越鞠丸对功能性消化不良大鼠血清MTL水平及胃窦黏膜NO表达的影响

摘要：目的 从动物实验的角度证实越鞠丸对治疗功能性消化不良（FD）的疗效,通过测定FD大鼠的胃内残留率、小肠推进率说明其胃肠动力的改变,并且从血清胃动素（MTL）水平、胃窦黏膜NO含量的改变进一步探讨其治疗的可能作用机制。方法 取48只无特定病原体（SPF级）健康雄性SD大鼠,称重后随机分为空白组（8只）及造模组（40只）,空白组自由饮水进食,造模组采用郭氏夹尾法建立功能性消化不良大鼠模型,模型制备共7天。造模成功后,将造模大鼠随机分为5组,分别为模型组、西药组（莫沙必利）、越鞠丸低、中、高剂量组。各组分别予以对应药物连续治疗7天后,统计各组大鼠造模、给药前后的体重改变情况、饮水量与进食量改变情况;给药后大鼠胃内残留率与小肠推进率的改变;以及ELISA法检测血清MTL的含量和胃窦黏膜NO的表达。结果 （1）与空白组比较,FD模型组大鼠的体重、进食量、饮水量均有显著下降;在药物治疗后,与模型组比较,各治疗组大鼠体重并未出现明显改变。但越鞠丸组均出现明显进食量、饮水量增加。（2）与模型组比较,西药组、越鞠丸（中、高）组大鼠胃内残留率均减少,且差异具有统计学意义（63.89±16.74%、56.79±20.52%、64.25±17.79%比81.18±6.78%,P<0.05）;西药组、越鞠丸（低、中、高）组大鼠小肠推进率均升高（59.47±3.76%、52.28±2.75%、56.06±1.31%、59.74±3.02%比46.99±4.59%,P<0.05）,且越鞠丸高剂量组与莫沙必利组无统计学差异（59.47±3.76%比59.74±3.02%,P>0.05）。（3）与模型组比较,西药组和越鞠丸（中、高）组大鼠血清MTL均升高,而胃窦黏膜组织NO含量减少,差异有统计学意义（MTL：202.64±27.64pg·ml-1、181.78±35.15pg·ml-1、214.92±40.01pg·ml-1比124.35±10.43pg·ml-1;NO：0.09±0.06μmol·L-1、0.11±0.01μmol·L-1、0.09±0.08μmol·L-1比0.17±0.03μmol·L-1,P<0.05）。结论 越鞠丸能明显增加大鼠进食量、饮水量,且中、高剂量组能减少胃内残留率、提高小肠推进率,由此证明越鞠丸具有加快胃肠动力的作用,其作用机制可能与上调MTL水平、下调NO水平有关。     

越鞠丸对功能性消化不良大鼠胃窦黏膜5-HT及胃肠激素水平的影响

[目的]研究越鞠丸对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠胃肠功能的改善作用,并探讨其可能的作用机制。[方法]48只SPF级健康雄性SD大鼠,称重后随机分为6组:对照组、模型组、莫沙必利组及越鞠丸低、中、高剂量组,每组各8只。对照组不予特殊处理,其他各组采用郭氏夹尾法建立FD大鼠模型,通过大鼠体重、进食及饮水量、胃排空率,胃窦黏膜形态评估造模情况。对照组、模型组予0.9%氯化钠溶液2mL/次,莫沙必利组予0.3mg/200g,越鞠丸低、中、高剂量组分别予0.9g/200g、1.8g/200g、3.6g/200g中药浓缩液连续灌胃7d,1次/d。比较各组大鼠造模、给药前后体重、进食及饮水量改变情况;计算给药后大鼠胃排空率;采用免疫组化及酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测胃窦组织5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的含量和血清血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)的水平。[结果]与对照组比较,模型组大鼠的体重、进食及饮水量均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),说明FD大鼠模型造模成功。与对照组比较,模型组大鼠胃排空率下降(P<0.05);与模型组比较,莫沙必利组、越鞠丸中、高剂量组大鼠胃排空率均增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,莫沙必利组和越鞠丸中、高剂量组大鼠胃窦组织5-HT含量升高、血清VIP水平减低,差异有统计学意义(P<0.05)。与莫沙必利组比较,越鞠丸高剂量组胃窦组织5-HT含量差异无统计学意义(P>0.05),越鞠丸中、高剂量组血清VIP水平差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]越鞠丸能够增加FD大鼠的胃肠动力,其作用机制可能是通过增加胃窦组织5-HT表达、下调血清VIP水平来影响胃肠功能。     

ARDS患者呼出气冷凝液和血清中NO、ET-1和8-isoPG检测的临床意义

目的：研究急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者呼出气冷凝液(EBC)和血清中一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)和8-异前列腺素(8-isoPG)的浓度变化及其临床意义。方法选取2012年9月至2014年7月在南通大学第二附属医院重症监护病房(ICU)中行机械通气的ARDS 52例患者为观察组,收集患者入院第1天及治疗后第7天呼出气冷凝液及血清标本。健康对照组为30例健康体检者,收集其EBC及血清标本。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组受检者EBC和血清中的NO、ET-1和8-isoPG浓度。结果观察组患者EBC中NO、ET-1和8-isoPG水平高于对照组[(7.33±2.21)μmol/L vs (2.37±0.79)μmol/L、(46.02±10.39)μmol/L vs (10.08±4.27)μmol/L、(55.87±13.78) pg/mL vs (21.86±9.24) pg/mL,P<0.05];血清中NO、ET-1和8-isoPG水平高于对照组[(122.82±64.88)μmol/L vs (22.42±6.56)μmol/L、(178.82±55.21)μmol/L vs (97.32±39.74)μmol/L、(241.94±43.98) pg/mL vs (122.09±36.62) pg/mL,P<0.05];治疗后观察组患者EBC中NO、ET-1和8-isoPG水平均较治疗前下降[(6.32±1.61)μmol/L vs (7.33±2.21)μmol/L、(32.49±10.55)μmol/L vs (46.02±10.39)μmol/L、(36.74±11.41) pg/mL vs (55.87±13.78) pg/mL,P<0.05];血清中ET-1和8-isoPG水平低于治疗前[(158.31±55.79)μmol/L vs (178.82±55.21)μmol/L、(170.20±53.37) pg/mL vs (241.94±43.98) pg/mL,P<0.05]。结论 EBC和血清中NO、ET-1和8-isoPG浓度变化可反映ARDS患者肺部炎症反应及肺损伤严重程度;EBC反映炎症反应较血清更灵敏。     

莫沙比利对40%血容量丢失大鼠口服补液时胃排空率和血浆胃动素水平的影响

目的 研究莫沙比利(MOS)对40%血容量丢失大鼠早期口服葡萄糖-电解质液(GES)时胃排空的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为GES组(假手术后口服GES)、H+GES组(失血后口服GES液)和H+GES/ MOS组(失血后口服GES和莫沙比利).用氯胺酮-速眠新Ⅱ肌肉注射复合麻醉后,行右侧颈动脉插管,按全身血容量的40%分两次间隔15 min放血制作失血性休克模型.于失血后0.5、1.0 h分两次给予2倍失血量的GES灌胃.莫沙比利(0.5 mg·kg-1·w-1)溶于GES,于首次灌胃时给予.失血后4.0 h腹主动脉取血处死动物,检测血浆胃动素(MTL)和一氧化氮(NO)水平,酚红法测定胃排空率.结果 失血后4.0 h GES组、 H+GES组和H+GES/MOS组胃排空率分别为(92±13)%、(62±11)% 和(80±11)%,3组间差别有统计学意义(P＜0.05). H+GES/MOS组胃动素水平显著高于H+GES组[(104±11)pg/L和 (73±14)pg/L],但低于GES组[(132±24)pg/L,P＜0.05].H+GES/MOS组NO水平显著低于H+GES组[(83±13)μmol/L和(106±13)μmol/L],但高于GES组[(54±7)μmol/L,P＜0.05].结论 莫沙比利能显著增加大鼠失血性休克时血浆胃动素水平,降低NO水平,促进胃对口服液体的排空,提高口服补液复苏的效果.     

大黄酸对非酒精性脂肪肝病模型大鼠的干预作用及对血清IL-1β、IL- 6的影响

目的观察大黄酸对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型大鼠干预作用及血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的影响。方法 SD雄性大鼠40只随机分为对照组10只,模型组20只,大黄酸组10只。采用高脂高果糖诱导建立NAFLD大鼠模型。测定大鼠体质量、肝湿重,检测比较各组大鼠血清ALT、AST、TC、TG、GLU、IL-1β、IL-6水平。结果与对照组比较,模型组大鼠肝脏细胞脂肪性病变明显,且血清ALT[(62.11±6.8)U/L比(28.22±4.2)U/L]、AST[(147.67±5.6)U/L比(100.89±2.0)U/L]、TG[(0.80±0.08)mol/L比(0.40±0.06)mol/L]、TC[(1.65±0.2)mol/L比(0.82±0.1)mol/L]、GLU[(7.44±0.5)mmol/L比(5.28±0.2)mmol/L]、IL-1β[(29.25±5.85)pg/m L比15.32±2.68)pg/m L]、IL-6[(202.64±12.78)pg/m L比(138.08±4.96)pg/m L明显增高(P均0.05);与NAFLD模型组比较,大黄酸组大鼠肝脏细胞脂肪性病变显著改善,且血清ALT[(32.00±4.7)U/L比(62.11±6.8)U/L]、AST[(137.00±6.3)U/L比(100.89±2.0)U/L、TG[(0.55±0.14)mol/L比(0.80±0.18)mol/L、TC[(1.05±0.1)mmol/L比(1.65±0.2)mmol/L]、GLU[(5.58±0.3)mmol/L比(7.44±0.5)mmol/L]、IL-1β[(17.89±1.58)pg/m L比(29.25±5.85)pg/m L、IL-6[(105.56±11.84)pg/m L比(202.64±12.78)pg/m L]明显降低(P均0.05)。结论大黄酸可能通过降低模型大鼠血清IL-1β、IL-6水平,改善肝脏脂质沉积和炎症水平,进而抑制肝脏脂肪变性。     

一氧化氮和内皮素-1与脂多糖诱发的持续性气道高反应性的关系

目的探讨一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)与多次腹腔注射脂多糖(LPS)诱发的豚鼠持续性气道高反应性(AHR)的关系。方法48只雄性Dunkin-Hartley豚鼠,随机分为LPS组和生理盐水(NS)对照组。两组分别每隔24 h腹腔注射LPS(1 mg/kg)或NS(1 mL/kg)1次,连续4次。另取6只豚鼠不予任何处理作为基线对照。每次注射药剂24 h后各组取6只观察气道对吸入组胺反应性的变化,以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数、NO和ET-1含量的变化。结果接受3次和4次LPS腹腔注射的豚鼠在末次给药24 h后出现持续的AHR,同期BALF中NO含量显著升高[(18.07±0.63)μmol/L比(10.68±0.62)μmol/L,(19.08±1.35)μmol/L比(10.54±1.05)μmol/L,P均<0.001],而ET-1含量在第2次给药24 h后明显升高[(89.42±6.83)pg/mL比(60.21±8.85)pg/mL,P<0.001],但在第3次给药24 h后降至基线水平,第4次给药24 h后显著降低[(42.69±1.64)pg/mL比(63.16±5.93)pg/mL,P<0.05]。结论腹腔多次注射LPS可诱发持续性AHR,AHR的产生可能与NO水平的上升有关,与ET-1无明显关系。     

茵陈草水提物对四氯化碳致大鼠肝纤维化的干预作用

目的观察茵陈草水提物对四氯化碳致大鼠肝纤维化的干预作用。方法通过向SD大鼠腹腔注射四氯化碳与花生油混合溶液诱导建立肝纤维化大鼠模型。将50只肝纤维化模型大鼠按照随机数字表法随机分为五组:模型组、阳性药水飞蓟素40mg/kg组、茵陈草水提物2.5、5、10g/kg剂量组,每组10只。连续灌胃给药56天,每天1次。另设10只SD大鼠为正常组。模型组、正常组大鼠每天给予等体积生理盐水灌胃。末次给药4h后,3%苯巴比妥钠腹腔注射麻醉后,腹主动脉取血,离心提取血清。剥离肝脏,HE染色法及Masson染色法观察大鼠肝脏病理和纤维化程度。比色法检测大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量,ELISA法检测肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)含量。比色法检测肝组织透明质酸(HA),III型前胶原(PCIII),层粘连蛋白(LN)、IV型胶原(IV-C)含量。结果与模型组比较,茵陈草水提物低、中、高剂量组大鼠血清AST、ALT水平显著降低[AST:(31.78±3.29)U/mL、(24.85±2.23)U/mL、(15.94±2.27)U/mL比(38.98±4.71)U/mL;ALT:(29.75±2.48)U/mL、(22.37±2.15)U/mL、(16.63±2.75)U/mL比(34.21±4.79)U/mL,P均0.05],肝组织炎症因子TNF-α、IL-1β水平显著降低[TNF-α:(27.54±2.92)pg/mL、(23.27±2.56)pg/mL、(17.08±2.15)pg/mL比(31.54±2.81);IL-1β:(35.41±2.41)pg/mL、(27.26±1.37)pg/mL、(19.57±1.69)pg/mL比(42.63±3.53)pg/mL,P均0.05];茵陈草水提物低、中、高剂量组大鼠肝组织胶原HA、PCIII、LN、IV-C水平显著降低[HA:(202.83±14.71)μg/L、(137.05±10.24)μg/L、(96.47±7.48)μg/L比(252.42±16.85)μg/L;PCIII:(171.87±8.23)μg/L、(114.75±11.35)μg/L、(68.98±7.83)μg/L比(191.76±14.53)μg/L;LN:(281.82±19.51)μg/L、(178.21±16.39)μg/L、(94.92±8.54)μg/L比(341.28±17.69)μg/L;IV-C:(25.52±2.42)μg/L、(21.85±2.26)μg/L、(18.37±2.48)μg/L比(28.77±3.29)μg/L,P均0.05];茵陈草水提物高剂量组作用优于低、中剂量组(P均0.05)。结论茵陈草水提物对四氯化碳致肝纤维化模型大鼠肝脏有一定保护作用,其作用机制可能与调节肝组织炎症因子TNF-α、IL-1β和胶原HA、PCIII、LN、IV-C表达有关。     

急性脑梗死患者血清Hcy、IL及NO检测及其临床意义

目的:探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)、IL及NO在急性脑梗死患者中的检测及其临床意义。方法:急性脑梗死患者60例作为观察组,另选择同时期同龄健康者60例作为对照组,对两组患者血清Hcy、IL及NO水平进行检测,并比较不同梗死面积及神经功能缺损程度脑梗死患者的血清表达水平,同时以Logistic分析上述血清指标与急性脑梗死的关系。结果:观察组的血清Hcy[(16.68±2.36)μmol/L]及IL[(1.99±0.25)pg/ml、(9.45±1.12)pg/ml及(10.98±1.30)pg/ml]水平均高于对照组[(6.56±1.04)μmol/L、(0.84±0.10)pg/ml、(3.53±0.65)pg/ml及(5.13±0.73)pg/ml],血清NO[(114.87±10.85)μmol/L]水平则低于对照组[(165.59±15.80)μmol/L],不同梗死面积及神经功能缺损程度脑梗死患者的血清表达水平也明显存在统计学差异,且经Logistic分析显示上述血清指标均与急性脑梗死有密切的关系(P均<0.05)。结论:血清Hcy、IL及NO与急性脑梗死有密切的关系,可作为疾病检测与监测重要依据性指标。     

血清一氧化氮、N端脑利钠肽前体和降钙素原与慢性阻塞性肺疾病严重程度的相关性研究

目的 探讨血清中一氧化氮(NO)、N端脑利钠肽前体(NT-proBNP)和降钙素原(PCT)浓度与慢性阻塞性肺疾病(COPD)严重程度的相关性.方法 选取我院2013-2015年期间确诊为COPD患者175例作为研究组,并根据FEV1/FVC、FEV1%预计值和临床症状将COPD分为轻度(45例)、中度(40例)、重度(46例)和极重度(44例)四组,选取健康体检者50例作为对照组.检测五组受检者血清中NO、NT-proBNP和PCT浓度,分析四组COPD患者和对照组之间各指标的差异及其与FEV1%预计值的相关性.结果 对照组、COPD轻度组、中度组、重度组和极重度组患者FEV1%预计值分别为(87.1±6.7)%、(82.4±4.8)%、(58.9±6.2)%、(43.8±4.2)%和(26.7±2.7)%,血清中NO水平分别为(35.66±13.85)μmol/L、(28.45±10.50)μmol/L、(20.65±7.56)μmol/L、(13.41±4.34)μmol/L和(8.54±3.26)μmol/L,呈递减趋势且各组FEV1%预计值和NO水平差异有统计学意义(P<0.05);五组NT-proBNP水平分别为(45.6±8.6)pg/mL、(102±34.4)pg/mL、(214±45.2)pg/mL、(348±60.3)pg/mL和(425±105.2)pg/mL,呈递增趋势且各组NT-proBNP水平差异有统计学意义(P<0.05);重度和极重度COPD患者血清中PCT水平明显高于轻度、中度COPD患者和对照组[(1.055±0.536)ng/mL、(2.564±1.135)ng/mL vs(0.081±0.043)ng/mL、(0.087±0.045)ng/mL、(0.062±0.026)ng/mL],差异有统计学意义(P<0.05);COPD患者FEV1%预计值与NO的浓度呈正相关(r=0.525,P<0.05),与NT-proBNP和PCT的浓度呈负相关(r=-0.685,P<0.05;r=-0.424,P<0.05).结论 COPD患者严重程度的增加与血清NO浓度呈负相关与血清NT-proBNP和PCT浓度呈正相关.     

巴戟天醇提物通过MAPK/ERK信号通路对脑缺血再灌注模型大鼠的保护作用

目的探究巴戟天醇提物(RMOEE)对脑缺血再灌注模型大鼠的保护机制。方法将40只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组及RMOEE低、中、高剂量组,每组8只。采用线栓法制备脑缺血再灌注模型大鼠,RMOEE低、中、高剂量组分别按照3、6、12g/kg的剂量灌胃给药,假手术组和模型组大鼠给予等体积羧甲基纤维素钠溶液。给药21天后,采用Zea Longa评分标准对各组大鼠进行神经功能评分,并采用干湿重法检测脑含水量,酶联免疫法检测大鼠缺血侧脑组织炎症因子表达,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定大鼠脑梗死体积百分比,苏木精-伊红(HE)染色法检测大鼠脑神经元病理学改变,原位末端转移酶标记(TUNEL)染色法检测大鼠脑组织凋亡,Western blot法检测相关蛋白表达情况。结果与模型组比较,RMOEE各剂量组能够降低Zea Longa评分[(2.2±0.3)分、(1.9±0.3)分、(1.5±0.3)分比(3.6±0.4)分,P0.05或P0.01];并且与模型组比较,RMOEE中、高剂量组大鼠脑含水量明显减少[(80.2±4.3)%、(73.4±2.8)%比(88.5±1.9)%,P均0.05],脑梗死体积百分比明显降低[(35.9±0.3)%、(18.5±0.3)%比(45.6±5.4)%,P0.05或P0.01],脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、细胞内黏附分子-1(ICAM-1)及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达水平显著降低[TNF-α:(668.78±25.12)nmol/L、(488.02±40.28)nmol/L比(783.76±44.42)nmol/L;IL-1β:(540.92±22.98)nmol/L、(413.22±20.71)nmol/L比(680.61±39.74)nmol/L;ICAM-1:(255.40±14.25)pg/mL、(201.42±21.42)pg/mL比(292.26±16.32)pg/mL;VCAM-1:(42.20±3.83)pg/mL、(35.71±2.18)pg/mL比(54.90±5.56)pg/mL,P均0.05];RMOEE各剂量组脑神经元病理学改变得到有效改善,中、高剂量组大鼠脑组织细胞凋亡率明显降低[(40.80±1.90)%、(35.36±1.80)%、(29.60±1.53)%比(48.90±2.80)%,P均0.05],MAPK/ERK信号通路相关蛋白表达降低[p-MEK1/2:(1.99±0.13)、(0.66±0.09)比(2.62±0.21);p-ERK1/2:(0.99±0.06)、(0.78±0.04)比(1.78±0.20),P0.05或P0.01],凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3、Caspase-9表达降低[Bax:(1.42±0.09)、(1.30±0.10)比(2.82±0.17);Caspase-3:(1.48±0.06)、(0.86±0.05)比(1.87±0.12);Caspase-9:(1.92±0.14)、(1.15±0.10)比(2.76±0.16),P0.05或P0.01],Bcl-2蛋白表达升高[(0.73±0.05)、(1.10±0.06)比(0.50±0.04),P0.05或P0.01]。结论 RMOEE可能通过调控MAPK/ERK信号通路,降低炎症因子表达以及抑制凋亡,进而对大鼠脑缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。     

miRNA-20a-BCL-2信号通路介导雷公藤红素、平阳霉素对舌鳞癌细胞增殖与侵袭的实验研究

目的探讨miRNA-20a-BCL-2信号通路介导雷公藤红素、平阳霉素对舌鳞癌细胞(Tca8113)增殖与侵袭。方法 Tca8113细胞液于DMEM培养液中培养,作为对照组;雷公藤红素组、平阳霉素组、联合组(雷公藤红素+平阳霉素)的培养方法为10%胎牛血清DMEM培养液分别含有20μg/mL的雷公藤红素、20μmol/mL的平阳霉素以及20μg/mL雷公藤红素+20μmol/mL平阳霉素。以上各组每孔设6个平行样,培养48h,培养结束后,检测Tca8113细胞活力、凋亡、侵袭情况,实时荧光逆转录法测定miRNA-20a、BCL-2 mRNA水平,酶联免疫吸附法测定MMP-9、cyc D1、VEGF蛋白水平。结果与对照组比较,雷公藤红素组、平阳霉素组、联合组增加Tca8113细胞抑制率[(72.56±0.98)%、(59.43±0.44)%、(92.44±0.16)%比(0.00±0.00)%,P0.05],Tca8113细胞凋亡率[(42.32±9.43)%、(43.09±8.21)%、(60.54±9.88)%比(29.34±8.32)%,P0.05],降低Tca8113miRNA-20a RNA水平[(1.53±0.17)、(1.52±0.20)、(0.53±0.10)比(1.97±0.25),P0.05],Tca8113 BCL-2RNA水平[(4.13±0.36)、(4.16±0.39)、(2.32±0.29)比(5.16±0.21),P0.05)],Tca8113穿膜数[(434±25)个、(458±54)个、(223±33)个比(757±19)个,P 0.05],Tca8113 MMP-9水平[(465.32±15.32)μmol/L、(469.98±43.76)μmol/L、(196.14±19.23)μmol/L比(567.98±23.76)μmol/L,P0.05],Tca8113cyc D1水平[(345.87±13.98)μmol/L、(352.87±16.98)μmol/L、(172.87±9.54)μmol/L比(578.00±15.09)μmol/L,P 0.05],Tca8113 VEGF水平[(630.87±14.87)μmol/L、(625.87±15.76)μmol/L、(245.76±32.76)μmol/L比(916.91±28.97)μmol/L,P0.05]。结论雷公藤红素联合平阳霉素能抑制miRNA-20a-BCL-2信号通路及下游细胞因子的表达,进而抑制Tca8113增殖、侵袭。     

参附桃红承气汤对多器官功能障碍综合征模型大鼠肝肾功能及组织病理的影响

目的观察参附桃红承气汤对多器官功能障碍综合征(MODS)模型大鼠肝肾功能及组织病理的影响。方法将50只健康Wistar大鼠随机分成空白组,模型组,参附桃红承气汤低、中、高剂量组,每组10只。参照文献方法造模,自造模前3天至处死前,空白组和模型组给予生理盐水1mL灌胃,1天2次参附桃红承气汤组分别给予2、4、8g/mL生药灌胃,1天2次,观察各组大鼠造模前后生命体征。造模24h后处死大鼠取血,检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、总胆红素(TB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、摘取肝、肾组织行病理学检查。结果模型组大鼠血清BUN、Cr、TB、ALT、AST水平明显高于空白组[(24.26±7.1)mmol/L、(80.02±26.27)μmol/L、(4.51±1.29)μmol/L、(259.90±199.81)U/L、(345.80±209.95)U/L比(6.82±0.62)mmol/L、(45.68±6.69)μmol/L、(0.42±0.14)μmol/L、(55.33±16.43)U/L、(108.44±15.89)U/L,P均0.05];与模型组比较,参附桃红承气汤高剂量组BUN、Cr、TB、ALT、AST水平显著降低[(12.53±3.80)mmol/L、(56.51±14.63)μmol/L、(2.41±0.89)μmol/L、(67.00±36.27)U/L、(135.78±27.03)U/L比(24.26±7.1)mmol/L、(80.02±26.27)μmol/L、(4.51±1.29)μmol/L、(259.90±199.81)U/L、(345.80±209.95)U/L,P均0.05]。光镜下,参附桃红承气汤高剂量组肝肾组织较模型组炎性浸润有明显改善,出血、水肿及坏死明显减轻。结论高剂量参附桃红承气汤能降低MODS模型大鼠血清BUN、Cr、TB、ALT、AST水平,对脂多糖(LPS)介导的MODS模型大鼠肝肾组织病理有改善作用。     

黄葵胶囊对慢性肾小球肾炎模型大鼠肾组织病理和免疫功能的影响

目的观察黄葵胶囊对慢性肾小球肾炎模型大鼠肾组织病理和免疫功能的影响。方法SD大鼠50只随机分为空白对照组、模型组、黄葵胶囊低、中、高剂量组,每组10只,采用小牛血清白蛋白法建立慢性肾小球肾炎大鼠模型,空白对照组和模型组给予生理盐水灌胃,黄葵胶囊低、中、高剂量组分别给予0.5g/kg、1.0g/kg和2.0g/kg的黄葵胶囊灌胃,共8周。观察各组大鼠肾组织病理学变化,检测外周血T淋巴细胞亚群比例和血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)及肾组织白介素-6(IL-6)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平。结果空白对照组大鼠肾小球、系膜基质未见明显病理变化,模型组大鼠肾小球硬化、系膜基质增生,黄葵胶囊各剂量组大鼠肾脏病理变化较模型组明显减轻。模型组大鼠外周血CD3、CD4和CD4/CD8均明显低于空白对照组和黄葵胶囊低、中、高剂量组,差异均有统计学意义[CD3:(41.51±3.84)%比(58.23±4.52)%、(46.31±4.14)%、(50.25±4.37)%、(56.04±4.42)%,P0.05;CD4:(21.73±2.86)%比(37.61±3.47)%、(26.59±2.97)%、(32.44±3.11)%、(35.31±3.32)%,P0.05;CD4/CD8:(0.64±1.16)比(1.75±1.68)、(0.86±1.31)、(1.23±1.52)、(1.52±1.54),P0.05];CD8高于空白对照组和黄葵胶囊低、中、高剂量组,差异均有统计学意义[(33.74±2.46)%比(21.49±2.07)%、(30.81±2.27)%、(26.33±2.05)%、(23.17±2.15)%,P0.05]。模型组大鼠血清Scr、BUN和UA含量高于空白对照组、黄葵胶囊低、中、高剂量组,差异均有统计学意义[Scr:(68.62±5.74)μmol/L比(45.21±6.72)μmol/L、(62.17±7.23)μmol/L、(58.06±6.18)μmol/L、(52.45±6.85)μmol/L,P0.05;BUN:(17.29±2.43)mmol/L比(7.26±2.01)mmol/L、(14.67±2.28)mmol/L、(11.05±2.17)mmol/L、(9.14±2.37)mmol/L,P0.05;UA:(114.37±9.27)μmol/L比(65.68±7.12)μmol/L、(87.53±8.76)μmol/L、(80.49±8.49)μmol/L、(72.66±8.27)μmol/L,P0.05]。模型组大鼠肾组织IL-6、ICAM-1和TGF-β1水平均高于空白对照组、黄葵胶囊低、中、高剂量组,差异均有统计学意义[IL-6:(0.27±0.04)比(0.15±0.01)、(0.22±0.02)、(0.19±0.02)、(0.17±0.01),P0.05;ICAM-1:(0.26±0.02)比(0.12±0.03)、(0.21±0.03)、(0.18±0.02)、(0.15±0.03),P0.05;TGF-β1:(0.42±0.03)比(0.21±0.02)、(0.36±0.02)、(0.31±0.03)、(0.27±0.01),P0.05]。结论黄葵胶囊可保护慢性肾小球肾炎模型大鼠肾脏组织,改善肾功能,减轻炎症反应,机制可能与调节免疫相关。     

柚皮素对自身免疫性肝炎模型小鼠保护作用及TRAF6/JNK信号通路的影响

目的探讨柚皮素对自身免疫性肝炎(AIH)模型小鼠保护作用及肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法将72只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为阴性对照组,模型组,柚皮素低(30mg/kg)、中(60mg/kg)、高(120mg/kg)剂量组和阳性对照组(2mg/kg),每组12只。阴性对照组尾静脉注射等量生理盐水,其余各组小鼠一次性尾静脉注射刀豆球蛋白A(ConA)(12mg/kg)制备AIH模型。注射完毕之后,柚皮素低、中、高剂量组和阳性对照组分别灌胃相应药物,阴性对照组和模型组灌胃等量生理盐水,每天1次,持续给予5天。末次灌胃24h后,采用全自动生化分析仪检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肝组织病理学改变,酶联免疫吸附(ELISA)检测小鼠肝组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白免疫印迹法检测小鼠肝组织TRAF6、JNK、磷酸化JNK(p-JNK)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平。结果阴性对照组小鼠肝脏结构未见明显异常;模型组小鼠见大片肝细胞坏死区域,肝索排列紊乱,同时伴有炎性细胞浸润;柚皮素各剂量组和阳性对照组病理改变较模型组减轻,且柚皮素高剂量组与阳性对照组只存在轻度肝细胞坏死。与阴性对照组比较,模型组小鼠血清ALT[(134.82±13.60)U/L比(27.16±4.81)U/L,P0.05]、AST[(156.07±19.81)U/L比(20.49±3.62)U/L,P0.05],肝组织IL-6[(417.26±59.48)pg/mL比(102.18±18.62)pg/mL,P0.05]、TNF-α[(355.22±50.12)pg/mL比(62.17±6.07)pg/mL,P0.05]、TRAF6[(1.08±0.28)比(0.36±0.02),P0.05]、p-JNK[(0.94±0.14)比(0.38±0.02),P0.05]和Bax[(1.24±0.25)比(0.30±0.05),P0.05]蛋白水平增加,Bcl-2[(0.43±0.04)比(1.05±0.21),P0.05]和Bcl-2/Bax[(0.35±0.07)比(3.50±0.45),P0.05]水平降低;与模型组比较,柚皮素低、中、高剂量组和阳性对照组小鼠血清ALT[(119.45±11.72)U/L、(83.29±9.53)U/L、(52.13±9.14)U/L、(54.65±10.63)U/L比(134.82±13.60)U/L,P均0.05]、AST [(122.82±16.53)U/L、(86.51±9.48)U/L、(42.64±7.35)U/L、(46.82±8.27)U/L比(156.07±19.81)U/L,P均0.05],肝组织IL-6[(364.34±41.77)pg/mL、(307.13±37.43)pg/mL、(248.29±32.18)pg/mL、(253.17±34.90)pg/mL比(417.26±59.48)pg/mL,P均0.05]、TNF-α[(293.57±37.68)pg/mL、(240.94±27.49)pg/mL、(153.82±19.92)pg/mL、(149.56±18.08)pg/mL比(355.22±50.12)pg/mL,P均0.05]、TRAF6[(0.86±0.13)、(0.71±0.10)、(0.52±0.07)、(0.49±0.06)比(1.08±0.28),P均0.05]、p-JNK[(0.78±0.11)、(0.64±0.09)、(0.50±0.08)、(0.46±0.07)比(0.94±0.14),P均0.05]和Bax[(1.10±0.19)、(0.95±0.18)、(0.43±0.05)、(0.40±0.12)比(1.24±0.25),P均0.05]蛋白水平降低,Bcl-2[(0.52±0.07)、(0.60±0.10)、(0.73±0.13)、(0.71±0.15)比(0.43±0.04),P均0.05]和Bcl-2/Bax[(0.47±0.04)、(0.63±0.08)、(1.70±0.21)、(1.78±0.38)比(0.35±0.07),P均0.05]水平增加,柚皮素各剂量组之间呈剂量效应关系(P0.05);各组小鼠肝组织JNK蛋白水平变化不显著(P0.05);柚皮素高剂量组与阳性对照组作用相似(P0.05)。结论柚皮素可能通过抑制TRAF6/JNK信号通路,减轻AIH模型小鼠肝脏炎症反应,对AIH模型小鼠肝脏具有保护作用。     

替普瑞酮对类固醇致胃黏膜损伤的保护作用

目的研究替普瑞酮对类固醇激素所致胃黏膜损伤的保护作用及其机制。方法50只雄性SD大鼠随机分为空白组、实验对照组、低剂量替普瑞酮组、中剂量替普瑞酮组和高剂量替普瑞酮组,每组10只。采用泼尼松龙皮下注射制备大鼠胃黏膜损伤模型,低、中、高剂量组替普瑞酮的剂量分别为50、100、200mg/kg,给药7d,每天1次。观察胃黏膜的病理变化,计算溃疡指数、胃黏膜组织学损伤指数,放射免疫法检测血浆内皮素1和胃黏膜前列腺素E2(PGE2)水平,Griess法检测血清NO含量。结果类固醇激素能引起胃黏膜显著出血性损伤,实验对照组大鼠溃疡指数中位数为44.5,组织学损伤指数中位数为5.5,明显高于空白组(均为0,均P<0.01);实验组大鼠血浆内皮素1水平为399pg/ml±74pg/ml,高于空白组(279pg/ml±56pg/ml,P<0.01);血浆NO水平(27μmol/L±5μmol/L)低于空白组(36μmol/L±5μmol/L,P<0.01);胃黏膜PGE2水平(154pg/mg±83pg/mg)低于空白组(337pg/mg±112pg/mg,P<0.01)。低、中、高剂量替普瑞酮组的溃疡指数中位数分别为32.5,23.0,23.0,均明显低于实验组(均P<0.01);组织学损伤指数中位数分别为3.0,3.0,1.5,均明显低于实验组(均P<0.01),内皮素1水平分别为299pg/ml±99pg/ml,284pg/ml±85pg/ml,189pg/ml±32pg/ml,均明显低于实验对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01);NO水平分别为56μmol/L±16μmol/L,62μmol/L±12μmol/L,83μmol/L±9μmol/L,均明显高于实验对照组(均P<0.01),高剂量替普瑞酮组胃黏膜PGE2水平为241pg/mg±65pg/mg,明显高于实验组154pg/mg±83pg/mg(P<0.05)。溃疡指数、组织学损伤指数和内皮素1水平随替普瑞酮剂量的增大而降低,血清NO、胃黏膜PGE2水平随替普瑞酮剂量的增大而升高。结论替普瑞酮对类固醇致胃黏膜损伤具有一定的保护作用,其机制可能与降低内皮素1水平和增加NO和PGE2生成有关。     

低频超声治疗对SD大鼠颊囊黏膜溃疡愈合的影响

目的探讨低频超声对大鼠实验性口腔黏膜溃疡愈合时间及溃疡组织中一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)含量的影响。方法健康Sprague-Dawley(SD)大鼠36只,雌雄各半,完全随机分为6组(n=6),1组设为正常对照组,其余5组利用氧自由基诱导法+物理烧伤法建立SD大鼠颊囊黏膜口腔溃疡动物模型,分别为溃疡组、药物组和低频超声组(1.1、1.58、2.06 W)。末次治疗24 h后观察溃疡愈合时间,并采用分光光度计测定大鼠口腔颊囊黏膜组织中NO、NOS含量。结果大鼠溃疡病理特点与人类口腔溃疡病理特点基本相似。低频超声组较溃疡组及药物组的溃疡愈合时间短。NO活性测定结果显示,低频超声组1.1、1.58、2.06 W[分别为(9.86±1.69)、(9.42±1.34)、(8.51±1.26)μmol/g]较溃疡组[(23.85±4.81)μmol/g]显著降低(P<0.05),与正常对照组(10.88±1.68)μmol/g比较无统计学差异(P>0.05);NOS活性检测结果同样表明,低频超声组1.1、1.58、2.06 W[分别为(3.89±0.72)、(4.35±0.53)、(4.74±0.81)μmol/g]较溃疡组[(6.48±0.77)μmol/g]显著降低(P<0.05),与正常对照组(3.83±0.99)μmol/g比较无统计学差异(P>0.05)。结论适合剂量参数的脉冲低频超声能有效降低溃疡组织中的NO、NOS活性含量,对溃疡的愈合有一定的促进作用。     

丹参多酚酸盐注射液辅助治疗不稳定型心绞痛疗效及对血清炎症因子、代谢组学变化的影响

目的观察丹参多酚酸盐注射液辅助治疗冠心病不稳定型心绞痛(UAP)的作用机制。方法收集73例冠心病不稳定心绞痛(UAP)患者随机分为观察组42例和对照组31例,两组均采用常规治疗,观察组在此基础上静脉滴注丹参多酚酸盐注射液,14天为1个疗程。采用硝酸还原酶比色法检测两组患者治疗前后血清一氧化氮(NO)含量,ELISA法检测内皮素-1(ET-1)、饥饿激素(Ghrelin)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)及内脂素(Visfatin)水平;采用超高效液相色谱仪与成分分析法分析两组患者治疗前后血清代谢差异物,并用EZinfo 2.0软件进行PCA分析潜在差异生物标记物。结果 (1)与对照组比较,观察组临床症状、心电图总疗效明显高于对照组(临床症状疗效:83.81%比66.74%,P0.05;心电图疗效:83.33%比54.84%,P0.05);(2)对照组治疗后较治疗前血清NO、IL-10、Ghrelin表达升高(P0.05),ET-1、IL-6及Visfatin表达降低(P0.05);观察组治疗后较对照组治疗后血清NO、Ghrelin、IL-10表达增高[NO:(66.79±8.11)μmol/L比(60.34±4.86)μmol/L,P0.05;Ghrelin:(23.64±3.25)μg/L比(15.81±1.87)μg/L,P0.05;IL-10:(174.18±9.95)pg/mL比(166.39±17.21)pg/mL,P0.05],ET-1、IL-6及Visfatin降低[ET-1:(55.59±6.37)pg/mL比(69.24±9.37)pg/mL,P0.05;IL-6:(70.81±5.28)pg/mL比(86.39±6.37)pg/mL,P0.05;Visfatin:(19.68±3.39)μg/mL比(29.71±3.88)μg/mL,P0.05];(3)对照组治疗前后血清生物标记物无明显变化,观察组治疗后较治疗前鉴定出5种代谢差异物,其中色氨酸、9'-羧基-γ-生育酚含量升高,溶血磷脂、花生四烯酸及胆汁酸含量下降。结论丹参多酚酸盐注射液可从舒张血管、抗氧化、减轻炎症反应等多个方面起到辅助治疗UAP的作用。     

复方芪苓配方颗粒对尿酸性肾病模型大鼠作用机制研究

目的研究复方芪苓配方颗粒降尿酸及改善肾功能的作用机制。方法 60只雄性SD大鼠按随机数字表法分为复方芪苓配方颗粒高剂量组(9.6g·kg-1·d-1)、中剂量组(4.8g·kg-1·d-1)、低剂量组(2.4g·kg-1·d-1),别嘌醇组(10.5mg·kg-1·d-1),正常对照组,模型对照组,每组10只。采用灌胃腺嘌呤联合腹部皮下注射氧嗪酸钾制备大鼠尿酸性肾病模型,连续造模2周。造模成功后各组给予相应药物灌胃,正常及模型对照组以等体积蒸馏水灌胃,连续给药2周。分别采用肌氨酸氧化酶法、尿素酶法、尿酸酶法测定其血清肌酐、尿素、尿酸,化学比色法测定肝脏黄嘌呤氧化酶,免疫组化检测肾脏组织有机阴离子转运体1(OAT1)、尿酸盐转运体1(URAT1)、有机阳离子转运体2(OCT2)的表达。结果与模型对照组比较,复方芪苓配方颗粒高、中、低剂量组尿酸性肾病模型大鼠血清尿酸水平显著降低[(107.80±9.27)μmol/L、(119.31±10.63)μmol/L、(129.41±9.27)μmol/L比(178.00±10.84)μmol/L,P<0.01];复方芪苓配方颗粒高、中剂量组血清肌酐、尿素水平显著降低[(51.00±5.30)μmol/L、(57.65±10.36)μmol/L比(101.67±9.84)μmol/L,(12.43±1.09)μmol/L、(18.37±2.41)μmol/L比(29.35±4.59)μmol/L,P<0.01];复方芪苓配方颗粒高、中剂量组肝脏黄嘌呤氧化酶明显降低[(38.38±3.85)U/L、(39.09±4.39)U/L比(45.90±5.02)U/L,P<0.05];复方芪苓配方颗粒高剂量组肾脏OAT1蛋白的表达显著上调[(636786.94±46980.65)比(330652.32±36608.14),P<0.01],且其高、中剂量组OCT2蛋白的表达显著上调[(698162.61±24727.35)、(668148.15±39230.42)比(462729.95±34117.12),P<0.01],URAT1蛋白的表达显著下调[(33202.67±2481.30)、(63795.48±5177.65)比(159163.58±16016.05),P<0.01]。结论复方芪苓配方颗粒能降低尿酸性肾病模型大鼠血清肌酐、尿素、尿酸水平,其作用机制可能与降低大鼠肝脏黄嘌呤氧化酶活性,上调大鼠肾脏OAT1、OCT2水平,下调URAT1水平,从而抑制尿酸生成、并通过增加尿酸盐的分泌及降低肾脏尿酸盐重吸收能力促进尿酸排泄相关。     

同型半胱氨酸与老年冠心病合并2型糖尿病患者心功能的相关性研究

目的：探讨同型半胱氨酸(HCY)与老年冠心病合并2型糖尿病患者心功能的关系,为临床治疗和干预提供理论依据。方法选取2013年6月至2015年6月期间就诊于我院老年病科的500例冠心病合并2型糖尿病老年患者作为研究对象,选取同期于我院做健康查体的50例健康老年人作为正常对照组。根据心功能分级标准将患者有无心力衰竭(HF)分为HF组343例和非HF组157例。比较三组受检者的HCY、空腹血糖(FPG)及甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、糖化血红蛋白(HBA1C)、脑钠肽(BNP)及左心室射血分数(LVEF)的差异。结果 HF组患者的FPG [(9.3±4.2) mmol/L]、HBA1C [(9.01±2.45)%]、TG [(1.76±0.58) mmol/L]、TC [(6.13±1.01) mmol/L]水平均明显高于非HF组[(7.3±2.6) mmol/L、(7.66±2.36)%、(1.43±0.61) mmol/L、(5.02±0.43) mmol/L]及正常对照组[(5.6±3.1) mmol/L、(4.62±0.47)%、(1.16±0.39) mmol/L、(4.21±0.52) mmol/L],差异均具有统计学意义(P<0.05)。HF组患者HCY [(18.5±7.2)μmol/L]、LVEF [(51.3±7.5)%]、BNP [(3212.5±4134.2) pg/mL]均明显高于非HF组[(11.9±3.0)μmol/L、(59.2±4.4)%、(369.3±780.5) pg/mL]与正常对照组[(7.3±1.6)μmol/L、(69.2±5.5)%、(79.8±31.2) pg/mL],差异均具有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析发现,HCY与心功能分级之间存在正相关性(r=0.51,P<0.05),HCY与LVEF之间存在负相关性(r=-0.35,P<0.05)。结论 HCY可以反映老年冠心病合并2型糖尿病患者的心功能,患者心功能越差,HCY水平越高。     

反复热性惊厥过程中γ-氨基丁酸B受体对一氧化氮/一氧化氮合酶体系的调节作用

目的:探讨γ-氨基丁酸B受体(γ-aminobutyric acid B receptor,GABABR)对热性惊厥(febrile seizure,FS)大鼠一氧化氮(nitric oxide,NO)/一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)体系表达的影响.方法:将21 d龄SD大鼠随机分为对照组、FS组、FS+巴氯芬(baclofen)组和FS+法克罗芬(phaclofen)组.采用热水浴诱导大鼠FS,隔日诱导1次,共10次.采用分光光度计法测定大鼠血浆中NO含量;用原位杂交方法观察神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)mRNA表达情况;用免疫组化方法观察nNOS蛋白表达情况.结果:FS+baclofen组NO含量低于FS组[(19.02±9.31)μmol/L比(40.03±9.12)μmol/L],同时nNOS蛋白和mRNA表达也较FS组减弱;而FS+phaclofen组NO含量高于FS组[(66.46±8.15)μmol/L比(40.03±9.12)μmol/L],同时nNOS蛋白和mRNA表达也较FS组增强.结论:反复热性惊厥过程中,GABABR的改变可影响NO/NOS体系的表达.