柯萨奇B3m病毒感染新生乳鼠致急性病毒性心肌炎模型的研究

目的 探讨制备柯萨奇B3m病毒感染Balb/C新生乳鼠急性病毒性心肌炎模型的实验途径。方法 地柯萨奇B3m亲心肌株病毒进行增毒，滴定TCID50后感染Balb/C新生乳鼠。CVB3m病毒感染组3窝共21只，对照组3窝共20只。感染组每只乳鼠腹腔内接种1000TCID50CVB3m病毒液0.04ml，对照组每只乳鼠腹腔内接种1640维持液0.04ml。观察感染乳鼠的发病及心肌病理变化。结果 感染组乳鼠在感染CVB3m后48～72h发病，心肌病理变化以多形核细胞、单核细胞和巨噬细胞浸润为主要特征，心肌小血管壁内皮细胞受损，心肌细胞变性、肿胀；对照组乳鼠未见发病。结论 柯萨奇B3m病毒是急性心肌炎的重要病原体，其毒力及接种量与发病密切相关，本模型为研究急性病毒性心肌炎的发病机制及抗病毒药物的筛选奠定了基础。     

柯萨奇B3病毒诱导鼠心肌炎血浆β-内啡肽及其受体的变化

目的:观察病毒性心肌炎病理过程中内源性阿片系统激活的动态变化,探讨阿片肽在心肌炎病理损伤中的作用。方法:以柯萨奇B3病毒(Cox B3)诱导BALB/c鼠心肌炎为实验模型,观察感染后第3,7 ,10,15,25和35 d鼠体、肝和肺的质量,血浆β-内啡肽(β-EP)水平、心肌细胞膜 β-EP受体及心肌病损程度。采用放射免疫法测定血浆 β-EP、放射配体结合法测定 β-EP受体、常规病理检查心肌病损程度。结果:以1 000 TCID50Cox B3感染BALB/c鼠,约92.8％(65-70)鼠诱导出典型的心肌炎病理改变。感染后3-25 d受染鼠血浆 β-EP水平显著高于正常对照组;感染后10-25 d受染鼠肺/体质量和肝/体质量比均高于正常对照鼠,提示受染鼠出现较严重的充血性心力衰竭。同时,受染鼠心肌细胞膜 β-EP受体Bmax显著增高,Kd值变化不明显。结论:由于病毒和自身免疫对心肌细胞的损伤,使病毒性心肌炎患鼠出现充血性心力衰竭,引起循环中阿片肽水平升高及相应受体的变化。通过神经内分泌-免疫网络,这些变化必将对心脏的病理损伤产生明显的作用。     

红芪提取物(HE)对亲心肌柯萨奇B_3病毒(CVB_(3m))感染的作用初探

体外试验表明HE具有明显抑制CVB_(3m)繁殖和保护病毒感染细胞的作用。体内试验表明HE对CVB_(3m)感染小鼠具有减缓死亡、延长存活时间、保护其不得心肌炎或减轻心肌炎病变的作用。提示HE在控制病毒感染中起重要作用。     

吉林省1999年医药卫生科研进展

1.吉林省东丰县病毒性心肌炎暴发流行病原学研究白求恩医大第一临床学院儿科以流行期间诊断为心肌炎的住院患儿为对象,对其中资料完整的46例病人的粪便、咽分泌物及其双份血清,用微量细胞培养法(HHVM)、动物分离法及ELISA特异性IgM、IgG检测法进行研究。研究结果表明:HHVM法在26例患儿中分离到柯萨奇毒B_3(CVB_3),阳性率为56.5％,动物分离法及特异性IgM的阳性率分     

薄芝醇提取物(GE)抗亲心肌柯萨奇B_3病毒(CVB_(3m))感染的作用初探

体外试验表明GE具有明显抑制CVB_(3m)繁殖和保护病毒感染细胞的作用。体内试验表明GE对CVB_(3m)感染小鼠具有减缓死亡、延长存活时间、保护其不得心肌炎或减轻心肌炎病变的作用。提示GE在控制病毒感染中起重要作用。     

心肌康对慢性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞的保护作用

目的 观察心肌康对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞的保护作用.方法 对清洁级Balb/c小鼠采用柯萨奇病毒(CVB3)腹腔注射染毒,制成慢性病毒性心肌炎动物模型,按照随机数字表法分为三组:A组为病毒性心肌炎(VMC)组、B组为心肌康组、C组氯沙坦组.另设20只腹腔接种不含病毒的Eagle's液小鼠为正常对照组,观察心肌康对模型鼠的生存率的影响及对CVB3 RNA表达、Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的影响.结果 心肌康组、氯沙坦组小鼠的生存率明显高于病毒对照组,心肌康对CVB3感染鼠有保护作用,心肌康组对感染鼠的治疗作用要优于氯沙坦组.结论 心肌康可通过下调CVB3 RNA表达、抑制胶原增生而对心肌细胞产生保护作用.     

西洋参对小鼠病毒性心肌炎的疗效及机制

目的:探讨西洋参(Panax quinquefolium)对BALB/C小鼠Coxsackie B_3病毒性心肌炎的治疗作用。方法:雄性4周龄BALB/C小鼠腹腔接种CVB_3病毒液,建立VMC模型,接种30min后用西洋参煎剂灌胃每日1次,持续最长至4周。观察小鼠存活率、心肌病理改变、心肌内病毒滴度、心肌细胞凋亡坏死率、外周血T细胞亚群及抗心肌抗体的改变。结果:西洋参治疗组比病毒感染组存活率提高,心肌组织病理改变恢复加快,心肌细胞凋亡坏死率减低及外周血T细胞亚群比例改善,自身抗体减少(P<0.05)。结论:西洋参对CVB小鼠有较好的治疗作用。晚期效果好于黄芪。     

国内首次在导管心肌活检组织中检测到柯萨奇B组病毒核酸

病毒性心肌炎的病原学诊断一直是一个难题。因为从患者血液及粪便中分离到病毒心肌炎的病原只能是中度或低度相关,从心肌中分离到病毒的阳性率很低,仅见于少数病例。国外目前采用经导管取得的心内膜心肌活检标本进行核酸分子杂交或多聚酶链反应检测病毒RNA或DNA。首都儿科研究所与安贞医院合作,对1例病原不清的7岁女性心肌炎患者经导管心内膜心肌活检取材,制备8μm厚的冰冻切片。用〔~3H〕标记的柯萨奇B_3病毒(coxsackie virus B_3,CVB_3)cDNA全核苷酸序列核酸探针与活检心     

益心饮对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠心肌组织病理及超微结构的保护作用

目的:观察益心饮对病毒性心肌炎小鼠心肌组织病理及超微结构的影响。方法:用CVB3感染Balb/c小鼠制造病毒性心肌炎动物模型,分别用生理盐水、黄芪注射液及益心饮口服液灌胃治疗,分别观察7d和14d的心肌组织病理变化,并于电镜下观察小鼠心肌组织的超微结构。结果:益心饮口服液及黄芪注射液能明显减轻心肌变性坏死及炎性细胞浸润。结论:益心饮口服液对感染CVB3引起的病毒性心肌炎心肌组织病理及超微结构有明显的保护作用。     

小鼠柯萨奇B_3病毒感染与胸腺等免疫器官继发性萎缩的关系

本文用CVB_3感染BALB/G小鼠,结果表明:在感染过程中,免疫器官的受累以胸腺最为明显,脾脏次之。肠系膜淋巴结未见著变。胸腺、脾脏重量和镜下的改变,ANAE强阳性率的变化与心肌炎发展的不同阶段至为密切,与极期变化最重,胸腺和脾脏的重量分别缩小为对照组的1/5和1/2。此外,拒食和体重下降等营养因索,也起一定作用。     

HSV-1心肌炎心肌凋亡细胞的检测与分析

目的研究单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus type-1，HSV-1）心肌炎心肌细胞凋亡。方法将60只小鼠随机分成感染组（40只），病毒稀释液组（20只）。给感染组每只小鼠接种滴度TCID50为10^-4 HSV—lvero细胞液0．1mL，给病毒稀释液组每只小鼠接种RPMI 1640液0．1mL。在接种6d后处死小鼠，用光镜、TUNEL、电镜检查其心肌组织。结果感染组病毒性心肌炎（viral myocarditis，VMC）检出率65％，心肌细胞凋亡鼠检出率52．5％。凋亡心肌细胞核数占心肌细胞核总数的35．6％左右。病毒稀释液组未发现心肌炎性病变及凋亡细胞。结论心肌细胞凋亡与HSV-1VMC有一定的关系。     

心肌肌凝蛋白诱导BALB/c小鼠发生自身免疫性心肌炎

目的:建立BALB/c小鼠实验性自身免疫性心肌炎模型.方法:采用差速离心、分级饱和硫酸铵沉淀和DEAE-Sephadex A-50离子交换层析纯化等方法自猪心中提取并纯化心肌肌凝蛋白,经SDS-PAGE和Western印迹方法鉴定.以此蛋白免疫遗传易感的BALB/c小鼠,建立自身免疫性心肌炎模型.结果:97％(35/36)小鼠在免疫后第14天出现不同程度的心肌炎病理改变,主要表现为心肌间质单个核细胞浸润、肌纤维排列紊乱和肌浆溶解.免疫鼠血清肌钙蛋白I水平升高,并出现较高滴度的抗肌凝蛋白自身抗体.结论:猪心肌肌凝蛋白可以诱导BALB/c小鼠出现典型的自身免疫性心肌炎.     

慢性病毒性心肌炎动物模型的建立

目的建立小鼠慢性心肌炎实验动物模型,为心肌炎发病机理的研究以及治疗药物的筛选提供一个可靠的实验手段.方法采用BALB/c小鼠500只,用驯化的柯萨奇B3病毒进行感染,在实验的第10天、20天、40天、80天和120天对实验小鼠进行各项实验数据检测.主要包括死亡率、病理形态、超微结构、心电图和血清特异性抗体等.结果①实验组小鼠死亡率为27.8%.②小鼠心脏重与体重比值随着实验时间的延长有明显的增加.③小鼠平均心肌炎发病率为49%,第120天仍有心肌病理改变.④实验小鼠心肌超微结构有明显改变.⑤实验小鼠异常心电图发生率约在50%以上.第120天实验小鼠心电图改变仍占57.7%.⑥小鼠血清特异性抗体IgG在各时间段变化不明显,而IgM随时间的延长阳性率有明显下降趋势.结论通过实验显示,一个稳定可靠的慢性小鼠心肌炎模型基本建立成功,本实验支持慢性心肌炎可导致扩张性心肌病的发生.     

柯萨奇病毒B_3感染小鼠心肌的病毒核酸与炎症变化之间的关系

[目的 ]研究柯萨奇病毒感染的心肌炎模型小鼠的心肌中病毒核酸与炎症变化之间的关系 .[方法 ]应用聚合酶链反应 ,于感染后 1,3,5,7,10 ,14,2 1,30d ,对 58只实验组和 32只对照组的BALB/C小鼠心肌进行柯萨奇病毒B3 RNA检查 ,并观察心肌病理变化 .[结果 ]实验组小鼠心肌柯萨奇病毒B3 RNA在感染后 3～ 30d呈阳性 ,对照组心肌柯萨奇病毒B3 RNA均阴性 .感染后 3 30d心肌聚合酶链反应与病理学两种检查结果相一致 .[结论 ]心肌中柯萨奇病毒B3 RNA的存在与心肌炎症变化之间有密切的关系 .     

灯盏花素对病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的作用

目的:研究灯盏花素从细胞凋亡方面对病毒性心肌炎的治疗作用。方法:建立病毒性心肌炎的模型。40只Balb/c雄性小鼠随机分为正常对照组(n=10)、病毒感染组(n=15)和灯盏花素组(n=15),在感染后第9天处死小鼠,取其心脏进行检测。用HE染色法观察其心肌病理变化,免疫组化法观察Caspase-3情况,用TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况。结果:①治疗组心肌病理变化改变减轻(P<0.01);②治疗组Caspase-3的表达较感染组低(P<0.05);③治疗组心肌细胞凋亡少于感染组(P<0.01)。结论:细胞凋亡在病毒性心肌炎中发挥重要作用,灯盏花素对病毒性心肌炎有治疗作用。     

大蒜多糖对病毒性心肌炎小鼠心肌酶的影响

目的 探讨大蒜多糖对实验性病毒性心肌炎小鼠心肌酶的影响。方法 采用BALB/C小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3)建立实验性小鼠病毒性心肌炎模型。小鼠随机分为正常对照组、模型组、大蒜多糖I组、大蒜多糖Ⅱ组、大蒜多糖Ⅲ组和黄芪组。注射病毒1小时后给药，连续7天，于第8天处死存活鼠取材。观察小鼠存活率及心肌病理变化，测定血清心肌酶及心肌组织中的病毒滴度。结果 大蒜多糖治疗组与模型组相比小鼠存活率明显增高，心肌组织病理损伤减轻，血清心肌酶含量和心肌组织中病毒滴度明显降低。结论 大蒜多糖对实验性小鼠病毒性心肌炎具有治疗作用。     

柯萨奇B3病毒性心肌炎模型小鼠的免疫学指标检测

目的：建立急性病毒性心肌炎小鼠模型并检测其免疫功能指标。方法：腹腔注射CVB3建立急性病毒性心肌炎小鼠模型，用MTT比色法检测NK、TNF、IFN的活性；进行小鼠心肌组织病毒分离、病理检查，检测小鼠体重、心脏及脾脏重量变化。结果：CVB3感染鼠的体重及心脏、脾脏的重量均明显减轻；血清中TNF活性及脾细胞诱生TNF量显著增高；脾脏NK活性增高，但脾细胞诱生IL－2量降低；IFN无明显变化。结论：急性病毒性心肌炎模型小鼠的NK活性、细胞因子等指标均发生明显变化。     

细胞凋亡在小鼠病毒性心肌炎中的作用

目的 :探讨柯萨奇病毒 B3(CVB3)所致小鼠病毒性心肌炎 (VM)心肌细胞损伤的变化 ,观察细胞凋亡在心肌损伤中的作用。方法 :采用 CVB3制备小鼠病毒性心肌炎动物模型 ,分别于腹腔接种 CVB3后第 5、7、10、14、2 1、2 8d,取心肌组织切片 HE染色了解心肌损伤 (坏死 )情况 ;电镜和流式细胞仪检测 ,观察心肌中的细胞凋亡。结果 :心肌坏死方面 :光镜观察见对照组小鼠心肌组织无异常改变 ,实验组病鼠可见心肌细胞坏死和单核、淋巴细胞浸润 ,后期可见纤维化 ;心肌细胞凋亡方面 :电镜观察对照组心肌中未检出凋亡细胞 ,而病鼠心肌凋亡细胞检出率较高 5 8.33% (7/12例 ) ,且细胞凋亡多存在于炎症病灶周围的心肌细胞及病灶处炎性浸润细胞 ;各期病鼠心肌组织中的细胞凋亡比率较对照组明显增加 ,流式细胞仪检测平均心肌细胞凋亡百分率为 2 6 .74± 15 .2 2 % ,感染后第 7～ 14 d心肌细胞凋亡百分率明显高于其余时间 (P<0 .0 0 1)。结论 :小鼠病毒性心肌炎中心肌损伤坏死与凋亡共存 ,其中异常的心肌细胞凋亡与病毒性心肌炎的发病过程有关     

柯萨奇病毒B_3致病模型的建立

目的 :建立柯萨奇病毒 (CV)B3 的实验动物模型 ,以期为抗病毒药物筛选提供工具。方法 :雄性BALB/C鼠腹腔注射CVB3 后 ,观察小鼠发病症状 ,并在不同时间处死小鼠 ,取小鼠心、脾、肝、肾等组织进行病毒分离、病毒核酸检测、心肌组织病理检查。结果 :感染后第 3d小鼠即出现症状 ,第 5d在小鼠的心脏、脾脏、肾脏均可分离出感染性病毒 ,其滴度分别为 :10 4 .7,10 3.3 ,10 3.2 TCID50 / 0 .1ml,同时小鼠心、脾、肾、等组织及血清中CVB RNA检测为阳性 ,心肌组织出现典型炎性改变。结论 :雄性BALB/C鼠感染CVB3 后可引起病毒性心肌炎发生     

检测血清肌钙蛋白诊断急性病毒性心肌炎

目的 比较血清心肌肌钙蛋白与血清CK－MB水平诊断心肌炎性损伤的敏感性和特异性。方法 建立急性病毒性心肌炎小鼠模型,测定小鼠血清心肌肌钙蛋白I（cTnI)、心肌肌钙蛋白T(cTnI)及肌酸激酶MB同工酶（CK－MB）水平;同时观察42例临床拟诊急性病毒性心肌炎患者血清肌钙蛋白及血清CK－MB水平。结果 28只病鼠中19例（67．85％）cTnI升高,17例（60．71％）cTnI升高,6例（21．42％）CK－MB升高;42例患者中26例（61．9％）cTnI升高,16例（38．1％）cTnI升高,2例（4．76％）CK－MB升高。结论 测定血清肌钙蛋白水平探查心肌炎性损伤远较血精CK－MB敏感。