LAIR-2单克隆抗体的制备、鉴定和夹心ELISA方法的建立

为了制备LAIR 2单克隆抗体并建立夹心ELISA方法。应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗LAIR 2单克隆抗体 (mAb )。采用间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定LAIR 2的细胞分布。辣根过氧化物酶 (HRP )标记LAIR 2mAb ,并建立检测LAIR 2的夹心ELISA方法。用重导向杀伤实验 (RCA )鉴定LAIR分子参与调节杀伤功能的关系。结果成功地制备了 3株特异识别LAIR 2的mAb ,1株mAb (3G4 )能够识别LAIR 1和LAIR 2的共同表位 ,但不能在重导向杀伤实验中抑制CD16诱导的杀伤功能。夹心ELISA方法检测LAIR 2的敏感性为 5ng/ml,为LAIR 2的分布及定量检测提供了方法     

肿瘤患者外周血中抑制性受体LAIR-1表达升高

目的:研究LAIR-1在肿瘤患者中的表达,探讨其在抗肿瘤免疫应答中的作用.方法:应用夹心ELISA检测肿瘤患者血清中可溶型sLAIR-1的水平;应用免疫荧光染色和流式细胞术分析,观察LAIR-1在患者PBMC中NK细胞、CD4 T细胞、CD8 T细胞和B细胞上的表达.结果:肿瘤患者血清sLAIR-1水平为(4.6±3.2) μg/ L,明显高于正常人血清sLAIR-1 水平(3.9±3.0) μg/L,P<0.05.NK细胞,CD4 T细胞及CD8 T细胞表达LAIR-1水平上调.肺癌患者CD4/CD8比值明显低于正常人,B细胞百分率明显高于正常人.NK细胞、CD4 T细胞CD8 T细胞中LAIR-1的表达阳性率高于对照组.结论:在肿瘤患者LAIR-1分子表达水平高于正常人.肿瘤患者抑制性受体LAIR-1 表达水平的上调可能与肿瘤的免疫逃逸有关.     

女性甲状腺功能异常患者血清瘦素含量变化观察

目的 :探讨女性甲状腺功能异常患者血清瘦素 (Leptin)水平的变化。方法 :采用放射免疫分析法 (RIA)分别检测 6 0例甲状腺功能亢进、36例原发性甲状腺功能减退和 30例健康人血清Leptin水平 ,并随访经过治疗后甲状腺功能恢复至正常水平患者 (2 4例甲亢、12例甲减 )血清Leptin水平。结果 :各组Leptin水平皆与BMI呈强正相关 (p <0 0 1)。Leptin水平 (甲减组 4 2 1± 1 87μg/L)明显低于健康组 (8 18± 3 31μg/L) ,有统计学意义 (p <0 0 1) ;甲亢组 8 6 1± 3 0 4 μg/L与健康组比较无显著性差异 (p >0 0 5 )。治疗后甲减缓解组Leptin水平 (6 77± 2 35 μg/L)明显高于初诊未治疗组 (4 19± 1 84 μg/L) (p <0 0 5 ) ,接近正常人水平 ;甲亢组治疗前后Leptin水平无明显差异 (p >0 0 5 )。结论 :生理剂量的甲状腺激素可使人体产生足够的Leptin ,维持人体的正常能量代谢。甲状腺功能异常因甲状腺激素的变化而影响了Leptin的正常调节。     

LAIR基因的克隆、原核表达及免疫反应性鉴定

目的：克隆和表达淋巴细胞相关免疫球蛋白样受体(1euko—cyte—associated immunoglobulin—1ike recepto，LAIR)，鉴定抗LAIR—1单克隆抗体(mAb)与LAIR—2分子的免疫反应性。方法：利用RT—PCR，从人外周血单个核细胞(PBMC)及白血病细胞系Jurkat和HL-60中克隆了LAIR cDNA。将LAIR—1的脑膜外区基因及LAIR—2cDNA，克隆入GST融合蛋白表达载体pGEX—4T—3中。以其转化E.cobi菌株后，在IPTG诱导下进行表达，表达产物用谷肮甘肽交联的Sepharose 4B纯化。用间接见ELISA法，鉴定抗LAIR—1mRNA对表达蛋白的免疫反应性。结果：克隆并表达了LAIR—1和LAIR—2cDNA。同时克隆了5种新的LAIR—1异型，其中从HL-60细胞克隆的2种包含LAIR—1开放读框(0RF)，从Jurkat细胞中克隆的3种为LAIR—1cDNA片段。mAb鉴定表明LAIR—1与LAIR—2的免疫反应性不同。结论：LAIR基因的转录、转录后的加工及表达，可能与个体和疾病状态有关。LAIR—1和LAIR—2免疫反应性的不同与其构象有关。     

肾综合征出血热患者血浆和血清可溶性IL-2R水平变化的研究

本文应用双McAb ELISA夹心法检测了HFRS患者血清和血浆中SIL-2R水平。结果表明,急性期患者血浆和血清中sIL-2R水平(分别为199±81U/ml和214±122U/ml)显著地高于恢复期患者(分别为104±37U/ml和97±28U/ml)和正常人(分别为88±31U/ml和71±21U/ml)(P<0.01);在急性期中尤以少尿期升高最明显。表明HFRS患者机体免疫细胞处于高度活化的状态,患者血清和血浆中sIL-2R的检测对于判断病期和指导治疗均有一定的意义。     

儿童肾脏病患者血清白介素-2、白介素-6和胰岛素样生长因子-Ⅱ检测及其临床意义

为观察儿童肾脏病患者血清白介素 - 2 (IL - 2 )、白介素 - 6 (IL - 6 )、胰岛素样生长因子 -Ⅱ (IGF -Ⅱ )的含量 ,探讨细胞因子与肾脏病的关系 ,采用RIA法检测了不同肾脏病儿童患者血清IL - 2、IL - 6、IGF -Ⅱ的水平。结果显示 ,正常儿童血清IL - 2含量为 1 .6 0± 0 .32 μg/L、IL - 6为 37.0± 6 .0ng/L、IGF -Ⅱ为 0 .30±0 .1 5μg/L。正常男女性儿童之间血清三个细胞因子含量无显著性差异 (P >0 .0 5 )。正常儿童与成年人之间三个细胞因子有显著性差异 (P <0 .0 1 )。慢性肾小球肾炎血清IL - 2含量为 1 .96± 0 .4 4 μg/L、IL - 6为 5 4 .9± 2 0 .9ng/L、IGF -Ⅱ为 0 .5 2± 0 .1 5 μg/L ;急性肾炎血清IL - 2含量为 1 .92± 0 .4 7μg/L、IL - 6为 76 .3± 36 .2ng/L、IGF -Ⅱ为 0 .6 2± 0 .2 2 μg/L ;紫癜性肾炎血清IL - 2含量为 1 .91± 0 .33μg/L、IL - 6为 5 5 .5± 1 5 .1ng/L、IGF -Ⅱ为 0 .5 0± 0 .1 9μg/L ;肾病血清IL - 2含量为 1 .96± 0 .6 5 μg/L、IL - 6为 5 6 .2± 2 8.4ng/L、IGF -Ⅱ为 0 .5 9±0 .2 8μg/L ;不同肾脏病儿童三个细胞因子与正常人相比有显著差异 (P <0 .0 1 )。提示 :不同肾脏病儿童血清IL- 2、IL - 6、IGF -Ⅱ含量升高表明 ,这三个细胞因子均积极参与     

检测可溶型CD226双mAb夹心ELISA的建立及初步应用

目的 :建立一种检测可溶型CD2 2 6 (sCD2 2 6 )的双mAb夹心ELISA ,并用于临床标本的检测。方法 :确定包被mAbLeoA1和HRP mAbFMU3的最佳工作浓度及最佳稀释液后 ,建立双mAb夹心ELISA ,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行鉴定。再以建立的方法检测临床标本。结果 :包被mAbLeoA1的最佳工作浓度为 2 .5mg/L ,HRP mAbFMU3的最佳工作浓度 1∶4 0 0 ,标准品及HRP mAb的最佳稀释液分别为 1g/LBSA 1mL/LTween2 0 PBS和 30 g/LPEG PBS .建立的双mAb夹心ELISA ,其特异性 (与人IgG无交叉反应 ,阻断实验中阻断效应呈剂量依赖性 )、敏感性 (检出下限为 110ng/L标准品CD2 2 6 /Fc融合蛋白 )及稳定性 (CV <10 .2 % )均较良好。对部分临床标本的检测中 ,发现 6例类风湿关节炎(RA)患者血清sCD2 2 6的水平升高 ,与正常人血清sCD2 2 6水平相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :建立一种特异性高、重复性好、较敏感的检测sCD2 2 6的双mAb夹心ELISA ,初步证明可用于临床标本的检测     

卡介苗多糖核酸对过敏性支气管哮喘外周血单个核细胞TH1/TH2反应的作用

目的观察卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)对支气管哮喘患者外周血淋巴细胞TH1/TH2反应的作用,并与结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)进行比较. 方法缓解期过敏性支气管哮喘患者16例,对照组健康成人13例,分离外周血单个核细胞(PBMC),分别加入不同浓度的BCG-PSN(1、10、100、1000 μg/ml)、TB-PPD(10 μg/ml)、尘螨抗原(DerP, 10 μg/ml)体外培养4 d,不加刺激剂者为阴性对照.收集培养上清,ELISA检测IFN-γ、IL-5浓度的变化. 结果 PSN(1～100 μg/ml)刺激正常人PBMC分泌IFN-γ水平均高于哮喘患者(P＜0.05).BCG-PSN(10 μg/ml)可以刺激哮喘患者PBMC分泌IFN-γ(358.7 pg/ml,范围0～2433.0 pg/ml),但显著低于同等浓度的TB-PPD刺激作用(13 036 pg/ml,范围600.5～35 100.0 pg/ml,P＜0.01).PSN刺激PBMC分泌IFN-γ呈浓度依赖性,当浓度达到100 μg/ml时,与低浓度相比刺激作用显著增强(P＜0.01),与TB-PPD的刺激作用类似.DerP刺激哮喘患者PBMC分泌IL-5水平显著高于正常人(P＜0.05).BCG-PSN刺激PBMC分泌IL-5的作用较弱,显著低于TB-PPD和DerP的刺激作用. 结论 BCG-PSN具有一定的TH1刺激作用,但低于TB-PPD的刺激作用,有待对BCG-PSN组分进一步优化以增强疗效.     

健康人与代谢性骨病患者血清骨钙素水平及其意义

目的 :研究正常与病理状态下血清骨钙素 (S -BGP)变化及其临床意义。方法 :采用放射免疫分析法观察了 2 70例不同年龄段 (每隔 1 0岁为一年龄段 )健康人 ,60例脑血管疾病以及 85例代谢性骨病患者的S -BGP水平。结果 :(1 ) 89例新生儿脐血S -BGP浓度为 1 9 3± 1 6 8μg/L ,2 2例出生 3天婴儿S -BGP浓度为 7 4± 2 3μg/L ,1 0 0例正常人 (1 1～ 60岁 ,平均年龄 39岁 )S -BGP浓度为 5 2± 1 35μg/L ,其中 :男性 5 3±1 4μg/L(n =47) ,女性 5 1± 1 34μg/L(n=53)。 30例老年健康人S -BGP浓度为 3 9± 1 48μg/L。S -BGP与年龄呈明显负相关 (r=- 0 383 ,P <0 0 0 1 )。 (2 ) 85例代谢性骨病患者S -BGP浓度 :甲亢患者 2 1 7± 2 0 46μg/L ,与正常组比较差异非常显著 (P <0 0 1 ) ;老年糖尿病 (NIDDM)患者 2 6± 0 99μg/L ,与正常老年健康组比较差异非常显著 (P <0 0 1 )。 (3) 60例老年脑血管疾病患者S -BGP水平 :脑梗塞 2 2± 1 1 μg/L ,脑出血 2 5± 1 2 μg/L ,与正常老年健康组比较差异非常显著 (P <0 0 1 )。结论 :本文结果表明 ,S -BGP的放射免疫分析是研究正常与病理状态下骨代谢变化的重要检测手段     

识别不同结构域的PTA1/CD226的mAb与活化血小板的关系

目的:研究识别不同PTA1/CD226分子结构域的mAb与刺激血小板活化的关系。方法:采用识别不同结构域的抗PTA1/CD226的mAb(FMU17),应用免疫荧光染色、流式细胞术和血小板凝集试验,研究识别不同结构域mAb对血小板的活化作用。结果:识别CD226第1个结构域的3株mAb(FMU1、2和3)可以与血小板结合,并可刺激血小板发生凝集,而识别CD226第2个结构域的mAbFMU6、FMU7以及识别两个结构域之间序列的FMU4和FMU5既不能与血小板表面天然的CD226分子结合,也不能刺激血小板活化。结论:抗PTA1/CD226mAb刺激血小板活化与抗体识别的结构域有关。     

9.1C3/LAIR-1的真核表达、纯化及单克隆抗体的制备和鉴定

目的 表达并纯化9.1C3/LAIR-1胞膜外区与人IgCl Fc段的融合蛋白，轩针对9.1C3/LAIR-1胞膜外区的单克隆抗体（mAb)。方法 构建真核表达载体pIg/3C-9.1C3/LAIR-1,表达并纯化9.1C3/LAIR-1－Fe融合蛋白。以9.1C3/LAIR-1－Fc融合蛋白免疫BALB／c小鼠，制备。以间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定mAb的特异性，以竞争结合实验鉴定mAb识别LAIR－1的表位。结果表达并经9.1C3/LAIR-1－hIgFc融合蛋白，以其免疫BALB／c小鼠，获得1株针对9.1C3/LAIR-1胞膜外区的mAb 4H7。4H7对HL－60细胞和经9.1C3/LAIR-1 cDNA转染的COS7 的表位识别，与已报道的抗9.1C3 mAb体不同。 结论 成功地构建了9.1C3/LAIR-1胞膜外区基因的真核表达载体，并表达纯化了9.1C3/LAIR-1－hIgFc融合蛋白。获得一株针对9.1C3/LAIR-12胞膜外区的mAb，为进一步研究9.1C3/LAIR-1分子的2结构和功能提供了新的手段。     

霉酚酸影响T细胞增殖及细胞因子表达的体外实验

目的： 探讨霉酚酸（MPA）或与抗B7-1单克隆抗体联用对T细胞增殖的影响及其机制。 方法： 体外建立T细胞反应系统，BrdU掺入法检测T细胞增殖，RT-PCR及ELISA法检测细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-10的mRNA及蛋白表达水平。 结果： （1）50 μmol/L MPA能明显抑制T细胞增殖，与对照组相比，差异显著（P＜0.01)。（2）MPA可抑制IL-2、IFN-γ表达，增强IL-10表达。IL-2蛋白表达水平在MPA 组明显低于对照组(42.73 ng/L±14.64 ng/L vs 99.70 ng/L±9.15 ng/L，P＜0.01)；IFN-γ蛋白表达水平在MPA组明显低于对照组（7.87 ng/L±4.22 ng/L vs 82.42 ng/L±25.55 ng/L，P＜0.05)；与对照组比较，MPA明显增强IL-10表达水平（770.95 ng/L±126.85 ng/L vs 545.71 ng/L±22.45 ng/L，P＜0.05）；联用抗B7-1单抗能加强此效应（941.90 ng/L±56.61 ng/L vs 770.95 ng/L±126.85 ng/L，P＜0.05)。（3）IL-2、IFN-γ mRNA表达量在MPA组均明显低于对照组（0.74±0.10 vs 1.17±0.15，0.52±0.05 vs 0.75±0.12，P＜0.01）；IL-10 mRNA表达水平在MPA处理组与对照组间差异不明显，但与抗B7-1单抗联用后，其表达水平高于单用MPA组（1.28±0.06 vs 0.84±0.09，P＜0.01）。 结论： MPA可改变细胞因子表达谱，促使Th1亚群向Th2亚群偏移可能是其发挥免疫负调节作用的机制之一；联用抗B7-1单抗可能有一定协同效应。     

Differentiation of hepatitis B virus genotypes D and E by ELISA using monoclonal antibodies to epitopes on the preS2-region product

An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) has been described for serological determination of hepatitis B virus genotypes, using monoclonal antibodies (mAb) against seven distinct epitopes (b, m, k, s, u, f and g) on the preS2-region products of hepatitis B surface antigen (HBsAg). The usefulness of this method for serological detection of genotype E, however, was theoretical, because no HBsAg samples of this genotype were included in the original test panel. Moreover, the predicted serotype of genotype E (bksufg) closely resembled that of genotype D (bksu, bksuf or bksug). Four HBsAg samples of genotype E were tested by the original described ELISA. The epitope g, predicted to be present in these samples by amino acid sequences, was not detected when HBsAg of genotype E was captured on a solid phase by mAb to the common determinant 'a' of HBsAg and then reacted with mAb to g (5156) labeled with horseradish peroxidase. However, the four examples of HBsAg of genotype E were captured by mAb 5156 to g on a solid phase; they were then detected by labeled mAb to the common determinant 'a'. Since epitopes f and g co-occurred on HBsAg of genotype E, HBsAg samples of this genotype were also detected, by 'sandwiching' them between immobilized mAb to g and labeled mAb to f. By contrast, HBsAg of genotype D in 90 sera was not reactive when sandwiched between mAb to f and g. Thus, this modified ELISA enables the serological determination of all six genotypes of HBsAg and, by inference, of hepatitis B virus.     

抗Ig融合蛋白Fc段单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究

目的：制备并鉴定抗Ig融合蛋白Fc段的单克隆抗体(mAb)，建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法和纯化Fc融合蛋白的亲和层析法。方法：以hBCMA—Ig融合蛋白为抗原免疫BALB／c小鼠，通过细胞融合制备抗Fc段mAb，用ELISA等方法鉴定mAb的Ig亚类、表位以及种属特异性，建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法;Western blot检测mAb对变性Ig融合蛋白的反应性。将mAb与Sepharose4B交联，制备亲和层析柱，对LAIR1-Ig融合蛋白进行纯化。结果：获得7株稳定分泌抗Fc段mAb的杂交瘤(FMUFcl-FMUFc7)。利用FMUFc4作为包被mAb，FMUFc5作为酶标记mAb，成功地建立了检测Ig融合蛋白的ELISA法，敏感度达到2μg／L；在7株mAb中，FMUFc6可用于Ig融合蛋白的western blot检测。用FMUFc 6mAb制备的亲和层析柱，可有效地纯化LAIRl—Ig融合蛋白。结论：成功地制备了抗Ig融合蛋白Fc段的mAb，建立了可用于Ig融合蛋白检测和纯化的方法，为Ig融合蛋白的应用提供了有力手段。     

同时检测HIV抗体及p24抗原快速诊断试剂的研制

目的：研制可同时检测HIV－1、HIV－2抗体及p24抗原的胶体金快速诊断试剂。方法：利用重组杆状病毒－昆虫细胞系统进行HIV－1 gp41及HIV－2 gp36抗原的高效表达，以免疫亲和层析法纯化抗原。抗－HIV p24单克隆抗体杂交瘤细胞株，并制备抗－HIV p24单克隆抗体。以硝酸基纤维膜为载体，以纯化的HIV－1 gp41、HIV－2 gp36抗原及抗p24抗体点膜，20nm胶体金颗粒／抗人IgG和抗－HIV p24单克隆抗体进行标记，对33份已知HIV感染者阳性血清及6份阴性血清进行检测。结果：通过重组杆状病毒－昆虫细胞系统进行HIV－1 gp41及HIV－2 gp36抗原的表达，可获取浓度为2．0mg/L的纯化抗原。从抗p24单克隆抗体杂交瘤细胞株中培养上清液，通过葡萄球菌蛋白A免疫亲和层析柱可得到1．5mg/L的纯化抗体。利用纯化的抗原抗体进行标记，对39份已知血清进行检测，与荷兰Organon公司HIV1＋2抗体、p24抗原、ELISA诊断试剂同时检测结果进行比较，证实有较强的特异性及敏感性。结论：同时检测HIV－1、HIV－2抗体及p24抗原快速诊断试剂的问世，可为HIV感染的诊断提供一个简便、可靠、敏感的方法。     

Calreticulin is a B cell molecular target in some gastrointestinal malignancies

Calreticulin, upon translocation to the cell surface, plays a critical role in the recognition of tumour cells and in experimentally induced cellular anti‐tumour immunity. However, less is known about anti‐calreticulin antibodies and their role in malignancies. Using enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA), we found immunoglobulin (Ig)A and/or IgG anti‐calreticulin antibodies in sera of approximately 63% of patients with hepatocellular carcinoma (HCC), 57% of patients with colorectal adenocarcinoma (CRA) and 47% of patients with pancreatic adenocarcinoma (PACA), while healthy controls, patients with viral hepatitis C and with chronic pancreatitis reached only 2%, 20% and 31% seropositivity, respectively. We found significantly elevated mean levels of IgA anti‐calreticulin antibodies (P < 0·001) in patients with HCC (78·7 ± 52·3 AU, mean ± standard deviation), PACA (66·5 ± 30·9 AU) and CRA (61·8 ± 25·8 AU) when compared to healthy controls (41·4 ± 19·2 AU). Significantly elevated mean levels of IgG anti‐calreticulin antibodies (P < 0·001) were detected in patients with HCC (121·9 ± 94·2 AU), gall bladder adenocarcinoma (118·4 ± 80·0 AU) and PACA (88·7 ± 55·6 AU) when compared to healthy controls (56·7 ± 22·9 AU). Pepscan analysis revealed a large number of antigenic epitopes of calreticulin recognized by both IgA and IgG antibodies of patients with HCC and PACA, indicating robust systemic immune response. Moreover, significantly elevated levels of antibodies against peptide KGEWKPRQIDNP (P < 0·001) in these patients, tested by ELISA, confirmed the distinct character of antibody reactivity against calreticulin. The high occurrence and specificity of serum anti‐calreticulin autoantibodies in the majority of patients with some gastrointestinal malignancies provide the evidence for their possible clinical relevance.     

Enzyme‐linked immunosorbent assay for detection and survey of ochratoxin a in livestock sera and mixed feeds

By a combination of monoclonal antibody (mAb)‐based enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA) and a simplified extraction procedure, the contents of ochratoxin A (OTA) in pig, cow and horse serum and in mixed feeds for pigs were analyzed. Preliminary ELISA with anti‐OTA mAb. 7/alkaline phosphatase (ALP)‐labelled second antibody has revealed that all 19 sera of pigs contained OTA at an average of 0–4 ngml^‐1, and these data were closely correlated with HPLC analysis (r = 0.903). OTA in the sera was confirmed by both chemical methylation and enzymatic hydrolysis. The levels of OTA in one fetal pig serum sample and in five cow serum samples were below the detection limit of the ELISA (<0.1 ngml^‐1). HPLC analysis revealed 0.3 and 0.7 μg kg^‐1 of OTA in two samples of mixed feeds. The second survey on 139 serum samples with an improved ELISA utilizing horseradish peroxidase (POD) as enzyme label giving a detection limit of 0.01 ngml^‐1) has demonstrated average levels of 0.36, 0.02 and 0–11 ng ml^‐1 for OTA in serum from pig (124 samples), cow (14 samples) and horse (1 sample), respectively. The third survey on 17 pig sera also demonstrated that all samples were contaminated with OTA at an average of 5.2 ngml^‐1. These three trials indicated that the present procedure based on the ELISA with anti‐OTA mAb. 7/POD‐labelled second antibody and the simple extraction procedure is an excellent tool for mass survey of OTA in livestock sera. This is the first report demonstrating the natural occurrence of OTA in livestock sera and mixed feeds in Japan.     

建立夹心ELISA检测RANTES方法及在小肠移植中的应用

背景：RANTES 及其受体介导的细胞免疫是同种异体小肠移植急性排斥反应发生的重要组成部分,小肠移植后血清中RANTES 水平有可能作为早期检测急性排斥反应发生的较敏感的免疫指标。 目的：建立夹心ELISA检测RANTES的方法,并将其应用于大鼠小肠移植模型,探讨其作为检测早期急性排斥反应指标的可能性。 方法：以辣根过氧化物酶标记RANTES mAbs,通过竞争ELISA检测抗RANTES mAb 识别的表位,建立双夹心ELISA试剂盒并检测其敏感性,然后将其应用于大鼠小肠移植模型中RANTES的检测。 结果与结论：以anti-RNATES mAb No.2 (5 mg/L) 为包被抗体,HRP-anti-RNATES mAb No.4(1∶800)为酶标抗体建立了双抗体夹心ELISA法,其敏感性达到0.5 μg/L。异基因大鼠小肠移植模型术后血清RANTES明显增高。提示成功建立了特异性强、灵敏度良好的检测RANTES的双抗体夹心ELISA法,为早期诊断小肠移植排斥反应提供了一种新的方法。