP分析在法科学实践中的应用

用Ａｍｐ－ＦＬＰ技术分析Ｄ１Ｓ８０位点的多态性，对８５例亲子鉴定案和２例强奸杀人案进行了鉴定。在８５例亲子鉴定案中，３５例排除了错误被控父亲，５０例未排除。在３５例中，Ｄ１Ｓ８０位点排除了３０例，排除机率为３５．２９％，其中有２例只有Ｄ１Ｓ８０位点排除了亲子关系；其余遗传标记排除３３，排除机率为３８．８２％，有５例Ｄ１Ｓ８０未排除。在５０例未排除亲子关系的案例中，由Ｄ１Ｓ８０位点得到的单项父权指数（ＰＩ）为２．０５７６～１１１．１１１１，在提高父权相对机会（ＲＣＰ）上起了很大作用。５０例中，４１例的ＲＣＰ达到了９９．７３０％以上，肯定了父权，９例达到９９．３００％～９９．６４９％，证明被控男子很可能是孩子生父。Ｄ１Ｓ８０位点的个人鉴别能力高，在法医学亲子鉴定和个人识别中具有重要的作用。     

用PTVS检测t（14；18）PCR产物的DNA序列

为确定聚合酶链反应（ＰＣＲ）和地高辛（ＤＩＧ）系统检测ｔ（１４；１８）的特异性，我们采用ＰＧＥＭ－Ｔｖｅｃｔｏｒ系统（ＰＴＶＳ）和双脱氧链终止技术克隆并测定了ＲＬ细胞系和一个ＮＨＬ患者－Ａｍｂｒｏｓｅｎ的ｔ（１４；１８）ＰＣＲ产物的ＤＮＡ序列。结果表明两者的ＰＣＲ扩增产物均为ｂｃｌ－２－ＪＨ融合基因片段，证实ＰＣＲ－ＤＩＧ系统是一种特异的检测ｔ（１４；１８）的方法。同时还表明用ＰＴＶＳ对ＰＣＲ。产物进行克隆测序优于直接用双脱氧法测序。     

巢式PCR检测舌苔幽门螺杆菌临床研究

目的：幽门螺杆菌（H.pylori）是消化道疾病的常见致病菌,实验检测舌苔中是否存在H.pylori比较困难。利用巢式PCR检测舌苔幽门螺杆菌分布,并分析舌苔H.pylori与胃H.pylori的相关性。方法：用13C或14C尿素呼气试验（UBT）检测胃H.pylori;随机刮取80份舌苔样本,其中UBT阳性病人舌苔样本55份,UBT阴性病人舌苔样本25份,用巢式PCR检测舌苔H.pylori,以H.pylori的热休克蛋白HSP60基因为引物。结果 ：巢式PCR检测出44份的舌苔H.pylori感染为阳性;数据统计分析后,UBT阳性与PCR阳性的相关性较好（两组McNemar检验P=0.061〉0.05）。结论：胃H.pylori阳性的人群中,其舌苔感染H.pylori的可能性很大,舌苔是人体H.pylori的主要储存地,考虑为胃内H.pylori感染和复发的原因之一。