孕哺期铅暴露对仔鼠海马中生长抑素及学习记忆能力的影响

目的:观察孕哺期铅暴露对仔鼠学习记忆能力及海马中生长抑素(SS)表达的影响。方法:母鼠从孕期第1 d至仔鼠出生第30 d分别饮用去离子水(对照组)、0.05%醋酸铅水(染铅1组)、0.1%醋酸铅水(染铅2组)。Y—迷宫试验用于检测仔鼠的学习记忆能力,应用免疫组织化学的方法测定仔鼠海马中SS阳性神经元数量的变化。结果:染铅组与对照组比较,Y—迷宫试验的错误次数明显增多,有统计学差异(P<0.05)。染铅2组与对照组CA1区(P<0.01)及CA3区(P<0.05)比较SS阳性神经元数目均明显减少,染色变浅,有统计学差异;染铅1组与对照组比较CA1区SS阳性神经元变化有统计学差异(P<0.05),CA3区则无此变化。结论:孕哺期母体铅暴露会损害仔鼠的学习记忆能力,可能与海马组织中SS表达的下降有关,而且海马CA1区对铅损害更敏感。     

孕哺期铝暴露对仔鼠海马LTP及Glu含量影响

目的 研究孕哺期染铝对仔鼠长时程增强(LTP)和谷氨酸(Glu)含量影响,探讨铝对发育中中枢神经系统毒性作用及机制.方法 Wistar大鼠怀孕起染AlCl3至仔鼠哺乳期结束,共计6周,原子吸收石墨炉法测定血铝和脑铝含量;细胞外微电极技术测定LTP;免疫组化法测定海马谷氨酸含量.结果 0.2％ AlCl3组仔鼠血铝和脑铝分别为(47.43±14.38)mg/L、(13.86±6.60)mg/g;0.4％ AlCl3组血铝和脑铝为(55.56±19.07) mg/L、(18.79±5.18)mg/g,与对照组[(33.89±8.74) mg/L,(7.61±3.44) mg/g]比较,血铝、脑铝含量均明显增加(P ＜0.05);CAl区LTP的诱导和维持明显受到抑制,其群体峰电位幅值增强率明显低于对照组(P＜0.01).孕哺期铝暴露使仔鼠海马内谷氨酸含量下降(P＜0.05).CAl区对照组,0.2％ AlCl3组和0.4％ AlCl3组谷氨酸平均吸光度(A)值分别为(0.35±0.02)、(0.33 +0.02)、(0.29±0.03),阳性面积比分别为(5.06±1.36)、(4.70±0.56)、(1.71 +0.23).结论 孕哺期铝暴露可以使仔鼠海马CA1区LTP的诱导和维持受到抑制,谷氨酸水平下降.     

铅硒联合作用对大鼠海马突触结构参数的影响

目的观察铅、硒对大鼠海马突触结构参数的影响,探讨铅致学习记忆损害机制及硒的拮抗作用。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、单独染铅组、单独加硒组和铅硒同时组,至观察终点测定血铅和血硒值,利用透射电镜测定突触结构参数。结果单独染铅组较对照组,血铅值显著增高,突触间隙宽度明显增大,突触后致密物厚度、活性带长度及界面曲率明显减小(P<0.05);铅硒同时组与单独染铅组相比,血铅值降低,突触间隙宽度显著减小,突触后致密物厚度及活性带长度明显增大(P<0.05)。结论铅暴露可改变大鼠海马突触结构参数,从而对学习记忆造成影响;硒对铅致大鼠海马突触结构改变具有保护作用。     

孕哺期氧化乳蛋白饮食对子代小鼠学习记忆能力的影响

目的 探索孕哺期氧化乳蛋白饮食对子代小鼠脑部氧化还原状态及学习记忆能力的影响。方法 通过不同处理方法[加热、次氯酸(HClO)、过氧化氢-铜(H2O2-Cu)]对全脂乳进行氧化修饰。雌雄鼠合笼成功即开始饲喂氧化乳蛋白日粮3w,产后母乳喂养,仔鼠3w断乳后,随机分为三批,第一批立即测定仔鼠脑部的氧化损伤指标,第二、三批分别饲以原来氧化乳蛋白日粮和普通饲料至6w,进行Morris水迷宫测试空间学习记忆能力;测定6w仔鼠脑部的抗氧化及氧化损伤指标。结果 孕哺期饲喂氧化乳蛋白日粮,子代小鼠脑部氧化还原状态失衡,与空白对照组相比,氧化修饰组子代小鼠脑部抗氧化酶活力(CAT、SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)均呈现不同程度的下降(P<0.05),水迷宫实验中,与空白对照组相比,氧化乳蛋白组潜伏期明显上升,穿越平台次数低于空白对照组(P<0.05)。结论 孕哺期饲喂氧化乳蛋白日粮,引起子代小鼠脑部氧化应激,降低其抗氧化防御能力,同时影响其空间学习记忆能力。     

孕哺期双酚A暴露对雄性仔鼠海马即早基因表达的影响

目的探讨孕哺期双酚A暴露对雄性仔鼠海马即早基因c-fos、c-jun、egr-1和Arc表达的影响。方法低、中、高剂量双酚A组孕鼠分别灌胃染毒2mg／kg、10mg／kg、50mg／kg双酚A,对照组孕鼠用同体积的玉米油灌胃,至哺乳期结束,检测雄性仔鼠的学习记忆能力以及海马c-los、c-jun、egr-1和Arc水平。结果双酚A组雄性仔鼠在水迷宫中的逃离潜伏期明显高于对照组,海马c-los、c-jun和egr-1水平显著低于对照组,具有一定的剂量一反应关系。结论孕哺期双酚A暴露损害雄性仔鼠学习记忆能力的机制可能与海马c-fos、c-jull和egr-1表达降低有关。     

碘过量对仔鼠脑突触素表达影响及硒干预作用

目的 研究碘过量摄入对小鼠仔鼠脑突触素表达影响及硒的干预作用.方法 将60只BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组(饮用自来水)、碘(Ⅰ)过量组(饮水3 000μg/L Ⅰ)、单独补硒(Se)组(饮水200μg/L Se)、碘过量加硒(饮水3 000 μg/L Ⅰ+200μg/L Se)组.饲养4个月后,雌雄交配.测定第14和28 d仔鼠血清总四碘甲状腺原氨酸(T_4)和总三碘甲状腺原氨酸(T_3)水平,分别用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和蛋白印迹试验(Western blot)测定仔鼠大脑组织突触素mRNA和蛋白的表达.结果 第14 d碘过量组仔鼠血清L_4水平为(68.78±11.10)nmol/L,明显低于正常对照组和碘过量加硒组的(100.85±11.47)和(93.15±12.10)nmol/L(P<0.05);其脑组织突触素mRNA相对量为(44.87±3.82),明显低于正常对照组、单独补硒组和碘过量加硒组的(58.34±8.13),(54.33±5.32),(49.89±7.46);其蛋白相对量为(0.64±0.02),明显低于正常对照组、单独补硒组和碘过量加硒组的(0.78±0.01),(0.76±0.01),(0.81±0.03)(P<0.05).碘过量和补硒对第28 d仔鼠血清T_4和T_3水平和脑组织突触素表达水平无明显影响.结论 碘过量引起仔鼠脑突触素表达异常,补硒有缓解作用.     

缺锌对大鼠海马神经元突触参数的影响

采用液体缺锌饲料以灌胃的方式使大鼠缺锌二周。用电镜形态计量法测定海马ＣＡ３区神经元及其突触结构的变化。结果表明：在缺锌状态下，海马ＣＡ３区含有５０个以上囊泡的突触的构成比明显减少，而含有１０个以下囊泡的突触的构成比则增加，突触结构内线粒体的最小直径减小，突触前后膜的截面积缩小。提示缺锌状态下，海马ＣＡ３区突触的能量代谢降低，神经递质的释放能力和反应性降低。     

微波辐射对大鼠海马突触结构和功能的影响

目的探讨微波辐射对大鼠海马突触结构、突触体特性以及神经递质含量和释放的影响。方法采用30 mW／cm2微波辐射Wistar大鼠,通过电镜观察辐射后6 h海马突触结构改变,并对突触体进行鉴定;采用流式细胞仪和电子自旋共振仪检测辐射后突触体内Ca2 浓度和膜蛋白流动性的改变;于辐射后6 h及1、3、7 d采用高效液相色谱仪和分光光度法检测辐射后海马氨基酸和乙酰胆碱递质含量以及突触体释放的变化。结果30 mW／cm2微波辐射可引起海马突触囊泡堆积、活性区延长、突触后致密物增加、突触穿孔以及突触曲率增加。突触体内Ca2 浓度升高,与假辐射组比较,差异有统计学意义(P<0．01),膜蛋白旋转相关时间(τc)缩短,与假辐射组比较,差异有统计学意义(P<0．05)。海马谷氨酸和甘氨酸含量降低,突触体γ-氨基丁酸(GABA)释放减少;乙酰胆碱含量,乙酰胆碱酯酶(AChE)活力以及乙酰胆碱释放均增加,与假辐射组比较,差异有统计学意义(P<0．01)。结论微波辐射可引起海马突触结构和功能损伤,进而可能影响学习记忆功能。     

孕哺期镧暴露对大鼠子代海马神经元细胞内钙稳态及超微结构影响

[目的]探讨孕哺期镧暴露所致仔代发育期的神经毒性机制.[方法]成年雌性Wister大鼠受孕后至仔鼠出生后21 d.用不同浓度氯化镧(LaCl3)水染毒,仔鼠断乳后处死.取海马检测海马神经元细胞内游离钙离子([Ca2 ]i)浓度.[结果]大鼠海马神经元细胞[Ca2 ]i浓度(nmol/L),2.5 g/L氯化镧水组为(234.566±19.596),5.0 g/L氯化镧水组为(327.294士34.547),10.0 g/L氯化镧水组为(446.258±29.325),蒸馏水对照组为(159.396士15.235),3个实验组均高于对照组,中剂量组高于低剂量组,高剂量组高于中剂量组.差异均有统计学意义(P相似文献   

电磁脉冲对大鼠海马突触可塑性相关蛋白表达的影响

目的研究电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)照射后大鼠海马组织中突触可塑性相关蛋白的表达情况。方法以EMP 6×104V.m-1照射Wistar大鼠,用Western blot蛋白印迹法检测海马组织中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和神经细胞黏附分子(neural celladhesion molecule,NCAM)的表达。结果EMP照射后6 h,海马BDNF的表达与对照组相比增长了25.8%(P<0.05),之后呈缓慢回降趋势;照射后7 d再度升高,与对照组相比增长了32.2%,(P<0.05)。EMP照射后6~12 h,海马NCAM的表达与对照组相比增长了8.1%(P<0.05),3 d后回降,与对照组相比减少了10.8%(P<0.05),照射后7 d再度升高,与对照组相比增长了14.1%,(P<0.05)。结论EMP照射后早期,海马BDNF和NCAM的上调,可能介导了突触可塑性的正向改变。     

出生后铅暴露对大鼠海马突触结构可塑性的影响

目的通过观察断乳后染毒Wistar大鼠海马神经元数目、突触数目以及突触结构参数:突触间隙宽度、突触后致密物厚度、突触活性带长度、突触界面曲率的变化情况,探讨出生后铅暴露对海马突触结构可塑性的影响。方法断乳后雌性大鼠16只,随机分成染铅组和对照组各8只。染铅组经水给予400μmol/L PbCl2,对照组饮用去离子水,直至观察终点(2月龄),T迷宫学习训练后灌注取脑,应用免疫组化法检测神经元数目,利用透射电镜测定突触数目及突触结构参数。结果与对照组相比,染铅组血铅显著增高(P<0.05);染铅组大鼠脑海马CA3区神经元数目与对照组神经元细胞数目无显著差异(P>0.05);染铅组与对照组相比,大鼠脑海马CA1区突触数目显著减少(P<0.05),突触结构参数中:间隙宽度显著增大(P<0.05),突触后致密物厚度、突触界面曲率及突触活性带长度显著减小(P<0.05)。结论断乳后低剂量的铅染毒并不对大鼠海马神经元的数目产生影响,而是主要引起突触连接数目的减少以及突触间隙、突触后致密物厚度等突触结构参数的改变,从而对学习记忆造成影响。     

高功率微波辐射对大鼠海马神经元突触超微结构及氨基酸类神经递质含量的影响

目的 观察高功率微波（HPM）辐射后大鼠海马神经元突触超微结构及氨基酸类神经递质含量的变化.方法 采用5、10、30及100 mW/cm^2 HPM辐照60只Wistar雄性大鼠,于照后6 h、1 d和7 d处死各组动物并取海马组织,应用电镜及图像分析定量观察海马神经元突触超微结构,采用高效液相色谱法检测海马组织中谷氨酸（Glu）、天门冬氨酸（Asp）、γ-氨基丁酸（GABA）和甘氨酸（Gly）4种氨基酸类神经递质的含量.结果 5～100 mW/cm2HPM辐射后,大鼠海马神经元线粒体肿胀,粗面内质网扩张,染色质浓缩、边集;突触内囊泡堆积或排空,突触间隙增宽,突触后致密物（postsynaptic den-sity,PSD）增厚,活性区延长;大鼠海马于辐射后6 h,Glu、Asp、和Gly含量减少,且以Glu和Gly含量减少为主;10 mW/cm^2组在照后7 d内Glu含量均明显降低;Gly含量在照后6 h明显降低,1 d时基本恢复.结论 HPM辐射可引起大鼠海马神经元突触超微结构的改变,并可影响海马氨基酸类神经递质的含量.     

生长发育期氯化镧暴露对大鼠海马神经元和神经突触超微结构的影响

目的研究生长发育期氯化镧(LaCl3)暴露对大鼠海马神经元和神经突触超微结构的影响。方法 40只Wistar雌性成年大鼠随机分成对照和低、中、高浓度染镧组,低、中、高浓度染镧组雌鼠产仔后分别饮用0.25%,0.5%,1.0%LaCl3溶液,对照雌鼠产仔后饮用蒸馏水。各染镧组仔鼠断乳前吸吮母乳染镧,断乳后自行饮用0.25%,0.5%和1.0%LaCl3溶液1个月。采用穿梭箱测定仔鼠学习记忆能力,采用电感耦合等离子体-质谱法(ICP-MS)测定仔鼠海马组织中镧含量,采用透射电镜技术观察仔鼠海马神经元和神经突触的超微结构。结果穿梭箱测试时,低、中浓度染镧组仔鼠的主动逃避潜伏时间以及中浓度染镧组仔鼠的电击次数和电击时间均显著多于对照组,高浓度染镧组仔鼠的电击次数、电击时间和主动逃避潜伏时间显著多于对照和低浓度染镧组。低、中、高浓度染镧组仔鼠海马组织中镧含量显著高于对照组,分别达到对照组的10.5倍、16.5倍和26.0倍。随着镧染毒水平的增加,海马神经元超微结构的损伤程度明显加重。此外,与对照组比较,染镧组仔鼠海马神经突触活性带较短、突触后致密物较薄,且中、高浓度染镧组仔鼠海马神经突触的界面曲率减小。结论 LaCl3损害大鼠的学习记忆能力,这可能与镧在海马内蓄积而损害海马神经元和神经突触的超微结构有关。     

铅对大鼠海马及其突触体膜脂质流动性的影响

目的　通过检测染铅大鼠海马铅含量及其突触体膜脂质流动性变化 ,探讨铅对学习记忆功能影响的机制。方法　Wistar大鼠饮用含 2 g/L 的醋酸铅 (PbAc)的水溶液 ,染铅 3个月后 ,分别采用原子吸收法和荧光偏振分光光度法测定血清、海马中铅含量和海马突触体膜脂质流动性。结果　与对照组比较 ,染铅组大鼠血清和海马中铅含量明显升高 (P <0 0 5 ) ,其海马突触体膜脂质流动性降低 (P <0 0 5 )。结论　铅对大鼠海马突触体膜脂质流动性的影响可能与铅干扰脑的学习记忆功能有关     

孕哺期铅暴露对仔鼠海马组织中Aβ40表达的影响

目的 探讨母体铅染毒对子一代海马组织中β淀粉样蛋白40(Aβ40)表达的影响.方法 雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅(0.3、1.0及3.0g/L,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21d断乳为止.随机抽取各组仔鼠,在出生后第7、14、21天分别测其血液和海马组织中铅的含量;在出生后第21天时,采用免疫组化方法测定各组海马组织中Aβ40的表达.结果 孕哺期不同剂量铅暴露后,7、14和21天的仔鼠血铅、海马铅水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组化染色结果显示,Aβ40免疫组化阳性反应主要定位于胞浆和胞膜;各个铅暴露组仔鼠海马的CAl区域Aβ4o免疫组化阳性反应物的面密度显著高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组相比,各个铅暴露组仔鼠海马的CA1区域Aβ40免疫组化阳性反应物的平均灰度值明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,增强了仔鼠海马组织中Aβ40的聚集,干扰了正常的海马神经元的功能,进而可能影响其学习记忆功能.     

穿心莲内酯对血管性痴呆大鼠认知功能及海马突触可塑性的影响

目的探讨穿心莲内酯(andrographolide,ANDRO)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠认知功能及海马突触可塑性的影响。方法 2012年6—8月将30只SD大鼠随机分为治疗组(10只)、模型组(10只)、假手术组(10只)。通过阻断大脑中动脉2 h制做VD大鼠模型,治疗组大鼠给予ANDRO(200 mg/kg)灌胃治疗,模型组及假手术组大鼠给予2 ml生理盐水灌胃。用Morris’s水迷宫评估大鼠认知功能,免疫印迹法检测大鼠海马突触素表达。计量资料按完全随机成组设计资料进行方差分析,组间比较采用单因素方差分析,多个样本均数两两比较采用q检验。P0.05为差异有统计学意义。结果连续4 d水迷宫潜伏期模型组[(103.87±5.22)、(88.27±5.37)、(73.95±5.46)、(67.26±5.01)s]均长于治疗组及假手术组大鼠(均P0.05),治疗组[(97.08±4.01)、(79.27±4.66)、(66.62±5.44)、(58.30±6.40)s]均长于假手术组(均P0.05)。假手术组、治疗组、模型组海马突触素灰度值比率分别为0.89±0.01、0.83±0.02、0.79±0.01,比较差异有统计学意义(F=123.27,P0.05)。结论 ANDRO改善VD大鼠认知功能可能与保护突触可塑性有关。     

间断性低氧对幼鼠认知功能及海马突触超微结构的影响

目的 观察慢性间断性低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)对幼鼠认知功能及海马突触超微结构的进行性影响。 方法 雄性21日龄SD幼鼠66只,体重(50±5)g,随机分为正常对照组(unhandled control group,UC组)和慢性间断性低氧组(CIH组),每组33只,每组又分为2,4,6周3个时间点,每个时间点11只幼鼠。CIH组每日间断缺氧8 h,通过Morris水迷宫测试幼鼠学习和记忆能力,利用透射电镜观察海马CA1区突触超微结构的变化。 结果 1)Morris水迷宫定位航行试验:CIH组幼鼠逃避潜伏期明显长于UC组,两组之间差异具有统计学意义(P<0.05)。2)Morris水迷宫空间搜索试验:与UC组比较,CIH组跨越目标象限时间占整个游泳时间的百分率明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。与UC组比较,CIH组穿越平台次数明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。3)电镜下可见CIH组突触小泡数量减少,结构不清,线粒体出现空泡样改变。UC组无明显病变。 结论 CIH致幼鼠认知功能进行性下降与海马CA1区突触超微结构的改变密切相关。     

铅硒联合作用对原代培养海马神经元影响

目的观察铅、硒对原代培养的海马神经元生长及存活的影响，研究硒对铅的神经细胞生长抑制的拮抗作用。方法建立新生Wistar大鼠海马神经元原代无血清培养技术，通过PbCl2，Na2SeO3单独及联合作用，观察神经细胞的生长和存活情况。结果10^-5mol／L铅明显抑制了原代培养的海马神经元突起生长，引起神经元存活率下降；单独硒（2×10^-6mol／L）有明显促进海马神经元突起生长的作用．尤其在神经元突起生长早期；但对海马神经元存活率的影响不明显。铅和硒共同孵育时，培养早期硒能拮抗铅对神经元突起延伸的抑制．但随着培养时间延长，这种拮抗作用消失；从神经元存活率来看，在实验剂量下，未见硒能拮抗铅对神经元存活的抑制作用。结论铅具有抑制神经元生长和存活的毒性。本实验剂量下的硒在细胞培养早期有促进神经元突起生长和拈抗铅对神经元生长和存活的抑制作用。     

孕哺期铅暴露对仔鼠学习记忆能力及海马中精氨酸加压素的影响

目的 观察孕哺期铅暴露对仔鼠学习记忆能力及海马中精氨酸加压素(AVP)表达的影响.方法 母鼠从孕期第1天至仔鼠出生第30天分别饮用去离子水(对照组)、0.05%醋酸铅水(染铅1组)、0.10%醋酸铅水(染铅2组).Y-迷宫试验用于检测仔鼠的学习记忆能力,应用免疫组织化学的方法测定仔鼠海马中AVP阳性神经元数量的变化.结果 染铅组与对照组比较,Y-迷宫试验的错误次数明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05).染铅2组与对照组比较,CA1区及CA3区AVP阳性神经元数目均明显减少,染色变浅,差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05);染铅1组与对照组比较,CA1区AVP阳性神经元变化的差异有统计学意义(P＜0.05),CA3区则无此变化.结论 孕哺期母体铅暴露会损害仔鼠的学习记忆能力,可能与海马组织中AVP表达的下降有关,而且海马CA1区对铅损害更敏感.     

反复热性惊厥对大鼠海马区神经元超微结构及突触形态学影响的研究

【目的】观察热性惊厥大鼠脑海马区神经元、细胞器超微结构及神经突触形态学参数变化,探讨热性惊厥性学习记忆损害的可能机制。【方法】36只21日龄雄性SD大鼠均分为热性惊厥组(febrile seizures group,FS)、发热对照组(febrile control group,FG)及正常对照组(normal control group,NG)。采用热水浴法建立热性惊厥大鼠模型,应用透射电镜分别观察海马CA1区神经元、细胞器的病理超微结构改变和神经突触参数变化特征。【结果】FS组大鼠脑海马区出现显著病理超微结构改变。FS组在神经元变性坏死(χ2=44.61,P<0.005)、线粒体肿胀(χ2=8 9.5 4,P<0.005)、内质网脱颗粒(χ2=36.96,P<0.005)及高尔基体扩张(χ2=18.82,P<0.05)等方面较对照组程度严重,差异有非常显著性。三组在突触后致密物质厚度[FS、FG、NG组分别为(66.43±19.46)nm(、89.91±25.48)nm及(96.18±26.13)nm,F=11.23,P<0.01]、突触活性带长度[FS、FG、NG组分别为(347.87±124.65)nm(、392.01±147.55)nm及(395.63±149.77)nm,F=10.84,P<0.01]、突触界面曲率[FS、FG、NG组分别为(1.0926±0.1247)、(1.1788±0.1933)及(1.1549±0.1831),F=3.19,P<0.05]及突触间隙[FS、FG、NG组分别为(46.21±6.32)nm(、32.55±5.12)nm及(29.67±5.08)nm,F=7.14,P<0.01]等方面的差异有显著性,提示FS组大鼠脑海马CA1区突触后致密物质厚度减小、突触活性带长度缩短、突触界面曲率下降及突触间隙增宽。FS组与对照组在突触数密度(F=2.46,P>0.05)及面密度(F=1.87,P>0.05)方面差异无显著性。【结论】反复热性惊厥发作可导致大鼠脑海马区严重的神经元和细胞器超微病理改变,同时伴有神经突触可塑性变化,推测热性惊厥性学习记忆损害与以上病理改变有关。