1，6－二磷酸果糖对心肌细胞胞质游离Ca~（2＋）和pH的影响

考察外源性的１，６－二磷酸果糖（ＦＤＰ）对心肌细胞内游离Ｃａ２＋浓度和ｐＨ值的影响。用荧光探针（Ｆｕｒａ－２，ＢＣＥＣＦ）技术同时测定成年大鼠心肌细胞内游离Ｃａ２＋浓度和ｐＨ值，并观察其在缺氧／复氧条件下的变化。结果：在缺氧／复氧过程中，胞质游离Ｃａ２＋浓度缓慢升高，从基础值１３０±２９．５ｎｍｏｌ／Ｌ１升至７４２±１５４ｎｍｏｌ／Ｌ，胞质ｐＨ值则从７．１２±０．０８降至６．７１±０．１３。在含有５ｍｍｏｌ／ＬＦＤＰ的细胞悬液中，则胞质游离Ｃａ２＋上升幅度明显低于对照组（Ｐ＜０．０５），在复氧结束时的最高值为５３８±１９３ｎｍｏｌ／Ｌ，但胞质ｐＨ值的变化与对照组比较无显著差别。结论：ＦＤＰ可以减轻由缺氧／复氧所造成的心肌细胞内游离Ｃａ２＋浓度增高的程度，而对胞质ｐＨ值的变化无明显影响。     

Fura－2荷载血小板胞内游离钙浓度的连续测定

以Ｃａ２＋荧光指示剂Ｆｕｒａ－２荷载血小板，连续测定血小板胞内游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）浓度动态变化。在生理胞外Ｃａ２＋浓度时。正常成人血小板［Ｃａ２＋］ｉ静息水平为１０８．３±３．６ｎｍｏｌ／Ｌ（－ｘ±ｓ－ｘｎ＝１５，下同），以凝血酶０．２Ｕ／ｍｌ作诱导，［Ｃａ２＋］ｉ迅速升至峰值７７０．３±２７．３ｎｍｏｌ／Ｌ，其下降幅度在４ｍｉｎ时为４０．９％±１．８％；以ＴＭＢ８４００μｍｏｌ／Ｌ阻滞胞内Ｃａ２＋释放，［Ｃａ２＋］ｉ的峰值（４４３．７±２７．７ｎｍｏｌ／Ｌ）明显下降（Ｐ＜０．００１），而４ｍｉｎ的下降幅度（４７．７％±３．８％）则无明显差异（Ｐ＞０．０５）。在胞外Ｃａ２＋＜１０－８ｍｏｌ／Ｌ时，［Ｃａ２＋］ｉ静息水平７０．２±７．５ｎｍｏｌ／Ｌ，作同样的诱导，［Ｃａ２＋］ｉ的峰值（３２１．２±１７．８ｎｍｏｌ／Ｌ）及下降幅度（９９．２％±３．６％）均有显著变化（ｐ＜０．００１）。结果表明，本文所建立的方法能连续测定血小板［Ｃａ２＋］ｉ的动态变化。     

蜂毒素对大鼠血小板内钙浓度的影响

应用Ｆｕｒａ－２作为荧光试剂，测定大鼠血小板细胞内Ｃａ＾２＋浓度变化，蜂毒素１．５ｍｇ／Ｌ使血小板细胞内Ｃａ＾２＋浓度增加，悬液中加入ＣａＣｌ２１ｍｍｏｌ／Ｌ，血小板细胞内Ｃａ＾２＋继续增加，维拉帕米３．１２５ｍｇ／Ｌ作用５ｍｉｎ后，蜂毒素仍可使血小板Ｃａ＾２＋增加，但加入ＣａＣｌ２血小板Ｃａ＾２＋的浓度不再增加。提示蜂毒素促进大鼠血小板细胞内Ｃａ＾２＋的释放和细胞外Ｃａ＾２＋进入细胞内。     

染铅鼠海马神经原长时程增强过程中Ca^2＋浓度及PKC活性的…

为探讨中枢神经系统铅中毒的生化机制，以慢性染铅鼠为动物模型，用高叔刺激诱发海马区产生长时程增强后，以Ｆｕｒａ－２为Ｃａ＾２＋指示剂，测定海马神经元Ｃａ＾２＋浓度，以放射性［ｒ－＾３２Ｐ］－ＡＴＰ掺入外源性底物方法测定神经元胞浆及胞膜ＰＫＣ活性。结果：染铅组长时程增强过程中Ｃａ＾２＋浓度明显升高（２３６．４８±６１．８３ｎｍｏｌ／Ｌ，与对照组比较有统计学意义（Ｐ〈０．０００１）。ＰＫＣ活性亦升高（胞     

温度对纪鼠心肌细胞内游离钙的影响

目的 探讨温度以纪鼠心肌细胞内游离钙的影响 方法 用萤光探针Ｆｕｒａ－２及ＢＣＥＣＦ染料结合计算机图处理技术，观察温度对心肌细胞内Ｃａ＾２＋浓度的影响。结果 发现低温引起细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度明显上升，而异搏定能显著地降低低温心肌细胞内的游离Ｃａ＾２＋浓度，结论低温对幼鼠心肌细胞不利。     

荧光试剂法测定小鼠受精卵胞质游离Ca^2＋

目的 通过测定小鼠卵细胞受精过程中胞质游离Ｃａ＾２＋浓度的变化，研究其变化规律及在胚胎早期发育中的作用。 方法 采用Ｃａ＾２＋特导荧光试剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ和ＡＲ／ＣＭ／ＭＩＣ型单细胞阳离子测定系统，测定了休止于第二次成熟分裂中期（ＭⅡ）的小鼠卵母细胞受精过程中的胞质游离Ｃａ＾２＋浓度。 结果 小鼠卵受精过程中胞质游离Ｃａ＾２＋浓度发生波动或振荡。 结论 这对胚胎发育的早期研究有一定意义。     

降钙素基因相关肽对人主动脉平滑肌增殖的影响

以人主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）为模型，用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量测定法观察了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对细胞增殖的影响，并对细胞内Ｃａ＾２＋浓度进行了测定，结果表明，ＣＧＲＰ对人主动脉ＳＭＣ有明显抑制作用，呈浓度依赖性，最佳浓度为１０ｎｍｏｌ／Ｌ，抑制率达４７．４４％，胞浆内游离Ｃａ＾２＋浓度明显降低，提示ＣＧＲＰ降低细胞内Ｃａ＾２＋浓度可能是其抑制ＳＭＣ增殖的作用机制之一。     

冬虫夏草水提液抗心肌细胞缺氧再给氧损伤的实验研究

采用荧光素染色法和ＡＣＡＳ５７０型粘附细胞仪观察冬虫夏草水提液对正常心肌细胞内Ｃａ＾２＋的作用及对缺氧再给氧时细胞内Ｃａ＾２＋的影响。结果显示：冬虫夏草水提液能降低正常心肌细胞内Ｃａ６２＋的浓度，减轻缺氧再给氧时细胞内Ｃａ＾２＋超载现象，二均呈良好的量效关系。     

三七皂甙对烫伤小鼠巨噬细胞IP3→CaM信号途径的影响

目的 研究中药三七皂甙对巨噬细胞（ＭΦ）肌醇脂质信号系统中ＩＰ３－ＣａＭ途径的调理作用。方法 用中药三七皂甙治疗烫伤昆明种小鼠,通过观察伤鼠ＭΦ的ＰＬＣ活性、ＩＰ３活性、胞内Ｃａ２＋浓度、ＣａＭ量和它们参与产生分泌的ＩＬ－１。结果 三七皂甙能使伤后该途径中升高的信使物质及其产物 ＰＬＣ、ＩＰ３、胞内Ｃａ２＋、ＣａＭ和它们参与产生分泌的ＩＬ－１得到一定程度的调理。三七皂甙可使升高的ＰＬＣ活性从（５７．５８±８．９１）μｍｏｌ／Ｌ降到（２７．００±２．３１）μｍｏｌ／Ｌ、可使升高的ＩＰ３活性从（１８ ８４４．５±２ ４４５．９）Ｂｑ／１０６　ｃｅｌｌ降到（４ １６９．７±５４３．３）Ｂｑ／１０６ ｃｅｌｌ、可使升高的胞内Ｃａ２＋ 浓度从（３９３．１８±３９．６２）ｎｍｏｌ／Ｌ降到（９０．５６±７．２１） ｎｍｏｌ／Ｌ、可使升高的 ＣａＭ量从（５９８．１５±５０．２１）ｎｍｏｌ．Ｌ降至（３１６．３１±２５．３５）ｎｍｏｌ／Ｌ、可使升高的ＩＬ－１量从０．９９８±０．０５８降至０．５９０±０．０５０。结论 中药三七皂甙对肌醇脂质信号系统中ＩＰ３－ＣａＭ途径具有较好的调理作用。     

NIDDM患者血小板Ca_(2+)转运及其与聚集功能的关系

３２例ＮＩＤＤＭ患者，分血小板聚集功能亢进组（ｎ＝１７）和无亢进组（ｎ＝１５），探讨Ｃａ２＋转运影响血小板胞浆游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）变化与最大聚集（ＭＡＲ）的关系。结果：亢进组血小板静息［Ｃａ２＋］ｉ高于对照组（１３４．４±２６．４对１０１．５±１３．３ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１）。［Ｃａ２＋］ｉ与ＭＡＲ呈正相关（ｒ＝０．３２１９，Ｐ＜０．０５）以凝血酶刺激，有胞外Ｃａ２＋内流及胞内Ｃａ２＋释放时，亢进组［Ｃａ２＋］ｉ高于对照组（９１８．９±２０７．６对７９１．２±１１９．６ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１），并与ＭＡＲ呈正相关（ｒ＝０．３３７１，Ｐ＜０．０１）；以ＴＭＢ８阻滞胞内Ｃａ２＋释放，组间差异仍然显著（Ｐ＜０．０５）；当缺乏胞外Ｃａ２＋内流时，则组间不呈显著差异（Ｐ＞０．０５）。以钙载体Ａ２３１８７刺激，在有或无胞外Ｃａ２＋时，亢进组［Ｃａ２＋］ｉ均高于对照组（Ｐ均＜０．０５）然而，无亢进组上述各指标与对照组间均未呈显著差异。提示ＮＩＤＤＭ患者血小板聚集功能亢进与［Ｃａ２＋］ｉ变化有关，可能涉及胞浆内Ｃａ２＋稳态异常，凝血酶刺激胞外Ｃａ２＋内流及Ａ２３１８７作用胞内Ｃａ２＋释放增强等环节     

花椒油素对A23187和钙调节血小板及细胞内游离钙作用的研究

目的 研究花椒油素对ＣａＣｌ２和钙离子载体Ａ２３１８７调节血小板及其中Ｃａ＾２＋浓度的作用。方法 比浊法测定血小板聚集,用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光法测定细胞内游离钙的水平。结果 花椒油素显著地抑制ＣａＣｌ２和Ａ２３１８７诱导的血小板聚集,前者的抑制率为９．０％～６７．１％,后者的抑制率为１８．１％～７２．５％。明显降低Ａ２３１８７诱导的血小板胞质游离Ｃａ＾２＋浓度,降低率为１２．８％～６３．４％。结论 花椒油素抑制聚集作用与降低细胞内游离Ｃａ＾２＋水平之间呈线性正相关（Ｐ〈０．０１）。     

17β-雌二醇对人的类成骨细胞HOS TE85胞内游离钙、IP3及钙调蛋白影响

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对成骨细胞胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）、１,４,５－三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量及钙调蛋白（ＣａＭ）含量的影响。方法以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ为钙荧光指示剂,采用激光共聚焦显微系统测定细胞内钙荧光值的改变,以反映［Ｃａ２＋］ｉ含量的变化。用阳离子交换法测定ＩＰ３含量。以测定钙依赖的磷酸二酯酶活性方法测定ＣａＭ含量。结果给予０．１、１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２后５０ｓ胞内钙荧光值分别增加４．７和６．１倍,持续８０～１６０ｓ;以１００ｎｍｏｌ／Ｌｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ预处理细胞,Ｅ２仅使胞内钙荧光值升高１．５倍。加入１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２,ＩＰ３含量在给药后２０～３０ｓ和６０～７０ｓ呈双峰升高。同样剂量的Ｅ２可使ＣａＭ含量增加８５．２％。他莫西芬不能阻断Ｅ２引起的胞内钙荧光值、ＩＰ３及ＣａＭ含量升高的作用,而磷脂酶Ｃ抑制剂使Ｅ２的作用部分或完全抑制。结论Ｅ２作用于胞膜引起胞外钙内流,并通过ＩＰ３导致［Ｃａ２＋］ｉ进一步增加,激活ＣａＭ从而调节细胞功能。     

估算肾功能不全的心衰患者血清地高辛总浓度和DLIS浓度

用超滤－ＦＰＩＡ测定血清地高辛游离浓度，结合其游离百分率，估算了１２例伴有肾功能不全的慢性心衰患者血清地高辛总浓度和地高辛样免疫活性物质（ＤＬＩＳ）浓度。结果表明，１２例患者实测地高辛游离浓度为０．７９±０．４８（０．４６～２．１０）ｎｍｏｌ／Ｌ；实测地高辛总浓度为１．３１±０．８０ｎｍｏｌ／Ｌ，明显高于计算的地高辛总浓度（１．０５±０．６４ｎｍｏｌ／Ｌ），差异显著（Ｐ＜０．０１）。计算的地高辛样免疫活性物质浓度为０．２７±０．１９（０．０７～０．７６）ｎｍｏｌ／Ｌ，该结果与用Ｄａｓｇｕｐｔａ等新近报道的计算方法获得的数据（０．２５±０．１３ｎｍｏｌ／Ｌ）一致。     

aFGF和Genistein对AGZY—83A细胞内PKC活性及[Ca^2＋]i的影响

目的：探讨ａＦＧＦ及ＴＰＫ抑制剂Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ对ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞内ＰＫＣ活性游离Ｃａ＾２＋浓度的影响。方法：用不同浓度的ａＦＧＦ和Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ诱导ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞,（γ－Ｐ＾３２）－ＡＴＰ标记的Ｈｉｓｔｏｎｅ Ⅰ为底物,液体闪烁测定ＰＫＣ活性;Ｆｕｒａ－２／ＡＭ负载荧光光度法测定细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度。结果：ａＦＧＦ诱导后,细胞内ＰＫＣ活性及Ｃａ＾２＋浓度升高,且与ａＦＧＦ呈剂     

一种新的同时测定大鼠心肌细胞内Ca2＋和pH的方法

目的 建立一种同时测定单细胞内Ｃａ＾２＋和ｐＨ的方法。方法 大鼠单个心室肌细胞内同时负载Ｃａ＾２＋和ｐＨ敏感性荧光指示剂ｉｎｄｏ－１和ＳＮＡＲＦ－１,用荧光显微镜法测定细胞内Ｃａ＾２＋和ｐＨ的变化,并建立了测定条件和两种指示剂的细胞内标准曲线。结果 室温下将１０μｍｏｌ／Ｌ的ｉｎｄｏ－１－ＡＭ和５μｍｏｌ／Ｌ的ＳＮＡＲＦ－１－ＡＭ载入细胞内,两种指示剂单负载和以负载时荧光强度和荧光比没有明显不同,     

海风藤醇B对PAF诱导的兔血小板钙内流和胞内游离钙浓度升…

应用＾４５Ｃａ＾２＋和钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２／ＡＭ进行实验，发现海风藤醇Ｂ（１０，１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１）无论对血小板激活因子（ＰＡＦ）引起的兔洗涤血小板Ｃａ＾２＋内流还是胞内游离钙浓度（Ｃａ＾２＋）升高均有抑制作用，且呈良好的剂量相关，最大抑制率分别为３７．２％和５０．８％，但对Ａ２３１８７引起的胞内（Ｃａ＾２＋）升高无显著抑制作用。结果表明，海风藤醇Ｂ能选择性拮抗ＰＡＦ诱导的钙内流的Ｃａ＾     

苄普地尔对大鼠心肌质膜Ca^2＋,Mg^2＋—ATP酶的非竞争抑制作用

钙通道阻滞剂牙普地尔在体外非竞争性抑制大鼠心肌质膜Ｃａ６２＋，Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶，抑缺常数Ｋｉ＝４３．０±１．３μｍｏｌ／Ｌ，半数抑制家度ＩＣ５０＝６７±６μｍｏｌ／Ｌ，表明其钙泵和或钙调素拮抗作用较维拉帕米强。     

呼吸中枢M受体亚型与细胞内钙

目的探讨呼吸中枢Ｍ受体亚型与细胞内钙的关系。方法采用Ｆｕｒａ－２双波长荧光法测定Ｍ１和Ｍ２受体激动剂和拮抗剂对胎鼠桥脑和延脑神经细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的影响。结果在静息状态下，其［Ｃａ２＋］ｉ为７２±６ｎｍｏｌ／Ｌ，加入２００μｍｏｌ／ＬＡｃｈ，［Ｃａ２＋］ｉ升高３８％，匹鲁卡品（Ｐｉｌ）０．４～２００μｍｏｌ／Ｌ无明显的升高细胞内钙的作用，而Ｍ２受体激动剂６β－乙酰氧基去甲托烷（６β－ＡＮ）１～１０μｍｏｌ／Ｌ。对神经细胞内的游离钙均无明显影响。Ｍ１－Ｒ拮抗剂哌仑西平（Ｐｉ）６０μｍｏｌ／Ｌ能拮抗Ａｃｈ升高细胞内钙的作用，Ｍ２－Ｒ拮抗剂ＡＦ－ＤＸ１１６２０μｍｏｌ／Ｌ不能拮抗。结论Ｍ１－Ｒ兴奋与细胞内钙升高有关。     

降钙素基因相关肽对人主动脉平滑肌增殖的影响

以人主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）为模型，用３Ｈ－ＴｄＲ掺入量测定法观察了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对细胞增殖的影响，并对细胞内Ｃａ２＋浓度进行了测定。结果表明：ＣＧＲＰ对人主动脉ＳＭＣ有明显抑制作用，呈浓度依赖性，最佳浓度为１０ｎｍｏｌ／Ｌ，抑制率达４７．４４％。胞浆内游离Ｃａ２＋浓度明显降低，提示ＣＧＲＰ降低细胞内Ｃａ２＋浓度可能是其抑制ＳＭＣ增殖的作用机制之一。     

梭曼中毒复合缺氧损伤对PC12细胞游离钙的影响

目的：探索钙在梭曼中毒神经细胞损伤中的作用及其机理。方法：采用Ｃａ＾２＋指示剂Ｆｕｒａ－２作为细胞内钙离子荧光探针，检测了梭曼中毒复合缺氧损伤时ＰＣ１２细胞内「Ｃａ＾２＋」的变化。结果：单纯梭曼对细胞内「Ｃａ＾２＋」，无明显影响，在乙酰胆碱和／或谷氨酸存在的情况下，梭曼中毒明显升高「Ｃａ＾２＋」，单纯缺氧也可使「Ｃａ＾２＋」升高，梭曼中毒复合缺氧损伤「Ｃａ＾２＋」升高更加明显。尼莫地平可对抗梭中毒