应用单克隆抗体检测华支睾吸虫病人的循环抗原

本文应用抗华支睾吸虫成虫抗原的单克隆抗体建立了Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，以检测华支睾吸虫病人血清中的循环抗原。被检的６１例中５１例（８３％）呈阳性反应，而肺吸虫、血吸虫、旋毛虫、猪囊虫病人以及健康人均为阴性。     

四种方法检测伯氏疏螺旋体IgG抗体比较

用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法、ＥＬＩＳＡ法、ＩＦＡ法及ＣＦ法进行了检测兔莱姆病血清ＩｇＧ抗体的比较实验。对１０例人工感染伯氏疏螺旋体（莱姆病病原体）的兔血清的检测结果表明,Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法与ＥＬＩＳＡ法,ＩＦＡ法及ＣＦ法的符合率分别为１００％、９０％和７０％;对１２例正常兔血清的检测,符合率均为１００％。这提示,Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法可能成为一种用于检测人或动物莱姆病血清抗体的简便方法。     

单克隆抗体双夹心ELISA检测血吸虫循环抗原对抗血吸虫药疗效考核的价值

应用日本血吸虫抗３１／３２ｋＤ（１Ｄ＝０．９９２１ｕ）单克隆抗体双夹心酶联免疫吸附试验（双夹心ＥＬＩＳＡ）检测血吸虫循环抗原，用于城市急性血吸虫病经吡喹酮治疗５年后无再次感染患者的疗效考核，阳性率为１２．２０％。与快速法ＥＬＩＳＡ检测循环抗原的符合率为９６．３４％。与常用检测抗体的ＩＨＡ、ＥＬＩＳＡ法平行对照，阳性率基本一致。与改进的粪便孵化法比较，两法的符合率为８５．３６％。无疫水接触史健康人未见阳性反应。对肝病患者无交叉反应。结果显示双夹心ＥＬＩＳＡ法检测循环抗原敏感性高，特异性强，具有良好的抗血吸虫药物疗效考核价值。     

用抗弓形虫单克隆抗体检测孕妇血清中弓形虫循环抗原

用抗弓形虫单克隆抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测３５０例孕发和１８例娩出畸形儿的产妇血清中的弓形虫循环抗原（ＣＡｇ）、同时用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测这批血清中的弓形虫体ＩｇＧ。３５０例孕妇血清中弓形虫ＣＡｇ阳性３例，阳性率为０．８６％。弓形虫Ｉdisplay status     

生物素-亲和素系统检测弓形虫病的研究

①目的建立简易、实用的生物素－亲和素系统（ＡＢＣ）的免疫酶染色试验（ＡＢＣ－ＩＥＳＴ）和斑点酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）的方法，以检测弓形虫病的微量抗体。②方法以全虫和可溶性虫体为抗原，在常规ＩＥＳＴ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的基础上，加用ＡＢＣ，观察其特异度和敏感度。③结果ＡＢＣ－ＩＥＳＴ和ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的特异度和常规法相同，但敏感度有显著提高。④结论ＡＢＣ法可应用于微量抗体及早期感染的检测。     

圆斑酶联免疫吸附试验诊断囊虫病——生物素-亲和素酶复合物在该方法中的应用

目的：应用生物素－亲和素－酶复合物系统，建立一种繁感、特异、经济简便的囊虫病血清学诊断。方法：生物素－亲和素－酶复合物圆斑酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、滤纸血斑ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。结果：ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ 诊断囊虫病，检出率（９５．９２％ ）远较圆斑酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）高８３．６７％ ，平均几何滴度（１∶２ ８０１．７３）约为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ（１∶５８７．２６）的５ 倍；用该方法对４℃条件下保存３ 月的患者滤纸血斑样本进行检测，阳性率为９４．７４％ （５４／５７），无假阳性反应（０／４５）；对相同患者血清和滤纸血斑双份血样进行检测，阳性率均为９０％ （２０／２２）。结论：该方法提高了检出率，简化了采样及送样程序，适合于边远地区和用于流行病学调查。     

McAb－ELISA检测早孕因子抗原的研究

应用早孕因子单克隆抗体（ＥＤＦ－ＭｃＡｂ），建立早孕因子新的免疫学检测方法，酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）。本文初步确立了用ＥＬＩＳＡ检测ＥＰＦ抗原的实验条件，并与Ｅａ一活性玫瑰花结抑制试验（Ｅａ－ＲＩＴ）进行了比较。结果表明，因ＥＬＩＳＡ检测ＥＰＦ抗原具有特异性好、敏感性高，判断结果客观的特点。     

班氏丝虫宿主循环抗原的检测

应用兔抗牛丝虫抗体ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测安徽流行区人体班氏丝虫循环抗原。微丝蚴血症者血清总阳性率９６％（２４／２５），尿液总阳性率为６０％（１５／２５），４份乳汁阳性率均为１００％。１５份尿液阳性和４份乳汁阳性者与血清阳性结果的符合率分别为１００％（１５／１５）和７５％（３／４）。检测江苏非流行区正常人血清、尿液、乳汁共４３份，全部阴性。１１份肠道线虫感染者尿液全为阴性，血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。１０份肺吸虫感染者血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。结果表明，班氏丝虫循环抗原不仅存在于血清而且存在于尿液和乳汁中。     

血吸虫病人工潜伏疫区监测措施的初步研究

运用ＩＦＡＴ检测血吸虫抗体和单克生抗体,Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测循环抗原。用这两种方法对云南大理市３个不同流行村低年龄组儿童（４－１５岁）进行检测。结果：新村ＩＦＡＴ阳性率（１．３３％）显著你于双阳村（１１．５２％）和沙里木庄村（１５．７９％）;而Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测仅沙里木庄村出现１例阳性反应。结合各地螺情及病情资料分析,认为新村确系防治后出现的有螺无病区,疫情稳定,血吸虫病流行环节已经阻断,对     

应用单克隆抗体Dot—ELISA检测血吸虫病循环抗原…

将抗血吸虫多肽表位的单克隆抗体ＳＪＡ１１１与辣根过氧化物酶结合，用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ直接法检４６２例确诊的血吸虫病人循环抗原，阳性率为７８．５７％（３６３／４６２）；３１例肝吸虫病人，２３例肺吸虫病人和１１８例正常人中，仅１例肺吸虫病人出现交叉反应。循环抗原的阳性检出率与每克粪便虫卵数（ＥＰＧ）呈正相关（ｒ＝０．９７５２，Ｐ〈０．０２５）。血吸虫病人经吡喹酮治疗后６月，循环抗原阴转率为７５．８６％     

斑点酶联免疫吸附试验检测血吸虫病

用成虫、卵及尾蚴抗原做斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA)检测96份血吸虫患者血清,阳性率分别、为70.8%、91.7%及81.3%。三种抗原 Dot—ELISA 的互补阳性率为93.8%。而对50份献血员及38份肺吸虫患者血清进行检测都是阴性。Dot—ELHSA 的重现性及稳定性好,抗原用量少、简单、出结果快。     

斑点酶联免疫吸附试验检测伤寒特异性抗体

目的　验证斑点酶联免疫吸附试验 (Dot -ELISA)检测伤寒抗体的敏感性和特异性。方法　采用Dot -ELISA测定伤寒沙门菌包膜抗原V、菌体抗原O和鞭毛抗原Hd 的特异性抗体 ,并与肥达氏反应相比较。结果　肥达氏反应均为阴性 ,而经Dot -ELISA试验 ,疑似伤寒患者血清中检出 3种抗体阳性 1例 ,非伤寒发热病人血清中检出单项Hd 抗体阳性1例。Dot -ELISA法比肥达氏反应敏感 10倍以上 ,且无交叉反应。结论　该法有较高的特异性和敏感性 ,且操作简单、快速、无需特殊设备 ,宜于临床推广应用。     

DOT-ELISA USING MONOCLONAL ANTIBODIES FOR IDENTIFICATION OF LEISHMANIA DONOVANI

Dot-ELISA with monoclonal antibodies specific to different leishmania species was used for the identification of promastigotes from naturally infected sandflies. In the experiments, monoclonal antibodies L9E4, L9F5 and L7E12 were tested by Dot.ELISA. One of the hybridomas, L9E4 was selected for further analysis. The highest titer of the ascites fluid with promastigotes of MHOM/CX/77/PD, determined by Doc.ELISA, was l:655 360. Promastigotes obtained from naturally infected sandflies and grown in NNN culture medium were identified by monoclonal antibodies from three clones via Dot.ELISA. Promastigotes IPHL/CX84/PD 10,-11 tested with hybridoma L9E4 ascites fluid showed a titer of l:81 920 and was 3-20 times higher than thrit shown by indirect fluorescence. No positive reaction was observed when antigen discs were incubated in negative SP2/0 ascites fluid. The reaction was completed in 2-3 hours. So Dot.ELISA as described proved to be very sensitive, specific and fast in identifying promastigotes from naturally infected sandflies.     

抗rSj14-3-3单克隆抗体检测循环抗原及疗效考核价值的初步研究

目的探讨抗重组日本血吸虫14-3-3(rSj14-3-3)的单克隆抗体检测血吸虫循环抗原对血吸虫病疗效考核的价值.方法制备纯化的抗日本血吸虫14-3-3的单克隆抗体,以纯化的兔抗rSj14-3-3多抗和酶标羊抗兔多抗为检测系统的酶联免疫吸附试验(P-M-ELISA)法,分别对同批治疗前及治疗后2、4、6、12个月的血吸虫病患者和感染兔血清进行检测,并与常规检测抗体的可溶性虫卵抗原-酶联免疫吸附试验(SEA-ELISA)法比较.结果 P-M-ELISA法对治疗前血吸虫病患者检测阳性率为98.2%,而检测抗体的SEA-ELISA为95.5%.P-M-ELISA法对治愈后2、4、6、12个月血清循环抗原检测阴转率分别为17.7%、41.9%、55%、85%,而检测抗体的SEA-ELISA法分别为3.2%、6.5%、12.5%、15%.结论该法既有较好的诊断价值,又有较好的疗效考核价值.     

McAb—ELISA检测血吸虫循环研究：I.McAb的制备,筛选...

Fusions between spleen cells from BALB/c mice infected with Schistosoma japonicum or mansoni cercariae and SP2/0 myeloma were carried out. More than 30 hybridoma cell lines secreting monoclonal antibodies were obtained. Their target antigens were integument, gut and egg respectively. The preliminary tests showed that the antibody against gut-associated polysaccharide antigen had the highest activity of all antibodies obtained. This antibody can be used in the sandwich ELISA to detect trichloroacetic acid soluble antigen at a level of less than 1 ng/ml, A positive reaction was found in a group of infected rabbits, negative in normal and the circulating antigen level correlated with the number of infecting cercariae. Three months after treatment antigen titers of 6/8 rabbits became negative. This report shows that the McAb sandwich ELISA for the detection of circulating antigen is better than other antibody detecting methods. It is also a potential immunodiagnostic method.     

抗食管癌单克隆抗体的免疫组织化学研究

以人食管癌109细胞株免疫BALB/c小鼠获得两株抗食管癌杂交瘤,分别分泌单克隆抗体(McAb)2GF_3和2GF_4。以上述两种McAb的一种或将该二者混合,用ABC染色法检测食管癌和正常组织的石蜡切片,发现该两种McAb对不同组织类型或分化程度不同的食管癌细胞有不同的反应性;而且,应用两种McAb混合液的,可增高在食管癌总体标本中的检测阳性率。     

重组Calpain蛋白诱导抗体产生及检测日本血吸虫感染的研究

目的 研究在大肠杆菌中表达的日本血吸虫Calpain蛋白的免疫原性及其在日本血吸虫病诊断上的应用。方 法用重组Calpain蛋白免疫BALB／c小鼠，ELISA法测定特异性IgG抗体的动态变化及其IgG亚型(IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3)产生特征；同时用重组Calpain蛋白作为诊断抗原，粪检血吸虫病阳性患者血清作为一抗，肝吸虫阳性患者血清作为考核交叉反应血清。结果 重组Calpain抗原免疫小鼠后，产生了一个极高的抗Calpain特异性抗体，免疫4周IgG类抗体达到高峰，与对照组鼠相比较免疫鼠血清中IgG1，IgG2a，IgG2b特异性抗体也显著上升；Calpain重组抗原血清检测日本血吸虫和粪检的符合率为100％，粪检阳性EPG低的个体抗Calpain抗体滴度高，EPG高的患者抗Calpain抗体滴度反而低，与肝吸虫的交叉反应率为37％。结论 日本血吸虫Calpain是一个具有免疫原性的蛋白，能够激发宿主产生高水平的免疫球蛋白，能够敏感地测定日本血吸虫的感染，提示Calpain可以发展成为日本血吸虫病的诊断抗原和日本血吸虫疫苗候选分子。     

McAb-ELISA检测血吸虫循环抗原——Ⅰ.McAb的制备、筛选及初步试验

将感染日本血吸虫或曼氏血吸虫尾蚴的BALB/c小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合,制备了30余株分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤,其靶抗原分别为血吸虫成虫表面膜、肠道、体细胞和虫卵。预试验结果表明,抗血吸虫成虫肠道多糖抗原McAb活性最强,将其用于夹心ELISA检测血吸虫成虫三氯醋酸可溶性抗原,敏感度达1ng/ml。用夹心ELISA测定正常兔血清呈阴性反应;测定感染兔血清呈阳性反应,且抗原水平与感染度呈正相关;8只感染兔治疗后3个月,除2份兔血清外,其余血清均转为阴性。提示本方法优于一般抗体测定法,是一种有潜力的免疫诊断方法。     

重组人内抑素单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的制备抗重组人内抑素(ES)单克隆抗体(McAb)并进行鉴定。方法利用重组人ES为抗原,免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫小鼠的脾细胞与同源小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,间接ELISA法对细胞培养上清进行筛检,对能稳定分泌抗重组人ES的细胞株,进行扩大培养。体内诱生法制备腹水并对其初步鉴定。结果获得3B4、1D10、1G5、2D10,4株能稳定分泌抗重组人ESMcAb的杂交瘤细胞株,并对3B4和1D10两株给予鉴定,其免疫亚型为IgG2a、IgG3。腹水ELISA效价为10-6、10-5。通过蛋白免疫印迹法和免疫组化证明抗体有特异性和敏感性。结论成功制备分泌抗重组人ES的杂交瘤细胞株,为研究人ES的表达及相关领域奠定了基础。     

抗人精浆蛋白McAb的制备及其特性研究

本文报道用杂交瘤技术建立了２株分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体的细胞株Ｄ１和Ｃ１２。Ｄ１株分泌的抗体为ＩｇＭ，Ｃ１２株为ＩｇＧ３。这两株均能与正常人精浆和无精子症患者的精浆产生特异性免疫反应。Ｄ１株单抗具有补体依赖性制动人精子的作用，间接免疫荧光试验表明，它能结合到人精子颈部和顶体后区。这充分说明２株单抗是特异性抗人精浆的，Ｄ１是精子制动抗体，其相应的精子抗原属于精子外套抗原成分之一。