芹菜素对深Ⅱ度烧伤模型大鼠急性肺损伤保护作用及机制研究

目的探讨芹菜素对深Ⅱ度烧伤模型大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法 Wistar大鼠180只,按随机数字表法分为假烧伤组(0.9%氯化钠溶液)、模型组(0.9%氯化钠溶液)、地塞米松5mg/kg组和芹菜素12.5、25、50mg/kg组,除假烧伤组外,均通过烫伤仪(温度106℃、压力0.03MPa、持续时间5s)制备深Ⅱ度烧伤模型大鼠,相应药物治疗14天。检测各组大鼠肺功能指标,计算肺指数,苏木精-伊红(HE)染色法行肺组织病理学检查并行损伤评分,原位末端转移酶标记(TUNEL)法观察肺细胞凋亡,透射电子显微镜观察肺细胞超微结构改变;生化分析法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)]含量。结果与模型组比较,地塞米松5mg/kg组和芹菜素25、50mg/kg组大鼠呼吸频率降低[(100.13±5.69)次/min、(108.72±6.81)次/min、(98.27±5.58)次/min比(116.04±7.25)次/min,P0.05或P0.01]、肺泡通透指数降低[(2.74±0.42)、(2.88±0.46)、(2.19±0.37)比(3.92±0.57),P0.01]、氧分压(PaO2)升高[(6.71±1.30)kPa、(6.59±1.34)kPa、(8.24±1.76)kPa比(4.05±0.86)kPa,P0.01]、肺指数降低[(5.16±0.65)、(5.18±0.71)、(4.53±0.68)比(5.93±0.85),P0.05或P0.01];肺组织形态结构病变、细胞凋亡状况和肺细胞超微结构病变均明显改善,损伤评分降低[(7.76±0.91)分、(7.15±1.12)分、(4.89±0.75)分比(10.73±1.74)分,P0.01],凋亡指数(AI)降低[(36.90±6.45)%、(34.19±6.28)%、(22.14±4.67)%比(51.27±8.03)%,P0.01];SOD活性升高[(58.47±8.70)U/mg、(62.98±9.04)U/mg、(69.13±9.37)U/mg比(48.19±8.24)U/mg,P0.05或P0.01]且MDA含量降低[(4.56±0.92)nmol/mg、(4.29±0.82)nmol/mg、(3.02±0.71)nmol/mg比(5.64±1.10)nmol/mg,P0.05或P 0.01]、TNF-α含量降低[(84.82±11.03)pg/mL、(94.17±12.68)pg/mL、(63.84±9.01)pg/mL比(126.75±15.41)pg/mL,P0.01]、IL-1β含量降低[(0.69±0.16)pg/mL、(0.98±0.17)pg/mL、(0.57±0.13)pg/mL比(1.40±0.29)pg/mL,P0.01]、IL-6含量降低[(104.17±13.99)pg/mL、(135.93±15.02)pg/mL、(97.85±12.16)pg/mL比(183.82±18.15)pg/mL,P0.01];芹菜素25、50mg/kg组大鼠MPO活性升高[(1.29±0.37)U/g、(1.40±0.39)U/g比(0.99±0.24)U/g,P0.05或P0.01]、CAT活性升高[(24.05±5.36)U/mg、(26.24±5.48)U/mg比(17.92±4.33)U/mg,P0.05或P0.01]。与地塞米松5mg/kg组比较,芹菜素50mg/kg组大鼠呼吸频率、肺组织CAT、IL-1β及IL-6含量无明显差异(P0.05),余指标芹菜素50mg/kg组改善更显著(P0.05或P0.01)。结论芹菜素对深Ⅱ度烧伤大鼠急性肺损伤具有保护作用,可能与抑制氧化应激和炎症反应有关。     

冬虫夏草对哮喘模型大鼠肺组织NOD1和NOD2表达的影响

目的观察哮喘模型大鼠肺组织NOD1和NOD2表达,探讨冬虫夏草治疗哮喘的可能作用机制。方法 SD大鼠24只,制备哮喘大鼠模型,给予冬虫夏草水煎剂5mL/只灌胃,分别采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测大鼠肺组织NOD1和NOD2蛋白及mRNA表达量。结果哮喘组大鼠肺组织NOD1 mRNA表达量显著低于对照组[(0.62±0.34)比1,P0.01];冬虫夏草组大鼠肺组织NOD1 m RNA表达量显著高于哮喘组[(0.98±0.22)比(0.62±0.34),P0.01]。哮喘组大鼠肺组织NOD2蛋白光密度值显著低于对照组[(0.18±0.03)比(0.24±0.03),P0.01],哮喘组大鼠肺组织NOD2 mRNA表达量与对照组差异无统计学意义[(0.92±0.32)比1,P0.05];冬虫夏草组大鼠肺组织NOD2蛋白和mRNA表达量显著高于哮喘组[(0.23±0.02)比(0.18±0.03),(1.27±0.48)比(0.92±0.32),P均0.05]。NOD2 mRNA与蛋白表达水平、NOD1 mRNA与NOD2 mRNA表达水平均无显著相关性(n=24,r=0.32、0.20,P0.05)。结论哮喘模型大鼠肺组织NOD1和NOD2表达下降,冬虫夏草可能有上调NOD1和NOD2表达作用。     

槐杞黄对OVA诱导哮喘模型大鼠嗜酸性细胞凋亡及免疫调节因子的影响

目的探讨槐杞黄对哮喘模型大鼠嗜酸性细胞凋亡、Th1/Th2/Th17免疫调节及相关炎症因子的影响。方法将60只SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、地塞米松组、槐杞黄组、槐杞黄联合地塞米松组,每组12只。卵清蛋白(OVA)致敏激发复制大鼠哮喘模型,对照组和模型组大鼠给予生理盐水,槐杞黄组大鼠按0.4g·100g-1·d-1给予槐杞黄颗粒混悬液灌胃,地塞米松组大鼠按0.1g·100g-1·d-1给予地塞米松混悬液,槐杞黄联合地塞米松组大鼠给予槐杞黄(0.4g·100g-1·d-1)+地塞米松(0.1g·100g-1·d-1),连续给药15天后,测定各组大鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、白介素5(IL-5)、白介素3(IL-3)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及白介素17(IL-17)水平;肺泡盥洗液进行白细胞计数及分类;病理切片观察肺组织病理变化;实时定量-PCR测定肺组织Bcl-2、Bax及NF-κB mRNA表达。结果与模型组比较,地塞米松、槐杞黄以及槐杞黄联合地塞米松可显著降低哮喘大鼠血清IgE水平[(57.14±5.66)ng/mL、(57.87±5.31)ng/mL、(46.68±6.67)ng/mL比(84.17±5.41)ng/mL,P<0.05,P<0.01];槐杞黄联合地塞米松可明显降低哮喘大鼠血清IL-5[(23.56±6.60)pg/mL比(32.20±10.64)pg/mL,P<0.05]、IL-3 [(2717.38±128.88)pg/mL比(4235.66±165.50)pg/mL,P<0.01]、GM-CSF[(6.84±5.54)pg/mL比(13.20±2.01)pg/mL,P<0.01]及IL-17[(252.25±15.14)pg/mL比(415.80±32.67)pg/mL,P<0.01]水平;地塞米松和槐杞黄联合地塞米松可降低哮喘模型大鼠肺泡盥洗液白细胞总数[(83.41±4.65)、(63.7±6.10)比(169.40±11.18),P均<0.05],以及嗜酸粒细胞(EOS)[(1.05±0.02)、(0.71±0.04)比(7.01±0.18),P均<0.05]和淋巴细胞(LYM)[(7.91±0.09)、(8.18±0.23)比(17.91±0.11),P均<0.05]百分比。给药组均可缓解大鼠肺组织肺泡壁及气道周围炎症细胞浸润的现象。地塞米松、槐杞黄以及槐杞黄联合地塞米松均可明显降低哮喘模型大鼠肺组织Bcl-2/Bax mRNA相对表达量[(0.92±0.24)、(1.65±0.28)、(0.78±0.44)比(6.08±2.31),P均<0.01]。槐杞黄以及槐杞黄联合地塞米松可降低哮喘大鼠肺组织NF-κB mRNA相对表达量[(1.19±0.11)、(1.10±0.15)比(1.46±0.08),P均<0.05]。结论槐杞黄辅助治疗可减轻哮喘模型大鼠气道炎症,其机制可能与纠正Th1/Th2/Th17免疫失衡,促进嗜酸性细胞凋亡,减少哮喘发作炎症因子水平相关。     

穗花杉双黄酮对脂多糖致大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究

目的探讨穗花杉双黄酮对脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及机制。方法将60只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、阳性对照组和穗花杉双黄酮组(简称穗花杉组),每组15只。模型组、阳性对照组和穗花杉组大鼠均通过气道滴注3.0mg/kg LPS100μL,对照组大鼠气道滴注等体积的生理盐水,6h后阳性对照组大鼠腹腔注射2.5mg/kg地塞米松100μL,穗花杉组大鼠腹腔注射2.5mg/kg穗花杉双黄酮100μL,对照组和模型组注射等体积生理盐水。48h后称重测定大鼠肺组织湿/干重比;苏木精-伊红染色(HE)观察各组大鼠肺组织病理;ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平;RT-PCR检测肺组织miR-140-5p表达;蛋白印迹法(WB)检测肺组织Toll样受体4(TLR4)、核因子活化B细胞κ轻链增强子(NF-κB)蛋白表达水平。利用LPS刺激肺上皮细胞A549,加入穗花杉双黄酮RT-PCR检测miR-140-5P的表达,加入miR-140-5P抑制剂、mimic-NC干预,RTPCR检测TLR4、NF-κB表达。结果穗花杉组大鼠肺组织湿/干重比明显低于模型组[(4.77±0.19)比(5.84±0.27),P0.05];HE染色结果显示,穗花杉组大鼠肺组织结构较ALI模型组大鼠炎症细胞明显减少,肺泡间隔明显变薄;ELISA结果显示,穗花杉组大鼠血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平均明显低于模型组[TNF-α:(395.16±41.23)pg/mg比(846.23±29.26)pg/mg;IL-6:(315.26±30.25)pg/mg比(876.54±45.23)pg/mg;IL-1β:(650.16±29.46)pg/mg比(1056.26±54.16)pg/mg,P均0.05];WB结果显示,穗花杉组大鼠肺组织TLR4、NF-κB表达量明显低于模型组;RT-PCR结果显示,穗花杉组大鼠肺组织和人肺上皮细胞miR-140-5P表达分别高于模型组和刺激组[(0.85±0.13)比(0.34±0.08);(0.81±0.15)比(0.27±0.14),P均0.05];miR-140-5P mimic能明显抑制TLR4、NF-κB表达[TLR4:(0.95±0.12)比(2.31±0.08);NF-κB:(0.97±0.13)比(2.45±0.06),P均0.05]。结论穗花杉双黄酮对LPS诱导的大鼠ALI具有保护作用,其机制可能与促进miR-140-5p mimic表达,抑制ALI炎症过程关键蛋白TLR4、NF-κB表达以及其下游炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β水平有关。     

柚皮素对自身免疫性肝炎模型小鼠保护作用及TRAF6/JNK信号通路的影响

目的探讨柚皮素对自身免疫性肝炎(AIH)模型小鼠保护作用及肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法将72只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为阴性对照组,模型组,柚皮素低(30mg/kg)、中(60mg/kg)、高(120mg/kg)剂量组和阳性对照组(2mg/kg),每组12只。阴性对照组尾静脉注射等量生理盐水,其余各组小鼠一次性尾静脉注射刀豆球蛋白A(ConA)(12mg/kg)制备AIH模型。注射完毕之后,柚皮素低、中、高剂量组和阳性对照组分别灌胃相应药物,阴性对照组和模型组灌胃等量生理盐水,每天1次,持续给予5天。末次灌胃24h后,采用全自动生化分析仪检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肝组织病理学改变,酶联免疫吸附(ELISA)检测小鼠肝组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白免疫印迹法检测小鼠肝组织TRAF6、JNK、磷酸化JNK(p-JNK)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平。结果阴性对照组小鼠肝脏结构未见明显异常;模型组小鼠见大片肝细胞坏死区域,肝索排列紊乱,同时伴有炎性细胞浸润;柚皮素各剂量组和阳性对照组病理改变较模型组减轻,且柚皮素高剂量组与阳性对照组只存在轻度肝细胞坏死。与阴性对照组比较,模型组小鼠血清ALT[(134.82±13.60)U/L比(27.16±4.81)U/L,P0.05]、AST[(156.07±19.81)U/L比(20.49±3.62)U/L,P0.05],肝组织IL-6[(417.26±59.48)pg/mL比(102.18±18.62)pg/mL,P0.05]、TNF-α[(355.22±50.12)pg/mL比(62.17±6.07)pg/mL,P0.05]、TRAF6[(1.08±0.28)比(0.36±0.02),P0.05]、p-JNK[(0.94±0.14)比(0.38±0.02),P0.05]和Bax[(1.24±0.25)比(0.30±0.05),P0.05]蛋白水平增加,Bcl-2[(0.43±0.04)比(1.05±0.21),P0.05]和Bcl-2/Bax[(0.35±0.07)比(3.50±0.45),P0.05]水平降低;与模型组比较,柚皮素低、中、高剂量组和阳性对照组小鼠血清ALT[(119.45±11.72)U/L、(83.29±9.53)U/L、(52.13±9.14)U/L、(54.65±10.63)U/L比(134.82±13.60)U/L,P均0.05]、AST [(122.82±16.53)U/L、(86.51±9.48)U/L、(42.64±7.35)U/L、(46.82±8.27)U/L比(156.07±19.81)U/L,P均0.05],肝组织IL-6[(364.34±41.77)pg/mL、(307.13±37.43)pg/mL、(248.29±32.18)pg/mL、(253.17±34.90)pg/mL比(417.26±59.48)pg/mL,P均0.05]、TNF-α[(293.57±37.68)pg/mL、(240.94±27.49)pg/mL、(153.82±19.92)pg/mL、(149.56±18.08)pg/mL比(355.22±50.12)pg/mL,P均0.05]、TRAF6[(0.86±0.13)、(0.71±0.10)、(0.52±0.07)、(0.49±0.06)比(1.08±0.28),P均0.05]、p-JNK[(0.78±0.11)、(0.64±0.09)、(0.50±0.08)、(0.46±0.07)比(0.94±0.14),P均0.05]和Bax[(1.10±0.19)、(0.95±0.18)、(0.43±0.05)、(0.40±0.12)比(1.24±0.25),P均0.05]蛋白水平降低,Bcl-2[(0.52±0.07)、(0.60±0.10)、(0.73±0.13)、(0.71±0.15)比(0.43±0.04),P均0.05]和Bcl-2/Bax[(0.47±0.04)、(0.63±0.08)、(1.70±0.21)、(1.78±0.38)比(0.35±0.07),P均0.05]水平增加,柚皮素各剂量组之间呈剂量效应关系(P0.05);各组小鼠肝组织JNK蛋白水平变化不显著(P0.05);柚皮素高剂量组与阳性对照组作用相似(P0.05)。结论柚皮素可能通过抑制TRAF6/JNK信号通路,减轻AIH模型小鼠肝脏炎症反应,对AIH模型小鼠肝脏具有保护作用。     

长链非编码RNA牛磺酸上调基因1调节脓毒症患者炎症反应的分子机制研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)对脓毒症炎症反应的调节作用及分子机制。方法选取2018年1月—2018年12月浙江省温州市人民医院收治的脓毒症患者(脓毒症组)30例,及同期健康志愿者(健康对照组)30名,实时定量PCR检测血清lncRNA TUG1和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达水平,酶联免疫吸附反应(ELISA)检测炎症因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)浓度。过表达TUG1慢病毒感染细菌脂多糖(LPS)处理的单核巨噬细胞THP-1,噻唑蓝(MTT)检测细胞活力改变,免疫蛋白印迹(Western blot)检测细胞中HMGB1蛋白表达变化,ELISA检测巨噬细胞炎性因子浓度改变。结果与健康对照组比较,脓毒症组患者外周血lncRNA TUG1水平显著降低[(0.49±0.02)比(1.01±0.02),P0.01],HMGB1水平升高[(1.62±0.03)比(0.98±0.02),P0.01],两者呈负相关;促炎因子浓度显著升高[IFN-γ(33.91±5.81)pg/mL比(26.26±4.22)pg/mL、TNF-α(18.51±2.29)pg/mL比(13.89±2.12)pg/mL、IL-6(37.42±5.22)pg/mL比(19.12±3.34)pg/mL,P均0.05],抗炎因子水平明显下降[IL-10(8.71±1.59)pg/mL比(17.63±2.73)pg/mL,P0.05];LPS处理的THP-1细胞过表达TUG1,细胞活力显著增强[(84.17±4.32)%比(49.18±3.28)%,P0.01];lncRNA TUG1靶向抑制HMGB1表达,促炎因子水平降低[IL-6(211.38±7.87)pg/mL比(602.21±10.08)pg/mL、TNF-α(206.75±8.39)pg/mL比(483.13±13.48)pg/mL,P0.01]。结论 lncRNA TUG1抑制LPS诱导的巨噬细胞促炎因子分泌及HMGB1表达,调控脓毒症炎症反应。     

芹菜素对深II度烧伤大鼠急性肺损伤保护作用的研究

目的 研究芹菜素对深II度烧伤大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法 将120只实验用SD大鼠随机平均分为假烧伤组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、地塞米松5mg/kg组和芹菜素12.5、25、50 mg/kg组。除假手术组外,其余各组大鼠均采用106℃、0.03 MPa压力持续5s的方法制备深II度烧伤大鼠模型。给药治疗14d后,检测各组大鼠肺功能指标,计算肺指数,HE染色法行肺组织病理学检查并行损伤评分,TUNEL法观察肺细胞凋亡,透射电子显微镜观察肺细胞超微结构改变;生化分析法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和MDA含量,ELISA法检测炎症细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6]含量。结果 与模型组比较,地塞米松5mg/kg组和芹菜素25、50 mg/kg组大鼠呼吸频率降低[(100.13±5.69)次/min、(108.72±6.81)次/min、(98.27±5.58)次/min比(116.04±7.25)次/min,P<0.05或P<0.01]、肺泡通透指数降低[(2.74±0.42)、(2.88±0.46)、(2.19±0.37)比(3.92±0.57),P<0.01]、氧分压(PaO₂)升高[(6.71±1.30) KPa、(6.59±1.34)KPa、(8.24±1.76)KPa比(4.05±0.86)KPa,P<0.01]、肺指数降低[(5.16±0.65)、(5.18±0.71)、(4.53±0.68)比(5.93±0.85),P<0.05或P<0.01];肺组织形态结构病变、细胞凋亡状况和肺细胞超微结构病变均明显改善,损伤评分降低[(7.76±0.91)分、(7.15±1.12)分、(4.89±0.75)分比(10.73±1.74)分,P<0.01]和凋亡指数(AI)降低[(36.90±6.45)%、(34.19±6.28)%、(22.14±4.67)%比(51.27±8.03)%,P<0.01];SOD活性升高[(58.47±8.70)U/mg、(62.98±9.04)U/mg、(69.13±9.37)U/mg比(48.19±8.24)U/mg,P<0.05或P<0.01]且MDA含量降低[(4.56±0.92)nmol/mg、(4.29±0.82)nmol/mg、(3.02±0.71) nmol/mg比(5.64±1.10) nmol/mg,P<0.05或P<0.01]、TNF-α含量降低[(84.82±11.03)pg/mL、(94.17±12.68)pg/mL、(63.84±9.01)pg/mL比(126.75±15.41) pg/mL,P<0.01]、IL-1β含量降低[(0.69±0.16)pg/mL、(0.98±0.17)pg/mL、(0.57±0.13)pg/mL比(1.40±0.29)pg/mL,P<0.01]、IL-6含量降低[(104.17±13.99)pg/mL、(135.93±15.02)pg/mL、(97.85±12.16)pg/mL比(183.82±18.15) pg/mL,P<0.01];芹菜素25、50 mg/kg组MPO活性升高[(1.29±0.37)U/g、(1.40±0.39)U/g比(0.99±0.24)U/g,P<0.05]、CAT活性升高[(24.05±5.36)U/mg、(26.24±5.48)U/mg比(17.92±4.33)U/mg,P<0.05或P<0.01]。与地塞米松5mg/kg组比较,芹菜素50 mg/kg组肺泡通透指数降低[(2.19±0.37)比(2.74±0.42),P<0.01]、PaO2升高[(8.24±1.76)KPa比(6.71±1.30) KPa,P<0.05]、肺指数降低[(4.53±0.68)比(5.16±0.65),P<0.05],肺组织损伤评分降低[(4.89±0.75)分比(7.76±0.91)分,P<0.01]、AI降低[(22.14±4.67)%比(36.90±6.45)%,P<0.01],MPO活性升高[(1.40±0.39)U/g比(1.07±0.28)U/g,P<0.05]、SOD活性升高[(69.13±9.37)U/mg比(58.47±8.70)U/mg,P<0.05],MDA含量降低[(3.02±0.71) nmol/mg比(4.56±0.92)nmol/mg,P<0.01]、TNF-α含量降低[(63.84±9.01)pg/mL比(84.82±11.03)pg/mL,P<0.01]。结论 芹菜素对深II度烧伤大鼠急性肺损伤具有保护作用,可能与抑制氧化应激和炎症反应有关。     

抑制高迁移率组蛋白1对大鼠急性脊髓损伤后炎性反应的影响

目的探讨抑制高迁移率组蛋白1(HMGB1)对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)炎性反应的影响。方法选择健康雄性Wister大鼠32只,随机分为正常组、假手术组、模型组、甘草酸(Gly)组,每组8只。正常组大鼠不予任何刺激,假手术组大鼠只咬除T10椎板,不损伤脊髓,模型组和甘草酸组大鼠采用改良Allen’s法制备T10不完全性急性脊髓损伤模型,甘草酸组给予200mg/kg甘草酸灌胃处理,每天1次,连用3天。术后3天取各组大鼠T10段脊髓,应用ELISA法检测脊髓组织HMGB1、核转录因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)水平,qRT-PCR法检测脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达量。结果ELISA结果显示,脊髓损伤后,模型组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β水平较正常组明显升高[(3139.33±68.89)pg/mL比(1977.42±19.08)pg/mL、(2420.16±30.45)pg/mL比(1390.88±15.32)pg/mL;(244.61±5.49)pg/mL比(103.35±2.20)pg/mL、(271.91±3.24)pg/mL比(138.90±3.34)pg/mL、(109.89±3.33)pg/mL比(47.44±1.94)pg/mL,P均<0.01];甘草酸组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β水平较模型组明显降低[(2566.91±23.75)pg/mL比(3139.33±68.89)pg/mL、(1728.55±24.27)pg/mL比(2420.16±30.45)pg/mL、(177.50±4.86)pg/mL比(244.61±5.49)pg/mL、(190.77±1.95)pg/mL比(271.91±3.24)pg/mL、(66.38±3.62)pg/mL比(109.89±3.33)pg/mL,P均<0.01]。RT-qPCR结果表明,模型组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA水平较正常组明显升高[(1.25±0.08)比(0.57±0.02)、(1.66±0.04)比(0.76±0.02)、(1.26±0.06)比(0.53±0.03)、(1.73±0.08)比(0.94±0.07)、(1.82±0.07)比(1.01±0.06),P均<0.01];甘草酸组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA水平较模型组明显降低[(0.79±0.03)比(1.25±0.08)、(1.14±0.04)比(1.66±0.04)、(0.75±0.03)比(1.26±0.06)、(1.37±0.04)比(1.73±0.08)、(1.31±0.04)比(1.82±0.07),P均<0.01]。结论 HMGB1至少部分参与介导ASCI炎性反应,并与HMGB1依赖的NF-κB信号通路密切相关,甘草酸可能通过抑制HMGB1/NF-κB通路减轻大鼠急性脊髓损伤后的炎性反应。     

经皮穴位电刺激预处理对运动性疲劳模型大鼠血脑钠素和尾加压素Ⅱ水平的影响

目的观察经皮穴位电刺激(TEAS)足三里穴对运动性疲劳模型大鼠血脑钠素(BNP)和尾加压素Ⅱ(UⅡ)的影响。方法 21只SD大鼠随机分为正常组、模型组、TEAS组,每组7只。采用跑台运动法建立运动性疲劳模型大鼠,采用TEAS"足三里"穴预处理30min(连续波、频率2Hz、强度5mA)。通过大鼠力竭运动时间评价大鼠运动能力的变化,ELISA法检测血BNP、UⅡ水平。结果模型组大鼠力竭运动时间较正常组明显缩短[(112.54±15.36)min比(158.17±18.93)min,P<0.01],血UⅡ水平低于正常组[(30.67±4.10)ng/mL比(45.82±6.31)ng/mL,P<0.01],血BNP水平高于正常组[(45.73±6.82)pg/mL比(29.45±4.60)pg/mL,P <0.01];TEAS组大鼠力竭运动时间较模型组延长[(146.53±16.42)min比(112.54±15.36)min,P<0.05],血UⅡ水平高于模型组[(38.49±5.16)ng/mL比(30.67±4.10)ng/mL,P<0.05],血BNP水平低于模型组[(32.46±5.39)pg/mL比(45.73±6.82)pg/mL,P<0.05]。结论经皮穴位电刺激足三里穴能降低运动性疲劳模型大鼠血BNP水平,升高UⅡ水平,延长大鼠力竭运动时间,对运动性疲劳大鼠具有一定的保护作用。     

依达拉奉对急性肺损伤的治疗作用及其机制探讨

目的探讨自由基清除剂依达拉奉对急性肺损伤大鼠模型的保护作用。方法将32只SD大鼠随机分为C组(生理盐水+生理盐水,n=8)、E组(生理盐水+依达拉奉,n=8)、LPS组(脂多糖+生理盐水,n=8)和LPS+E组(脂多糖+依达拉奉,n=8),各组经尾静脉注入LPS和依达拉奉或等体积生理盐水。6 h后麻醉大鼠并行动脉血气分析及肺病理学检查,检测血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)及肺组织中丙二醛(MDA)和NO水平。结果与C组相比,LPS组出现明显的肺损伤改变、动脉血氧分压显著下降[(99.37±4.35)mmHg vs(60.11±8.41)mmHg,P<0.01]、血浆中TNF-α[(3.89±0.53)pg/mL vs(11.95±1.97)pg/mL,P<0.01]和IL-6[(4.73±0.91)pg/mL vs(41.25±7.11)pg/mL,P<0.01]显著升高,肺组织中MDA[(2.06±0.42)nmol/mg vs(8.91±2.03)nmol/mg,P<0.01]和NO[(3.97±0.87)nmol/mg vs(8.74±2.01)nmol/mg,P<0.01]也显著升高;与LPS组相比,自由基清除剂依达拉奉使肺组织中MDA[(8.91±2.03)nmol/mg vs(3.76±0.68)nmol/mg,P<0.01]和NO[(8.74±2.01)nmol/mg vs(3.53±0.71)nmol/mg,P<0.01]显著降低,显著减轻急性肺损伤(ALI)大鼠的肺损伤程度,提高动脉血氧分压[(60.11±8.41)mmHg vs(85.69±6.41)mmHg,P<0.01],并使血浆中的TNF-α[(11.95±1.97)pg/mL vs(5.65±1.09)pg/mL,P<0.01]和IL-6[(41.25±7.11)pg/mL vs(11.06±1.27)pg/mL,P<0.01]显著降低。结论自由基清除剂依达拉奉能减轻急性肺损伤的病理生理变化,其机制在于依达拉奉能有效清除自由基并减少致炎因子的释放。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠肺内白细胞介素9和γ干扰素的表达

目的观察大鼠烟雾暴露慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型白细胞介素9(IL-9)和γ干扰素(IFN-γ)的表达,探讨IL-9和IFN-γ与COPD气道炎症的关系。方法单纯熏香烟法建立大鼠COPD模型。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)行白细胞总数和分类计数检测;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清、BALF和肺组织中IL-9及IFN-γ的浓度;肺组织切片行HE染色观察形态学改变;采用图像分析系统定量测定肺平均内衬间隔(Lm)、平均肺泡数(MAN)和支气管壁厚/外径比值。结果(1)COPD组Lm及支气管壁厚/外径高于正常对照组,MAN低于正常对照组,差异有统计学意义(P均<0.01)。(2)COPD组血清、BALF和肺组织中IL-9浓度较正常对照组显著增高[血清:(4.02±2.12)pg/mL比(1.12±0.73)pg/mL;BALF:(5.73±2.60)pg/mL比(0.97±0.45)pg/mL;肺组织:(24.92±6.65)pg/mL比(11.42±4.23)pg/mL;P均<0.01]。COPD组血清、肺组织和BALF中IFN-γ的浓度与正常对照组比较均降低,前两者差异有统计学意义[血清:(21.54±7.65)pg/mL比(69.59±13.68)pg/mL;肺组织:(21.88±6.11)pg/mL比(69.84±15.35)pg/mL;P均<0.05]。(3)与正常对照组比较,COPD组BALF中白细胞总数[(5.29±1.61)×108/L比(2.10±1.19)×108/L,P<0.01]、巨噬细胞绝对计数[(4.42±1.38)×108/L比(1.84±0.93)×108/L,P<0.01]、中性粒细胞绝对计数[(1.32±0.36)×108/L比(0.093±0.043)×108/L,P均<0.01]均显著增高。(4)COPD组BALF中白细胞总数、巨噬细胞绝对计数、中性粒细胞绝对计数与BALF中IL-9浓度均呈正相关(r分别为0.9290、.835和0.924,P均<0.05),与肺组织中IL-9浓度呈正相关(r分别为0.8850、.983和0.775,P均<0.05),与血清中IL-9浓度无明显相关性。血清及BALF中IL-9浓度与IFN-γ无明显相关性,肺组织中IL-9与肺组织中IFN-γ则呈负相关(r=-0.818,P<0.05)。结论吸烟可使IL-9升高,IFN-γ水平降低,可能是吸烟导致COPD的原因之一。气道局部的IL-9表达与COPD气道炎症密切相关,可作为COPD气道炎症的检测指标之一。     

乌司他丁对老年患者腹腔镜子宫全切手术术后认知功能的影响

目的探讨乌司他丁(Uli)对老年腹腔镜子宫全切手术后患者认知功能的影响。方法选择美国麻醉师协会(ASA)Ⅰ或Ⅱ级择期行腹腔镜子宫全切手术的老年患者50例,随机分为观察组和对照组。观察组在常规全麻诱导前静滴乌司他丁,接着持续静脉泵注乌司他丁直至手术结束,对照组给予相应生理盐水。于手术前1天(D0)和手术后1(D1)、3(D2)、7(D3)天测定血清白介素-1(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100β蛋白的含量,并记录简易智力状态检查量表(MMSE)评分,D0和D3测定脑事件相关电位p300潜伏期和振幅,观察术后认知功能下降发生率。结果与D0时间点相比,两组患者在D1时间点均出现MMSE评分的下降[观察组:(24.46±1.69)分比(27.67±2.64)分,对照组:(21.21±1.80)分比(27.19±2.88)分,P0.05]。炎症因子增高IL-1β[观察组:(16.29±4.61)pg/mL比(10.33±2.99)pg/mL,对照组:(19.58±5.69)pg/mL比(10.45±3.12)pg/mL,P0.05]、IL-6[观察组:(26.68±3.53)pg/mL比(3.74±0.58)pg/mL,对照组:(42.55±4.36)pg/mL比(3.96±0.63)pg/mL,P0.05]、TNF-a[观察组:(61.30±11.91)pg/mL比(30.84±3.98)pg/mL,对照组:(80.98±15.33)pg/mL比(30.24±4.05)pg/mL,P0.05],NSE增高[观察组:(5.35±1.69)μg/mL比(2.78±2.36)μg/mL,对照组:(7.87±3.38)μg/mL比(2.89±1.97)μg/mL,P0.05],S100β蛋白表达水平增高[观察组:(0.17±0.13)μg/mL比(0.04±0.01)μg/mL,对照组:(0.22±0.33)μg/mL比(0.04±0.01)μg/mL,P0.05];与对照组相比,观察组在D3时间点MMSE评分增高[(27.54±2.37)分比(25.01±2.12)分,P0.05];与对照组相比,观察组在D3时间点IL-1β、IL-6、TNFa、NSE、S100β蛋白表达水平降低[(10.22±3.20)pg/mL比(13.33±3.58)pg/mL]、[(3.94±0.69)pg/mL比(14.23±0.84)pg/mL]、[(32.52±5.60)pg/mL比(43.07±4.38)pg/mL]、[(2.34±1.10)μg/mL比(5.65±0.89)μg/mL]、[(0.05±0.01)μg/mL比(0.16±0.0)μg/mL],P均0.05;与对照组相比,观察组D3时p300潜伏期缩短[(302.34±29.12)比(353.67±35.65),P0.05],振幅升高[(8.11±2.23)比(5.23±1.93),P0.05],观察组术后认知功能下降发生率低于对照组(P0.05)。结论乌司他丁可减轻或预防老年腹腔镜子宫全切手术患者术后认知功能下降,具有脑保护作用。     

甘麦大枣汤、四逆散及四君子汤对慢性应激大鼠内源性神经生长因子水平的影响

目的 探讨疏肝、养心、健脾疗法对慢性应激大鼠内源性神经生长因子(NGF)水平的影响.方法 120只SD大鼠分为正常组、模型Ⅰ组、模型Ⅱ组、甘麦大枣组、四逆散组和四君子汤组,每组20只.采用长期高压恒流电刺激足底法制作慢性应激动物模型.运用自发活动和穿越实验以及悬尾实验观察大鼠行为学变化.运用放射免疫分析法测定大鼠垂体、下丘脑和血浆中NGF水平.结果 ①与正常组[(1052.64±124.17)mm]比较,两模型组[(809.07±120.39)mm,(809.53±167.77)mm]和四君子汤组[(912.96±114.71)mm]大鼠的自发活动路程明显减少(P<0.01);两个中药组[(995.17±142.8)mm,(1092.58±272.62)mm]明显多于两模型组(P<0.01);②两模型组大鼠的穿越时间[(8.73±3.77)s,(8.07±3.16)s]明显减少(P<0.01);与两模型组比较,三个中药组穿越时间[(13.3±6.15)s,(12.19±5.11)s,(11.7±4.75)s]明显多于两模型组(P<0.01);③两模型组大鼠的站立次数[(4.79±3.47)次,(5.30±3.76)次]明显减少(P<0.01);三个中药组[(7.55±6.56)次,(8.12±4.99)次,(9.51±6.02)次]明显多于两模型组(P<0.05);④两模型组大鼠的悬尾不动时间[(83.42±29.18)s,(85.89±31.10)s]明显增多(P<0.01);与两模型组比较,三个中药组[(117.24±39.46)s,(121.87±39.88)s,(112.21±32.62)s]明显少于两模型组(P<0.01);⑤垂体中,甘麦大枣汤、四逆散以及四君子汤组NGF水平[(115.68±9.64)pg/mg,(209.63±17.44)pg/mg,(171.86±14.32)pg/mg]明显增加(P<0.01);下丘脑,四君子汤组[(12.02±11.43)pg/mg]与正常和模型Ⅱ组[(40.61±39.7)pg/mg,(39.46±31.88)pg/mg]相比NGF水平明显降低(P<0.05),四逆散组和甘麦大枣汤组[(7.53±9.16)pg/mg,(5.01±6.01)pg/mg]与正常组和模型Ⅰ、Ⅱ组相比水平明显降低(P<0.01);血浆中NGF水平,模型Ⅰ、Ⅱ组[(33.27±27.16)pg/ml,(39.46±31.88)Pg/ml]分别与正常组[(97.87±11.58)pg/ml]相比水平明显降低(P<0.05、P<0.01),四君子汤组[(93.57±7.86)pg/ml]NGF水平明显增加(P<0.05),四逆散以及四君子汤组[(90.50±10.35)pg/ml,(89.71±7.25)pg/ml]NGF水平差异无显著性,但有增加的趋势.结论 中药养心安神的甘麦大枣汤、疏肝理气的四逆散以及健脾益气的四君子汤对内源性NGF的水平有调节作用,为中西医结合阐明药物作用和疾病发病机制以及改善慢性应激相关疾病的治疗提供了依据.     

阿托伐他汀钙预防大鼠肺缺血再灌注损伤的实验研究

目的 探讨阿托伐他汀钙对肺缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制.方法 采用在体大鼠单肺原位缺血再灌注模型.30只Wistar大鼠随机分成假手术组(SO)、缺血再灌注组(IR)、阿托伐他汀钙处理组(AT),每组10只.各组进行肺湿干重比(W/D)、肺通透性指数(LPI)、脂质过氧化合物[丙二醛(MDA)]、超氧化物歧化酶(SOD)活性、髓过氧化物酶(MPO)活性测定,并进行肺组织光镜评价.采用免疫组织化学方法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、肺表面活性物质相关蛋白A(SPA)表达的变化.结果 AT组较IR组LPI[(0.023±0.003) vs (0.030±0.004)]、MDA[(17.685±1.537) nmol/mL vs (37.364±3.166) nmol/mL]、MPO[(0.052±0.002) U/mL vs (0.080±0.004) U/mL],W/D[(4.650±0.114) vs (4.769±0.106)]降低(P＜0.05),而SOD较IR组[(34.726±0.943) U/mL vs (19.728±0.817) U/mL]升高(P＜0.01).AT组较IR组肺SPA表达[(1996.584±260.081) vs (1119.609±348.256)]、eNOS[(181.933±65.715) vs (69.228±16.759)]升高(P＜0.01),而iNOS表达较IR组[(82.294±41.150) vs (303.739±95.383)]降低(P＜0.01).结论 阿托伐他汀钙有保护肺缺血再灌注损伤的作用.其可能的机制为维持肺表面活性物质和内皮NO活性,减少自由基的产生及抗炎作用.     

大黄酸对非酒精性脂肪肝病模型大鼠的干预作用及对血清IL-1β、IL- 6的影响

目的观察大黄酸对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型大鼠干预作用及血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的影响。方法 SD雄性大鼠40只随机分为对照组10只,模型组20只,大黄酸组10只。采用高脂高果糖诱导建立NAFLD大鼠模型。测定大鼠体质量、肝湿重,检测比较各组大鼠血清ALT、AST、TC、TG、GLU、IL-1β、IL-6水平。结果与对照组比较,模型组大鼠肝脏细胞脂肪性病变明显,且血清ALT[(62.11±6.8)U/L比(28.22±4.2)U/L]、AST[(147.67±5.6)U/L比(100.89±2.0)U/L]、TG[(0.80±0.08)mol/L比(0.40±0.06)mol/L]、TC[(1.65±0.2)mol/L比(0.82±0.1)mol/L]、GLU[(7.44±0.5)mmol/L比(5.28±0.2)mmol/L]、IL-1β[(29.25±5.85)pg/m L比15.32±2.68)pg/m L]、IL-6[(202.64±12.78)pg/m L比(138.08±4.96)pg/m L明显增高(P均0.05);与NAFLD模型组比较,大黄酸组大鼠肝脏细胞脂肪性病变显著改善,且血清ALT[(32.00±4.7)U/L比(62.11±6.8)U/L]、AST[(137.00±6.3)U/L比(100.89±2.0)U/L、TG[(0.55±0.14)mol/L比(0.80±0.18)mol/L、TC[(1.05±0.1)mmol/L比(1.65±0.2)mmol/L]、GLU[(5.58±0.3)mmol/L比(7.44±0.5)mmol/L]、IL-1β[(17.89±1.58)pg/m L比(29.25±5.85)pg/m L、IL-6[(105.56±11.84)pg/m L比(202.64±12.78)pg/m L]明显降低(P均0.05)。结论大黄酸可能通过降低模型大鼠血清IL-1β、IL-6水平,改善肝脏脂质沉积和炎症水平,进而抑制肝脏脂肪变性。     

清脑和血方治疗大鼠脑胶质瘤的药效作用及其初步机制研究

目的观察清脑和血方对大鼠脑胶质瘤的药效作用,并初步探讨其作用机制。方法 Wistar大鼠45只,采用脑立体定位注射鼠源性C6胶质瘤细胞(C6细胞)建立大鼠胶质瘤模型;将成模大鼠随机分为模型组、顺铂组、清脑和血方组,每组10只;另设10只大鼠为空白对照组。连续给药25天,检测各组大鼠血清白细胞介素(IL)-2、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ水平;依次剥离脑组织与胶质瘤组织,称重,计算瘤重占脑组织重百分比;HE染色观察胶质瘤组织病理;免疫印迹法检测胶质瘤组织中环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)的表达情况。结果与模型组比较,清脑和血方组大鼠的瘤重[(0.0121±0.0050)g比(0.0779±0.0390)g]、瘤重占脑组织重百分比[(0.49±0.0075)%比(3.07±0.0176)%]、血清中IL-2[(91.14±10.33)pg/mL比(160.42±15.98)pg/mL]、IL-10[(49.58±6.79)pg/mL比(92.17±7.71)pg/mL]含量均明显降低(P0.01);血清IFN-γ[(198.54±11.83)pg/mL比(111.53±17.50)pg/mL]、TNF-α[(209.41±21.82)pg/mL比(119.00±20.21)pg/mL]含量明显升高(P0.01)。结论清脑和血方能够明显抑制大鼠C6胶质瘤细胞的颅内生长,其作用机制可能与调节机体免疫因子水平,抑制肿瘤相关蛋白CREB的表达有关。     

芪冬活血饮对急性肺损伤模型大鼠caveolin-1和细胞因子的影响

目的观察芪冬活血饮对脂多糖所致大鼠急性肺损伤(ALI)小窝蛋白-1(Cav-1)及细胞因子的影响。方法将50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、芪冬活血高、中、低组,每组10只。通过气道内滴注脂多糖建立大鼠急性肺损伤模型。芪冬活血高、中、低剂量组造模前24、12h及造模后12h分别以16、8、4mL/kg芪冬活血饮灌胃,空白组及模型组以8mL/kg生理盐水灌胃。各组大鼠均在造模后24h处死,收集标本。检测肺泡灌洗液细胞因子变化;常规HE染色,光镜下观察肺组织病理变化;免疫组化法检测肺组织Cav-1表达;RT-PCR检测Cav-1mR NA表达。结果淤芪冬活血饮可以减少肺损伤大鼠肺泡结构破坏,肺水肿及炎性细胞浸润。于空白组TNF-α、IL-1β、IL-10含量最低,与其余各组比较差异均有统计学意义(P均0.01)。模型组TNF-α、IL-1β含量均高于芪冬活血中、高剂量组([52.59±12.78)pg/mL比(39.87±8.14)pg/m L和(27.78±10.99)pg/mL,(42.39±11.15)pg/mL比(33.83±8.38)pg/mL和(24.90±7.06)pg/mL,P0.05或P0.01],IL-10含量低于芪冬活血中、高剂量组([15.63±2.13)pg/mL比(20.98±2.17)pg/mL和(22.33±2.31)pg/mL,P0.05或P0.01]。芪冬活血中、高剂量组TNF-α、IL-1β比较差异有统计学意义(P均0.05)。盂Cav-1免疫组化积分空白组(3.08±1.03)分,模型组(8.58±1.39)分。除模型组与芪冬活血低剂量组免疫组化积分(7.33±1.16)分比较差异无统计学意义(P0.05),空白组、模型组与芪冬活血中、高剂量组([7.08±1.24)分、(5.91±1.11)分]比较P均0.01;Cav-1免疫组化积分及m RNA相对表达芪冬活血高剂量组低于低剂量组[(5.91±1.11)比7.33±1.16)]和(35.27±3.31比62.34±5.66),P0.01]。结论芪冬活血饮对LPS诱导的大鼠ALI有保护作用,其机制可能与抑制Cav-1表达,降低促炎细胞因子TNF-α、IL-1β水平,升高抗炎细胞因子IL-10水平,纠正炎症失衡有关。摘要目的观察芪冬活血饮对脂多糖所致大鼠急性肺损伤(ALI)小窝蛋白-1(Cav-1)及细胞因子的影响。方法将50 只SD 大鼠随机分为空白组、模型组、芪冬活血高、中、低组,每组10 只。通过气道内滴注脂多糖建立大鼠急性肺损伤模型。芪冬活血高、中、低剂量组造模前24、12h 及造模后12h 分别以16、8、4mL/kg 芪冬活血饮灌胃,空白组及模型组以8mL/kg 生理盐水灌胃。各组大鼠均在造模后24h处死,收集标本。检测肺泡灌洗液细胞因子变化;常规HE 染色,光镜下观察肺组织病理变化;免疫组化法检测肺组织Cav-1 表达;RT-PCR 检测Cav-1mRNA 表达。结果淤芪冬活血饮可以减少肺损伤大鼠肺泡结构破坏,肺水肿及炎性细胞浸润。于空白组TNF-α、IL-1β、IL-10 含量最低,与其余各组比较差异均有统计学意义(P均0.01)。模型组TNF-α、IL-1β含量均高于芪冬活血中、高剂量组[(52.59±12.78)pg/mL 比(39.87±8.14)pg/mL 和(27.78±10.99)pg/mL,(42.39±11.15)pg/mL比(33.83±8.38)pg/mL和(24.90±7.06)pg/mL,P0.05或P0.01],IL-10 含量低于芪冬活血中、高剂量组[(15.63±2.13)pg/mL比(20.98±2.17)pg/mL 和(22.33±2.31)pg/mL,P0.05 或P0.01]。芪冬活血中、高剂量组TNF-α、IL-1β比较差异有统计学意义(P均0.05)。盂Cav-1 免疫组化积分空白组(3.08±1.03)分,模型组(8.58±1.39)分。除模型组与芪冬活血低剂量组免疫组化积分(7.33±1.16)分比较差异无统计学意义(P0.05),空白组、模型组与芪冬活血中、高剂量组[(7.08±1.24)分、(5.91±1.11)分]比较P均0.01;Cav-1免疫组化积分及mRNA 相对表达芪冬活血高剂量组低于低剂量组[(5.91±1.11)比7.33±1.16)]和(35.27±3.31 比62.34±5.66),P0.01]。结论芪冬活血饮对LPS 诱导的大鼠ALI 有保护作用,其机制可能与抑制Cav-1 表达,降低促炎细胞因子TNF-α、IL-1茁水平,升高抗炎细胞因子IL-10 水平,纠正炎症失衡有关。     

炙甘草汤对糖尿病性心肌病模型大鼠心功能的影响

目的研究炙甘草汤对糖尿病性心肌病(DCM)模型大鼠心功能的改善作用及相关机制。方法将40只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、DCM模型组、炙甘草汤低、高剂量组,每组10只。通过高脂饮料饮食+链尿佐霉素(STZ)注射制备DCM模型,炙甘草汤低、高剂量组分别给予1mL/100g、2mL/100g炙甘草汤灌胃,正常对照组及DCM模型组给予等量双蒸水灌胃,至STZ注射后12周,检测血清BNP及超声心动图评估心功能,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax评估心肌凋亡水平,自噬相关蛋白LC3-Ⅰ/Ⅱ,P62,Beclin-1评估心肌自噬水平。结果与DCM模型组比较,炙甘草汤低、高剂量组均显著降低大鼠血清BNP水平[(358.39±60.86)pg/mL、(313.92±61.71)pg/mL比(443.11±51.88)pg/mL,P0.05]、左心室收缩末期内径(LVESD)[(4.86±0.61)mm、(4.28±0.39)mm比(6.04±0.51)mm,P0.05)]及左心室舒张末期内径(LVEDD)[(7.52±0.56)mm、(6.87±0.63)mm比(8.04±0.57)mm,P 0.05)],升高左室射血分数(EF)[(52.30±5.66)%、(61.14±5.28)%比(46.48±3.81)%,P0.05)]及左室短轴缩短率(FS)[(29.42±4.78)%、(35.33±4.01)%比(24.62±3.88)%,P0.05)]。Western blot检测结果显示,炙甘草汤低、高剂量组大鼠心肌组织较DCM模型组抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调[(0.49±0.02)、(1.03±0.05)比(0.48±0.29),P0.05],促凋亡蛋白Bax表达下调[(0.67±0.04)、(0.52±0.03)比(0.93±0.02),P0.05],自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达上调[(0.58±0.06)、(0.61±0.05)比(0.29±0.02),P0.05],P62表达下调[(0.76±0.06)、(0.40±0.02)比(1.23±0.08),P0.05],Beclin-1表达上调[(0.83±0.03)、(0.88±0.03)比(0.80±0.03),P0.05]。与炙甘草汤低剂量组比较,高剂量组上述指标改善更明显(P0.05)。结论炙甘草汤能改善DCM模型大鼠心功能,可能与其抑制心肌细胞凋亡,增强心肌细胞自噬相关。     

白芍总苷通过抑制内质网应激减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的研究

目的 探讨白芍总苷（TGP）对大鼠脑缺血再灌注（I/R）损伤的保护作用及其机制。方法 将240只实验用SD大鼠随机分为假手术组,模型组,TGP低（50mg/kg）、中（100mg/kg）、高（200mg/kg）剂量组和尼莫地平（NMP,15mg/kg）组,每组40只。采用线栓法阻断大脑中动脉2h复制大鼠脑I/R模型,造模前7d开始1次/d灌胃给药（假手术组和模型组灌胃给予生理盐水）。24h后,采用mNSS评分法评价大鼠神经功能,伊文思蓝渗透法检测血脑屏障（BBB）通透性,TTC染色法检测脑组织梗死体积,HE染色法和TUNEL染色法分别检测脑组织病理学改变和神经细胞凋亡,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）水平,Western blot法检测葡萄糖调控蛋白78（GRP78）、磷酸化胰腺内质网激酶（p-PERK）、C/EBP同源蛋白（CHOP）、核因子-?B（NF-?B）、激活型半胱胺酸蛋白酶-12（Cleaved Caspase-12）、激活型半胱胺酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）蛋白表达。结果 与模型组比较,TGP中、高剂量组和NMP组mNSS评分降低[(9.98±1.07)分、(6.41±0.83)分、(8.26±0.95)分比(14.63±1.52)分,P均<0.01]、伊文思蓝渗透量降低[(7.76±1.50)μg/g、(5.49±1.13)μg/g、(7.31±1.20)μg/g比(12.71±2.04)μg/g,P均<0.01]、脑梗死体积降低[(24.93±4.12)%、(16.52±3.05)%、(19.08±3.71)%比(39.48±5.16)%,P均<0.01];大脑皮质神经细胞形态结构损伤和凋亡明显改善,凋亡指数（AI）降低[(43.51±6.27)%、(22.34±4.85)%、(37.29±5.36)%比(68.15±8.43)%,P均<0.01];TNF-α水平降低[(1.77±0.24)ng/mL、(1.61±0.19)ng/mL、(1.89±0.26)ng/mL比(2.26±0.31)ng/mL,P均<0.01]、IL-1β水平降低[(41.76±6.21)pg/mL、(36.98±5.73) pg/mL、(41.15±6.40)pg/mL比(52.64±7.02)pg/mL,P均<0.01]、IL-6水平降低[(15.72±3.14)pg/mL、(9.84±2.63)pg/mL、(13.07±2.91)pg/mL比(21.34±3.85) pg/mL,P均<0.01];GRP78表达量降低[(0.41±0.09)、(0.18±0.05)、(0.27±0.08)比(0.96±0.21),P均<0.01]、p-PERK表达量降低[(0.75±0.14)、(0.24±0.05)、(0.38±0.09)比(0.94±0.19),P<0.05或P<0.01]、CHOP表达量降低[(0.14±0.04)、(0.07±0.03)、(0.19±0.05)比(0.44±0.10),P均<0.01]、NF-?B表达量降低[(0.67±0.15)、(0.67±0.15)、(0.58±0.13)比(0.89±0.18),P均<0.01]、Cleaved Caspase-12表达量降低[(0.74±0.16)、(0.52±0.11)、(0.61±0.15)比(0.95±0.22),P<0.05或P<0.01]、Cleaved Caspase-3表达量降低[(0.18±0.06)、(0.12±0.03)、(0.35±0.08)比(0.64±0.13),P均<0.01]。与NMP组比较,TGP高剂量组mNSS评分降低[(6.41±0.83)分比(8.26±0.95)分,P<0.01]、伊文思蓝渗透量降低[(5.49±1.13)μg/g比(7.31±1.20)μg/g,P<0.01];神经细胞形态结构损伤明显改善,AI降低[(22.34±4.85)%比(37.29±5.36)%,P<0.01];TNF-α水平降低[(1.61±0.19) ng/mL比(1.89±0.26)ng/mL,P<0.05]、IL-6水平降低[(9.84±2.63)pg/mL比(13.07±2.91)pg/mL,P<0.05];GRP78表达量降低[(0.18±0.05)比(0.27±0.08),P<0.01]、p-PERK表达量降低[(0.24±0.05)比(0.38±0.09),P<0.01]、CHOP表达量降低[(0.07±0.03)比(0.19±0.05),P<0.01]、NF-?B表达量降低[(0.67±0.15)比(0.58±0.13),P<0.05]、Cleaved Caspase-3表达量降低[(0.12±0.03)比(0.35±0.08),P<0.01]。结论 TGP对大鼠脑I/R损伤具有保护作用,其机制可能与抑制内质网应激相关炎症和凋亡通路有关。     

巴戟天醇提物通过MAPK/ERK信号通路对脑缺血再灌注模型大鼠的保护作用

目的探究巴戟天醇提物(RMOEE)对脑缺血再灌注模型大鼠的保护机制。方法将40只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组及RMOEE低、中、高剂量组,每组8只。采用线栓法制备脑缺血再灌注模型大鼠,RMOEE低、中、高剂量组分别按照3、6、12g/kg的剂量灌胃给药,假手术组和模型组大鼠给予等体积羧甲基纤维素钠溶液。给药21天后,采用Zea Longa评分标准对各组大鼠进行神经功能评分,并采用干湿重法检测脑含水量,酶联免疫法检测大鼠缺血侧脑组织炎症因子表达,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定大鼠脑梗死体积百分比,苏木精-伊红(HE)染色法检测大鼠脑神经元病理学改变,原位末端转移酶标记(TUNEL)染色法检测大鼠脑组织凋亡,Western blot法检测相关蛋白表达情况。结果与模型组比较,RMOEE各剂量组能够降低Zea Longa评分[(2.2±0.3)分、(1.9±0.3)分、(1.5±0.3)分比(3.6±0.4)分,P0.05或P0.01];并且与模型组比较,RMOEE中、高剂量组大鼠脑含水量明显减少[(80.2±4.3)%、(73.4±2.8)%比(88.5±1.9)%,P均0.05],脑梗死体积百分比明显降低[(35.9±0.3)%、(18.5±0.3)%比(45.6±5.4)%,P0.05或P0.01],脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、细胞内黏附分子-1(ICAM-1)及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达水平显著降低[TNF-α:(668.78±25.12)nmol/L、(488.02±40.28)nmol/L比(783.76±44.42)nmol/L;IL-1β:(540.92±22.98)nmol/L、(413.22±20.71)nmol/L比(680.61±39.74)nmol/L;ICAM-1:(255.40±14.25)pg/mL、(201.42±21.42)pg/mL比(292.26±16.32)pg/mL;VCAM-1:(42.20±3.83)pg/mL、(35.71±2.18)pg/mL比(54.90±5.56)pg/mL,P均0.05];RMOEE各剂量组脑神经元病理学改变得到有效改善,中、高剂量组大鼠脑组织细胞凋亡率明显降低[(40.80±1.90)%、(35.36±1.80)%、(29.60±1.53)%比(48.90±2.80)%,P均0.05],MAPK/ERK信号通路相关蛋白表达降低[p-MEK1/2:(1.99±0.13)、(0.66±0.09)比(2.62±0.21);p-ERK1/2:(0.99±0.06)、(0.78±0.04)比(1.78±0.20),P0.05或P0.01],凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3、Caspase-9表达降低[Bax:(1.42±0.09)、(1.30±0.10)比(2.82±0.17);Caspase-3:(1.48±0.06)、(0.86±0.05)比(1.87±0.12);Caspase-9:(1.92±0.14)、(1.15±0.10)比(2.76±0.16),P0.05或P0.01],Bcl-2蛋白表达升高[(0.73±0.05)、(1.10±0.06)比(0.50±0.04),P0.05或P0.01]。结论 RMOEE可能通过调控MAPK/ERK信号通路,降低炎症因子表达以及抑制凋亡,进而对大鼠脑缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。