肼化辣根过氧化物酶糖蛋白染色法

探索一种简便灵敏的糖蛋白半定量法。在 ｐＨ ５．０，碳二亚胺（ＥＤＣ）催化下，辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）与己二酰二肼反应生成肼化的ＨＲＰ（ＨＲＰ－ＨＺ），固相于硝酸纤维素膜上的糖蛋白（纤连蛋白或转铁蛋白）经过碘酸氧化其糖链中的糖基后生成的醛基可与ＨＲＰ—ＨＺ缩合，用ＨＲＰ的发包底物显色即可检出精蛋白的存在与否。结果：糖蛋白中，１０ ｎｇ的糖即可被检出。结论：与其他糖定量方法相比，该方法灵敏度高，方法简便，能够普遍应用。     

胆管癌胆汁糖蛋白及其糖链结构的初步研究

目的 寻找对胆管癌具有诊断价值的特异性标志物。方法 应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析４１例恶性胆道病变（胆管癌２７例、胆囊癌９例、壶腹癌５例）和２０例良性胆道病变病人胆管胆法中蛋白成分的差异。应用糖蛋白定性试验分析差异蛋白是否为糖蛋白。采用制备好的ＨＲＰ标记凝集素探针（ＤＳＡ－ＨＲＰ、ＷＧＡ－ＨＲＰ、ＬＣＡ－ＨＲＰ、ＣｏｎＡ－ＨＲＰ）对分离出的差异糖蛋白的糖链结构进行初步分析。结果 胆管癌胆汁中存在４种差     

视网膜色素上皮细胞吞噬机理的研究

用富含甘露糖的糖蛋白（ＨＲＰ）作吞噬刺激物，Ｄ－甘露糖作抑制剂测定Ｗｉｓｔａｒ大鼠ＲＰＥ细胞内摄入的ＨＲＰ吞噬体的数量及其含量。结果表明ＲＰＥ细胞内ＨＲＰ吞噬体数量在３０分钟内迅速增加，其含量在４小时内呈稳定持续增加；加入１０ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｄ－甘露糖对其有明显抑制作用，提示ＲＰＥ细胞摄入ＨＲＰ主要是由特异性甘露糖受体所介导。     

视网膜色素上皮细胞吞噬机理的研究：甘露糖受体…

用富含甘露糖的糖蛋白作吞噬刺激物，Ｄ－甘露糖作用制剂测定Ｗｉｓｔａｒ大鼠ＲＰＥ细胞内摄入的ＨＲＰ吞噬体的数量及其含量。结果表明ＲＰＥ细胞内ＨＲＰ吞噬体数量在３０分钟内迅速增加，其含量在４小时内呈稳定持续增加；加入１０ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｄ－甘露糖对其有明显抑制作用，提示ＲＰＥ细胞摄入ＨＲＰ主要由特异性甘露糖受体所介导。     

近超声驱蚊器驱蚊效果的实验观察

本文对５ＫＨＺ－７３ＫＨＺ（５３ＫＨＺ－６５ＫＨＺ缺如）近超声驱蚊器驱蚊效果进行了实验观察，结果证实各型驱蚊器对蚊虫驱赶效果不明显，对雌蚊吸血活动无影响。     

大鼠颞叶皮质谷氨酸能神经元至纹状体的投射

用辣根过氧化物酶逆行追踪与免疫细胞化学结合方法，对大鼠颞叶皮质谷氨酸能神经元及纹状体的投射进行了研究。结果发现，将ＨＲＰ注入一侧新纹状体后，双侧颞叶皮质Ⅲ－Ⅴ层内可见３种不同标记细胞：ＨＲＰ单标记细胞，Ｇｌｕ单标记细胞和ＨＲＰ与Ｇｌｕ双标记细胞，其中ＨＲＰ单标记细胞及ＨＲＰ与Ｇｌｕ双标记细胞以同侧略多。     

链球菌G蛋白在检测实验动物特异性抗体中的应用

用卫生部武汉生物制品研究所研制的酶联链球菌Ｇ蛋白（ＨＲＰ－ＳＰＧ），配以自制的检测鼠肝炎病毒和仙台病毒抗体的试剂盒，测定小鼠、仓鼠、大鼠、豚鼠和沙鼠血清中的相应抗体，并与ＨＲＰ－ＳＰＡ对比。动物经病毒感染后，产生以ＩｇＧ为主的抗体。以ＨＲＰ－ＳＰＧ作为酶结合物，其结合谱比ＳＰＡ大。用于检测病毒特异抗体时，对大鼠和仓鼠的检出率，明显高于ＨＲＰ－ＳＰＡ，对小鼠和豚鼠则结果近似。用两种酶结合物均未查出沙     

采用酶标凝集素检测特异的糖蛋白

红桂木凝集素和木菠萝凝集素经过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶得到ＡＬＬ－ＨＲＰ和Ｊａｃａｌｉｎ－ＨＲＰ的酶标复合物。通过对１６种蛋白质进行检测，发现这两种凝集素均与胃蛋白酶，β－乳球蛋白结合（ＡＬＬ还可与牛血清白蛋白结合），其中与胃蛋白酶的结合最强，糖抑制试验表明半乳糖，棉子糖均可抑制两种凝集素对胃蛋白酶的作用。利用ＡＬＬ－ＨＲＰ酶联法检测１５例正常人胃液中的胃蛋白酶，酶含量为（１．２２５±０．７９５     

大鼠中缝背核至尾壳核的SOM能投射——HRP法与PAP法的联合研究

采用ＨＲＰ逆行追踪与免疫细胞化学相结合的方法对大鼠中缝背至尾壳核的ＳＯＭ能纤维投射进行了研究，结果显示，将ＨＲＰ注射至尾壳核，并用ＨＲＰ－ＰＡＰ法联合应用技术后，在大鼠中缝背核内均可见到明显的双重染色胞体大鼠即ＨＲＰ－ＳＯ示记核周体，其分布具有一定的局部定位关系。这类细胞主要们缝背核尾侧部，且缝际区多于外侧区，表明中缝背核至尾壳核的投影，含有生长抑制样纤维。此外，在该核内还可见到数量不等的ＨＲＰ和     

抗独特型抑制法测定可溶性IL—2受体的实验研究

本研究用抗独特型抑制法测定可溶性ＩＬ－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）。主要步骤为：以抗ＩＬ－２Ｒα单抗５Ｇ１包被，加入ｓＩＬ－２Ｒ及针对包被单抗的抗独特型酶标抗体ＨＲＰ－２Ｇ３。ｓＩＬ－２Ｒ与ＨＲＰ－２Ｇ３竞争结合包被单抗，其含量与显色ＯＤ值成反比。本法简便，灵敏，特异性好，可望用于基础及临床研究。     

肝胆显象剂－~（99m）Tc－芳甲酰肼羰甲基亚氨二乙酸类的合成和动物实验

合成９个新类型芳甲酰肼羰甲基亚氨二乙酸衍生物，用氯化亚锡还原高锝酸钠制得９９ｍＴｃ－标记化合物，用小白鼠和家兔实验的结果，都显示不同程度为肝脏细胞吸收，血中清除和分泌于胆道。其中以９９ｍＴｃ－２－甲氧基－５－溴苯甲酰肼羰甲基亚氨二乙酸的特异性较好。     

大鼠大脑皮质—蓝斑—小脑通路：HRP溃变电镜研究

目的 为了在超微水平上证实皮质－ＬＣ－小脑通路的存在。方法 采用顺行溃变与ＨＲＰ逆行示踪相结合电镜技术。结果 在ＬＣ颅则部观察到中（ｄ〈２ｕｍ）、小（ｄ〈１ｕｍ）型溃变前囊，以电子致密型为主，偶见神经微丝型溃变。电子致密型溃变前囊中的小泡以圆形清亮小泡为主，偶见大颗粒小泡和扁平小泡。同时在ＬＣ的颅侧部观察到大量ＨＲＰ逆标神经元胞体和树突，部分溃变前囊与ＨＲＰ逆标神经元形成非对称型轴－树突触，部分溃变的前囊与非ＨＲＰ标记树突形成轴－树突触。结论皮质－ＬＣ投射和ＬＣ－小脑投射在ＬＣ内存在单突触连接；皮质纤维不仅投向ＬＣ内的小脑投射神经元，也投向ＬＣ内其它神经元。     

大鼠下丘脑室旁核接触脑脊液神经元的光镜及电镜观察

目的 探讨脑－脑脊液之间进行信息交换的结构基础。方法 用ＣＢＨＲＰ追中学结合电镜技术。结果 将ＣＢ－ＨＲＰ注入第三脑室后，在下丘脑人见到ＨＲＰ标记神经元，包体为多角型或形，有的标主神经元胞体似突入第三脑室中，有的标记神经元突起伸入到下丘脑室产质内，在电镜下可见一丘脑室人ＨＲＰ反应阳性神经元的胞体、树突和轴突终末，ＨＲＰ的反应物为高电子密度呈针状或块状。结论下丘脑室离脊液神经元。     

肝胆显象剂—^99mTc—芳甲酰肼羰甲基亚氨二乙酸类的合成和动物…

合成９个新类型芳甲酰肼羰甲基亚氨二乙酰衍生物，用氯化亚锡还原高锝酸钠制得＾９９ｍＴｃ－标记化合物，用小白鼠和家兔实验的结果，都显示不同程度为肝脏细胞吸收，血中清除和分泌于胆道，其中以＾９９ｍＴｃ－２－甲氧基－５－溴苯甲酰肼羰甲基亚氨二乙酸的特异性较好。     

壳聚糖作为敏感膜材料的研究

以壳聚糖为膜材料制成薄膜，运用生物素－亲和素系统将辣报过氧化物酶（ＨＲＰ）固定在膜上，固定化过程对ＨＲＰ的活性无影响，而其稳定生提高，运用Ｌｕｍｉｎｏｌ－Ｈ２Ｏ２－ＨＲＰ化学发光体系，对水样中微量Ｈ２Ｏ２进行检测，在１０＾－６～１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ范围内线性关系良好，回归方程：Ｙ＝２０．６４８Ｘ－２１５．２３９（Ｘ：ｎｍｏｌ／Ｌ），检测灵敏度为０．５ｎｍｏｌ／Ｌ。实验研制的壳聚糖膜可制成生物传感顺     

脊髓运动神经元嫌Golgi树突的更论证

以ＣＢ－ＨＲＰ法（前后肢５块肌注射）和Ｇｏｌｇｉ法，对同窝大鼠脊髓相应切片进行观察，佐以还原银切片分析。以前角外侧部细胞数相比，ＣＢ－ＨＲＰ切片是Ｇｏｌｇｉ切片的２倍。以标记或浸染的侧索内白质树突（ＷＭＤ）的表面密度相比，ＣＢ－ＨＲＰ胫骨前肌注射者是Ｇｏｌｇｉ切片的２．９倍。ＣＢ－ＨＲＰ各肌注射组的ＷＭＤ均能长达侧索周边部，其中不少形成软脊膜边缘丛，即嫌Ｇｏｌｇｉ树突（ＧＢＤ）。前角内侧部细胞远达     

恶性疟原虫HRPⅡ基因多态性分析

采用ＰＣＲ方法扩增恶性疟原虫云南株（ＰＦＤ－３／ＹＮ）与海南株（ＦＣＣ－１／ＨＮ）富含组氨酸蛋白Ⅱ部分基因序列，对扩增片段进行了限制性内切酶分析及部分基因序列测定，用ＰＣＧＥＮＥ软件对恶性疟原虫ＰＦＤ－３／ＹＮ、７Ｇ８及Ｄ１０３个虫株部分ＨＲＰⅡ基因序列进行了比较分析。结果显示ＨＲＰⅡ在３个虫株间存在不同程度的差异，我国疟原虫虫株无ＨＲＰⅡ基因缺失突变现象。     

采用白桂木凝集素-HRP测定唾液SIgA方法的建立

目的 建立白桂木凝集素－ＨＰＲ夹心法检测唾液中分泌型ＩｇＡ（ＳＩｇＡ）。方法 制备ＡＨＬ－ＨＲＰ作为酶标凝集素，ＡＨＬ为包被物，确定最适包被浓度及ＡＨＬ－ＨＲＰ工作稀释度，夹心酶联检测ＳＩｇＡ，进行检出限、精密度、准确性等实验并制备标准曲线，初步测定７１例正常人唾液ＳＩｇＡ含量。结果 ＡＨＬ－ＨＲＰ夹心法检测ＳＩｇＡ标准曲线线性检测范围５～３３７ｍｇ／Ｌ。本法测定７１例健康人唾液ＳＩｇＡ含量为（５     

人皮肤成纤维细胞纤连蛋白的纯化及其N-糖链结构

研究人皮肤成纤维细胞纤连蛋白及其片段 Ｎ－糖链结构。用明胶－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和柱纯化培养的人皮肤成纤维细胞所分泌的纤连蛋白（Ｆｎ），用胰糜蛋白酶限制性水解，获得明胶结合片段和肝素结合片段；用肼化的凝集素与经过碘酸氧化后的辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）缩合的方法制备 ４种 ＨＲＰ－凝集素（Ｃｏｎ Ａ， ＤＳＡ，ＷＧＡ，ＬＣＡ）探针，用Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ法检测明胶结合片段（Ｍｒ４３ × １０３）、肝素结合片段（Ｍｒ３０ ×１０３，２５ ×ｌ０３）在切除唾液酸及平分型 Ｎ－乙酰氨基葡萄糖（ＧＩｃＮＡｃ）前后的 Ｎ－糖链结构。结果： Ｆｎ的 Ｎ－糖链主要存在于 Ｍｒ分别为４３ × １０３、３０ ×１０３、２５ ×１０３的３个片段上，其结构为二、三（主要是Ｃ２Ｃ２６）或四天线的复杂型糖链；糖链末端连有唾液酸（ＳＡ）；都含有核心岩藻糖（ｃ－Ｆｕｃ；平分型 ＧｌｃＮＡｃ只存在于 ４３ × １０３片段所连的糖链中，而且很可能与 Ｃ—Ｆｕｃ共同存在于二天线或Ｃ２Ｃ２６三天线精链上；Ｆｎ的糖链中不含有Ｎ－乙酰乳糖胺重复顺序。结论：在Ｆｎ不同片段上均含有复杂型Ｎ糖链，并存在核心岩藻糖结构，平分型ＧｌｃＮＡｃ只存在于４３ ×１０３片段上。     

脑脊液α_1－抗胰蛋白酶、α_1－酸性糖蛋白测定在脑膜炎、脑炎鉴别诊断中的价值

脑脊液α_１－抗胰蛋白酶、α_１－酸性糖蛋白测定在脑膜炎、脑炎鉴别诊断中的价值李玉秀，石淑娟，王翠霞，刘秋月附属二院血液研究室（０５００００）附属二院检验科关键词脑脊液；α_１－抗胰蛋白酶；α_１－酸性糖蛋白；脑膜炎；脑炎，测定脑脊液（ＣＳＦ）检测对脑膜...