外周血结核感染T细胞斑点试验在结核病中的应用价值研究

目的 探讨外周血结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）在结核病中的应用价值。方法 回顾行T-SPOT.TB检查的住院疑似结核病患者536例;根据患者诊断分为结核病组和非结核病组;根据活动性、病变部位和化疗史将结核病患者分为活动性结核组和非活动性结核组,肺结核组、肺外结核病组和混合组,初治结核组和复治结核组。比较上述各组间T-SPOT.TB诊断价值以及分析肺外结核组各种结核病阳性率。结果536例患者中有344例确诊为结核病,其中T-SPOT.TB试验阳性296例,阴性48例,灵敏度为86.0%（296/344）;192例非结核病患者中,T-SPOT.TB阴性162例,特异度为84.4%（162/192）。非活动性结核组和活动性结核组阳性率分别为44.4%和88.4%（P＜0.01）。肺结核组、肺外结核病组和混合组阳性率分别为87.3%、70.4%和94.3%（P＜0.01）;初治结核组和复治结核组阳性率分别为87.1%和100%（P＜0.05）。肺外结核以结核性脑膜炎、胸膜炎和腹膜炎最常见,结核性脑膜炎阳性率最低为42.9%。结论外周血T-SPOT.TB试验在诊断住院患者结核病中具有很高的灵敏度和特异度;活动性结核和复治结核敏感度高于非活动性结核和初治结核;结核性脑膜炎敏感度不高,而在其它肺外结核具有较高临床应用价值。     

γ-干扰素释放试验在肺外结核病诊断中的临床意义

目的:评价γ-干扰素释放试验T-SPOT.TB检测外周血结核分枝杆菌抗原特异性γ-干扰素水平在肺外结核病诊断中的临床意义。方法:选取肺外结核患者(肺外结核组,30例)和健康人(健康对照组,31例)外周血单个核细胞(PBMC),利用结核分枝杆菌特异抗原ESAT-6和CFP-10与PBMC共同培养,采用ELISPOT检测培养液中IFN-γ浓度。比较T-SPOT.TB与TST及相关指标TB-AB、ESR、ADA等的结果。结果:T-SPOT.TB检测在肺外结核病中的敏感性是93.3%,高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组间TST阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在健康对照组中,T-SPOT.TB检测特异性(93.5%)高于TST(54.8%),结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。肺外结核组TB-AB,ESR,ADA水平高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:T-SPOT.TB检测法对肺外结核病诊断特异性高,优于TST试验,其联合TB-AB、ESR、ADA等对于肺外结核病的诊断意义更大。     

结核感染T细胞斑点试验及结核抗体在肺外结核病诊断中的临床意义

目的探讨结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT．TB）及抗结核抗体（38kD—IgG）试验在肺外结核病诊断中的临床价值。方法分析入院疑患肺外结核治疗的患者68例,其中确诊结核47例,非结核患者21例。用上述两种方法分别检测68例患者,并将二者的结果进行比较。结果T—SPOT．TB试验检测确诊结核病人的阳性率为78．7％（37／47）明显高于用结核抗体法检测确诊结核病人的阳性率59．5％（28／47）（P〈O．05）。二者的特异度分别为95．2％和71．4％,T—SPOT．TB检测特异度明显高于结核抗体检测（p〈0．05）。结论T-SPOT．TB检测是诊断肺外结核的快速敏感方法,在肺外结核性疾病诊断中有重要价值,可作为临床结核病的有效辅助诊断手段。     

结核感染T细胞斑点试验在HIV/AIDS 合并结核病诊断中的应用

目的 探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测在HIV/AIDS合并结核病诊断中的应用价值。方法 选取HIV阳性结核病患者44例、同期住院的HIV阴性结核病患者42例和HIV阳性非结核病患者28例。对3组患者的T-SPOT.TB、血结核抗体试验及外周血CD4⁺T细胞绝对计数等结果进行回顾性分析。结果 T-SPOT.TB对HIV阳性患者诊断结核病的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为81.82％、85.71％、90.00％、75.00％,其中灵敏度、阳性预测值与阴性预测值明显高于结核抗体检查,差异有统计学意义(P＜0.01)。HIV阳性结核病组T-SPOT.TB灵敏度(81.82％)与HIV阴性结核病组T-SPOT.TB灵敏度(83.33％)比较,差异无统计学意义(P=0.54),但HIV阳性结核病组结核抗体检查的灵敏度(25.00％)明显低于HIV阴性结核病组(57.14％)(P＜0.01)。HIV阳性结核病组中,T-SPOT.TB在菌阳肺结核、菌阴肺结核、肺外结核3种不同类型结核病患者中的灵敏度分别是71.43％、85.71％、88.89％,三者之间差异无统计学意义(P=0.586)。T-SPOT.TB在CD4⁺T淋巴细胞≤200个/μl的HIV合并结核病患者中的灵敏度为62.50%,低于CD4⁺T淋巴细胞＞200个/μl组(92.86%),差异有统计学意义(P=0.019)。结论 T-SPOT.TB灵敏度和特异度较高,对HIV/AIDS合并结核病具有较大的辅助诊断价值。CD4⁺T淋巴细胞的数量对T-SPOT.TB灵敏度有一定影响。     

胸腔积液TBAg/PHA比值在结核性胸膜炎早期诊断中的应用价值

目的探讨胸腔积液结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)中结核特异性抗原(TBAg)与植物血凝素(PHA)两者的定量比值(TBAg/PHA)对结核性胸膜炎(TBP)的诊断价值。方法分析2018年1月至2019年3月广州市胸科医院胸腔积液患者447例的临床资料,447例患者中TBP组为316例,非TBP组为131例。进行胸腔积液T-SPOT.TB检测,并对敏感度、特异度、准确度等指标进行诊断性试验评价。结果胸腔积液T-SPOT.TB试验诊断TBP的敏感度为82.3%,特异度为82.4%,准确度82.3%,阳性预测值和阴性预测值分别为91.8%、65.9%。当采用0.25作为TBAg/PHA比值的截断值时,诊断TBP的敏感度、特异度和ROC曲线下面积分别为84.8%、93.5%、0.862(95%CI:0.800～0.925)。TBP组的胸腔积液T-SPOT.TB结果阳性率为82.3%,非TBP组为17.6%,差异有统计学意义(P0.05)。比较胸腔积液T-SPOT.TB试验结果中ESAT-6 sfc、CFP-10 sfc、PHA sfc、ESAT-6/PHA比值、CFP-10/PHA比值和TBAg/PHA比值。除PHA sfc外,TBP组的其他各项指标均高于非TBP组,差异有统计学意义(P0.05)。结论胸腔积液TSPOT.TB试验采用TBAg/PHA比值法对TBP的早期诊断价值明显优于T-SPOT.TB试验定性的结果。     

T细胞斑点试验在泌尿系结核患者诊断中的价值

目的 探讨外周血结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）在泌尿系结核诊断及鉴别诊断中的临床应用价值。方法 收集2013年1月—2015年2月黑龙江省传染病防治院收治的拟诊为泌尿系结核患者132例,以综合临床资料分析诊断泌尿系结核患者101例为结核病实验组、非结核性泌尿系疾病患者31例为非结核病对照组。对两组患者分别进行外周血T-SPOT.TB、尿液结核分枝杆菌培养、尿液结核分枝杆菌聚合酶链反应（TB-PCR）、结核分枝杆菌耐药基因芯片技术、PPD试验及血清结核抗体(TB-Ab)检测。计算两组患者采用上述检测技术进行临床诊断的阳性率、敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值,将实验组与对照组每种检测结果分别进行统计学检验,应用SPSS 19.0软件进行统计学分析,计数资料用率或构成比表示,组内及组间率的比较采用卡方检验,以P＜0.05为差异有统计学意义。结果 T-SPOT.TB诊断泌尿系结核的敏感度为77.23％、特异度为70.97％,培养法敏感度为27.72％、特异度为100.00％,TB-PCR敏感度为31.68％、特异度为100％,基因芯片技术敏感度为20.79％、特异度为100％,PPD试验敏感度为82.18％、特异度为38.71％ ,TB-Ab敏感度为68.32％、特异度为54.84% ,分析表明T-SPOT.TB检测对于泌尿系结核病的早期诊断具有更加明显的优势。结论 外周血T- SPOT.TB检测技术对泌尿系结核的诊断及鉴别诊断具有较高的敏感度及特异度,值得临床推广。     

结核感染T淋巴细胞检测试验在结核病快速诊断中的应用及意义

目的：探讨结核感染T淋巴细胞检测（T-SPOT·TB）试验在结核病诊断中的应用价值与意义。方法对本院735例患者行T-SPOT·TB筛查,分为非结核组（89例）与结核组（646例）。临床确诊结核患者646例中肺结核578例,肺外结核32例,HIV合并结核感染（HIV-TB）36例。将筛查结果及斑点计数情况与结核菌素试验（PPD）、涂片、培养、结核抗体检测结果进行比较分析。结果T-SPOT·TB试验检测灵敏度为84．5％,PPD、涂片镜检法、痰培养法和结核抗体检测的灵敏度依次为57．9％、29．3％、33．6％和47．4％,与T-SPOT·TB试验相比,差异均有统计学意义（P＜0．01）;T-SPOT·TB试验特异度为94．4％,显著高于PPD（74．2％）,差异有统计学意义（P＜0．01）。在肺结核、肺外结核与HIV-TB患者中的T-SPOT·TB的灵敏度分别是86．2％、78．1％和63．9％,与PPD和痰培养法检出结果一致性较差,分别为71．7％（Kappa＝0．410）和51．8％（Kappa＝0．200）;细菌学阳性与阴性患者T-SPOT·TB试验的斑点数差异无统计学意义（P＞0．05）。结论T-SPOT·TB试验较传统的结核病实验室检测方法有更好的灵敏度与特异度,但不能区分结核活动性与否且费用较高,可作为结核病诊断的辅助方法。     

培养滤液蛋白10/靶6000蛋白检测对结核性脑、胸膜炎早期诊断的临床研究

目的探讨靶6000蛋白(ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)在早期辅助诊断结核性脑、胸膜炎中的价值。方法将收集的29例阳性病例(结核性脑膜炎及胸膜炎的患者)和30例对照病例应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其脑脊液或胸水ESAT-6和CFP-10蛋白,并与用聚丙烯酰胺凝胶块浓缩脑脊液或胸水后检测ESAT-6和CFP-10蛋白浓度进行比较。结果浓缩前的标本:CFP-10的灵敏度为62.1%,特异度为86.7%;ESAT-6的灵敏度为68.9%,特异度为90%;两蛋白联合诊断的灵敏度为79.3%,特异度为96.7%。浓缩后的标本:CFP-10的灵敏度为68.9%,特异度为86.7%;ESAT-6的灵敏度为72.4%,特异度为90%;两蛋白联合诊断的灵敏度为89.6%,特异度为96.7%。浓缩前后病例组与对照组的CFP-10和ESAT-6蛋白的阳性率差异均有统计学意义(均<0.05)。结论 ESAT-6和CFP-10检测结核具有较高的灵敏度和特异度,且简便和廉价,适合用于早期辅助诊断。     

结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验对淋巴结结核的诊断价值

目的 探讨结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)对淋巴结结核的诊断价值。方法 将2012年7月至2015年10月安徽省胸科医院收治的134例淋巴结肿大患者分为结核组(95例)和非结核组(39例),另取健康对照组28例,采外周血行T-SPOT.TB检测,对比分析3组T-SPOT.TB的阳性率,敏感度及特异度。结果 结核组、非结核组和健康对照组T-SPOT.TB阳性率分别为85.26%、15.38%和3.57%,结核组患者T-SPOT.TB阳性检测率显著高于其他两组。T-SPOT.TB诊断淋巴结结核的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为85.26%、89.55%、92.05%和81.08%。结论 T-SPOT.TB试验可作为淋巴结结核的重要诊断手段。     

结核感染T细胞斑点试验的临床应用价值探讨

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-spot assay.tubercle bacillus,T-SPOT.TB)在肺结核诊断中的临床意义及斑点形成细胞数的参考价值。方法应用结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测方法对210例2017年1～12月期间入住某院且临床已诊断肺结核病例(结核病组)和非结核疾病的其他肺部疾病病例(非结核疾病组)66例血液标本进行检测并分析结果。结果以临床诊断为标准,T-SPOT.TB试验敏感度为84.29%(177/210);特异度为78.79%(52/66)。肺结核组斑点形成细胞数(SFC)为(44.80±61.51)(结核特异的混合抗原A,ESAT-6抗原)和(54.97±80.59)(结核特异的混合抗原B,CFP-10抗原);非结核疾病的其他肺部疾病组斑点形成细胞数为(2.71±3.77)(ESAT-6抗原)和(2.55±4.05)(CFP-10抗原),两组结果差异有统计学意义[t=-5.55,P=0.000(A)及t=-5.28,P=0.005(B)]。T-SPOT.TB阳性的肺结核组SFCs为(52.70±63.97)(ESAT-6抗原)和...     

比较结核感染T细胞斑点试验、结核菌素试验以及血清结核抗体检测对诊断肺结核的价值

目的：比较结核感染T细胞斑点试验(T-cell spot of tuberculosis,T-SPOT.TB)、结核菌素试验(purified protein derivative,PPD)以及血清结核抗体(Tuberculosis antibody,TB-Ab)检测对肺结核的诊断价值。方法随机选取自2014年1月—2016年8月在该院确诊为肺结核患者60例,作为肺结核组;确诊非肺结核就诊者30名作为非肺结核组,两组就诊者均接受了T-SPOT.TB、PPD以及TB-Ab检测。比较两组接受不同检测方法对诊断肺结核灵敏性与特异性的差异。结果 T-SPOT.TB检测诊断肺结核的敏感性为73.30%,特异性为80.00%;PPD试验诊断肺结核的敏感性为60.00%,特异性为86.70%;血清TB-Ab检测检测诊断肺结核的敏感性为53.30%,特异性为66.70%。结论 T-SPOT.TB诊断肺结核的敏感性高于PPD试验和血清结核抗体检测;T细胞斑点试验T-SPOT.TB诊断肺结核的特异性高于血清结核抗体检测,与PPD试验差异无统计学意义。     

探讨T-SPOT．TB、CA125、TB-Ab在痰菌阴性肺结核诊断中的价值

目的探讨T细胞斑点试验（T—SPOT．TB）技术、糖类抗原125（CA125）测定与血清结核抗体（TB—Ab）测定,三种方法单-或联合检测对痰菌阴性肺结核的诊断价值。方法受试者均为我院住院患者共155例。其中痰菌阴性患者64例,痰菌阳性患者55例,非结核性肺疾病患者36例,对上述三项指标进行检测。结果单-指标诊断肺结核T—SPOT．TB的灵敏度为87．3％、特异度为83．3％,AUC为0．850,CA125的灵敏度为80．0％、特异度为72．2％、AUC为0．837;TB—Ab灵敏度为63．6％、特异度为80．6％、AUC为0．790;T—SPOT．TB和TB—Ab联合诊断的灵敏度为94．5％,特异度为79．8％,AUC为0．988,T—SPOT．TB、TB—Ab、CA125三指标联合检测灵敏度为96．4％,特异度为44．4％,AUC为0．966。结论使用单-方法诊断痰菌阴性肺结核,T—SPOT．TB最有价值;联合检测时,T—SPOT．TB联合TB—Ab灵敏度较高,AUC最高,对痰菌阴性肺结核的诊断具有更大的临床应用价值。     

结核感染T细胞斑点试验对结核病治疗效果的监测价值

目的：探讨结核感染T细胞斑点试验对结核病治疗疗效的监测意义。方法本研究采用T-SPOT.TB试剂盒,检测T细胞中γ-干扰素对结核分支杆菌特异性多肽类早期分泌性抗原靶标6-kD(ESAT-6)和培养滤液蛋白(CFP-10)的应答,对比113例结核感染者治疗前与治疗后T-SPOT.TB结果的变化,其结果根据对该试验中两种抗原的联合与各自应答来分析。结果113例感染者在治疗后T-SPOT.TB结果转阴者有42例(37.2%)。其中,CFP-10转阴率占48.9%(P<0.001),ESAT-6转阴率占20.0%(P=0.238)。ESAT-6的斑点形成细胞(SFCs)/2.5×105外周血单核细胞(PBMCs)的平均数在治疗前和治疗后分别为18.47和16.29(P=0.16),而CFP-10的SFCs/PBMCs的平均数在治疗前和治疗后分别为22.83和15.31(P<0.01)。结论结核病治疗对于T细胞中γ-干扰素引起的ESAT-6和CFP-10抗原应答影响不同,CFP-10的定量应答才是结核病治疗的更有效监测手段。     

T-SPOT.TB在活动性肺结核治疗效果的监测

  目的   探讨结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）对肺结核治疗效果的监测意义。   方法   采用T-SPOT.TB试剂盒，检测其抗原ESAT-6和CFP-10的应答，对比79例活动性肺结核患者治疗前与治疗2月末及治疗结束时ESAT-6和CFP-10应答结果的变化。   结果   79例活动性肺结核患者，ESAT-6和CFP-10应答的斑点数在治疗2月末和治疗结束时较治疗初均有明显下降，与治疗初比较，差异均有统计学意义（P < 0.05）。ESAT-6和CFP-10在治疗2月末和治疗结束时阴性率较治疗初有上升，与治疗初的阴性率比较，差异无统计学意义（ P > 0.05）；全部患者T-SPOT.TB转阴率为3.8%。治疗2月末与治疗结束时ESAT-6应答变化，差异有统计学意义（ χ2 = 4.635，P = 0.031 < 0.05）；治疗2月末与治疗结束时CFP-10应答变化，差异无统计学意义（ χ2 = 1.272，P = 0.259 > 0.05）。   结论   T-SPOT.TB治疗前后ESAT-6、CFP-10应答变化有明显差异，对肺结核治疗效果评价有一定作用，但不能利用其转阴率作为肺结核治疗停药指标。      

全自动化学发光法检测γ-干扰素试验诊断结核病的临床应用

目的 探讨全自动化学发光法检测γ-干扰素试验诊断结核病临床应用价值。 方法 比较全自动化学发光法检测γ-干扰素试验与结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)诊断结核病的性能差异。采用前瞻性研究,同步盲法进行,计划暂定招募结核病组(≥150例)、易与结核病混淆的非结核病组(≥100例)、随机健康人群(≥150例)。通过受试者工作特征(ROC)曲线比较两试验诊断性能的优劣性,Kappa检验评价两种诊断方法结果的一致性。 结果 实际收集400例样本,有效样本364例,其中结核病组141例,易与结核病混淆的非结核病组43例,随机健康人群180例。全自动化学发光法检测γ-干扰素试验、T-SPOT.TB试验［早期分泌靶向抗原6(ESAT-6)孔、培养滤液蛋白10(CFP-10)孔］的ROC曲线下面积(AUC)分别是0.897、0.884和0.879,Kappa值≈0.75。 结论 全自动化学发光法检测γ-干扰素试验和T-SPOT.TB试验诊断性能具有较好一致性,由于全自动化学发光法检测γ-干扰素试验操作全自动的优势,其在结核病诊断方面将有更好的临床应用价值。     

Longitudinal observation of an interferon gamma-released assay (T-SPOT.TB) for Mycobacterium tuberculosis infection in AIDS patients on highly active antiretroviral therapy

Background T-SPOT.TB is a novel test for tuberculosis infection with higher sensitivity and specificity than the traditional tuberculin skin test （TST）. However, there are no longitudinal data in the literature evaluating T-SPOT.TB for Mycobacterium tuberculosis in patients with acquired immune deficiency syndrome （AIDS） on highly active antiretroviral therapy （HAART）. The objective of this study was to assess the value of T-SPOT.TB longitudinally in AIDS patients on HAART without prophylaxis for tuberculosis.Methods A prospective observational study was conducted in 50 AIDS patients on HAART. None of the subjects had evidence of active tuberculosis. T-SPOT.TB, a T-cell-based interferon y released assay, was performed at the onset of the study and repeated 24 months thereafter. Subjects were evaluated every 6 months during the 36-month follow-up. Results Twenty-one （42%） AIDS patients on HAART tested positive by T-SPOT.TB （95% Cl 28.3%-55.7%）. The pooled spot-forming cells of early secretory antigenic target-6 （ESAT-6） and culture filtrate protein-10 （CFP-10） peptides were 68/million peripheral blood mononuclear cell （PBMC） （interquartile range 44-220）. The average number of CD4 cells in subjects was （305±152） cells/Ml and there was no significant difference in T-SPOT.TB response rates between subjects with CD4 cell counts 〈200 cells/ul （7/15 （46.7%）, 95% C/21.5%-71.9%） and those with CD4 cell counts≥200 cells/ul （14/35 （40.0%）, 95% Cl 23.8%-56.2%, P=0.662）. In the 32 subjects who completed the 24-month follow-up, 10 underwent T-SPOT.TB reversion, one had T-SPOT.TB conversion, six remained positive and 15 remained negative. None of them advanced to active tuberculosis during the 36-month follow-up.Conclusion The inactive status of tuberculosis infection may be maintained for a long period in AIDS patients on HAART.     

肺泡灌洗液GeneXpert联合结核酶联免疫斑点试验、结核抗体对菌阴肺结核的诊断效能

目的 探究支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（GeneXpert MTB/RIF）联合外周血结核酶联免疫斑点试验（T-SPOT）及结核抗体（TB-Ab）对菌阴肺结核的诊断效能。方法 回顾性分析中国科学技术大学附属第一医院2019年1月至2021年1月收治临床诊断菌阴肺结核患者114例、非结核性肺部其他疾病患者80例以及菌阳肺结核患者22例的临床资料,分析3组患者外周血T-SPOT、TB-Ab及BALF GeneXpert检测结果,对比3种检测方法的灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值、假阴性率、假阳性率以及约登指数等指标,对比3种方法单独检测与联合检测对菌阴肺结核的阳性检出率的差异,并作受试者工作曲线（ROC）,计算出曲线下面积（AUC）。结果 BALF GeneXpert、外周血T-SPOT和TB-Ab检测的灵敏度分别为66.91%、80.88%、90.44%;特异度分别为98.75%、73.75%、41.25%;诊断符合率分别为78.70%、78.24%、72.22%,均高于70.00%;在菌阴肺结核组中,这3种方法单项检测在菌阴肺结核组阳性检出率分别为63.15%、79.82%、90.35%,与非结核肺部疾病组相比,差异均有统计学意义（P<0.01）;3种方法联合检测在菌阴肺结核组中阳性检出率为96.49%,明显高于TB-GeneXpert法和T-SPOT,差异均有统计学意义（χ²=37.283,P<0.01;χ²=13.612,P<0.01）;联合检测在菌阴肺结核中约登指数明显高于单项检测,联合检测AUC为0.977,明显高于单项检测。结论 BALF GeneXpert 联合外周血T-SPOT、TB-Ab可显著提高菌阴肺结核诊断率,为指导临床治疗提供有力依据。