诱导型一氧化氮合酶在肿瘤组织中的作用

诱导型一氧化氮合酶（iNOS）与恶性肿瘤关系密切，被认为与肿瘤的发生、发展、侵袭和转移有关，但它在肿瘤起始及演进过程中的作用机制仍不十分清楚，继续进一步研究并弄清这些问题，将有可能在肿瘤的发生、发展及治疗等领域的研究取得较大的突破。     

诱导型一氧化氮合酶在地鼠颊囊癌变中的意义

目的:研究诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)在肿瘤发生发展中的表达和作用.方法:利用二甲基苯并蒽(9,10-dimethyl-1,2-benz-anthracene,DMBA)诱导地鼠颊囊癌变,免疫组化法检测iNOS动态表达,硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量的变化.结果:地鼠颊囊癌变中iNOS阳性表达不断增加,NO含量和微血管密度不断增加.结论:iNOS高表达和高水平量的NO可能在口腔鳞癌发展中起重要作用.     

诱导型一氧化氮合酶在胎膜早破胎膜组织中的表达及意义

目的：探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在胎膜早破胎膜组织中的表达及意义。方法：选择临产前行剖宫产终止妊娠的孕妇60例,其中早产胎膜早破组（pPROM）、足月胎膜早破组（tPROM）作为研究组,正常足月妊娠组为对照组,每组各20例,采用免疫组织化学染色法检测胎膜组织中iNOS的表达,采用苏木素-伊红染色检测胎膜的炎症情况,分析胎膜组织中iNOS的表达与绒毛膜羊膜炎的关系。结果：3组胎膜中均有一定程度iNOS表达,iNOS主要表达于炎症细胞中,pPROM组胎膜中的iNOS表达水平高于对照组（P〈0.01）。绒毛膜羊膜炎孕妇胎膜中的iNOS表达水平高于非绒毛膜羊膜炎孕妇（P〈0.01）。结论：iNOS在pPROM胎膜组织中的表达水平较高,这种高表达可能与绒毛膜羊膜炎的发生有关。     

大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶的表达及动态改变

目的：探讨大鼠急性脊髓损伤后不同时段髓内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA动态表达。方法：36只SD大鼠抽签法随机分组，任选一组作为对照。采用Allen法制作急性脊髓损伤模型，在损伤后2，6，12，24，48h等时段，以反转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)分析：iNOS mRNA表达。在脊髓损伤后24h，用免疫组化方法分析iNOS在脊髓不同类型神经细胞中的表达与分布，并以比色法测定脊髓损伤后血清NOS及一氧化氮的含量。结果：脊髓损伤后，神经元、星形细胞和小胶质中均可见iNOS表达，以神经元表达为主。脊髓损伤后2h可见iNOS表达0．56&;#177;0．02，24h达高峰1．20&;#177;0．05，48h开始降低0．70&;#177;0．06。血清中NOS及一氧化氮的动态改变与损伤组织iNOS mRNA变化趋势相一致。结论：研究资料提示脊髓损伤后脊髓内iNOS表达增高，过量产生的一氧化氮加重了继发性脊髓损伤。     

血管内皮细胞生长因子和诱导型一氧化氮合酶在支气管哮喘气道重塑中的表达及意义

目的:探讨哮喘气道重塑中血管内皮细胞生长因子(VEGF)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达及意义。方法:32只大鼠中随机取8只作对照组,其余为哮喘组。哮喘组又分为哮喘3d(8只)、7d(8只)和14d(8只)组。对照组大鼠1d和8d各腹腔注射生理盐水2mL,15d开始用37℃生理盐水雾化吸入,1次/d,10min/次,共3d。各哮喘组用卵蛋白粉(OVA)10mg、氢氧化铝20mg制成2mL悬液代替生理盐水作腹腔注射,1%OVA代替生理盐水分别雾化吸入3、7和14d。末次激发24h后行肺泡灌洗,回收肺泡灌洗液,测VEGF和iNOS的浓度。取右下肺组织切片作常规HE染色,测定气道内周径(Pi)、外周径(Pe),并计算管壁面积(WA)和气道平滑肌面积(SMC-A)。结果:各哮喘组气道中VEGF和iNOS浓度、WA/Pi和SMC-A/Pi均高于对照组,而且VEGF和iNOS浓度分别与WA/Pi和SMC-A/Pi呈正相关。结论:VEGF和iNOS可能参与哮喘气道重塑。     

诱导型一氧化氮合酶在前列腺癌中的表达及与肿瘤血管生成的关系

[目的]通过测定诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在前列腺增生症(BPH)、前列腺癌(PC)中表达情况以及微血管密度(MVD)计数,探讨其与肿瘤血管生成的关系.[方法]采用链霉菌素抗生物蛋白-过氧化酶方法,分别用iNOS多克隆抗体和CD34单克隆抗体对30例BPH、50例PC行免疫组织化学染色,采用免疫组织化学染色评分方法...     

碱性成纤维细胞生长因子对人晶体上皮细胞增殖及一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶的影响

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对人晶体上皮细胞内一氧化氮（NO）含量和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性、基因及蛋白表达的影响。 方法：以含10％胎牛血清（FBS）与100mg／L青霉素和100mg／L链霉素的DMEM培养液培养及传代人晶体上皮细胞。用0．001，0．01，0．1，1，10和100μg/L浓度的bFGF作用于晶体上皮细胞，用MTT法检测晶体上皮细胞的增殖情况；用Griess法测定NO含量；分别用RT—PCR方法及western blot法检测iNOS基因及蛋白的表达。 结果：①bFGF对细胞增殖的影响：与对照组比较，除100μg/L以组外，其余浓度为0．001～10μg／L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应均大于对照组，其中0．01～10μg/L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应差异显著（P〈0．05）。②bFGF对晶体细胞NO水平、NOS活性及iNOS的基因和蛋白表达的影响：对照组和0．001，0．01，0．1μg/L bFGF组NO水平较低，而在1μg/L以和10μg/L以的bFGF使人晶体上皮细胞的NO含量增高，0．1～10μg/L的bFGF使人晶体上皮细胞的NOS活性增高、使iNOS的基因和蛋白表达增强。 结论：可以促进人晶体上皮细胞的增殖，使NO含量和iNOS的活性和蛋白表达增高。     

诱导型一氧化氮合酶在末端病大鼠跟腱末端区表达及分布的规律

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶在末端病大鼠跟腱末端区组织的损伤及适应性改变中的作用。方法:实验于2004-04/07在华中师范大学体育系运动人体科学实验室完成。将8只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组2只和造模组6只。采用“电刺激跳跃法”建立大鼠跟腱末端病模型。4周后处死取其双侧后足跟腱末端,用免疫组化方法检测各组诱导型一氧化氮合酶表达,以ImageProPlus5.0图像分析系统测定阳性信号积分光密度值进行评估。结果:纳入动物8只,进入结果分析8只,无脱失值。两组跟腱末端区各部位均有诱导型一氧化氮合酶的表达,跟腱、纤维软骨、钙化软骨、跟骨及腱骨关节面的诱导型一氧化氮合酶积分光密度值表达造模组高于正常对照组(233.16±147.95,2.95±2.80;157.50±88.28,12.98±3.78;212.26±150.21,22.71±15.90;126.06±98.15,13.26±4.57;427.89±288.73,46.67±21.13,P<0.01或P<0.05),而在骨髓腔及腱围区诱导型一氧化氮合酶表达差异不显著(767.62±495.15,466.79±275.08;940.80±596.84,625.98±254.71,P>0.05)。结论:诱导型一氧化氮合酶在末端病大鼠大鼠跟腱末端区各部位均有明显表达,大部分区域和对照组大鼠存在较明显的差异。诱导型一氧化氮合酶在末端病大鼠跟腱末端区的发病中可能起着双重作用,它除了介导组织的损伤过程外还对末端区组织在结构和功能上的适应性改变起着调控作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对人晶体上皮细胞增殖及一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人晶体上皮细胞内一氧化氮(NO)含量和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性、基因及蛋白表达的影响。方法:以含10%胎牛血清(FBS)与100mg/L青霉素和100mg/L链霉素的DMEM培养液培养及传代人晶体上皮细胞。用0.001,0.01,0.1,1,10和100μg/L浓度的bFGF作用于晶体上皮细胞,用MTT法检测晶体上皮细胞的增殖情况;用Griess法测定NO含量;分别用RT-PCR方法及westernblot法检测iNOS基因及蛋白的表达。结果:①bFGF对细胞增殖的影响:与对照组比较,除100μg/L组外,其余浓度为0.001～10μg/L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应均大于对照组,其中0.01～10μg/L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应差异显著(P<0.05)。②bFGF对晶体细胞NO水平、NOS活性及iNOS的基因和蛋白表达的影响:对照组和0.001,0.01,0.1μg/LbFGF组NO水平较低,而在1μg/L和10μg/L的bFGF使人晶体上皮细胞的NO含量增高,0.1～10μg/L的bFGF使人晶体上皮细胞的NOS活性增高、使iNOS的基因和蛋白表达增强。结论:可以促进人晶体上皮细胞的增殖,使NO含量和iNOS的活性和蛋白表达增高。     

中期因子、一氧化氮合酶和VEGF在子宫颈癌的表达及临床意义

目的　探讨中期因子 (MK)、一氧化氮合酶 (NOS)和血管内皮生长因子 (VEGF)的表达水平及与宫颈癌组织内血管生成、生物学特性和预后的关系。方法　采用免疫组化染色 (SP法 )检测 4 9例子宫颈癌的MK、iNOS、eNOS、VEGF及微血管密度 (MVD) ,并与临床病理及预后指标对照分析同时进行随访。结果　宫颈癌组织中MK、iNOS、eNOS和VEGF阳性表达率分别是 5 9 2 %、71 4 %、5 7 1%和 4 9 0 % ,MVD均值为 2 4 2± 5 6 4。MK、NOS、VEGF和MVD均与宫颈癌临床分期、术后生存时间有密切关系 (P <0 0 5 ) ,但与组织学类型无关 (P >0 0 5 ) ;iNOS和MVD还与宫颈癌病理分级有密切关系 ;MK、NOS、VEGF的表达和MVD均值呈正相关 (P <0 0 5 )。结论　MK、NOS和VEGF的表达水平与宫颈癌的进展、术后生存时间有密切关系 ,提示MK、NOS、VEGF和MVD可作为患者预后评估的重要指标。     

膀胱移行细胞癌组织中p53和PCNA表达的关系及其临床意义

目的　研究同一膀胱移行细胞癌组织中p5 3蛋白和增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的关系及其临床意义。方法　应用免疫组化LDP法检测 86例膀胱癌组织中p5 3蛋白及PCNA的表达。结果　 86例膀胱癌组织中p5 3、PCNA的阳性表达率分别为 4 6 . 5 1%及 5 1 .16 % ,p5 3和PCNA的表达与肿瘤的病理分级、临床分期和患者术后生存率均呈正相关。PCNA表达强度受p5 3表达强度的影响。结论　p5 3基因与PCNA可能通过对细胞增殖周期的调控 ,参与膀胱癌的发生与发展 ,二者的异常表达对估计膀胱癌的恶性程度、推测预后、术后随访及治疗均有一定的指导意义。     

去整合素金属蛋白酶-12和增殖细胞核抗原在膀胱癌组织中的表达及临床意义

目的 研究去整合素金属蛋白酶-12(ADAM-12)和增殖细胞核抗原(PCNA)在膀胱癌中的表达,并探讨其表达与膀胱癌发病之间的关系.方法 应用免疫组织化学的方法 检测43例膀胱癌、15例正常膀胱组织中ADAM-12及PCNA的表达情况,并分析其与膀胱癌患者临床特征及病理分期的关系.结果免疫染色标本中,ADAM-12在膀胱癌组织中的表达明显高于正常膀胱组织,两者比较差异有统计学意义(x2=11.241,P=0.010).病理分期高的膀胱癌组织表达明显高于分期低者(x2=22.368,P＜0.001).PCNA在膀胱癌中的表达明显高于正常膀胱组织,两者比较差异有统计学意义(x2=9.250,P=0.026).病理分期高的膀胱癌组织的表达明显高于分期低者(x2=10.665,P=0.014).ADAM-12与PCNA在膀胱癌中的表达呈正相关(r=0.997,P＜0.001).结论 膀胱癌组织中ADAM-12蛋白和PCNA呈过表达,可能与肿瘤的发生发展密切相关;ADAM-12是膀胱癌具有潜在价值的肿瘤标记物,可以成为一项新的临床观察指标.     

细胞黏附分子及抑癌基因和凋亡抑制蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的：探讨细胞黏附分子、抑癌基因、凋亡抑制蛋白的表达与膀胱移行细胞癌病理分级、临床分期及预后的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测56例膀胱移行细胞癌及5名正常人膀胱黏膜标本中细胞黏附分子、抑癌基因和凋亡抑制蛋白的表达。结果：56例膀胱癌的细胞黏附分子、抑癌基因、凋亡抑制蛋白的表达总阳性率为57％、73％、86％；随着癌组织病理分级升高、临床分期浸润深度增加，细胞黏附分子、抑癌基因的表达降低，而凋亡抑制蛋白的表达升高。细胞黏附分子、抑癌基因、凋亡抑制蛋白的表达率在肿瘤复发患者与无复发患者比较，差异均无统计学意义。结论：细胞黏附分子、抑癌基因的表达与膀胱移行细胞癌的病理分级和临床分期有关；凋亡抑制蛋白的高表达率可能成为膀胱移行细胞癌辅助诊断指标之一。     

食管鳞癌组织中桩蛋白和血管细胞粘附分子-1的表达及其意义

目的 探讨桩蛋白和血管细胞粘附分子(VCAM)-1在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌细胞发生、发展和转移的关系.方法应用免疫组化SP法检测24例正常食管黏膜、94例食管鳞癌组织中VCAM-1和桩蛋白的表达情况.结果桩蛋白表达率与淋巴结转移、浸润深度和临床分期等因素显著相关(P<0.05、P<0.01、P<0.01);VCAM-1与浸润深度、淋巴结转移和临床分期等因素有关(P<0.01、P<0.05、P<0.01).桩蛋白与VCAM-1在癌组织中表达相关(列联r=0.247,P<0.05).结论桩蛋白和VCAM-1在食管鳞癌组织中高表达,可作为评价食管鳞癌生物学行为的指标.     

凋亡抑制蛋白livin在膀胱移行细胞癌中表达及临床意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白livin在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义。方法:应用SP免疫组织化学方法检测55例膀胱移行细胞癌及10例正常膀胱黏膜组织石蜡切片中livin表达的情况,结合临床资料分析其在膀胱移行细胞癌组织和正常膀胱黏膜中的表达及其与膀胱移行细胞癌临床病理分期、组织学分级和患者复发转移情况的关系。结果:livin在膀胱移行细胞癌标本中的表达阳性率为76.4%(42/55),而正常对照组中无1例呈阳性表达(P<0.01);livin的表达与膀胱移行细胞癌的初发和复发显著相关(P<0.05),但与组织学分级、临床病理分期、转移与否、肿瘤数目无关。结论:livin蛋白在膀胱移行细胞癌组织中表达明显上调,并与膀胱移行细胞癌的复发密切相关,livin蛋白可能通过抑制细胞凋亡,对膀胱移行细胞癌的发生发展起着重要作用,可作为膀胱移行细胞癌早期诊断和评判术后高复发风险的一项重要指标。     

CDK4在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨CDK4蛋白在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化方法,测定10例正常膀胱黏膜及40例BTCC标本中的CDK4蛋白的表达。结果:CDK4蛋白在正常膀胱黏膜和BTCC中的阳性表达率分别为0.00%、52.50%(P<0.05)。CDK4蛋白在G1、G2、G3中的阳性表达率依次为36.84%、61.54%、75.00%,差异无显著性(P>0.05);在Tis～T1中CDK4阳性表达率为40.00%,明显低于T2～T4中的73.33%(P<0.05)。结论:CDK4的过度表达可能在BTCC的进展中发挥了重要作用,CDK4可成为一种新的预后判断的参考指标。     

超声联合微泡增加内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶和一氧化氮生成的体外实验

目的 评估诊断性超声联合微泡对内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及一氧化氮(nitric oxide,NO)生成的增强效应.方法 将正常培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)分为空白对照组(A组)、纯微泡组(B组)、单纯超声组(C组)和超声联合微泡组(D组).其中,D组按条件不同又分为:辐照时间不同组(1 min、5 min、10 min)、机械指数不同组(0.09、0.4、1.0)、微泡浓度不同组(5×10~8/ml、2.5×10~8/ml、1.25×10~8/ml).干预后即刻和干预后24 h分别在光镜下观察细胞形态结构,RT-PCR测细胞eNOS相对表达量,NO试剂盒测培养液中NO水平,并用统计学方法对上述指标进行组间比较.结果 D组中eNOS及NO含量明显较其他三组高;当参数选择为机械指数1.0、微泡浓度2.5×10~8/ml、辐照时间10 min时,D组中eNOS和NO的增加程度最明显;并且干预后即刻和干预后24 h各组细胞及细胞膜形态结构在光镜下均无显著变化.结论 超声联合微泡辐照能增加内皮细胞中eNOS和NO生成;给予的超声及微泡条件不同,其增强效果也不同.     

FHIT在颊粘膜鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)基因在颊癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组织化学SP法,检测FHIT在40例颊癌组织、30例癌旁组织、10例正常颊粘膜组织中的表达。结果 FHIT蛋白在颊癌组织中的阳性率(45.0%)明显低于癌旁组织(76.7%)。癌旁组织FHIT蛋白阳性率(76.7%)明显低于正常颊粘膜组织(90.0%,),Ⅰ+Ⅱ期者阳性率(70.58%)明显高于Ⅲ+Ⅳ期者(30.43%)。颊癌高、中分化FHIT蛋白阳性率(66.7%)明显高于低分化者(31.25%),淋巴结转移组FHIT蛋白阳性表达率(33.3%)明显低于无淋巴转移组(60.0%),经统计学处理三者表达率比较差异有显着性(P0.05)。结论 FHIT基因在颊癌发生、发展、浸润及转移中具有重要的作用,可作为一种有价值的标志物。     

急性一氧化碳中毒大鼠脑组织nNOS、iNOS的表达

目的：观察神经元型一氧化氮合酶（nNOS)及诱导型一氧化氮合酶（iNOS)存急性一氧化碳（CO）中毒过程中的变化,以探讨CO中毒脑损伤机制。方法：健康Wistar大鼠静急性一氧化碳（CO）中毒过程中的变化,以探讨CO中毒脑损伤机制。方法：健康Wistar大鼠静式吸入2000－2500ppm CO 40-50min以建立实验性急性CO中毒大鼠动物模型,采用冰冻切片技术,运用免疫组织化学SABC方法,分别检测急性CO中毒大鼠中毒后即刻,1h,3h,6,12h,1d,3d,7d各时点nNOS及iNOS在大脑皮质及海马CA1区的表达。结果：C炽毒后1h大脑皮质及海马CA1区nNOS及iNOS在大脑皮质及海马CA1区的表达。结果：CO中毒中1h大脑皮质及海马CA1区nNOS阳性细胞明显增多（P＜0．01）,3h后下降恢复正常;iNOS阳性细胞于CO中毒中3h明显增多,6h达高峰,12h后缓慢下降（P＜0．01）,至3d基本恢复正常,结论：急性CO中毒可致大鼠大脑皮质及海马CA1区nNOS与iNOS阳性细胞数增多,iNOS的变化较nNOS表现出延迟趋势;活性增强的NOS尤其是iNOS尤其是iNOS可能骖与了解性CO中毒所致迟发性脑损伤。