移植周围神经修复脊髓损伤

脊髓损伤后的修复仍是当今医学领域的一大难题。脊髓损伤后神经再生和功能修复的研究虽然已进行了百年,但还存在许多问题。近年来,人们试图通过周围神经或其他组织移植,以改善脊髓损伤部位的微循环,促进损伤的脊髓再生修复,已取得了一定进展〔１～７〕。但较功能恢复...     

胚胎脊髓组织移植联合应用神经生长因子对损伤脊髓再生修…

选择胎龄为１４－１５天的大鼠胚胎脊髓植入成年大鼠半横断的脊髓损伤腔，同时局部应用神经生长因子。术后２－８个月，用组织学、免疫细胞化学、辣根过氧化酶示踪及超微结构的检查方法证实，移植组织在宿主脊髓内的存活率为９０％，并且分化成熟，具有正常的神经组织结构特征，大多数移植物充满损伤腔，与宿主脊髓形成良好的融合，移植组织与宿主组织出现新的纤维联系，使脊髓损伤的两端恢复了解剖的连续性。     

胚胎脊髓移植加神经生长因子和尼莫地平对成年大鼠脊髓继发性损伤的影响

目的：用神经生长因子（NGF）和尼莫地平（ND）增强胚胎脊髓移植修复成年大鼠损伤脊髓的效果,缓解脊髓继发性损伤。方法：采用脊髓半切洞损伤模型,分为单纯胚胎脊髓移植组,移植加NGF组,移植加NGF和ND组,术后移植部位脊髓细胞内游离钙离子浓度,超氧化物歧化酶（SOD）,丙二醛（MDA）的变化,并比较各组死亡率,结果：移植加NGF组较单纯移植组,MDA明显下降,SOD显著升高,有统计学意义（P＜0．05）,但两组间细胞内游离钙离子浓度差别不显著（P＞0．05）,移植加NGF和ND组更有效地升高SOD浓度,降低钙离子浓度和MDA含量,与其它两组比较有显著性差异（P＜0．05）,移植加NGF和ND组的死亡率明显低于其它两组,有非常显著性差异（P＜0．01）,结论：NGF和ND能较好地改善继发性脊髓损伤,明显降低经胚胎脊髓移植术皇的成年大鼠死亡率,。。     

胚胎脊髓组织移植联合应用神经生长因子对损伤脊髓再生修复的形态学影响

选择胎龄为１４～１５天的大鼠胚胎脊髓植入成年大鼠半横断的脊髓损伤腔，同时局部应用神经生长因子。术后２～８个月，用组织学、免疫细胞化学、辣根过氧化酶示踪及超微结构的检查方法证实，移植组织在宿主脊髓内的存活率为９０％，并且分化成熟，具有正常的神经组织结构特征，大多数移植物充满损伤腔，与宿主脊髓形成良好的融合，移植组织与宿主组织出现新的纤维联系，使脊髓损伤的两端恢复了解剖的连续性。     

周围神经移植联合神经营养因子修复脊髓传导束的实验研究

目的探讨周围神经移植联合神经营养因子修复脊髓传导束的可行性并观察其再生的情况。方法121只Wistar雄性大鼠被随机分成5组,A组(实验组,n=25):在T9水平横行切断脊髓并切除5mm,植入肋间神经和含酸性成纤维因子(acidicfibroblastgrowthfactor,aFGF)纤维蛋白凝胶;B组(水平对照组1,n=25):同法制备脊髓横断模型,断端间由含aFGF的纤维蛋白凝胶填充;C组(水平对照组2,n=25):同法制备脊髓横断模型,断端间植入肋间神经和不含aFGF的纤维蛋白凝胶;D组(水平对照组3,n=25):同法制备脊髓横断模型,断端间旷置;E组(空白对照组,n=21):仅行椎板切除术。通过BDA顺行神经示踪、FG逆行神经示踪、运动诱发电位(MEP)和大鼠BBB后肢运动功能评分,观察脊髓传导束再生的情况。结果A组在损伤区有BDA标记的神经纤维通过,在颈髓背角和腹侧角、脑干中缝核和红核、网状结构、前庭侧核以及在大脑运动皮层的第V层均发现FG标记阳性的神经细胞数。A组大鼠MEP的平均潜伏期和波幅以及BBB功能评分明显提高,与B、C和D组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论周围神经移植联合神经营养因子能部分修复脊髓传导束。     

胚胎脊髓移植联合应用神经生长因子及尼莫地平对成鼠损伤脊髓的影响

目的 :研究胚胎脊髓移植联合应用神经生长因子 (NGF)及尼莫地平 (ND)对损伤脊髓的修复作用。方法 :90只Wistar大鼠半切洞脊髓损伤后 ,随机分为 3组 :(1)单纯胚胎脊髓移植组 (A组 ) ,(2 )移植 NGF组 (B组 ) ,(3)移植 NGF ND组 (C组 )。观察组织形态学、运动诱发电位及行为学变化。结果 :C组的运动诱发电位潜伏期在早期比A组、B组皆有明显缩短 (P <0 0 5 )。以后肢运动功能的Tarlov评分看 ,B组和C组的后肢运动功能明显优于A组 (P <0 0 5 )。病理观察显示 ,移植的胚胎脊髓可在宿主内分化、发育 ,并可挽救损伤神经元 ,同时可与宿主脊髓结构连接。结论 :胚胎脊髓移植与NGF、ND合用 ,可能是脊髓损伤的一种有效疗法。     

周围神经移植修复脊髓损伤的实验研究

目的：探讨自体坐骨神经移植修复脊髓损伤的可行性。方法：将58只雌性Wistar大鼠分为二组，实验组：采用显微外科技术，将50只大鼠于T13水平切除左半侧脊髓10mm，再取右侧坐骨神经10mm移植到脊髓缺损处，近端接脊髓，远端接马尾，分别于术后2、4、6、8、12、22周在光镜和电镜下观察移植处坐骨神经、吻合口远端马尾神经、左后肢坐骨神经再生情况，并用摄像机记录患肢功能恢复情况。对照组：8只大鼠，于13水平切除左半侧脊髓10mm，不移植坐骨神经，观察脊髓缺损远端马尾神经和左右肢坐骨神经再生情况。结果：对照组坐骨神经的轴突及髓鞘部分崩解，密度降低，无再生轴突形成。实验组术后4周电镜下偶见移植处坐骨神经髓鞘及轴突形成，术后8周光镜及电镜下可见较多细的有髓神经纤维，22周时接近正常；同时观察到左后肢坐骨神经再生；大鼠后肢功能部分恢复，肌力达3级。结论：大鼠脊髓损伤后有再生能力，周围神经移植修复脊髓损伤是可行的。     

骨髓基质干细胞和神经生长因子悬液移植对脊髓损伤修复的影响

目的研究骨髓基质干细胞(BMSCs)移植联用神经生长因子(NGF)对脊髓损伤修复的治疗作用。方法用改良Allen法制成SD大鼠脊髓损伤动物模型(共32只),1周后分别将DMEM、BMSCs、NGF和BMSCs NGF移植入脊髓损伤部位即制成四组(每组8只),移植1、2个月后分别采用神经核蛋白(NeuN)抗体、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体和神经丝蛋白(NF)抗体进行免疫荧光染色观察移植的BMSCs的存活及分化情况、损伤部位神经纤维的再生情况。HE染色观察脊髓损伤处空洞面积的改变情况。同时采用BBB运动评分观察大鼠运动功能恢复情况。结果移植1、2个月后,部分移植细胞呈NeuN和GFAP阳性,同时实验组可见明显的神经纤维再生。脊髓损伤处的空洞面积明显减小,差异有显著性意义(P＜0．05),BBB评分结果比对照组均有明显增高,差异有显著性意义(P＜0．05)。在BMSCs NGF组上述改变更加显著。结论BMSCs可在脊髓损伤处分化为神经元和神经胶质细胞,BMSCs和NGF能够减小脊髓损伤处的空洞面积,促进受损轴突的再生和运动功能的恢复,两者联合应用在脊髓损伤修复治疗中具有协同作用。     

高压氧与带血供周围神经移植对成鼠损伤脊髓诱发电位的影响

目的：研究高压氧对带血供周围神经移植修复成鼠损伤脊髓功能恢复的作用。方法：将40只成年Wistar大鼠作成脊髓半切损伤模型,随机分为A、B两组,A组单纯带血供周围神经移植修复脊髓损伤,B组为带血供周围神经移植后给予高压氧治疗。手术后1、2、4、8、10周进行感觉诱发电位（SEP）和运动诱发电位（MEP）检查。结果：SEP和MEP潜峰时的恢复B组优于A组。结论：高压氧与带血供周围神经移植对成鼠损伤脊髓功能恢复有较好的促进作用。     

人工组织神经移植物辅加神经生长因子修复大鼠坐骨神经缺损

目的 探索壳聚糖与聚乙醇酸联合制成的人工组织神经移植物辅加神经生长因子（NGF）修复大鼠外周神经缺损的可能性。方法 壳聚糖套管和聚乙醇酸纤维制备成人工组织神经移植物并辅加NGF，修复大鼠的坐骨神经10mm缺失。术后24周，进行足迹试验，电生理学测试，形态学观察。用自体神经，硅胶管以及壳聚糖套管与聚乙醇酸纤维等分别作为对照组，结果 术后24周内，实验动物均未出现明显炎症及排斥反应。实验组的各检测指标均优于除自体神经组外的各对照。结论 壳聚糖和聚乙醇酸与外周神经组织有良好的生物相容性；辅加NGF的人工组织神经移植物对修复缺损的神经具有良好的桥梁作用和促神经生长作用。     

化学去细胞异体神经复合肝细胞生长因子修复周围神经缺损的研究

目的 研究化学去细胞异体神经复合人肝细胞生长因子(HGF)修复周围神经缺损的作用.方法 体外试验检测携带人肝细胞生长因子基冈的重组腺病毒(Ad-HGF)对小鼠骨骼肌细胞的转染效率以及转染细胞对目的 蛋白的表达.化学玄细胞异体神经修复大鼠坐骨神经10mm缺损后,近、远端吻合口附近肌肉分别注射腺病毒介导的人肝细胞生长因子(Ad-HGF),与自体神经移植组对照,通过步态分析、肌肉湿重测定、轴突生长速率测定、神经电生理、计算机图像分析等指标评价神经移植后再生效果.结果 流式细胞仪结果表明,随着病毒滴度的增加,Ad-HGF对骨骼肌细胞的转染不断增加.骨骼肌细胞对目的 蛋白(HGF)的表达可以持续两周.大鼠动物实验术后16周,去细胞异体神经可以修复周罔神经缺损,同自体神经移植对比,肝细胞生长因子明显增强了去细胞异体神经的神经再生能力.结论 复合肝细胞生K因子的化学去细胞异体神经能促进神经轴突牛长速度,显著增加移植物内新生血管,满意修复一定长度周围神经缺损,可以成为一种有效的周围神经组织工程修复材料.     

Experimental study of neural repair of the transected spinal cord using peripheral nerve graft

It has been reported that transected spinal cord shows signs of axonal regeneration after peripheral nerve (PN) graft. We studied the membrane excitability and ion distribution in axons from transected rat spinal cord 3 weeks after PN graft using the spinal cord evoked potential, electron probe X-ray microanalysis, and the patch-clamp technique. Axonal structures were also observed using conventional electron microscopy. At the Th11 level, laminectomy was performed (=control) and the left thoracic segments of the spinal cord 2mm in length were excised (=nongrafted group). PN sections from 8-week-old male Wistar rats were grafted into the spinal cord gap (=PN-grafted group). The spinal cord evoked potential in the PN-grafted group partly recovered in contrast to that in the nongrafted group, which showed no recovery. Higher Na, Cl, and Ca peaks and lower K peaks in the PN-grafted group were demonstrated compared with those in the nongrafted group. In the PN-grafted group, a higher current signal appeared in the axonal membrane of the spinal cord, suggesting a greater membrane activity compared with that in the nongrafted group. Unlike the nongrafted group, in which no myelinated axons were found, demyelinated axons that were myelinated by Schwann cells from the grafted peripheral nerve were observed in the PN-grafted group. These findings suggested that Schwann cells from the transplanted PN contributed to the repair of the transected spinal cord.     

神经生长因子治疗周围神经损伤的前瞻性研究

目的观察神经生长因子(NGF)对周围神经损伤的近期治疗效果。方法2004年4月～2005年10月将48例周围神经损伤患者随机分为治疗组(NGF组,25例)和对照组(维生素B_(12)组,23例),4周后比较两组患者疼痛、麻木症状的改善情况,以及神经电生理变化。结果与对照组相比,治疗组患者的疼痛、麻木症状显著减轻,差异有显著性意义(P＜0．05)；感觉和运动电位的恢复率明显增高,差异有极显著性意义(P＜0．01)；恢复神经的感觉和运动电位的潜伏期均明显缩短,差异有显著性意义(P＜0．05)；波幅均显著增高,差异有显著性意义(P＜0．05),不良反应少。结论NGF早期可安全、有效地治疗周围神经损伤。     

Vascular endothelial growth factor promotes peripheral nerve regeneration after sciatic nerve transection in rat

Objective：To evaluate the local effect of vascular endothelial growth factor （VEGF） on transected sciatic nerve regeneration.Methods：Sixty male white Wistar rats were divided into four experimental groups randomly （n=15）.In transected group the left sciatic nerve was transected and the stump was fixed to adjacent muscle.In treatment group the defect was bridged using a silicone graft filled with 10μL VEGF.In silicone group the graft was filled with phosphate-buffered saline.In sham-operated group the sciatic nerve was exposed and manipulated.Each group was subdivided into three subgroups with five animals in each and nerve fibers were studied 4,8 and 12 weeks after operation.Results：Behavioral test,functional study of sciatic nerve,gastrocnemius muscle mass and morphometric indices confirmed a faster recovery of regenerated axons in VEGF group than in silicone group （P〈0.05）.In immunohistochemical assessment,reactions to S-100 in VEGF group were more positive than that in silicone group.Conclusion：Local administration of VEGF will improve functional recovery and morphometric indices of sciatic nerve.     

外源性神经生长因子对内源性神经生长因子的影响

目的：探讨外源性神经生长因子对内源性神经生长因子的影响，方法：采用大鼠坐骨神经硅管内再生室模型，靶器官内注射神经生长因子（实验组）或生理盐水（对照组）２周，注射后１天，１周天及２周，采用新生大鼠背根神经节细胞培养，测定硅管内液神经营养活性，用化学发光免疫检测法（ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＣＬＩＡ）测定神经生长因子含量，结果：实验组与对照组细胞存活数及神经生长因子含量     

神经生长因子促周围神经再生临床应用初步报告

目的：观察神经生长因子促神经再生的临床应用效果。方法：１９９４年～１９９５年，对１１例前臂及腕部神经断裂采用了模拟神经再生室的小间隙静脉桥接法，室内注入神经生长因子，外源性提高再生室内的神经生长因子浓度。结果：经过术后１年的随访观察，按照低位神经损伤恢复的评定标准，全部病例取得了满意疗效。结论：神经生长因子对神经的再生（特别是感觉神经再生）有明显作用。临床采用再生室的小间隙桥接法室内注入神经生长因子，经轴突逆向运输达胞体而发挥作用。为神经生长因子临床应用提供一种有效、合理的方法     

微囊化SD大鼠周围神经组织移植促进周围神经再生的实验研究

目的　采用微囊化组织研究技术 ,研究微囊化神经组织移植对周围神经再生的影响。方法　将 12只SD大鼠随机分为实验组和空白组。切断SD大鼠左侧坐骨神经并行显微缝合 ,实验组 8只 ,加入制备好的微囊化同种异体周围神经颗粒无血清培养液 30 μl,约含微囊颗粒 30 0个 ;空白组 4只 ,加入不含微囊颗粒的无血清培养液 30 μl。术后 4周取材做组织形态学检查。结果　实验组周围神经再生明显优于空白组。结论　微囊化周围神经移植有促进周围神经再生的作用     

去细胞异种神经复合神经生长因子修复神经缺损的实验研究

目的 应用含有神经生长因子(NGF)的去细胞异种神经基膜管作为神经移植替代物桥接大鼠坐骨神经缺损,观察其对神经再生的作用.方法 选用Wistar大鼠45只,随机分为3组,每组15只,于术制成右后肢坐骨神经长10 mm的神经缺损,取兔胫神经制成去细胞神经基膜管,电镜及HE染色观察神经基膜管超微结构,流式细胞仪检测去细胞前后神经主要组织相容性抗原Ⅱ(MHC Ⅱ)的变化情况.A组以含有NGF的去细胞异种神经基膜管桥接神经缺损,B组单纯采用去细胞异种神经基膜管桥接神经缺损,C组采用自体神经移植修复神经缺损.术后1个月行神经电生理检测即胫后肌群运动诱发电位,用HE染色、免疫组化染色、透射电镜等方法对移植体远端吻个口再生神经纤维进行形态学观察,并对再生有髓神经纤维的数量、密度、直径及雪旺细胞的密度进行量化分析.结果 移植前新鲜神经组MHC-Ⅱ检测值为72.14±19.88,去细胞组MHC-Ⅱ检测值为4.19±3.11,两组比较差异有统计学意义(t=3.817,P＜0.05);透射电镜观察显示为胶原性管道,无细胞成分.术后4周,处死前行运动诱发电位检测,神经传导速度A组为(21.16±2.31)m/s,B组为(13.37±1.89)m/s,C组为(21.43±2.18)m/s,A组与 C组比较差异无统计学意义(P＞0.05),A组与 B组比较差异有统计学意义(P＜0.05).组织学观察见3组移植体远端吻合口横切面再生神经纤维呈微束状,透射电镜观察再生神经纤维具有正常的形态和结构.A、C组再生神纤纤维数量及直径均优于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 经化学萃取的去细胞兔胫神经基膜管能够移植于大鼠,成功修复大鼠坐骨神经缺损,而且复合NGF的去细胞基膜管在神经修复质量上优于单纯的去细胞神经基膜管,更加接近自体神经移植的效果.