HPLC法测定丹参中丹酚酸B

丹参是唇形科植物Salvia miltiorrhiza Bunge的根，为常用中药，性微寒、味苦，归心、肝经；具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功能。我国应用丹参已有近2000年的悠久历史，始载于东汉《神农本草经》，列为上品。丹参有效成分主要有水溶性的酚酸类，包括丹参素、丹酚酸B等；脂溶性的二萜醌类，包括丹参酮ⅡA等。其中，主要水溶性成分丹酚酸B（salvianolic acid B）为三分子丹参素与一分子咖啡酸缩合而成，对其的测定方法已有文献探讨，但对丹参药材中丹酚酸B量的集中范围进行大规模考察还未见报道。本实验对80个丹参样品进行测定，并对数据进行归纳总结。     

丹参中丹酚酸B的药理研究进展

传统的活血化瘀中药丹参为唇形科植物鼠尾草丹参（salvia miltiorrhiza．Bge）的干燥根及根茎。具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦功能。主治月经不调、经闭痛经、瘕瘕积聚、胸腹刺痛、疮疡止痛、心烦不眠、肝脾肿大及心绞痛等.     

丹参中丹酚酸B的提取工艺研究

丹参水溶性有效成分多具有酚酸性结构,主要由丹参素,丹酚酸A、B、C、D、E等含酚羟基的化合物构成,其中丹酚酸B的量最高,为3个分子丹参素与1个分子咖啡酸缩合而成,是丹参发挥疗效作用的主要物质之一。目前研究较多的有总丹酚酸(totalsalvianolic acid)、丹酚酸A(salvianolic acid A)和丹酚酸B(salvianolic acid B)[1]。本实验针对丹酚酸B对热的不稳定性,本实验比较了水提法、超声提取法和闪式破碎提取法处理丹参样品,为进一步优化丹酚酸B的提取条件提供参考。1仪器与试剂日本岛津LC—2010A高效液相色谱仪,KQ—300VDE超声提取器(昆山…     

浓缩干燥对丹参提取液中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的影响

目的考察浓缩及干燥方法对丹参提取液中丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量的影响。方法采用2005年版《中国药典》中丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量测定的HPLC法,测定不同浓缩干燥工艺中丹参酮ⅡA、丹酚酸B的含量,并计算各工序步骤的转移率。结果减压浓缩丹参酮ⅡA损失约6．92％、丹酚酸B损失约7．04％;常压浓缩丹参酮ⅡA损失约41．51％、丹酚酸B损失约20．40％;减压干燥丹参酮ⅡA损失约33．78％、丹酚酸B损失约13．92％;常压干燥丹参酮ⅡA损失约79．73％、丹酚酸B损失约41．94％。结论减压浓缩和减压干燥可以显著减少丹参酮ⅡA、丹酚酸B的损失。     

超微粉碎对提取丹参药材中丹参酮ⅡA和隐丹参酮的影响

目的 探讨超微粉碎对提取丹参药材中丹参酮ⅡA和隐丹参酮的影响.方法 丹参根经普通粉碎和超微粉后得粗粉和超微粉,用乙醇提取后,用HPLC法分别测定其丹参酮ⅡA和隐丹参酮的含量.结果 丹参酮ⅡA和隐丹参酮粗粉含量分别为0.896%和0.346%,而超微粉为1.012%和0.513%,为粗粉提取的1.13倍和1.48倍.结论 超微粉碎为植物药提取的前处理又提供了一个新方法,为高效的使用中药材提供了一个新的研究方向.     

HPLC法测定药典方丹参片中丹参酮ⅡA及丹酚酸B的含量

目的：完善药典方丹参片的质量标准，测定制剂中丹参酮ⅡA及丹酚酸B的含量，考察制备工艺中有效成分的转移率。方法：采用HPLC法进行含量测定。丹参酮ⅡA，以甲醇-水（80∶20）为流动相，检测波长为270 nm；丹酚酸B以甲醇-乙腈-甲酸-水（30∶10∶1∶59），检测波长为286 nm。结果：3批丹参片平均含丹参酮ⅡA 2.83 mg/g，转移率为42.3%；丹酚酸B含量为 51.8 mg/g，转移率为50.9%。结论：建立了丹参片中丹参酮ⅡA的含量测定方法，可以更好地控制丹参片的质量。     

HPLC同时测定丹参中丹参酮ⅡA与丹酚酸B的含量

目的:建立丹参中丹参酮ⅡA与丹酚酸B同一的HPLC测定方法。方法:采用高效液相色谱法,以梯度洗脱的方式,60 min内在同一谱中完成脂溶性成分丹参酮ⅡA和水溶性成分丹酚酸B的含量测定。结果:丹参酮ⅡA在0.006~0.014 mg/ml范围内线性关系良好(r=0.9998),回收率为99.41%,RSD为0.92%;丹酚酸B在0.0192~0.2128 mg/ml线性关系良好(r=0.9998),回收率为99.30%,RSD为0.89%。结论:HPLC法快速、简便、准确,可以同时测定丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量。     

HPLC法测定丹参不同饮片中丹参酮ⅡA及丹酚酸B的含量

目的:比较加工炮制对丹参不同饮片中丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量的影响.方法:采用高效液相色谱法,检测丹参酮ⅡA流动相为甲醇-水(75:25),检测波长270nm,流速1.0ml/min;检测丹酚酸B流动相为甲醇-水-冰醋酸(40:60:2),检测波长286nm,流速1.0ml/min.结果:丹参不同炮制品中丹参酮ⅡA含量由高到低为:丹参片炒丹参酒丹参;而丹酚酸B的含量由商到低为:炒丹参丹参片酒丹参.结论:丹参经不同炮制后其醇溶性化合物如丹参酮ⅡA和水溶性化合物如丹酚酸B有明显差异.     

市售9批丹参药材中丹参酮Ⅱ_A和丹酚酸B含量测定

目的比较市售9批丹参药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量差异。方法按照2010年版《中华人民共和国药典》要求,采用HPLC测定9批市售丹参药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量。结果丹参酮ⅡA含量6号(安徽野生)样品最高,为0.309 3%;8号(山东栽培)样品最低,仅为0.044 7%。丹酚酸B含量9号(山东野生)样品最高,为4.410 0%;2号(四川栽培)样品最低,为3.533 3%。结论目前市场上丹参质量差异很大,建议加强对丹参药材种植的规范化管理。     

HPLC法测定中风通络丸中丹参酮Ⅱ_A和丹酚酸B的含量

目的:建立中风通络丸中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量同时测定法。方法:色谱柱为依利特Hypersil-ODS(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%甲酸溶液;梯度洗脱:0~15 min,乙腈10%~20%;15~25 min,乙腈20%~50%;25~35 min,乙腈50%~60%;35~40 min,乙腈60%~95%,;流速为1.0 mL·min-1;检测波长:丹参酮ⅡA为270 nm,丹酚酸B为286 nm;柱温为30℃。结果:丹参酮ⅡA的线性方程为:Y=4×106X+175439(r=0.9998),线性范围为0.1861~0.4839μg,加样回收率为99.15%,RSD为1.20%;丹酚酸B的线性方程为:Y=2×106X+36551(r=0.9998),线性范围为0.6258~2.1902μg,加样回收率为100.19%,RSD为1.44%。结论:本方法操作简便,结果可靠,重现性好,可以用于中风通络丸的质量控制。     

高效液相色谱法测定参斛颗粒剂中丹参酮ⅡA与丹酚酸B的含量

目的 建立简便迅速的参斛颗粒剂中丹参酮ⅡA与丹酚酸B的含量测定方法. 方法采用高效液相色谱法,使用C柱,分剐以甲醇-水(85:25)和甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1:59)为流动相,检测波长:270 nm 、286 nm;流速:1mL/min;柱温:室温. 结果在此色谱条件下丹参酮ⅡA在含量0.1～0.5 μg线...     

丹酚酸B和丹参酮ⅡA不同配比对肿瘤坏死因子α损伤大鼠心脏微血管内皮细胞的影响

目的 观察不同配比的丹酚酸B(SalB)、丹参酮ⅡA(TanⅡA)对体外肿瘤坏死因子α(TNF—α)损伤大鼠心脏微血管内皮细胞(CMEC)的影响。方法 采用CMEC体外培养技术，建立TNF—α损伤模型，以细胞活力，细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放、一氧化氮(NO)合成、内皮素(ET)分泌、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的变化为评价指标，观察SalB和TanⅡA不同配比(10：0，8：2，5：5，2：8，0：10)对TNF-α损伤CMEC的保护作用。结果 SalB和TanⅡA(5：5)组明显提高细胞活力，SalB和TanⅡA(8：2)组显著降低LDH释放水平，TanⅡA促进NO合成、降低ET分泌以及抗氧化的作用最好。结论 SalB和TanⅡA的各配比组均能明显改善细胞的损伤，最佳配比根据检测指标的不同而不同。     

丹酚酸B、丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化家兔血清一氧化氮及甘油三酯的影响

[目的]观察丹参水溶性成分丹酚酸B和脂溶性成分丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化模型血清一氧化氮(NO)及甘油三酯(TG)浓度的影响,以寻找其作用耙点。[方法]复制家兔动脉粥样硬化模型,分别用放射性免疫方法和比色法检测血清NO和TG浓度,观察丹酚酸B和丹参酮ⅡA抗动脉粥样硬化的作用异同。[结果]丹酚酸B和丹参酮ⅡA都能增加动脉粥样硬化家兔血清NO浓度,降低血清TG浓度。但升高NO的作用丹参酮ⅡA优于丹酚酸B;降低TG作用丹酚酸B优于丹参酮ⅡA。[结论]丹参水溶性成分与脂溶性成分都能调节血清NO及TG浓度而达到抗动脉粥样硬化的作用,但具体作用机制有所不同。     

丹酚酸B、丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化家兔血清一氧化氮及甘油三酯的影响*

[目的]观察丹参水溶性成分丹酚酸B和脂溶性成分丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化模型血清一氧化氮(NO)及甘油三酯(TG)浓度的影响,以寻找其作用耙点.[方法]复制家兔动脉粥样硬化模型,分别用放射性免疫方法和比色法检测血清NO和TG浓度,观察丹酚酸B和丹参酮ⅡA抗动脉粥样硬化的作用异同.[结果]丹酚酸B和丹参酮ⅡA都能增加动脉粥样硬化家兔血清NO浓度,降低血清TG浓度.但升高NO的作用丹参酮ⅡA优于丹酚酸B;降低TG作用丹酚酸B优于丹参酮ⅡA.[结论]丹参水溶性成分与脂溶性成分都能调节血清NO及TG浓度而达到抗动脉粥样硬化的作用,但具体作用机制有所不同.     

丹酚酸B、丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化模型内皮细胞功能的影响

[目的]探讨丹参水溶性成分丹酚酸B和脂溶性成分丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化模型内皮细胞功能的影响,以寻找其作用靶点。[方法]复制家兔动脉粥样硬化模型,放射性免疫方法检测血浆血栓素(TXB₂)、6酮前列腺素F_1α(6-keto-PGF_1α)、内皮素(ET)浓度,观察丹酚酸B和丹参酮ⅡA对内皮细胞功能的影响。[结果]丹酚酸B能够减少动脉粥样硬化家兔血浆TXB₂、ET浓度,增加6-keto-PGF_1α浓度,丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化家兔血浆TXB₂、6-ke-to-PGF_1α、ET没有明显影响。[结论]丹参水溶性成分与脂溶性成分在治疗动脉粥样硬化过程中作用靶点及机制不同。     

HPLC法同时测定中药丹参中水溶性和脂溶性成分的含量

目的:建立同时测定丹参中2种水溶性成分和2种脂溶性成分的方法。方法:HPLC-DAD法,采用Agilent Zorbax TC C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇2%醋酸为流动相进行梯度洗脱:0～15 min,30% B～40% B; 15～20 min,40% B～60% B; 20～25 min,60% B～90% B; 25～40 min,90% B。检测波长为281 nm,柱温:35℃。结果:迷迭香酸、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮ⅡA浓度分别在3.76~120.20 μg·ml-1 (r=0.999 9)、34.20~1 094.5 μg·ml-1 (r=0.999 9)、0.64~20.32 μg·ml-1 (r=0.999 9)、1.02~32.72 μg·ml-1 (r=0.999 6)范围内呈良好的线性关系。4种成分精密度试验RSD <1%。48 h内稳定性RSD<1%。加样回收率为99.72%～100.63%。结论:该含量测定方法简便,分离效果好,能同时测定丹参中迷迭香酸、丹酚酸B、隐丹参酮及丹参酮ⅡA四种有效成分的含量,结果准确可靠。     

丹酚酸B及丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化IL-8及VCAM-1的影响

目的:观察丹参水溶性成分丹酚酸B和脂溶性成分丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化形成时炎症反应的影响,以探讨其抗动脉粥样硬化的作用靶点与机制。方法:建立家兔动脉粥样硬化模型,放射性免疫方法检测血清白介素-8(IL-8)浓度、免疫组化方法进行主动脉血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)染色,观察丹酚酸B和丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化的影响。结果:丹酚酸B和丹参酮ⅡA均能减少动脉粥样硬化家兔主动脉VCAM-1的表达,而丹酚酸B作用更明显;丹参酮ⅡA能显著降低动脉粥样硬化家兔血清IL-8浓度,丹酚酸B对IL-8没有明显影响。结论:丹酚酸B与丹参酮ⅡA均可防治动脉粥样硬化,但作用靶点及机制有所不同。     

HPLC法同时测定养心宁神丸中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量

目的建立高效液相色谱法测定养心宁神丸中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的质量分数。方法采用Agilent ZORBAX XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈为流动相A,0.1%(体积分数)H3PO4溶液为流动相B,梯度洗脱,流速:1.0 m L/min,柱温:30℃。结果丹参酮ⅡA和丹酚酸B分别在1.444~14.44μg/m L(R=0.999 9)、38.84~388.4μg/m L范围内(R=0.999 5)呈良好的线性关系,平均回收率分别为101.42%(RSD=3.06%)、101.97%(RSD=2.23%)。结论本方法简便、快捷、重复性好,可以用于养心宁神丸的质量控制。     

丹参中总酚酸的大孔吸附树脂分离纯化与富集

丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bunge的干燥根及根茎,具有活血祛瘀,消肿止痛,养血安神的功效.已上市治疗心血管疾病的中药复方中,很多以丹参入药.