牛磺酸对大鼠培养心肌细胞感染病毒后钙离子内流的影响

观察牛磺酸对心肌细胞感染 ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ３病毒（ＣＶＢ３）后 Ｃａ２＋内流的影响。取新生 ＳＤ大鼠心室肌制备培养搏动心肌细胞， １８ ｈ后接种 １００ ＴＣＩＤ５０的 ＣＶＢ３作为实验性病毒性心肌炎模型，并采用放射性同位素４５Ｃａ２＋示踪技术，观察了 １～２０ ｍｍｏｌ／ Ｌ牛磺酸对正常及感染 ＣＶＢ３后心肌细胞 Ｃａ２＋内流的影响。结果：（ｌ）１０～２０ ｍｍｏｌ／ Ｌ牛磺酸对正常心肌细胞不同胞外 Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］０， ０．５、 １．５和 ４．０ ｍｍｏｌ／ Ｌ）下的 Ｃａ２＋内流均有抑制作用，而 １ｍｍｏｌ／ Ｌ牛磺酸只抑制高［Ｃａ２＋］０（４．０ ｍｍｏｌ／ Ｌ）时 Ｃａ２＋内流，对低［Ｃａ２＋］０（０．５ ｍｍｏｌ／ Ｌ）和正常［Ｃａ２＋］０（１．５ ｍｍｏｌ／ Ｌ）时 Ｃａ２＋内流无明显作用；（２） ｌ～２０ ｍｍｏｌ／ Ｌβ－丙氨酸对 Ｃａ２＋内流无明显影响；（３）感染ＣＶＢ３后Ｃａ２＋内流增加，加用１ｍｍｏｌ／ Ｌ牛磺酸后能减少感染ＣＶＢ３后的Ｃａ２＋内流。结论：牛磺酸具有抑制培养心肌细胞感染ＣＶＢ３后Ｃａ２＋内流的作用，这可能是牛磺酸能减轻ＣＶＢ３所致细胞损伤的机理之一。     

牛磺酸对柯萨奇B3病毒感染新生大鼠心肌细胞外向钾电流的影响

目的 观察牛磺酸对柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）感染新生大鼠心肌细胞外向钾电流的影响。方法 运用全细胞膜片钳技术记录了分离的大鼠心肌细胞外向钾电流，并观察牛磺酸的作用。结果 ＣＶＢ３感染可使正常大鼠心肌细胞Ｉｏｕｔ明显增加，牛磺酸对正常大鼠心肌细胞Ｉｏｕｔ无明显影响，但可使ＣＶＢ３感染的Ｉｏｕｔ趋于正常。结论 牛磺酸对ＣＶＢ３感染心肌细胞Ｋ＾＋通道电流的作用可能是其发挥抗心肌损伤作用的机制之一。     

CVB_3对成年大鼠培养心肌细胞Ca~（2＋）内流的影响

ＣＶＢ_３对成年大鼠培养心肌细胞Ｃａ~（２＋）内流的影响郭棋，顾全保，赵剑星，杨英珍，虞勇（上海医科大学中山医院上海市心血管病研究所，中国科学院上海细胞生物学研究所２０００３２）关键词柯薩奇病毒；Ｂ组；大鼠；心肌细胞ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ组病毒（ＣＶＢ）...     

钙离子与牛磺酸两者跨心肌细胞膜内流的相互影响(摘要)

目的观察钙离子与牛磺酸跨心肌细胞膜内流的相互影响。方法取新生ＳＤ大鼠心室肌制备培养搏动心肌细胞,采用放射性同位素４５Ｃａ２＋及３Ｈ－牛磺酸示踪技术。结果①牛磺酸内流在低胞外Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］）００．５ｍｍｏｌＬ）和高［Ｃａ２＋］０（４．０ｍｍｏｌＬ）均比正常［Ｃａ２＋］０（１．５ｍｍｏｌＬ）和高［Ｃａ２＋］０（４．０ｍｍｏｌＬ）时增加,尤以低［Ｃａ２＋］０时明显;异搏定（１０μｍｏｌＬ）能促进牛磺酸的内流;②１０～２０ｍｍｏｌＬ牛磺酸对不同［Ｃａ２＋］０（０．５、１．５和４．０ｍｍｏｌＬ）下的Ｃａ２＋内流均有抑制作用,而１ｍｍｏｌＬ牛磺酸只抑制高［Ｃａ２＋］０时Ｃａ２＋内流,对低［Ｃａ２＋］０和正常［Ｃａ２＋］０时Ｃａ２＋内流无明显作用;１～２０ｍｍｏｌＬβ－丙氨酸对Ｃａ２＋内流无明显影响。结论胞外Ｃａ２＋浓度的变化可直接影响牛磺酸内流,而牛磺酸能抑制Ｃａ２＋的内流,两者相互影响,从而发挥牛磺酸调节细胞内Ｃａ２＋浓度的作用。     

实验性病毒性心肌炎药物治疗及凋亡的机制

目的以病毒性心肌炎（ＶＭＣ）细胞感染模型为基础，研究柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）细胞感染与心肌细胞凋亡的关系，并观察板蓝根对实验性ＶＭＣ的治疗效果。方法第一步建立稳定的ＶＭＣ细胞感染模型；第二步在ＣＶＢ３病毒感染心肌细胞后２４ｈ电镜观察超微结构改变，流式细胞仪检测“凋亡峰”，ＥＬＩＳＡ法定量检测ＣＶＢ３病毒感染后１，２，４，７，２４ｈ心肌细胞凋亡的情况；第三步将不同浓度的板蓝根与ＣＶＢ３病毒作用后在心肌细胞上检测病毒的ＴＣＩＤ５０。根据药物毒性测定的结果，取最大无毒浓度以下两种不同浓度的板蓝根按两种方式加药：（１）ＣＶＢ３病毒感染细胞后加药；（２）病毒先与药物作用后再感染细胞进行实验。以黄芪作为治疗阳性对照组，另设病毒感染组、正常细胞对照组。于药物作用４８ｈ后观察各组细胞搏动百分比、细胞病变（ＣＰＥ）、超微结构变化，并测定培养液中心肌酶水平，进行体外、细胞内药物疗效观察。结果（１）对ＣＶＢ３病毒感染后细胞的形态学检测（ＣＰＥ３＋～４＋），电镜下细胞内见包涵体，病毒颗粒及细胞培养液心肌酶（ＡＳＴ、ＬＤＨ、ＣＫ、ＣＫＭＢ、ＨＢＤＨ）水平升高，证实所建立的ＶＭＣ细胞感染模型是稳定的。（２）电镜观察ＣＶＢ３病毒感染心     

Ca^2＋在紫外线诱导成纤维细胞凋亡中的作用

目的 了解细胞内外钙离子浓度对紫外线（ＵＶＢ）辐射诱导成纤维细胞（ＮＩＨ３Ｔ３）凋亡作用的影响。方法 ＵＶＢ照射成纤维细胞１０ｍｉｎ，培养１２ｈ后，用流式细胞仪测定凋亡率。结果 ＵＶＢ照射组比ＵＶＢ不照射组凋亡率有显著增加；ＵＶＢ照射组内各组间凋亡率因细胞内外Ｃａ＾２＋浓度不同存在明显差异。结论 ＵＶＢ辐射诱导成纤维细胞发生凋亡与胞内外Ｃａ＾２＋浓度有关，Ｃａ＾２＋参与了凋亡的信号转导。ＵＶＢ诱导     

牛磺酸对应激心肌损伤大鼠Ca^2＋ Mg的调节作用

目的 探讨心肌损伤时牛磺酸心肌细胞及血浆中Ｃａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋浓度的影响。方法 以异丙肾上素诱导心肌损伤为模型,采用原子吸收分光光度法,分别测定对照组、Ｉｓｏ组及Ｔａｕ＋Ｉｓｏ组大鼠心肌和血浆中的Ｃａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋浓度。结果 Ｉｓｏ组心肌中的Ｃａ＾２＋浓度明显高于对照组,而牛磺酸能降低心肌升高的Ｃａ＾２＋并降低Ｍｇ＾２＋浓度,Ｔａｕ还有升高血Ｍｇ＾２＋浓度的作用。结论 牛磺酸对心肌的保护作用     

神经降压素的肝细胞保护作用与Ca^2＋的关系

观察了神经降压素（ＮＴ）的肝细胞保护作用与Ｃａ＾２＋的关系。结果显示，醋氨酚使肝细胞Ｃａ＾２＋内流和肝脏钙含量增加，但对于线粒体Ｃａ＾２＋摄取及其钙含量无明显影响，表明肝细胞可能出现胞质Ｃａ＾２＋超载。若在醋氨酚之前给予ＮＴ则使肝细胞Ｃａ＾２＋内流明显减少，肝脏Ｃａ＾２＋含量有降低趋势，但线粒体钙含量显著增加。这些结果提示，ＮＴ通过减少Ｃａ＾２＋内流，增强线粒体贮存Ｃａ＾２＋的能力，部分缓解醋氨酚     

维生素C对柯萨奇B_3病毒感染的心肌细胞的保护作用研究

观察维生素Ｃ对柯萨奇Ｂ３（ＣＶＢ３）病毒的复制和对病毒感染心肌细胞的影响，结果表明：维生素Ｃ（ＶｉｔＣ）对ＣＶＢ３感染的心肌细胞具有保护作用，加ＶｉｔＣ培养２４ｈ后，随时间延长，保护作用越来越明显（Ｐ＜０．０５）；实验结果还表明：ＶｉｔＣ在细胞外并无直接灭活病毒作用，而是作用于细胞，影响病毒的复制，从而使心肌细胞得到保护。     

牛磺酸对增减大鼠心肌细胞感染柯萨奇B3病毒的影响

目的 探讨牛磺酸对由柯萨奇Ｂ３病毒感染的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用,为该药的临床应用提供理论依据。方法 取新生ＳＤ大鼠的乳鼠心室肌肌制备博动心肌细胞,培养４８ｈ后接种１０＾３ＴＣＩＤ５０的柯萨奇Ｂ３病毒做为实验性病毒性心肌炎模型。结果牛磺酸明显减轻感染柯萨奇Ｂ３病毒心肌细胞的病变,使细胞博动增强;提高心肌细胞的琥珀酸脱氢酶活性,降低乳酸脱氢酶活性;抑制心肌细胞感染柯萨奇Ｂ３病毒后导致的乳酸脱     

不同年龄自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Ca^2＋转运功…

应用不同年龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌原代与传代细胞（ＶＳＭＣ），观察Ｃａ＾２＋转运功能障碍及某些相关因素的变化，结果表明：（１）在血压未升高的ＶＳＭＣＣａ＾２＋内流已较同龄对照组ＷＫＹ大鼠明显增加，而Ｃａ＾２＋外流量较ＷＫＹ大鼠显著降低。表明ＳＨＲＶＳＭＣ膜Ｃａ＾２＋转运功能障碍在血压升高前就已发生，并随年龄及血压增高有加重趋势；（２）ＶＳＭＣｃＡＭＰ及钙调素含量变化与细胞膜Ｃａ＾２＋     

温度对纪鼠心肌细胞内游离钙的影响

目的 探讨温度以纪鼠心肌细胞内游离钙的影响 方法 用萤光探针Ｆｕｒａ－２及ＢＣＥＣＦ染料结合计算机图处理技术，观察温度对心肌细胞内Ｃａ＾２＋浓度的影响。结果 发现低温引起细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度明显上升，而异搏定能显著地降低低温心肌细胞内的游离Ｃａ＾２＋浓度，结论低温对幼鼠心肌细胞不利。     

海风藤醇B对PAF诱导的兔血小板钙内流和胞内游离钙浓度升…

应用＾４５Ｃａ＾２＋和钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２／ＡＭ进行实验，发现海风藤醇Ｂ（１０，１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１）无论对血小板激活因子（ＰＡＦ）引起的兔洗涤血小板Ｃａ＾２＋内流还是胞内游离钙浓度（Ｃａ＾２＋）升高均有抑制作用，且呈良好的剂量相关，最大抑制率分别为３７．２％和５０．８％，但对Ａ２３１８７引起的胞内（Ｃａ＾２＋）升高无显著抑制作用。结果表明，海风藤醇Ｂ能选择性拮抗ＰＡＦ诱导的钙内流的Ｃａ＾     

维生素C对柯萨奇B3病毒的心肌细胞的保护作用研究

观察维生素Ｃ对柯萨奇Ｂ３病毒的复制和对病毒感染心肌细胞的影响，结果表明：维生素Ｃ对ＣＶＢ３感染的心肌细胞具有保护作用，加ＶｉｔＣ培养２４ｈ后，随时间延长，保护作用越来越明显（Ｐ〈０．０５）；实验结果还表明，ＶｉｔＣ在细胞外并无直接灭活病毒作用，而是作用于细胞，影响病毒的复制，从而使心肌细胞得到保护。     

大鼠脑挫伤后脑不同部位细胞和线粒体内的钙含量变化

用原子吸收分光光度法（ＡＡＳ）及比色法分别测定了脑挫伤后８ｈ大鼠各脑区细胞内钙（Ｃａｉ）、组织总磷（Ｐｔ）、线粒体钙（Ｃａｍｔ）、线粒体（Ｐｍｔ）的含量变化，结果表明原发损伤可使多数脑区的细胞受体影响并发生Ｃａ＾２＋内流，局部伤情影响着Ｃａ＾２＋内流程度；内流Ｃａ＾２＋多是以结合形式沉积于胞浆等部位以维持胞内Ｃａ＾２＋浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）稳定，蛋白质是可能的主要结合剂；但严重的Ｃａ＾２＋内流将     

高血压病人血脂与细胞膜离子转运的关系

目的：了解在高血压病中血脂对细胞膜离子转运的影响。方法：观察５１例高血压（ＥＨ）人及２０例正常对照者血总胆固醇（ＴＣ）、甘油三脂（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－ｃ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－ｃ）、载脂蛋白Ｂ－１００（ＡｐｏＢ－１００）及红细胞膜Ｎａ泵、Ｈ交换、＾４５Ｃａ＾２＋内流。结果；ＥＨ病人ＴＶＣ、ＴＧ、ＬＤＬ－ｃ、红细胞Ｎａ／Ｈ＋交换、＾４５Ｃａ＾２＋内流均高Ｎａ泵活悸降低、＾４５     

钙与心血管疾病

Ｃａ＾２＋在心肌细胞兴奋收缩耦联中起着极为重要的作用。胞浆中游离Ｃａ＾２＋浓度异常增高可导致细胞内Ｃａ＾２＋超载,是心肌缺血、坏死的重要因素。能量耗竭、心肌挛缩、核Ｃａ＾２＋稳态失衡、细胞膜受损等均可使心肌细胞内Ｃａ＾２＋超载。Ｎａ＾＋－Ｖａ＾２＋交换是导致Ｃａ＾２＋超载的主要途径。钙拮抗剂是防止Ｃａ＾２＋超载的首先药物。     

缺血及缺血／再灌心律失常大鼠心肌^45Ca^2＋内流变化

本实验采用麻醉大鼠缺血、及缺血再灌心失常法以及同位素示踪法，对大鼠心肌缺血４０ｍｍ和缺血１０ｍｍ再灌注３０ｍｍ心律失常发生与心肌损伤致Ｃａ＾２＋内流的变化进行了观察。结果表明，心肌缺血４０ｍｍ心失常发生较轻ＶＦ（５３％），＾４５Ｃａ＾２＋内流不明显（与正常心肌组比Ｐ〉０．０５）。缺血１０ｍｍ再灌３０ｍｍ心失常发生严重（９１％），室颤发生率较高（８０％），＾４５Ｃａ＾２＋内流量明显增加。证实缺血性心     

血管紧张系Ⅱ受体基因敲除对跨膜钙内流的作用

目的 观察血管紧张素Ⅱ受体亚型（ＡＴ１ａ）基因敲除对跨膜钙内流的影响。方法 培养ＡＴ１ａ基因敲除及其野生型对照小鼠的主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）和应用荧光倒置显微镜及钙荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ动态观测ＶＳＭＣ钙离子（Ｃａ＾２＋）ｉ变化。结果 在血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）刺激下钙内流显著增加,ＡＴ１ａ敲除组ＶＳＭＣ钙净增值为（２０４±２２）ｎｍｏｌ／Ｌ,基础（Ｃａ＾２＋）ｉ为（１０８±９）ｎｍ     

模拟航海运动病Ca^2＋内流机制探讨

采用正负交变加速度旋转刺激制备大鼠运动病模型，对运动病大鼠大脑皮质、小脑皮质、脑干前庭区脑细胞的Ｃａ＾２＋变化、ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ、Ｆｏｓ蛋白、Ｎａ－Ｋ－ＡＴｐａｓｅ、细胞色互氧化酶、碱性磷酸酶等指标进行了观察，对运动病大鼠血浆ＴＸＢ２、６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α和心钠素等进行了放射免疫测定。结果表明，大鼠脑细胞Ｃａ＾＋内流和脑血流减少是诱发运动病的重要固定之一。用脑益嗪处理大鼠以阻滞Ｃａ＾２＋内流