肌酸激酶同工酶蛋白诊断急性心肌梗死和冠脉再通的临床价值

目的探讨肌酸激酶同工酶蛋白(CK-MB mass)早期诊断急性心肌梗死(AMI)及冠脉再通的价值。方法118例AMI患者分为常规治疗70例和溶栓治疗48例,不同治疗时间采血检测其CK-MB mass、肌酸激酶同功酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)活性,直至酶学指标降至正常。微粒子酶联免疫分析法测定CK-MB mass,免疫抑制法测定CK-MB活性,速率法测定CK活性。观察AMI冠脉再通和冠脉未通患者心肌标志物出现异常的最早时间、上升至峰值的时间、峰期持续时间、下降至正常的时间。结果AMI冠脉未通组或再通组CK-MB mass与CK-MB活性、CK活性比较出现异常值时间、上升至峰值时间、峰值期持续时间、下降至正常时间明显缩短(P<0.01)。CK-MB mass峰值距AMI发病时间若以<11 h为标准,CK-MB mass诊断冠脉再通的敏感性和特异性均为100%。结论CK-MB mass可早期诊断AMI及AMI冠脉再通。     

急性心肌梗死溶栓后早期再灌注的生化指标

急性心肌梗死(AMI)后,及早采用非介入方法评估相关冠脉溶栓后早期再通程度具有极为重要的预后意义与治疗价值。本文对AMI溶栓后相关生化指标进行测定,旨在了解其在判断AMI相关冠脉再通程度中的敏感性与特异性。研究对象为97例AMI患者,男82例,女15例,均龄59士12岁。均于发病6h内接受溶栓治疗,其中仅接受rt—PA56例,链激酶34例,rt—PA加链激酶6例,rt—PA加尿激酶1例。所有患者均无可能干扰各生化指标的严重肾病或骨骼肌病。于溶栓后90min均接受冠脉造影,以期了解梗塞冠脉再通程度。并于溶栓开始前及溶栓后90min分别采各自静脉血测定肌红蛋白、肌钙蛋白T、股酸激酶(CK)、CK—MB同功酶及CK—MM同形异构体水平。结合上述生化指标水平与冠脉造影结果,对比分析各相关生化指标在判断梗塞冠脉再通中的有效价值。     

急性心肌梗死患者血清肌钙蛋白I浓度的释放特点及其对静脉溶栓再通的判定价值

目的　观察急性心肌梗死 (AMI)接受静脉溶栓治疗患者血清肌钙蛋白Ⅰ (cTnⅠ )的浓度变化情况及其评价溶栓再通的价值。　方法　 6 6例AMI者均接受静脉溶栓治疗 ,应用ELISA法测定cTnⅠ值。　结果　溶栓再通组 5 2例 ,溶栓未通组 14例 ,两组的cTnⅠ释放大部分存在双峰 ,溶栓再通组第一峰时 (11 34小时± 3 30小时 )、第二峰时 (2 3 80小时± 12 4 3小时 )比未通组相对应的时间明显提前 (P <0 0 5 ) ,cTnⅠ第一峰时比CK MB峰时提前。以cTnⅠ第一峰值到达时间≤ 14小时判定溶栓再通的敏感性、特异性及准确性分别为 92 31%、6 4 2 9%及6 6 5 %。　结论　在大多数AMI者血清cTnⅠ释放呈双峰 ,其第一、二峰值到达时间在溶栓再通组前移 ,血清cTnⅠ≤ 14小时作为评价溶栓再通与否 ,有一定的判定价值     

急性心肌梗死患者血清肌钙蛋白Ⅰ浓度的释放特点及其对静脉溶栓再通的判定价值

目的观察急性心肌梗死(AMI)接受静脉溶栓治疗患者血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)的浓度变化情况及其评价溶栓再通的价值. 方法 66例AMI者均接受静脉溶栓治疗,应用ELISA法测定cTnⅠ值. 结果溶栓再通组52例,溶栓未通组14例,两组的cTnⅠ释放大部分存在双峰,溶栓再通组第一峰时(11.34小时±3.30小时)、第二峰时(23.80小时±12.43小时)比未通组相对应的时间明显提前(P＜0.05),cTnⅠ第一峰时比CK-MB峰时提前.以cTnⅠ第一峰值到达时间≤14小时判定溶栓再通的敏感性、特异性及准确性分别为92.31%、64.29%及66.5%. 结论在大多数AMI者血清cTnⅠ释放呈双峰,其第一、二峰值到达时间在溶栓再通组前移,血清cTnⅠ≤14小时作为评价溶栓再通与否,有一定的判定价值.     

急性心肌梗死静脉溶栓冠状动脉再通指标出现的时间顺序探讨

目的探讨急性心肌梗死(AMI)病人梗死相关冠状动脉静脉溶栓再通指标出现的时间顺序。方法将67例静脉溶栓治疗的AMI病人分为再通组和未通两组,再将再通组根据AMI发病时间分为<2h、2h~6h和>6h3个亚组,观察静脉溶栓后各组再灌注心律失常时间、胸痛缓解时间、心电图ST段下降达50%时间及肌酸激酶(CK)峰时间。结果再通组从再灌注心律失常时间、胸痛缓解时间到ST段下降达50%时间呈依此延长(P<0.05或P<0.01),且前述各指标随梗死时间的延长而相应延长,未通组的CK峰时间明显长于再通组及各亚组(P<0.05)。结论AMI静脉溶栓梗死相关冠状动脉再通指标按先后顺序为再灌注心律失常、胸痛缓解、ST段下降达50%及CK峰时间,且随梗死时间延长而相应延长。     

急性心肌梗塞的冠状动脉再通指标

对急性心肌梗塞进行溶栓疗法可望开通闭塞的冠状动脉。大剂量尿激酶(UK)的静脉溶栓法(IVCR)与冠状动脉内溶栓法(PTCR)对闭塞冠脉的再通率无差别。前者有快速投药的优点,然因未作冠脉造影,难以判断是否再通。本文总结56例急性心肌梗塞早期患者的紧急冠脉造影所见与临床症状、心电图 ST 段及血清肌酸激酶(CK)的变化,探讨判断冠状动脉再通的无创性指标。对象与方法:对象为56例急性穿壁性心肌梗塞早期入院患者(发病3.4±1.5小时),为作 PTCR 进行了紧急冠脉造影。前壁梗塞计31例,下壁梗塞计25例。平均年龄57±9岁。男48例、女8例.溶栓疗     

rt-PA静脉溶栓与直接冠脉支架术治疗急性心肌梗塞的对比观察

目的 比较rt-PA静脉溶栓与直接冠状动脉支架术治疗急性心肌梗塞(AMI)的近期临床效果.方法 238例AMI患者中,130例行rt-PA静脉溶栓治疗,108例行直接冠状动脉支架置入术,观察30天.结果 溶栓组中梗塞相关动脉(IRA)临床评价再通者102例,再通率78.5%:直接冠脉支架组术后IRA血流达Ⅱ-Ⅲ达100%.随访1个月,溶栓组和直接冠脉支架组病死率分别为4.3%和0.9%P>0.05);再缺血事件发生率分别为18.5%和0.9%(P<0.05);出血并发症发生率分别为14.6%和1.9%(P<0.05);溶栓组的左室射血分数(LVEF)为52.3±8.0,直接支架组为63.3±9.2(P<0.05).结论 直接冠状动脉支架术治疗AMI与rt-PA静脉溶栓治疗相比具有较高的IRA的再通率和良好的近期预后.     

急性心肌梗死早期尿激酶静脉溶栓的临床研究

目的观察急性心肌梗死(AMI)早期尿激酶静脉溶栓的临床疗效。方法 32例AMI患者早期给予尿激酶静脉溶栓治疗与55例AMI患者给予常规治疗,观察溶栓治疗患者的再通情况及其溶栓后24h内T波倒置对判定冠脉再通的意义。结果溶栓组与对照组溶栓开始时间距发病6h的冠脉再通率分别为76.0%和16.4%,差异有统计学意义(P0.05)。发病至开始溶栓时间越短,再通率越高。早期溶栓24h内T波倒置提示冠脉再通,早期T波倒置与冠脉再通率有明显相关性(P0.01)。结论急性心肌梗死早期使用尿激酶溶栓治疗可提高AMI的疗效,降低病死率。ST-T改变和T波倒置具有判断闭塞冠脉再通的临床价值。     

急性心肌梗塞肝素加阿司匹林抗凝治疗对梗塞相关冠状动脉内血栓自溶的影响

为探讨急性心肌梗塞肝素加阿司匹林抗凝治疗对梗塞相关冠状动脉内血栓自溶的影响,我们观察了45例急性心肌梗塞肝素加阿司匹林抗凝治疗,22例尿激酶溶栓治疗和21例心肌梗塞常规治疗冠状动脉造影情况,其结果为:急性心肌梗塞肝素加阿司匹林抗凝治疗对梗塞相关冠状动脉血栓自溶率为42.2%,溶栓治疗梗塞相关冠脉再通率为68.2%,常规治疗梗塞相关冠状动脉内血栓自溶再通率为14.3%.三组间有显著差异(X~2=12.78,P<0.01).结论是肝素加阿司匹林抗凝治疗急性心肌梗塞能促进冠状动脉内血栓自溶,提高梗塞相关冠脉再通率,但血栓自溶缓慢,冠脉再通延迟,对挽救梗塞区域心肌坏死作用不大.然而,对改善心肌电稳定性和心肌缺血区域的供血有积极的临床意义.     

肌红蛋白、肌钙蛋白T、肌酸激酶同工酶的检测对老年急性心肌梗死溶栓再通的判定价值

目的　探讨血清肌红蛋白 (Mb)、肌钙蛋白T(cTnT)和肌酸激酶同工酶 (CK MB)对老年急性心肌梗死溶栓疗效的早期判定价值。方法　应用酶联免疫分析法测定 32例老年急性心肌梗死患者溶栓治疗后的Mb、cTnT、CK MB浓度 ,分析急性心肌梗死患者溶栓再通组 ( 1 8例 )和溶栓未通组 ( 1 4例 )上述指标的变化。结果　急性心肌梗死溶栓再通组Mb、cTnT和CK MB达到峰值浓度的时间明显较未通组提前 ( P <0 .0 5) ,其中Mb较cTnT和CK MB峰值出现更早 ,分别为( 7.4± 2 .5)h、( 1 3.7± 4.1 )h和 ( 1 4.4± 2 .7)h (P <0 .0 1 ) ;Mb的诊断敏感性 ( 79% )与诊断效率( 87% )明显高于cTnT( 6 0 %、75% )和CK MB( 47%、6 7% ) (P <0 .0 1 )。结论　血清Mb、cTnT和CK MB水平及其变化可以较好地早期预测急性心肌梗死患者溶栓再通 ,其中Mb较cTnT及CK MB具有更好的的临床价值。     

日本血吸虫一种新腺苷酸激酶全长cDNA的克隆与功能分析

目的：对用表达序列标签（Expression Sequence Tag,EST）策略从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中筛选出的新基因进行功能预测。方法：用NCBI站点的BLASTx及BLASTn程序对所获得的新基因序列进行同源性搜索；用NCBI BLAST站点的blast two sequence程序对同源性高的基因进行核苷酸及氨基酸水平的同源性比较；利用Motif Scan in a Protein Sequence对cDNA序列所编码的蛋白质进行结构域搜索；利用CD－Search程序对目标蛋白进行保守区域搜索。结果：发现一个与曼氏血吸虫22kDa单核苷酸激酶mRNA高度同源的日本血吸虫新基因，基因与氨基酸水平的同一性均分别为86．0％和87．0％；蛋白结构域搜索及保守区域搜索结果显示，该cDNA序列所编码的蛋白质是一种腺苷酸激酶。结论：用EST策略筛选新基因是一个可行的方法，所筛到的日本血吸虫新基因编码一种腺苷酸激酶，全长编码序列与曼氏血吸虫腺苷酸激酶mRNA高度同源。     

日本血吸虫SjPGK基因克隆和序列分析

目的　克隆日本血吸虫磷酸甘油酸激酶 (Sj PGK)编码基因片段 ,分析其核苷酸序列。方法　根据曼氏血吸虫磷酸甘油酸激酶 (Sm PGK) c DNA序列设计并合成一对引物 ,以日本血吸虫成虫总 RNA为模板 ,采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)特异性扩增 Sj PGK基因片段 ,将其克隆入p MD18- T载体中 ,经双酶切分析和 PCR鉴定 ,将阳性克隆进行脱氧核糖核酸序列测定 ;运用BL AST程序 ,将测序结果及其推导的编码氨基酸序列与 NCBI数据库在核苷酸水平和氨基酸水平进行同源性比较。结果　 RT- PCR特异性扩增出一条长约 830 bp的条带 ;重组质粒的双酶切和以其脱氧核糖核酸为模板的 PCR均可见一条与 RT- PCR产物相同的条带 ;脱氧核糖核酸序列测定和分析结果表明 :Sj PGK基因片段长为 830 bp,与 Sm PGK的核苷酸同源性为 85 % ,分值为 6 72 ;氨基酸同源性为 94 % ,分值为 4 73。结论　成功地克隆了 Sj PGK编码基因片段 ,为寻找日本血吸虫新的抗感染疫苗候选分子奠定基础     

牛心肌肌球蛋白轻链激酶的提纯及其一些生物化学性质的研究

本文采用离子交换柱层析、硫酸铵盐析、亲和层析等方法,从牛心肌中提取、纯化了肌球蛋白轻链激酶(MLCK),酶的比活性为12nmolPi/mg Min~(-1).提纯倍数为499倍,对底物ATP的km值为220μmol/L,MLCK为Ca~(2+)、钙调蛋白依赖性酶,在EGTA存在时,激酶无活性。同时还发现.低Mg~(2+)浓度时.MLCK 活性升高.高Mg~(2+)(4.5mmol/L以上)时,MLCK活性反而下降。     

初发糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性变化的研究

目的：检测初发糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性变化,以推断ＰＫＣ活性变化在肾内血流动力学改变中所起的作用。方法：用链脲菌素制备糖尿病大鼠实验模型,在糖尿病发病２周后,分离肾小球,提取纯化胞浆及胞膜蛋白,利用γ－＾３２ＰＡＴＰ底物磷酸化的方法检测胞浆及胞膜ＰＫＣ活性。同时测量血、尿肌酐,计算内生肌酐清除率。结果：糖尿病大鼠表现出明显的肾小球高滤过及肾脏肥大现象,此时细胞内总的ＰＫＣ活性与对照     

恶性疟原虫FCC1/HN株丙酮酸激酶基因的扩增、克隆和序列分析

目的　扩增恶性疟原虫海南株FCC1/HN的丙酮酸激酶 (PK)的编码基因 ,构建其原核和真核表达重组质粒 ,测定其序列 ,并了解它及它推导的蛋白质与恶性疟原虫 3D7和人PK基因之间的差异。　方法　根据 3D7的PK基因设计合成一对引物 ,用PCR从FCC1/HN株基因组中扩增PK基因 ;将它分别定向克隆到原核表达质粒PGEX 4T 1和真核表达质粒 pcDNA3 ,分别转化大肠杆菌JM 10 9感受态细菌 ;经酶切、PCR扩增鉴定筛选到阳性重组克隆 ,用双脱氧链末端终止法测定其序列 ,用生物信息学软件分析PK序列及进行同源性比较。　结果　PCR扩增得到特异的FCC1/HN株PK基因 ,大小为 2 2 3 5bp ,编码 744个氨基酸。其氨基酸序列与 3D7的同源性高达 99.9% ,与约氏疟原虫的同源性为 70 .2 % ,但与弓形虫和人的PK的同源性分别只有 2 0 .9%和 2 1.6%～ 2 5 .4%。　结论　从FCC1/HN株基因组中获取了PK基因 ,成功构建了其原核和真核表达质粒 ,并测定了其序列 ;它与 3D7的PK高度同源 ,但与人的PK基因同源性很低 ,可能是一个药物靶标。     

GLP—1受体基因表达cAMP—PKA途径调控的研究

利用蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）的激活剂毛喉素（ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ）对大白鼠胰岛素瘤细胞（ＲＩＮｍ５Ｆ）上胰升血糖素样肽＿１（ＧＬＰ＿１）受体的基因表达进行了研究。在毛喉素的作用下，ＧＬＰ＿１受体ｍＲＮＡ的量明显减少，出现了ＧＬＰ＿１受体基因表达的负调控，但毛喉素可以使ＧＬＰ＿１受体的ｍＲＮＡ的稳定性增加。结果表明，ＧＬＰ＿１受体的转录是通过ｃＡＭＰ＿蛋白激酶Ａ途径进行调控的，影响此途径的物质对ＧＬＰ＿１的生理功能以及在临床应用方面起着重要作用     

可溶性白介素2受体与急性心肌梗塞相关性的研究

本研究采取双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法测定３２例急性心肌梗塞患者血清可溶性白介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）和肌酸激酶（ＣＫ）结果显示：急性心肌梗塞的ｓＩＬ－２Ｒ和ＣＫ明显高于恢复期的患者及正常对照组（ｎ＝４０）（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．００１），而恢复期与正常对照组无显著差异（Ｐ＞０．０５）；ｓＩＬ－２Ｒ水平与急性心肌梗塞的面积呈正相关（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．０５）；无并发症的急性心肌梗塞与伴有并发症的急性心肌梗塞的ｓＩＬ－２Ｒ、ＣＫ有显著差异（Ｐ＜０．０５．Ｐ＜０．０１）．提示急性心肌梗塞患者存在免疫调节功能改变，显示ｓＩＬ－２Ｒ做为急性心肌梗塞患者病情监测、判断预后的指标。     

DOPAMINE FAILS TO INHIBIT Na,H-EXCHANGER IN PROXIMAL TUBULES OF OBESE ZUCKER RATS

Dopamine via the activation of D₁-like receptors inhibits Na,K-ATPase and Na,H-exchanger and subsequently increases sodium excretion. We have previously reported that dopamine failed to inhibit Na,K-ATPase in the proximal tubules (PTs) of obese Zucker rats. The present study was designed to determine the effect of dopamine on Na,H-exchanger in PTs of lean and obese Zucker rats, and examine D₁-like receptor-coupled signal transduction pathway mediating the inhibition of Na,H-exchanger. We found that dopamine inhibited Na,H-exchanger in the PTs of lean rats but this response was absent in obese rats. In brush border membranes, [³H]SCH 23390 binding revealed a, ～45% reduction in D₁-like receptor binding sites in obese compared to lean rats. Dopamine stimulated cAMP accumulation in PTs of lean but not in obese rats. Forskolin-mediated stimulation of cAMP was similar in lean and obese rats. Dopamine as well as forskolin and dibutyryl cAMP-mediated stimulation of protein kinase A (PKA) was reduced in PTs of obese compared to lean rats. The data suggest that reduction in D₁-like receptor binding sites, defective coupling with signaling pathway and inability of PKA activation may be responsible for the failure of dopamine to inhibit Na,H-exchanger in PTs of obese rats. This phenomenon may contribute to an increase in sodium reabsorption and development of hypertension in obese Zucker rats.     

SERUM THYMIDINE KINASE AS A MARKER OF DISEASE ACTIVITY IN PATIENTS WITH MULTIPLE MYELOMA

Serum thymidine kinase (STK) levels have recently been used to detect tumour regression and progression in a number of hematological malignancies. In this study, patients with myeloma were monitored longitudinally for STK and several other potentially useful tumour markers to determine which laboratory parameters are the most useful for differentiating between stable and progressive disease. STK was determined by radioenzyme assay, lymphocyte surface markers were analysed by flowcytometry, plasma cell labelling index (LI) by immunofluorescence with anti BU-1, serum B2-microglobulin (SB2M) by radioimmunoassay and M proteins by radial immunodiffusion. Detailed multiparameter longitudinal investigations of 5 patients and ongoing studies of 70 other patients suggest that STK is a more reliable marker of progressive disease than either SB2M, LI, M-protein or CD10 positive lymphocytes. A rise in STK during the emergence of progressive disease at least paralleled and usually preceded any change in the other parameters which often did not change at all. All samples from patients with progressive disease (n = 29) had a STK above the normal range (0–5U/I) whereas 76% of patients in clear stable disease had a STK within the normal range. All samples (n = 34) from patients with light chain isotype suppression (LCIS) had STK values of less than 12 U/L and 82% of samples (n = 33) from patients without LCIS had a STK above the normal range (0–5U/L). The correlation between STK and LI was r = 0.65; p < 0.001 (n = 21). The radioenzyme assay for STK is simple, reproducible and a valuable tool for monitoring patients with myeloma and when used in conjunction with other clinical and laboratory investigations, aids in the separation of patients with stable myeloma from patients whose disease is progressive.     

Chemical-genetic analysis of cyclin dependent kinase 2 function reveals an important role in cellular transformation by multiple oncogenic pathways

A family of conserved serine/threonine kinases known as cyclin-dependent kinases (CDKs) drives orderly cell cycle progression in mammalian cells. Prior studies have suggested that CDK2 regulates S-phase entry and progression, and frequently shows increased activity in a wide spectrum of human tumors. Genetic KO/knockdown approaches, however, have suggested that lack of CDK2 protein does not prevent cellular proliferation, both during somatic development in mice as well as in human cancer cell lines. Here, we use an alternative, chemical-genetic approach to achieve specific inhibition of CDK2 kinase activity in cells. We directly compare small-molecule inhibition of CDK2 kinase activity with siRNA knockdown and show that small-molecule inhibition results in marked defects in proliferation of nontransformed cells, whereas siRNA knockdown does not, highlighting the differences between these two approaches. In addition, CDK2 inhibition drastically diminishes anchorage-independent growth of human cancer cells and cells transformed with various oncogenes. Our results establish that CDK2 activity is necessary for normal mammalian cell cycle progression and suggest that it might be a useful therapeutic target for treating cancer.