慢性阻塞性肺疾病大鼠肺内白细胞介素9和γ干扰素的表达

目的观察大鼠烟雾暴露慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型白细胞介素9(IL-9)和γ干扰素(IFN-γ)的表达,探讨IL-9和IFN-γ与COPD气道炎症的关系。方法单纯熏香烟法建立大鼠COPD模型。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)行白细胞总数和分类计数检测;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清、BALF和肺组织中IL-9及IFN-γ的浓度;肺组织切片行HE染色观察形态学改变;采用图像分析系统定量测定肺平均内衬间隔(Lm)、平均肺泡数(MAN)和支气管壁厚/外径比值。结果(1)COPD组Lm及支气管壁厚/外径高于正常对照组,MAN低于正常对照组,差异有统计学意义(P均<0.01)。(2)COPD组血清、BALF和肺组织中IL-9浓度较正常对照组显著增高[血清:(4.02±2.12)pg/mL比(1.12±0.73)pg/mL;BALF:(5.73±2.60)pg/mL比(0.97±0.45)pg/mL;肺组织:(24.92±6.65)pg/mL比(11.42±4.23)pg/mL;P均<0.01]。COPD组血清、肺组织和BALF中IFN-γ的浓度与正常对照组比较均降低,前两者差异有统计学意义[血清:(21.54±7.65)pg/mL比(69.59±13.68)pg/mL;肺组织:(21.88±6.11)pg/mL比(69.84±15.35)pg/mL;P均<0.05]。(3)与正常对照组比较,COPD组BALF中白细胞总数[(5.29±1.61)×108/L比(2.10±1.19)×108/L,P<0.01]、巨噬细胞绝对计数[(4.42±1.38)×108/L比(1.84±0.93)×108/L,P<0.01]、中性粒细胞绝对计数[(1.32±0.36)×108/L比(0.093±0.043)×108/L,P均<0.01]均显著增高。(4)COPD组BALF中白细胞总数、巨噬细胞绝对计数、中性粒细胞绝对计数与BALF中IL-9浓度均呈正相关(r分别为0.9290、.835和0.924,P均<0.05),与肺组织中IL-9浓度呈正相关(r分别为0.8850、.983和0.775,P均<0.05),与血清中IL-9浓度无明显相关性。血清及BALF中IL-9浓度与IFN-γ无明显相关性,肺组织中IL-9与肺组织中IFN-γ则呈负相关(r=-0.818,P<0.05)。结论吸烟可使IL-9升高,IFN-γ水平降低,可能是吸烟导致COPD的原因之一。气道局部的IL-9表达与COPD气道炎症密切相关,可作为COPD气道炎症的检测指标之一。     

联合检测血清SP-D、hs-CRP及血浆Fbg水平在慢性阻塞性肺疾病患者病情监测中的价值

[摘要]　目的　探讨联合检测血清肺泡表面活性蛋白-D（SP-D）、超敏-C反应蛋白（hs-CRP）及血浆纤维蛋白原（Fbg）水平在慢性阻塞性肺疾病患者病情监测中的价值。　方法　选取慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）患者30例（AECOPD组）,COPD稳定期患者10例（COPD稳定期组）,健康对照30例（健康对照组）。分别检测3组研究对象的血清SP-D、hs-CRP水平,比较其差异,同时检测AECOPD组及COPD稳定期组患者血浆Fbg水平,并比较其差异。分析血清SP-D、hs-CRP及血浆Fbg水平与FEV1%pred、FEV1/FVC的相关性。　结果　（1）血清SP-D水平AECOPD组（21.90±7.89）ng/mL高于健康对照组（8.07±4.03）ng/mL与COPD稳定期组（12.49±3.52）ng/mL（P<0.05）,COPD稳定期组高于健康对照组（P<0.05）。（2）血清hs-CRP水平AECOPD组（14.23±7.00）mg/L高于健康对照组（1.06±1.09）mg/L与COPD稳定期组（3.19±3.04）mg/L（P<0.05）,COPD稳定期组与健康对照组比较,差异无显著性意义（P>0.05）。（3）血浆Fbg水平AECOPD组（4.27±1.15）g/L高于COPD稳定期组（3.38±1.26）g/L（P<0.05）。(4) COPD患者血清SP-D、hs-CRP及血浆Fbg水平与FEV1%pred、FEV1/FVC无关。　结论　血清SP-D、hs-CRP及血浆Fbg水平可作为COPD诊断及病情监测的良好指标;联合检测上述指标可增加敏感性及特异性。     

稳定期COPD患者口服强的松对血清SP-D浓度的影响

目的探讨口服强的松对慢性阻塞性肺病（COPD）稳定期患者血清肺表面活性物质相关蛋白D（SP-D）含量的影响。方法选择Ⅲ级及Ⅳ级稳定期COPD患者64例,随机分为口服强的松15mg/d及20mg/d两组治疗4周,每组32例。收集治疗前后血清标本各一份,采用ELISA法检测患者血清SP-D浓度。结果治疗前后平均血清SP-D浓度口服15mg/d强的松治疗组患者分别为（134.9±56.3）ng/ml和（91.5±47.4）ng/ml,口服20mg/d强的松组患者分别为（131.2±60.7）ng/ml和（93.4±50.9）ng/ml,每组治疗前后血清平均SP-D水平差异都具有统计学意义（P〈0.05）。COPD患者平均血清SP-D浓度组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论稳定期COPD患者口服糖皮质激素治疗血清SP-D浓度比治疗前降低,血清SP-D浓度检测可以成为一个潜在COPD治疗的生物学检测指标。     

噻托溴铵对慢性阻塞性肺疾病大鼠血清、肺泡灌洗液及肺组织中IL-8、TNF-α、PLA2的影响

目的研究噻托溴铵对慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）大鼠血清、肺泡灌洗液及肺组织中炎症因子水平及肺组织病理结构的影响,以证实噻托溴铵治疗慢阻肺的抗炎作用。方法采用烟熏加气管内注入内毒素法建立大鼠慢阻肺模型。将雄性SD大鼠随机分为对照组、慢阻肺组和噻托溴铵干预组,每组10只。HE染色观察大鼠肺、支气管的病理改变,测定肺平均内衬间隔（MLI）及平均肺泡数（MAN）。行支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数及分类。酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清、BALF及肺组织中IL-8、TNF-α、磷脂酶A2（PLA2）的含量。结果慢阻肺组大鼠肺、支气管HE染色符合慢阻肺的病理改变;慢阻肺组大鼠出现明显肺气肿,噻托溴铵组也出现肺气肿,但程度较轻。慢阻肺组大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞及淋巴细胞比例,血清、BALF及肺组织中炎症因子水平较对照组均明显升高（P〈0.01）;噻托溴铵干预组与慢阻肺组相比,BALF中细胞总数、中性粒细胞及淋巴细胞比例,血清、BALF及肺组织中炎症因子水平均显著降低（P〈0.01）,但仍明显高于对照组（P〈0.01）。结论噻托溴铵可以通过减少炎症细胞渗出降低慢阻肺大鼠血清、BALF及肺组织中IL-8、TNF-α、PLA2水平,减轻气道及肺组织炎症,发挥抗炎作用。     

慢性阻塞性肺疾病患者血清白细胞介素32水平的变化及意义

目的测定慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重期和稳定期患者血清白细胞介素32（IL-32）水平,以探讨IL-32在COPD发病机制中的作用。方法 2010年10月至2011年5月收集120例COPD患者,急性加重期60例,稳定期60例。另选同期30例非吸烟健康受试者作为对照组。用ELISA法检测血清IL-32和IL-8、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量,同时测定肺功能（FEV1%pred、FEV1/FVC）,并分析IL-32水平与IL-8、TNF-α和气流阻塞之间的相关性。应用SPSS 13.0软件进行统计学分析,多组数据间比较采用单因素方差分析,采用Pearson相关分析进行相关性检验。结果 COPD急性加重期组血清IL-32的含量[（174.56±88.15）ng/L]显著高于对照组[（59.41±20.98）ng/L]和COPD稳定期组[（89.40±33.84）ng/L]（P均〈0.01）,COPD稳定期组血清IL-32含量显著高于健康对照组（P值〈0.01）;COPD急性加重期组、稳定期组血清IL-32水平与IL-8、TNF-α呈正相关（P均〈0.01）,与FEV1%pred、FEV1/FVC和PaO2呈负相关（P均〈0.01）;不同严重程度COPD患者血清IL-8、TNF-α和IL-32含量比较无统计学意义（P均〉0.05）。结论 COPD患者血清IL-32水平升高,可能与IL-8、TNF-α等炎性因子有关。IL-32可能作为一种促炎因子参与COPD的炎症反应。     

干扰素诱导蛋白10在慢性阻塞性肺疾病中的变化及意义

目的：探讨干扰素诱导蛋白10（CXCL10）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）肺部炎症及免疫调节中的作用。方法：将周围型肺癌Ⅰ～Ⅲa期需手术治疗的患者分为肺功能正常非吸烟组（NS组,10例）、肺功能正常吸烟组（S组,13例）、吸烟COPD稳定期组（COPD组,10例）。术前记录患者吸烟史、临床资料及术前1周肺功能检查结果,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者肺组织匀浆CXCL10含量,并分析吸烟指数与CXCL10含量的相关性及CXCL10对COPD患者气流受限的影响。结果：①COPD组肺组织匀浆CXCL10含量（147.92±42.62）ng/g,显著高于NS组（62.28±16.32）ng/g和S组（93.02±23.01）ng/g（均P〈0.01）;且S组与NS组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;②在COPD组和S组,肺组织匀浆CXCL10含量与吸烟指数呈正相关（r=0.752和0.566,均P〈0.05）;在COPD组,与FEV1占预计值百分比呈负相关（r=-0.680,P〈0.05）。结论：吸烟可能增强肺部CXCL10的表达;CXCL10参与了COPD肺部炎症过程,可能在免疫调节方面起重要作用。     

核因子-κB在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺内的表达及泼尼松对其的影响

目的 探讨核因子κB(NF-κB)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病机制中的作用及糖皮质激素在COPD中的治疗价值.方法 Wistar大鼠24只随机分为3组:对照组、COPD组和激素组,每组8只大鼠.采用单纯熏香烟法建立COPD模型,激素组于熏香烟前予泼尼松隔日灌胃.支气管肺泡灌洗(BAL),测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、中性粒细胞绝对计数和百分比,并对肺组织切片行HE染色观察形态学改变,采用图像分析系统定量测定肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)和肺泡腔面积与总面积比(PAA).对大鼠肺组织切片采用免疫组织化学法观察3组大鼠肺组织NF-κB表达的变化.结果 COPD组MLI和PAA均较对照组增高,差异有统计学意义(P＜0.01),泼尼松干预后下降(与COPD组比较,P＜0.01或0.05),而COPD组MAN低于对照组,治疗后增高,差异有统计学意义(P＜0.01或0.05).与对照组比较,COPD组BALF中白细胞总数[(1.64±0.12)×108/L比(5.76±0.29)×108/L]、中性粒细胞绝对计数[(0.099±0.065)×108/L比(1.26±0.25)×108/L]均增高,差异有统计学意义(P＜0.01).泼尼松干预后上述指标均下降(P＜0.01).COPD组细支气管上皮细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比为(29.02±1.25)%,与正常组[(12.17±1.13)%]比较,差异有统计学意义(P＜0.01);激素组为(19.23±1.18)%,与COPD组比较,差异亦有统计学意义(P＜0.01).结论 NF-κB与COPD的气道炎症密切相关,泼尼松治疗可以通过调节NF-κB的表达,抑制粒细胞趋化和脱颗粒,增加中性粒细胞弹性蛋白酶的抑制活性,从而减轻气道炎症及其对气道的损害,延缓COPD的进展.     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血浆SP-D水平测定及临床意义

目的检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期及稳定期患者血浆肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)含量并探讨其临床意义。方法选择COPD急性加重期(AECOPD)患者住院治疗时及治疗后获得缓解的患者69例,采用双抗体夹心酶标免疫分析法检测血浆SP-D浓度,同时进行血常规检测。检测42例健康体检者作为对照。结果 AECOPD及稳定期COPD患者血浆SP-D平均浓度分别为(183±86)、(126±72)ng/mL,对照组为(96±47)ng/mL,AECOPD与稳定期、对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),AECOPD患者血浆SP-D阳性率为85.50%,与WBC、中性粒细胞的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论血浆SP-D可作为AECOPD诊断的潜在生物学指标。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期大鼠模型的建立

目的：建立大鼠COPD急性加重期模型的方法,确定滴注感染细菌的浓度。方法：雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组（每组再分为高、中、低细菌浓度组,空白组）。进行一般体征的观察,基础体温的测定,感染前后血清中白细胞总数测定,肺组织病理形态的观察。结果：从对照组及COPD模型组的基础体温测定看,高浓度细菌组的基础体温高于中、低浓度组及空白组。对照组：高浓度细菌组的白细胞计数均高于对照组中、低浓度组及空白组（t=-4.012,P〈0.05;t=-3.939,P〈0.05;t=-6.52,P〈0.01）;模型组：低、中、高浓度组WBC计数高于空白组（t=-4.517,P〈0.05;t=-10.32,P〈0.01;t=-7.094,P〈0.01）;高、中浓度组WBC计数高于低浓度组（t=-4.32,P〈0.05;t=-3.86,P〈0.05）。并且无论是对照组还是模型组,高浓度细菌组感染后白细胞计数明显高于感染前白细胞计数（t=-14.319,t=-7.06,P〈0.01）。从病理学角度看,对照组的高浓度细菌组的肺组织病理学改变符合人类肺炎的病理表现,COPD模型组的高浓度细菌组的肺组织病理学改变符合人类COPD合并肺炎的病理表现。结论：用熏吸香烟加气管内注射内毒素及鼻腔反复高浓度滴入金黄色葡萄菌（细菌浓度为2.4×109cfu/mL）的方法可建立大鼠AECOPD模型,可用于实验研究。     

噻托溴铵对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者血清超敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α水平及肺功能的影响

目的探讨噻托溴铵对慢性阻塞性肺疾病（COPD）稳定期患者血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平及肺功能的影响。方法选取2012年8月～2013年9月宁波市北仑区人民医院呼吸科治疗的COPD稳定期患者70例,随机分为观察组（n=35）和对照组（n=35）。对照组患者予以茶碱缓释片口服,0.1 g/次,2次/d,连用16周。观察组患者予以噻托溴铵干粉剂1粒/次,1次/d,睡前吸入,连用16周。观察两组治疗前和治疗16周后血清hs-CRP、TNF-α及肺功能的变化。结果治疗16周后,观察组与对照组患者血清hs-CRP、TNF-α水平[（1.07±0.23）mg/L,（1.45±0.27）ng/mL;（1.42±0.31）mg/L,（2.16±0.45）ng/mL]均较前[（2.05±0.46）mg/L,（2.92±0.52）ng/mL;（1.97±0.45）mg/L,（2.87±0.57）ng/mL]明显下降（t=3.02、3.17、2.39、2.31,P〈0.01或P〈0.05）,且观察组下降幅度明显大于对照组（t=2.27、2.45,P〈0.05）;同时观察组与对照组患者治疗后用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气量（FEV1）和FEV1/FVC[（1.77±0.34）L,（1.21±0.25）L,（0.70±0.19）;（1.58±0.32）L,（0.99±0.23）L,（0.63±0.15）]均较前[（1.41±0.24）L,（0.80±0.15）L,（0.57±0.12）;（1.42±0.26）L,（0.79±0.18）L,（0.56±0.13）]明显提高（t=2.45、2.89、2.44、2.16、2.41、2.18,P〈0.05或P〈0.01）,且观察组提高幅度明显大于对照组（t=2.18、2.37、2.15,P〈0.05）。结论噻托溴铵吸入治疗COPD稳定期具有较好的效果,能明显改善患者的肺功能,其作用机制与其能降低血清炎症因子hs-CRP、TNF-α水平,抑制慢性炎性反应过程密切相关。     

辛伐他汀对COPD大鼠肺组织凋亡相关因子的影响

目的探讨辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织凋亡相关因子的影响及作用机制。方法随机将30只大鼠分为正常组、对照组、治疗组。对照组采用熏香烟加气管内滴入LPS法建立大鼠COPD模型,香烟暴露2周后治疗组同时给予辛伐他汀(2.5 mg/kg)治疗6周,8周后处死所有大鼠,HE染色观察大鼠肺组织病理改变,显微图像分析系统计算肺平均内衬间隔和平均肺泡数,免疫组织化学技术检测大鼠肺组织半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的水平。结果对照组可见肺气肿和气道周围炎性改变,治疗组症状较对照组减轻;与正常组相比,对照组和治疗组肺平均内衬间隔(MLI)、iNOS、Caspase-3增多(P<0.05),平均肺泡数(MAN)、eNOS减少(P<0.05);与对照组比较,治疗组MLI、iNOS、Caspase-3减少(P<0.05),MAN、eNOS增多(P<0.05)。各组大鼠肺组织中Caspase-3与iNOS呈正相关(P<0.05),与eNOS呈负相关(P<0.05)。结论辛伐他汀通过增加肺组织eNOS表达,降低iNOS及Caspase-3表达,减少COPD肺组织细胞凋亡,在COPD中起到保护性作用。     

泼尼松对IL-8在COPD大鼠肺组织表达的影响

目的 研究IL-8在慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠肺组织中的表达及泼尼松对其表达的影响.方法 Wistar大鼠24只随机分为:正常对照组(A组)、单纯熏烟组(B组)和熏烟 泼尼松组(C组),每组各8只.单纯熏香烟法建立COPD模型,C组于熏香烟前予泼尼松5 mg/kg隔日灌胃.模型建立后,行支气管肺泡灌洗,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞数,酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF上清液和血清中的IL-8和TNF-α浓度,并对肺组织切片行苏木精-伊红(HE)染色观察形态学改变,采用图像分析系统定量测定肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)和肺泡腔面积与总面积比(PAA).结果 B组MLI、PAA比A组增高,而MAN低于A组,C组与B组相比MLI、PAA降低,MAN升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).与A组比较,B组BALF中IL-8、TNF-α、白细胞总数、中性粒细胞绝对计数和中性粒细胞百分比均增高(P＜0.05),C组较B组上述指标均下降(P＜0.05).B组血清中IL-8和TNF-α浓度亦比A组增高(P＜0.05),C组较B组下降,但IL-8的浓度差异无统计学意义.B组BALF中IL-8与中性粒细胞绝对计数、TNF-α呈正相关(r=0.735、0.987,P＜0.05);与血清中IL-8和TNF-α、血气分析的所有指标及形态学定量分析的任一指标均无相关性.血清IL-8与上述任一指标亦均无相关性.结论 BALF中的IL-8与COPD的气道炎症密切相关,IL-8与TNF-α相互作用,通过趋化激活中性粒细胞等炎性细胞共同参与COPD发病.泼尼松可能通过抑制IL-8的表达,从而减轻炎症介质和炎性细胞对气道的损害,延缓COPD的进展.     

酪氨酸激酶受体RON在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺内表达的研究

目的:探讨酪氨酸激酶受体RON在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠气道炎症中的作用。方法:单纯熏香烟法建立COPD大鼠模型;支气管肺泡灌洗计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数与肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)数,培养正常和COPD大鼠AM,采用逆转录-聚合酶链式反应法检测大鼠肺组织中酪氨酸激酶受体RON mRNA的表达情况,免疫组化法观察大鼠气道和离体培养的AM中RON蛋白的表达水平,图像分析系统测定肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)和肺泡腔面积与总面积比(PAA)。结果:COPD组MLI、PAA较正常对照组明显增高[MLI:(111.451±49.334)×10-6m vs(44.803±10.624)×10-6m;PAA:(79.653±7.594)%vs(48.352±13.063)%],而MAN则明显低于正常对照组[(81.621±20.394)×106/m2vs(170.098±42.398)×106/m2],差异均有统计学意义(P<0.01)。COPD组BALF中细胞总数和AM计数均明显高于正常对照组[细胞总数:(6.029±0.420)×108/L vs(1.463±0.0692)×108/L;AM数:(5.752±0.571)×108/L vs(1.387±0.105)×108/L,P<0.01)]。COPD组大鼠肺组织RON mRNA表达较正常对照组明显上调[(0.892±0.088)vs(0.353±0.080),P<0.01],COPD组大鼠气道上皮及AM中RON蛋白水平也较正常对照组显著增加[气道RON蛋白:(0.171±0.027)vs(0.073±0.009);AM RON蛋白:(0.310±0.101)vs(0.110±0.006),P<0.01]。结论:RON与COPD气道炎症调节密切相关。     

单核细胞趋化蛋白-1与COPD大鼠气道炎症的研究

目的　探讨单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP- 1)在慢性阻塞性肺疾病 (COPD)发病机制中的作用。方法　采用单纯熏香烟法建立 COPD模型 ,支气管肺泡灌洗计数支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中细胞总数与肺泡巨噬细胞(AM)计数 ,以酶联免疫吸附法 (EL ISA )测定 BAL F和血清中的 MCP- 1及肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)水平。采用图像分析系统测定肺平均内衬间隔 (ML I)、平均肺泡数 (MAN )和肺泡腔面积与总面积比 (PAA )。结果　 COPD组ML I、PAA比正常对照组增高 ,而 MAN低于对照组 ,差异均有统计学意义 (P<0 .0 1)。 COPD模型组 BAL F中MCP- 1、TNF-α水平、细胞总数和 AM计数均高于正常对照组 (P<0 .0 1)。模型组血清中 MCP- 1〔(32 .75± 10 .91)pg/ ml〕与对照组〔(2 4 .13± 6 .92 ) pg/ ml〕相比无统计学差异 (P>0 .0 5 )。模型组 BAL F中 MCP- 1水平与 AM数目和 TNF-α水平 (r=0 .86 1,P<0 .0 1;r=0 .86 8,P<0 .0 1) ,以及 TNF-α水平与 AM数目 (r=0 .84 ,P<0 .0 1)均呈密切正相关 ,但血清中 MCP- 1水平、TNF-α水平与 BAL F中的 AM数目均无相关性 (r=0 .4 88,P>0 .0 5 ;r=0 .132 ,P>0 .0 5 )。结论　 MCP- 1与 COPD的气道炎症密切相关     

急性肺损伤小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能降低

目的 探讨急性肺损伤（ALI）小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的变化及其影响因素。方法 昆明种小鼠随机分为正常对照组、ALI模型组,脂多糖经气道滴入激发构建ALI模型小鼠;通过支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞（AM）,流式细胞术及荧光显微镜观察ALI小鼠AM吞噬功能的变化;免疫印迹与ELISA检测ALI小鼠肺组织白介素-33（IL-33）的表达和分泌情况;ELISA检测不同浓度脂多糖刺激肺泡上皮细胞株MLE-12细胞IL-33分泌的情况;采用不同浓度的脂多糖和IL-33作用正常组AM,观察这些刺激因素对AM吞噬荧光微球的影响。结果 与正常小鼠AM（75.1%±3.0）%相比,ALI小鼠AM吞噬荧光微球百分率（57.0±4.3）%明显降低,但ALI小鼠肺组织IL-33的表达和支气管肺泡灌洗液中IL-33的分泌均明显升高（P<0.05）;脂多糖（100~1000 ng/mL）促进肺泡上皮细胞IL-33分泌增加（P<0.01）;脂多糖（10~500 ng/mL）和IL-33（100 ng/mL）均明显抑制了AM的吞噬功能（P<0.05）。结论 ALI小鼠AM吞噬功能降低,这可能是由于脂多糖直接刺激AM引起,或者脂多糖激发肺泡上皮细胞产生的预警素IL-33也可抑制AM吞噬功能。     

维生素D缺乏与稳定期慢性阻塞性肺疾病患者呼吸道细菌定植的关系研究

目的探讨维生素D缺乏与稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者呼吸道细菌定植的关系。方法选择稳定期COPD且细菌培养阳性患者30例纳入观察组,随机选取同期收治的与观察组在年龄、性别、体重指数和肺功能等一般资料相匹配的细菌培养阴性30例稳定期COPD患者纳入对照组,比较两组患者血1,25-OH维生素D浓度。结果观察组血清1,25-OH维生素D浓度平均为(22.56±7.65)ng/ml,明显低于对照组的(29.57±10.13)ng/ml,两组比较差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论稳定期COPD合并细菌定植的患者其血1,25-OH维生素D浓度明显降低,提示维生素D缺乏的患者更容易合并呼吸道细菌定植。     

鼻内滴注烟草提取物和脂多糖建立慢性阻塞性肺疾病小鼠模型的评价

目的：建立鼻内滴注烟草提取物（CSE）和脂多糖（LPS）制备慢性阻塞性肺疾病（COPD）小鼠模型,并探讨其可行性。方法：24只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组和模型组,每组12只,鼻内滴注CSE和LPS建立COPD小鼠模型,测定2组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数、中性粒细胞数和巨噬细胞数,观察2组小鼠肺组织病理学表现并测定PAS阳性细胞数、肺泡平均内衬间隔（MLI）和肺泡破坏指数（DI）,Western blotting法检测2组小鼠肺组织中E-cadherin、Vimentin和α-SMA蛋白表达水平。结果：实验4和6周时模型组小鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞数和巨噬细胞数明显高于对照组（P<0.01）,模型组小鼠肺组织出现典型粘液高分泌和肺气肿改变;实验4和6周时模型组小鼠PAS阳性细胞数、肺泡MLI （P<0.01）和DI （P<0.01）明显高于对照组;与对照组比较,实验4和6周时模型组小鼠肺组织中E-cadherin蛋白表达水平降低（P<0.01）,Vimentin和α-SMA蛋白表达水平升高（P<0.01）。结论：采用鼻内滴注CSE和LPS的方法可在较短时间内建立COPD小鼠模型。