透射电镜超薄切片法与负染法探讨

透射电镜生物样品超薄切片技术是医学生物学研究中常用的方法。其它一些制备技术如免疫电镜、电镜细胞化学、放射自显影等,都必须进行超薄切片;而超薄切片所显示的生物样品的微细结构,也是识别扫描电镜图像、冷冻蚀刻复型及其他电镜图像的基础。负染色是相对正染色而言...     

电子显微镜在病理诊断中的应用

电子显微镜是利用电子与固体样品作用时发出的信息,对样品进行微区观察。目前的电镜种类很多,包括透射电镜（TEM）、扫描电镜（SEM）、扫描隧道电镜、原子力电镜等,但应用于临床病理诊断中的主要是透射电镜和扫描电镜,前者注重观察组织和细胞内的超微结构,后者则用于观察组织和细胞的表面形貌。临床病理诊断为最终诊断,目前电镜诊断技术以其可以观察到亚细胞结构的变化广泛应用于现代临床病理诊断中,已成为病理诊断中一项重要的依据,特别是在传统的临床诊断手段无法确诊的病例中,电子显微镜发挥着重大的作用。     

家兔主动脉内弹力膜表面正常结构的扫描电镜观察

本文用火棉胶揭去血管内皮,用盐酸、吐温消化制备血管标本,对主动脉内弹力膜表面正常结构进行了扫描电镜观察。正常内弹力膜状似粗糙的“毛地毯”,由密集排列的弹力纤维网构成,复盖于中膜表面.膜上有内弹力膜特殊分化的孔;孔内可见细胞穿行.将扫描电镜用于内弹力膜的结构研究,不仅增加了新的研究手段,而且可以显示光镜和透射电镜难以观察的微细结构的三维关系,对探讨内弹力膜结构和功能以及在病变中的改变有一定价值。     

甲状腺癌的扫描电镜诊断价值

扫描电镜以高分辨、大面积及立体像的观察效能研究肿瘤，是一种十分有利的工具。本文用扫描电镜观察了５例甲状腺乳头状癌和６例滤泡性癌，并以１５例甲状腺良性滤泡性肿瘤作为对照，结果表明，扫描电镜下所观察到的甲状腺滤泡结构及细胞表面形态的异常，明显反映甲状腺癌的特征。滤泡细胞的重度多形性、巨细胞、奇形细胞和奇形乳头或奇形细胞族的出现，以及细胞排列紊乱、拥挤和被覆面崎岖不平是扫描电镜下具有诊断意义的癌的特征。     

甲状腺癌的扫描电镜诊断价值

扫描电镜以高分辨、大面积及立体像的观察效能研究肿瘤，是一种十分有利的工具。本文用扫描电镜观察了５例甲状腺乳头状癌和６例滤泡性癌，并以１５例甲状腺良性滤泡性肿瘤作为对照，结果表明，扫描电镜下所观察到的甲状腺滤泡结构及细胞表面形态的异常，明显反映甲状腺癌的特征。滤泡细胞的重度多形性、巨细胞、奇形细胞和奇形乳头或奇形细胞簇的出现，以及细胞排列紊乱、拥挤和被覆面崎岖不平是扫描电镜下具有诊断意义的癌的特征。此外，扫描电镜对光镜下不可辨认的早期癌变细胞亦可明确察及，说明扫描电镜对甲状腺癌的诊断有很大价值。     

郎格罕细胞型组织细胞增生症电镜超微结构观察及诊断

近年来电镜作为一种先进手段,在临床疾病诊断中的作用逐渐被人们认识,许多疾病的确诊离不开电镜观察资料.郎格罕细胞型组织细胞增生症可表现为能自行缓解的单一骨损害到威协生命的多系统受累等多种形式.其病因及发病机制尚不清楚.因临床较少见,故早期诊断较困难.运用透射电镜观察及诊断郎格罕细胞型组织细胞增生症国内尚未见有详细报道,本文就2例小儿郎格罕细胞型组织细胞增生症的超微结构观察及诊断进行报道和探讨.     

电镜技术在非何杰金氏淋巴瘤针吸细胞学的应用

应用透射电镜和扫描电镜观察非何杰金氏淋巴瘤(NHL)14例。组织学分型:B 细胞性淋巴瘤8例.T 细胞性淋巴瘤6例。介绍了如何制作针吸细胞电镜标本,并讨论这种电镜观察技术的优缺点以及 T 细胞起源的瘤细胞和 B 细胞起源的瘤细胞在透射电镜、扫描电镜下的特点。     

人腭扁桃体隐窝上皮结构的研究

采用扫描电镜、透射电镜及光镜免疫金银法观察了31例慢性扁桃体炎患者和8例胎儿的扁桃体隐窝上皮结构及其中细胞的分布。电镜观察发现隐窝上皮表面存在三种类型微隐窝开口,其腔内有浸润细胞、异物及细菌。有三种特化上皮细胞(M细胞)覆盖于Ⅲ型微隐窝开口处,其结构与肠道M细胞相似,其数量随扁桃体炎的反复发作而减少。形态表明微隐窝是浸润细胞和外来抗原的出入口。M细胞与抗原的摄取及传递有关。光镜免疫金银法观察证明上皮浸润细胞中多数为OKT_s~+细胞,其中OKT_4~+者又占多数而OKT_s~+细胞较少,这些细胞是隐窝上皮参于免疫应答的结构基础。     

年轻恒牙组织形态的超微结构观察

  目的 观察年轻恒牙形态的超微结构特点,并分析年轻恒牙牙体硬组织结构特点与龋患关系。方法 取临床因正畸治疗需要而拔除的根尖孔尚未完全闭合的恒前磨牙作为标本,应用透射电镜和扫描电镜观察年轻恒牙釉质表面、髓腔内侧壁牙本质及根尖区牙骨质的超微结构形态。结果 电镜下年轻恒牙的釉质表面为多孔状,牙本质小管密集,横断面呈圆形,成牙本质细胞较多。结论 年轻恒牙的组织形态超微结构特点是龋病易感的主要因素。     

生物医学中的透射电镜方法

电子显微镜是研究生物超微结构的主要工具。要充分发挥这一工具的作用,必须对电镜所观察的样品有正确的全面的认识。本文只讨论透射电镜方面的问题,关于扫描电镜则待后讨论。 透射电镜是利用透射电子成像的电子显微镜。透射电子可以形成两种像,一种是样品的形态像,一种是样品的衍射像。根据成像方式和样品种类的不同,可将透射电镜的方法列表如下:     

鲜何首乌茎叶及块根组织的超微结构

目的：研究新鲜何首乌幼茎、纪叶及块根的超微结构。方法：采用ＯＤＯ扫描电镜法和冷冻蚀刻法行电镜观察。结果：发现叶表皮细胞游离面具有角质纹理，气孔由周细胞和中心细胞组成；幼茎韧皮部细胞核孔散在，膜蛋白颗粒散在或密集成惩；块根细胞质内淀粉粒的表面附有大小不一的微粒。结论：将ＯＤＯ法及冷冻蚀刻引入中草药学结构研究，可获得比光学显微镜及超薄切片透射电法更好的优势，并能更多植物细胞的三维微细结构。     

声带癌的电镜观察

报告4例正常声带及声带鳞状细胞癌的电镜观察结果。扫描电镜正常人声带与鳞癌细胞间形态学区别在于癌细胞表面膨大,不光滑,有不规则的类微绒毛样结构存在,细胞间接触减少且境界不清。应用扫描电镜可能早期发现喉癌和评价某些解剖异常。透射电镜:癌细胞核呈波纹状曲折或齿状凸出,细胞质內有较多张力原纤维,细胞间有发育良好的桥粒连接,癌间质细胞中可见较多淋巴细胞和浆细胞。目前认为是机体免疫功能增强的表现,其多数预后较好。     

生物蛋白胶/松质骨基质负载软骨细胞体外培养的实验研究

目的 探讨生物蛋白胶,松质骨基质作为软骨细胞培养支架的可行性。方法 ①取3周龄的新西兰幼兔的关节软骨细胞种植于生物蛋白胶,松质骨基质载体上作体外培养;②通过倒置显微镜、扫描电镜、透射电镜、AB-PAS染色、Ⅱ型胶原免疫组化检查等,了解细胞生长及软骨基质的分泌情况,并观察载体降解情况。结果 ①生物蛋白胶,松质骨基质载体中大部分保持卵圆形,小部分在支架表面如贴壁细胞状;②于第9天以后,支架内的细胞数均开始明显增加。软骨细胞活性达95％以上;③AB-PAS染色（＋）、Ⅱ型胶原免疫组化检查（＋）;④电镜观察显示软骨细胞较好地附在支架上并分泌细胞外基质。结论 生物蛋白胶,松质骨基质是一种较好的软骨细胞培养支架。     

应用电子显微镜的负染色技术快速检测樱桃树叶病毒

目的：讨论应用电子显微镜负染色技术进行樱桃树叶病毒粒子的快速检测。方法：对病株的典型叶片进行搅碎，离心制成悬液，用磷钨酸进行染色，在载网上干燥后，透射电镜下观察。结果：在电镜下能清楚显示样品表面的微细结构。结论：这种技术具有分辨率高，简单易行，快速等优点。被广泛应用于研究病毒及生物大分子的形态与结论。     

脂质过氧化和抗氧化作用对培养人内皮细胞的影响——冷冻复型的电镜观察

首次应用冷冻复型方法对培养人血管内皮细胞的内部结构进行观察,表明内皮细胞的冷冻复型样品所显示的细胞器结构清晰,立体感强;对膜性系统的观察结果与扫描电镜和透射电镜下常规样品观察结果相符,而在显示细胞表面的小孔和核膜孔方面优于以前的电镜方法。并观察了氢过氧化枯烯和硒作用下内皮细胞膜性系统的改变,进一步探讨脂质过氧化与抗氧化作用对细胞的影响。     

小鼠肠道M细胞正常形态的研究

用扫描电镜、透射电镜及光镜组化方法观察成年健康Balb/c小鼠肠道Peyer淋巴集结圆顶部表面上皮中M细胞的形态结构和分布及其表面组化特性。结果表明,M细胞是分布于Peyer淋巴集结圆顶部表面上皮中的一种特殊的上皮细胞。其形态结构特征为游离面具有许多短的微绒毛和微皱褶,基部胞膜内陷形成1个大的中央腔,其腔内常包绕数个淋巴细胞,偶见浆细胞和巨噬细胞,顶部胞质终末网不发达,有许多小泡。M细胞表面低活性的碱性磷酸酶可作为光镜下鉴别M细胞的依据。     

电镜技术在病理学诊断中的应用

为摸索出适合临床超微结构病理诊断的电镜技术 ,更好地发挥其对疾病诊断的作用 ,现根据多年工作积累并结合临床实际 ,介绍本实验室在疾病诊断中电镜技术的应用情况。1　几种常用电镜技术1.1　常规电镜技术　标本经固定后用 microslicer切片以增加样品量 ,取其中一部分 (其余切片继续保存 )做快速常规包埋、定位及超薄切片 ,用透射电镜观察 ,整个过程 2～ 3d。有些特殊结构在器官组织中分布很少 ,而对于疾病诊断又很有意义。本室的方法是先切大量半薄切片 ,在光镜下先找到这些特殊结构 (必要时可用美蓝染色 ) ,然后再做原位包埋、超薄切片 ,…     

唾液富组蛋白5作用后白念珠菌超微结构的改变

目的:电镜观察HRPs5作用后白念珠菌超微结构的变化.方法:将一定数量的孢子与一定浓度的HRPs5混合培养后,在扫描电镜下分析对照组与试验组菌细胞的变形率有无显著性差异;并且扫描电镜和透射电镜下观察HRPs5作用后白念珠菌超微结构的变化.结果:扫描电镜观察经过HRPs5处理过白念珠菌孢子表面不光滑并有明显的凹陷和穿孔.5000倍扫描电镜下分析对照组与实验组菌细胞的变形率有极显著性差异(P＜0.001).透射电镜观察经过HRPs5处理过的白念珠菌孢子可见细胞质内有空泡变性等改变.结论:富组蛋白能破坏白念珠菌的细胞膜,诱导胞内物质丧失,从而导致生物体死亡.     

家兔实验性早期动脉粥样硬化的扫描电子显微镜观察(附光镜和透射电镜对照)

本文对家兔实验性早期动脉粥样硬化进行了扫描电镜观察,个别标本並作了透射电镜及光镜对照,实验动物用高胆固醇食物喂饲。 对主动脉腔面进行了扫描电镜观察,可看到大小不等的内膜损害区,其表面的内皮细胞肿胀变形,损害严重的区域细胞坏死脱落,损害区边缘有的细胞排列紊乱。此外,还看到大量“火山口”样结构。 光镜下可见损害区内充填着大量泡沫细胞,内皮下层增厚水肿。 透射电镜下可见内皮细胞变形,细胞内出现许多空泡,细胞隙间变宽,内皮下散有大量泡沬细胞,泡沫细胞内的空泡有两种类型。 文章并讨论了动脉粥样硬化与内皮损害、细胞通透性改变及对血浆脂蛋白屏障功能降低之间的关系。     

多酚类化合物对白色念珠菌超微结构的影响

目的:电镜观察白色念珠菌与多酚类化合物作用后形态和超微结构的改变,进一步评价该类化合物的抗真菌作用,探讨其抗真菌作用机制.方法:将临床新分离的白色念珠菌与多酚类化合物共同培养24 h 后,分离菌体,按常规方法进行样品处理,在扫描电镜与透射电镜下观察其细胞表面形态结构变化与细胞内超微结构变化.结果:扫描电镜下观察可见酚类化合物作用后的白色念珠菌,细胞表面皱缩不平,细胞壁膜有严重皱折、变薄、剥脱等现象,并且质地变脆,有裂纹形成.透射电镜下可见,细胞壁不完整,局部有缺损,质地疏松,厚薄不均;细胞膜轮廓不清,不连续,有凸起;胞质不均匀,细胞内成分聚集固缩成电子密度较高的团块,且形成大量电子密度高的光亮区,间成有电子光点和空胞状物.结论:酚类化合物与白色念珠菌作用后,可使其超微结构发生明显的改变,此改变表明了其抗真菌作用,并为其抗真菌作用机制的研究提供了线索.