牛磺酸对细胞膜脂流动性的影响

①目的探讨牛磺酸对细胞膜脂流动性影响。②方法以１，６－Ｄｉｐｈｅｙｌ－１，３，５－ｈｅｘａｔｒｉｅｎｅ（ＤＰＨ）为探剂，用荧光偏振法测定荧光偏振度（Ｐ）值和微粘度（η—）研究细胞膜脂的流动性。③结果饮水中添加１％牛磺酸喂养１１０ｄ的正常小鼠（实验组），其红细胞的Ｐ值与η—分别为０．２４３±０．０１５和２．３９２±０．６５０；而正常饮水的对照组分别为０．２６７±０．０２１和２．８２１±０．５８０．实验组红细胞（ＲＢＣ）膜流动性优于对照组（ｔ＝２．６０，Ｐ＜０．０５）。实验组艾氏腹水瘤小鼠的瘤细胞膜的Ｐ值和η—分别为０．１０８±０．０２０和０．６１８±０．１４０；而对照组０．１３９±０．０２０和０．８７４±０．１５０．实验组瘤细胞膜流动性也明显优于对照组（ｔ＝３．２７，Ｐ＜０．０１）。④结论牛磺酸可能对维持细胞膜的稳定性起积极的作用。     

葡萄糖－6－磷酸脱氢酶缺乏时红细胞膜氧化性变化

用荧光分光法测定红细胞膜过氧化脂质（ＭＤＡ），同时用荧光偏振法，以疏水性荧光探剂１，６－二苯基－１，３．５－己三烯（ＤＰＨ）标记正常人及葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏者的红细胞膜脂区，测定０℃和９０℃的偏振荧光，膜流动性以荧光偏振度表示。结果发现：Ｇ６ＰＤ缺乏时红细胞膜ＭＤＡ含量（１．４８±０．０９５）及荧光偏振度（０．２６３３±０．００４３）明显高于正常（０．３８２±０．０７２及Ｏ２２６１±０．００６９），Ｐ均＜０．０１．即红细胞膜有序程度增高，流动性降低结果提示，Ｇ６ＰＤ缺乏时红细胞膜发生了氧化性损伤，红细胞膜ＭＤＡ含量增加，膜流动性下降，膜ＭＤＡ含量与流动性下降相关．这可能是引起溶血的一个重要原因。     

非胰岛素依赖性糖尿病患者血中IL—2和TNF—α水平评价

测定ＮＩＤＤＭ患者５０例，正常对照组６０例的血清ＩＬ－２和ＴＮＦ－α值，结果ＮＩＤＤＭ患者血中ＩＬ－２和ＴＮＦ－α值分别为６．９３±３．４２ｎｇ／ｌ和１．０２±０．６５ｎｇ／ｌ，较正常对照组稍低，胆两且差异均无显著性（Ｐ〉０．０５）。提示早期、无并发症的ＤＩＤＤＭ患者无明显免疫功能紊乱。ＩＬ－２，ＴＮＦ－α等细胞因子在糖尿病特别是ＮＩＤＤＭ的发生，发展中所起作用有待进一步探讨。     

牛磺酸对小鼠脾细胞DNA修复能力的影响

①目的观察牛磺酸对小鼠脾细胞ＤＮＡ修复能力的影响，以探讨牛磺酸抗衰老的机制。②方法以不同鼠龄小白鼠脾细胞悬液进行培养，实验组培养液中加入牛磺酸（３０μｇ／ｍｌ），以１０ｍｍｏｌ／Ｌ羟基脲抑制ＤＮＡ复制，经紫外线照射后，以３Ｈ－胸腺嘧啶脱氧核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定ＤＮＡ损伤后修复能力。③结果鼠龄１１０ｄ，１５０ｄ和１８０ｄ３组小鼠中，ＤＮＡ修复能力均随鼠龄增加而降低，但在不同鼠龄阶段，牛磺酸组ＤＮＡ修复能力均高于对照组，牛磺酸组的闪烁值分别为８．０±０．６Ｈｚ，５．３±０．５Ｈｚ和４．１±０．４Ｈｚ，而对照组则分别为６．３±０．７Ｈｚ，４．７±０．５Ｈｚ和３．２±０．２Ｈｚ（ｔ＝７．５０，２．８７，３３．８０，Ｐ均＜０．０１）。④结论牛磺酸具有增强小鼠脾细胞ＤＮＡ的修复能力和延缓衰老的作用。     

Ⅱ型糖尿病患者血清钙调素活性的变化

目的探讨２型糖尿病（ＤＭ２）患者血清钙调素（ＣａＭ）活性的变化及其对治疗的反应。方法ＤＭ２患者２６例，行口服降糖药治疗８ｗｋ，采用依赖于Ｃａ２＋的磷酸二酯酶分析法测定治疗前后患者血清ＣａＭ的活性，并设立正常对照组２０例。结果与正常对照组相比，ＤＭ２患者血清ＣａＭ活性明显降低（分别为６３１．６０±１０４．３２μｇ·Ｌ－１和３９９．８１±６８．４１μｇ·Ｌ－１，Ｐ＜０．００１）；口服降糖药治疗可使患者血清ＣａＭ活性明显回升（４９６．６９±５７．９４μｇ·Ｌ－１），但仍未能恢复正常（与正常对照组相比，Ｐ＜０．００１）。结论ＤＭ２患者存在着明显的Ｃａ２＋－ＣａＭ系统的功能异常，此可能与糖尿病的发生机制有关。     

核素显像法测定肾小球滤过率及其临床应用的价值

用９９ｍ锝－二乙三胺五乙酸（９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ）显像法测定了８４例受检者的肾小球滤过率（ＧＦＲ）。１５例正常人ＧＦＲ为１１４．５±１２．９ｍｌ·ｍｉｎ－１／１．７３ｍ２；泌尿系结石组及慢性肾炎组病人ＧＦＲ分别为６７．６±３７．２ｍｌ·ｍｉｎ－１／１．７３ｍ２及５３．２±３６．５ｍｌ·ｍｉｎ－１／１．７３ｍ２，与正常组比较差异有极显著意义（Ｐ＜０．００１）；原发性高血压组病人ＧＦＲ为８８．１±４０．３ｍｌ·ｍｉｎ－１／１．７３ｍ２，较正常组有显著差异（Ｐ＜０．０５）。５３例病人的自身对比研究证实，ＧＦＲ明显比尿素氮和肌酐灵敏（Ｐ＜０．００１），且该方法在测定总肾功能的同时，可显示分肾功能及肾脏形态学方面的资料。讨论了该法测定ＧＦＲ的注意事项。     

低密度脂蛋白-阿克拉霉素复合物抗小鼠肝癌H22的实验研究

形成小鼠皮下实体瘤型及腹水型肝癌Ｈ２２模型，观察低密度脂蛋白－阿克拉霉素（ＬＤＬ－ＡＣＭ）复合物和阿克拉霉素（ＡＣＭ）在荷瘤小鼠体内的抗肿瘤作用。结果表明：（１）对照组Ｈ２２实体瘤瘤重为１．７４±０．６０ｇ，ＡＣＭ组为１．３０±０．５７ｇ，ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组为０．８６±０．４４ｇ，与对照组差异有显著性（Ｐ＜０．０５），与ＡＣＭ组差异不明显（Ｐ＞０．０５）；（２）对照组、ＡＣＭ组及ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组荷腹水型肝癌Ｈ２２小鼠的平均生存时间分别为２４．６±７．５０ｄ，２３．４±７．６７ｄ和１７．１±３．４４ｄ。ＡＣＭ组和ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组荷瘤小鼠存活期均明显长于对照组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组效果好于ＡＣＭ组（Ｐ＜０．０５）。     

月桂酸修饰的超氧化物岐化酶保护红细胞抗氧化溶血作用的实验研究

目的：为了证实月桂酸修饰的超氧化物歧化酶（ＡＣ－ＳＯＤ）保护红细胞抗氧化溶血作用是否更优于未修饰的ＳＯＤ．方法：先在人的红细胞悬液中分别加入ＡＣ－ＳＯＤ（Ａ组）、ＳＯＤ（Ｂ组）、生理盐水（Ｃ组），于３７℃温育２０ｍｉｎ后，洗掉未结合在膜上的酶，再于三组红细胞悬液中均加入黄嘌呤（Ｘ）和黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）以产生超氧阴离子（Ｏ－２）造成溶血．各组再分别温育３０ｍｉｎ和１ｈ，以红细胞加蒸馏水的全溶血试管作为对照，用分光光度法测光密度值，计算溶血率．结果：温育３０ｍｉｎ的溶血率，Ａ，Ｂ，Ｃ三组分别为１１．６±０．８６，１３．３２±１．２５和１４．３４±１．３８，Ａ组明显低于Ｂ组（Ｐ＜０．０５）．Ｂ组与Ｃ组间无明显差异（Ｐ＞０．０５）．温育１ｈ的溶血率分别为１６．３６±０．４８，２３．５４±１．４９和２７．６６±２．３０，Ａ组非常显著地低于Ｂ组和Ｃ组（Ｐ＜０．００１）．结论：月桂酸修饰的ＳＯＤ保护红细胞抗氧化溶血作用明显优于未修饰的ＳＯＤ．     

血清α－L－岩藻糖苷酶活力测定对原发性肝癌的诊断意义

测定了原发性肝癌７７例（ＰＨＣ组），肝硬化３５例（ＤＣ组），消化系统其他恶性肿瘤患者３３例（ＤＳＣ组）及健康人１００例（ＮＣ组）血清α－Ｌ－岩藻糖苷酶（ＡＦＵ）活力。结果表明：ＰＨＣ组ＡＦＵ（６６９．６±１９１．５ｎｍｏｌ·ｍｌ￣（－１）·ｈ￣（－１））显著高于ＮＣ组（３１４．３±６７．０ｎｍｏｌ·ｍｌ￣（－１）·ｈ￣（－１），Ｐ＜０．０１），ＤＳＣ组（３９０．６±１０２．３ｎｍｏｌ·ｍｌ￣（－１）·ｈ￣（－１），Ｐ＜０．０１）和ＤＣ组（４５８．３±１５０．１ｎｍｏｌ·ｍｌ￣（－１）·ｈ￣（－１），Ｐ＜０．０５）。其诊断敏感性和特异性分别为７１．４％和８９．３％，与ＡＦＰ联合检测时ＰＨＣ组总的阳性检出率达８８．２％。     

白血病环腺苷一磷酸水平,腺苷酸环化酶和磷酸二酯酶比活化的比较

采用同位素测定法分别对急性和慢性白血病患者血浆环腺苷一磷酸（ｃＡＭＰ）、腺苷酸环化酶（ＡＣ）和环腺苷酸磷酸二酯酶（ｃＡＰＤＥ）三项指标进行了检测，并与非白血病患者和正常献血员进行比较，发现白血病组的ｃＡＭＰ水平分别为１０．２３±１．６４和１２．５７±１．３８ｐｍｏｌ／ｍｌ，较正常对照组２９．７８±２．６６ｐｍｏｌ／ｍ显著降低（Ｐ〈０．０１），ＡＣ比活力分别为０．３２±０．０２和０．４４±０．０６Ｕ     

离体胰腺神经节的细胞内生物电记录及细胞电生理特性

应用细胞内记录研究猫离体胰腺神经节细胞的电生理特性。结果：细胞的静息电位为－５８；５±８．７ｍＶ（下同）；膜的输入阻抗（Ｒ＿ｍ）、时间常数（τ）和膜电容（Ｃ＿ｍ）分别为６８．６±５．１ＭΩ、３．４±０．２ｍｓ和５０．８±３．９ｐＦ；当细胞内注入去极化电流引起的电紧张电位达阈电位水平时，所有的细胞都能爆发锋电位，阈电位在静息电位基础上去极１９．２±０．５ｍＶ，锋电位的幅度、超射值、时程分别为８１．０±１．７ｍＶ、２２．６±０．９ｍＶ和２．９±０．１ｍｓ。继锋电位后还出现一幅度为２０．５±０．８ｍＶ的锋电位后超极化，刺激突触前神经时，在大部分细胞均能记录到快兴奋性突触后电位（ｆ－ＥＰＳＰ）或顺向动作电位。ｆ－ＥＰ－ＳＰ的幅值、时程及神经传导速度分别为８．９±０．７ｍＶ、２５．８±１．９ｍｓ和０．４８±０．０４ｍ／ｓ。此外，在所有细胞都能观察到自发ｆ－ＥＰＳＰ。ｆ－ＥＰＳＰ由乙酰胆硷通过菸硷型受体引起。     

正常与肿瘤性星形神经胶质细胞细胞间直接通讯的比较

用ＭＴＴ法测定了体外培养的正常星形胶质细胞与恶性ＳＷＯ３８星形胶质瘤细胞的细胞增殖速率，用粘附式细胞仪（ＡＣＡＳ５７０）对２种细胞间隙连接通讯进行测试。结果正常胶质细胞比胶质瘤细胞分化程度高，生长慢（ＯＤ值分别为０．２０１±０．００８和１．０９２±０．０７５，Ｐ〈０．０１），前者间隙连接通讯（１０．０５±８．７２％，ｎ＝２０）显著高于后者（２．８３±５．５％，ｎ＝３８，Ｐ〈０．０５）     

ras和erbB—2癌基因在胃癌,癌旁和正常组织的表达

应用ｒａｓ癌基因产物Ｐ２１蛋白一段氨基酸序列的合成肽的单克隆抗体ＥＢ２４１１和ｅｒｂＢ－２癌基因产物Ｐ１８５抗体，对人胃癌、癌旁和正常组织中ｒａｓ和ｅｒｂＢ－２的表达进行免疫组化研究，结果：Ｐ２１在正常、癌旁和癌组织的阳性率分别为１３．３％、７９．３％和６８．９％；阳性细胞数分别为（４．０±１．５），（２１．９±１０．４）和（１４７．２±４０．０）ｍｍ＾－２，三之间呈显性差异（Ｐ〈０．０１）。     

围术期红细胞丙酮酸激酶活性的变化

目的：观察围术期红细胞内丙酮酸激酶（ＰＫ）活性的变化。方法：将３０例上腹部手术病人分成硬膜外阻滞（ＥＢ）和静脉普鲁卡因复合麻醉（ＩＰＢＡ）两组。结果：两组病人血糖于手术６０分时均开始明显升高，术后第一天值与基础值比较，ＥＢ组：（８．２９±５０），（４．８０±０．１８）ｍｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０１）；ＩＰＢＡ组：（６．３６±０．３３），（４．５５±０．１８）ｍｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０１）。红细胞内２，３－ＤＰＧ浓度无明显改变。但两组ＰＫ活性于术毕６０分时明显下降。其术后第一天值与基础值分别相比较，ＥＢ组：（７．５９±１．０１），（１１．６２±１．０６）ＩＵ／ｇＨｂ（Ｐ＜０．０５）；ＩＰＢＡ组：（７．７５±０．９４），（１１．８４±１．１２）ＩＵ／ｇＨｂ（Ｐ＜０．０５）。结论：在手术创伤后的高血糖反应下，红细胞内ＰＫ活性明显下降，２，３－ＤＰＧ浓度无变化。这可能与红细胞内糖酵解通路受抑制有关。     

甲型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化的检测

作应用ＣＤ系列单克隆抗体、碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶双桥酶法（ＡＰＡＡＰ技术）对甲型肝炎患５２例外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化进行了检测及分析。发现患急性期ＣＤ４＾＋细胞百分率（３０．７±３．４％）较正常对照（３７．７±２．５％）明显降低（Ｐ〈０．０１），ＣＤ８＾＋率则显增高（３５．８±３．９％对２７．７±２．４％，Ｐ〈０．０１），导致ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值（０．８７±０．２对１．３±０．１）     

LPO、MDA、SOD、GSH－PX测定对脑外伤高压氧治疗的疗效评估

对４０例脑外伤患者进行了高压氧治疗，并在治疗前后进行了血清过氧化脂质（ＬＰＯ）、丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）的测定。结果：治疗前ＬＰＯ、ＭＤＡ、ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ分别为：８．０４±１．２５（μｍｏｌ／Ｌ）、７．３５±０．２０（ｎＭ／ｍｌ）、８８．３０±１５．２０（Ｎｕ／ｍｌ）、１７１．５６±２８．２０（ｕ），治疗后为５．３５±１．７５（ｕｍｏｌ／Ｌ），４．８５±１．２０（ｎＭ／ｍｌ），９７．４４±２１．０２（Ｎｕ／ｍｌ），１８８．８５±４５．５５（ｕ）。治疗前病人组ＬＰＯ、ＭＤＡ含量明显高于健康组，而ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ活力则明显低于健康组。治疗后随着症状体征的消失，ＬＰＯ、ＭＤＡ明显降低，而ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ逐渐升高，四项指标均向正常范围逆转。且ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ已接近正常值（Ｐ＞０．０５）．故ＬＰＯ、ＭＤＡ、ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ的测定可做为高压氧治疗脑外伤的有价值的疗效判断指标而用于临床。     

快速分离肝癌患者外周血树突状细胞

目的探讨从肝癌患者外周血中大量快速分离树突状细胞（ＤＣ）有效方法。方法自肝癌患者外周血中分离出单个核细胞（ＰＢＭＣ）;ＰＢＭＣ与Ｇｍ－ＣＳＦ及ＩＬ－４共培养;检测培养前后ＤＣ表面ＨＬＡ－ＤＲ及Ｂ７－２表达水平及ＤＣ诱导Ｔ细胞增殖能力。结果ＧＭ－ＣＳＦ及ＩＬ－４联合刺激选择性使ＰＢＭＣ中ＤＣ大量增殖,并通过增强ＤＣ表面ＨＬＡ－ＤＲ及Ｂ７表达［从（１２．８±１．１）、（１５．１±１．０）增至１９．１±１．７）、（２１．６±１．５）,Ｐ＜０．０１］进一步增强ＤＣ免疫功能［由（６８２０±１４０）增至（１４０９０±１８０）ｍｉｎ－１,Ｐ＜０．０１］。结论联合应用ＧＭ－ＣＳＦ及ＩＬ－４能够从肝癌患者血中制备出大量高免疫活力ＤＣ。     

慢性肾衰血透患者脂质过氧化损伤与NK细胞活性的临床相关分析

本文测定２３例慢性肾衰血透患者血浆ＬＰＯ、ＳＯＤ、ＲＢＣ－ＬＰＯ及ＮＫ细胞活性。结果表明透前血浆ＬＰＯ、ＳＯＤ、ＲＢＣ－ＬＰＯ及ＮＫ细胞活性分别为１０．８５±２．１１ｎｍｏｌ／ｍｌ、４０．２４±８．０ｕ／ｍｌ、２３．９１±５．４９ｎｍｏｌ／ｇＨｂ和２９．９２±６．０８％（正常对照分别为６．５３±０．６５ｎｍｏｌ／ｍｌ、７９．２５±７．６１ｕ／ｍｌ、１６．３３±３．６１ｎｍｏｌ／ｇＨｂ和５１．２１±８．３３％）。透后血浆ＬＰＯ、ＳＯＤ分别为９．３８±１．５４ｎｍｏｌ／ｍｌ和５１．０７＋９．１６ｕ／ｍｌ，结果均与正常对照有显著差异；且透前、透后血浆ＬＰＯ、ＳＯＤ也有显著差异（Ｐ＜０．０１）。它们之间的相关分析表明血浆ＬＰＯ与ＢＵＮ、Ｃｒ呈正相关（ｒ＝０．３２５１Ｐ＜０．０５、ｒ＝０．４１９１Ｐ＜０．０１），与ＳＯＤ呈负相关（ｒ＝－０．５１１９Ｐ＜０．０１）；血浆ＳＯＤ与ＢＵＮ、Ｃｒ呈负相关（ｒ＝－０．５３５３、ｒ＝－０．４７６１Ｐ＜０．０１），ＮＫ细胞活性与ＲＢＣ－ＬＰＯ呈负相关（ｒ＝－０．４１３２Ｐ＜０．０５），与血浆ＬＰＯ、ＳＯＤ、ＢＵＮ、Ｃｒ无相关。上述表明慢性肾衰血透患者有脂质过氧化损伤，ＳＯＤ酶活性下     

非胰岛素依赖型糖尿病患者血NO、IL-2和TNF-α的检测

目的：为探讨非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）免疫调节情况及ＮＯ、ＴＮＦ－α在其肾病发病机制的作用。方法：ＮＯ：比色法测定；ＴＮＦ－α：双抗体夹心酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ法）。结果：ＮＩＤＤＭ肾病组的ＩＬ－２水平（１．２６±０．２４）μｇ／Ｌ明显低于正常（Ｐ＜０．０１），而ＮＯ（ＮＯ－２／ＮＯ－３）（９１．２±２４．３）μｍｏｌ／Ｌ和ＴＮＦ－α（３．４０±１．２０）μｇ／Ｌ则显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；无并发症组有相同趋势，但无统计学意义。结论：提示ＮＩＤＤＭ患者ＮＯ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－２调节紊乱，而且与ＮＩＤＤＭ肾病、感染等并发症有密切关系     

弓状核三种肽能神经元免疫细胞化学分析

使用免疫细胞化学ＰＡＰ法和计算机图象分析等技术，对下丘脑弓状核亮氨酸－脑啡肽（Ｌ－ＥＮＫ），β－内啡肽（β－ＥＮＤ），促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）三种免疫反应阳性细胞进行了半定量研究。结果如下：Ｌ－ＥＮＫ，β－ＥＮＤ和ＡＣＴＨ免疫反应阳性细胞的积分光密度（ＩＯＤ）分别为０．１１０６±０．０３７，０．０８３３±０．０４１６和０．１２５±０．０５１；每个弓状核剖面中它们的阳性细胞数分别为３１．０±９．２，１５．５±４．２和１５．０±５．２。该研究从形态学角度定量分析了弓状核三种肽能神经元，为进一步研究弓状核肽能神经的功能提供了直接依据。