Livin与Caspase-9在大肠癌组织中的表达及临床意义

目的:研究Livin和Caspase-9在大肠癌组织中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测60例大肠癌、20例腺瘤、18例正常大肠黏膜中Livin、Caspase-9的表达情况。结果:Livin在大肠癌组织中的表达(68.3%)明显高于腺瘤组织(40.0%)(P<0.05),腺瘤组织中的表达明显高于正常大肠黏膜组织(5.9%)(P<0.05)。Livin的表达与肿瘤有无淋巴结转移、Dukes分期、是否放化疗密切相关(P<0.05)。Caspase-9在大肠癌组织中的表达(25.0%)明显低于腺瘤组织(50.0%)(P<0.05),腺瘤组织中的表达明显低于正常大肠黏膜组织(83.3%)(P<0.05)。Caspase-9的表达与肿瘤分化程度、有无淋巴结转移密切相关(P<0.05)。Livin与Caspase-9在大肠癌组织中的表达呈负相关(P<0.05)。结论:Livin和Caspase-9在大肠癌的发生、发展中起着重要作用,可能会成为大肠癌的分子标志物或治疗的新靶点。     

肝癌中Smac和Caspase-3的表达及在细胞凋亡中的关系

目的探讨Smac和Caspase-3在原发性肝细胞癌(HCC)组织中的表达及二者在肝癌细胞凋亡中的作用和关系.方法免疫组化法检测43例肝癌组织、20例癌旁组织和11例正常肝组织中Smac和Caspase-3蛋白表达情况.RT-PCR检测Smac和Caspase-3 mRNA表达情况.结果43例HCC标本中Smac表达有20例(46.5%),而除2例癌旁组织外,其它癌旁组织和正常肝组织中均见Smac表达;Caspase-3在癌组织、癌旁组织和正常肝组织中分别有18例(41.9%)、15例(75%)和11例(84.6%)表达.Smac和Caspase-3在肝癌组织中的表达具有明显的正相关性(P＜0.05,r=0.6264).Smac mRNA表达阳性的肝癌组织的细胞调亡指数明显升高.结论Smac在肝癌组织中低表达,其表达和Caspase-3呈明显的正相关,二者可能是肝癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环.     

Survivin与Caspase-3在胆管细胞癌中的表达及相关性研究

目的 探讨Survivin和Caspase-3在胆管细胞癌中的表达及相互关系.方法 用免疫组化S-P法分别检测Survivin和Caspase-3在胆管细胞癌、癌旁组织及正常胆管组织中的表达.结果 ①Survivin在胆管细胞癌中的表达显著高于癌旁组织和正常胆管组织(P＜0.01);Caspase-3在胆管细胞癌中的表达显著低于癌旁组织和正常胆管组织(P＜0.01).②在胆管细胞癌中,Survivin的表达随着肿瘤分化程度的降低而增强(rs=0.404,P＜0.01),Caspase-3的表达随着肿瘤分化程度的降低而减弱(rs=0.389,P＜0.05).③Survivin和Caspase-3在胆管细胞癌中的表达呈负相关(rs=-0.765,P＜0.01).结论 Survivin的高表达和Caspase-3的失表达抑制了胆管细胞癌细胞的凋亡,可能与胆管细胞癌细胞的生长有关;Survivin和Caspase-3表达的负相关性反映了Survivin抑制Caspase-3介导的细胞凋亡.可能与癌细胞的发生发展有密切关系.     

Caspase-3 mRNA在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)中Caspase-3的表达水平及其与临床病理学特征之间的关系.方法 采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测手术切除的肝细胞癌患者的肝癌组织标本及癌旁肝组织标本中Caspase-3 mRNA的表达.结果 肝癌组织中Caspase-3 mRNA值为(0.028±0.018),癌旁组织中的Caspase-3 mRNA值为(0.049±0.026),肝癌组织中Caspase-3 mRNA明显低于相应的癌旁肝组织中的表达(P<0.01).结论 Caspase-3 mRNA可能成为判断肝癌预后或复发转移的指标之一.     

生长抑素对大肠癌细胞凋亡的影响

目的 探讨生长抑素对大肠癌细胞凋亡的影响.方法 采用巢式RT-PCR方法检测2004年1月至2006年10月皖南医学院附属弋矶山医院收治的79例大肠癌患者癌组织中生长抑素mRNA的表达情况,采用免疫组织化学法检测大肠癌组织中生长抑素、Fas、FasL、半胱天冬蛋白酶(caspase)3和8蛋白的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡指数(AI).采用χ~2检验、q检验、Spearman等级相关检验对结果进行分析.结果 大肠癌组织中生长抑素mRNA与其蛋白表达呈正相关(r=0.98,P<0.05).低分化和中分化大肠癌组织中生长抑素mRNA及其蛋白的表达明显低于高分化组织(χ~2=10.78,11.24,5.27,5.24,P<0.05);生长抑素mRNA及其蛋白在乳头状腺癌的阳性表达率明显高于黏液腺癌+印戒细胞癌及未分化癌(χ~2=6.56,6.99,5.44,7.39,P<0.05);Dukes A、B期的生长抑素mRNA及其蛋白阳性表达率明显高于C、D期(χ~2=5.17,4.06,P<0.05).生长抑素高表达组、中表达组的AI明显高于低表达组(q=5.66,4.21,P<0.05);Fas、caspase-8、caspase-3在生长抑素高表达组、中表达组的阳性表达率明显高于低表达组(χ~2=5.48,5.62,6.89,4.32,4.19,3.91,P<0.05).结论 生长抑素对大肠癌细胞凋亡的调控可能与Fas/FasL基因的表达失衡、功能和信号系统的紊乱有关.     

RASSF1A mRNA在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的 应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析RASSF1 A在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义.方法 提取65例外科手术切除的肝细胞癌组织(其中右肝癌41例,左肝癌的24例)及其相对应的癌旁正常组织和6株肝癌细胞株及1株正常肝细胞株的总RNA,逆转录成cDNA,应用实时荧光定量RT-PCR方法检测RASSF1 A mRNA的表达水平.结果 癌旁正常组织RASSF1A mRNA表达量为癌组织的3.32倍,两者差异有统计学意义(癌旁正常组织△CT=4.64±2-44,癌组织中△CT=6.30±1.92,P<0.01),其中38例(58.5%)肝癌组织中的RASSF1A mRNA表达水平比癌旁正常组织显著下调:下调8倍以上的有17例,下调4倍以上的有8例,下调2倍以上的有13例,另外有5例(7.7%)在肝癌组织中的RASSF1A表达水平比癌旁正常组织较高,其余22例(33.8%)则差异无统计学意义(P>0.05);3株(QGY-7701、PLC、Hep3B,50.0%)肝癌细胞株中的RASSF1A mRNA表达水平比正常肝脏细胞株(HL-7702)显著下调;在肝癌组织中RASSF1A的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小等无明显相关(P>0,05),但和门脉癌栓与否(P<0.05)、临床分期(P<0.05)及血清HbsAg明显相关(P<0.01).结论 RASSF1A基因的缺失或低表达可能在肝细胞癌发生、发展过程中起一定作用.     

7种microRNAs在原发性肝癌组织和癌旁组织间的差异表达及与血清肿瘤标志物水平的相关性研究

目的 分析小RNA(microRNAs)在原发性肝细胞癌组织和癌旁组织中的表达差异及与血清肿瘤标志物水平的相关性,探索肝癌诊断和预后可能的新标志.方法 使用实时定量PCR技术检测7种MicroRNAs在原发性肝细胞癌组织和癌旁组织中的表达差异.结果 7种microRNAs在原发性肝细胞癌组织和癌旁组织中的表达差异均有统计学意义(P<0.05).与癌旁组织相比,miR-34c、miR-21、miR-16及miR-10b在肝癌组织中表达上调,miR-200a、miR-148b及miR-Let-7i在肝癌组织中表达下调,其中miR-200a 和 miR-148b下调明显.miR-200a在肝癌和癌旁组织中的表达差异与患者血清AFP水平呈正相关(r=0.848 9,P<0.01),而其余microRNAs的表达差异与患者血清各肿瘤标志物水平均无相关关系(P>0.05).结论 原发性肝细胞癌和癌旁组织中存在microRNAs的表达差异,miR-200a可能成为新的肝癌早期诊断标志.     

Survivin和Caspase-3在结直肠癌中表达及临床意义

目的探讨Survivin和Caspase-3在结直肠癌中表达的临床意义,研究两基因与结直肠癌生物学特性之间的联系及两基因之间的关系。方法应用RT-PCR实验技术测定60例结直肠癌组织及40例癌旁正常组织标本中Survivin和Caspase-3mRNA的表达,分析两基因与肿瘤临床特性、生物学特性之间的相关性及其间的关系。结果Survivin在结直肠癌中的表达较癌旁正常组织明显升高（P〈0．05）,而在癌旁正常组织中未能检测到SurvivinmRNA。在癌组织中,Caspase-3的表达较正常组织明显降低（P〈0．05）。Survivin的表达与患者的性别、肿瘤大小、部位及组织分化程度无明显相关性,但与Dukes分期及有无淋巴结转移密切相关;而Caspase-3的表达仅与肿瘤的分化程度有关,且丽基因呈负相关。结论Survivin与Caspase-3在结直肠癌组织中表达均与癌旁正常组织存在差异,并与肿瘤的Dukes分期、淋巴转移和分化程度有关。因此我们可以推断Sur-vivin可能与肿瘤的侵袭性有着密切的联系;Caspase．3与肿瘤的恶性程度有关。单独或者联合检测两基因mRNA表达可以为临床治疗提供重要的参考依据。     

凋亡相关基因Survivin及Caspase-3 mRNA在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的探讨凋亡相关基因survivin及Caspase-3 mRNA的表达与膀胱移行细胞癌发生及发展的关系。方法应用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测33例膀胱移行细胞癌组织中survivin和Caspase-3 mRNA表达的情况，结合临床资料进行分析。结果93．9％（31／33）的肿瘤组织可检测到survivin mRNA表达，而对照组全部阴性表达，二者有统计学意义；81．8％（27／33）的肿瘤标本可检出Caspase-3 mRNA，而对照组中检出率为80％（8／10），实验组与对照组间无明显差异。在Ⅲ级膀胱移行细胞癌中survivin mRNA的表达强度较Ⅰ级为高，二者间有统计学意义（P〈0．05）。survivin和Caspase-3的表达与肿瘤的临床分期无关（P〉0．05）。结论survivin mRNA在膀胱移行细胞癌中有特异性表达，其高表达提示肿瘤分化不良。阻断suvivin mRNA的表达可能为膀胱肿瘤的治疗提供新的途径。     

联合检测大肠癌组织中PTEN与CyclinD1的表达及DNA含量的临床意义

目的:探讨大肠癌组织中PTEN和CyclinD1的表达及与DNA含量联合检测的关系及意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测58例大肠癌及14例癌旁正常大肠黏膜组织中PTEN和CyclinD1蛋白表达;应用流式细胞术检测以上组织中PTEN和CyclinD1的DNA含量;分析它们之间及与肿瘤分期、分级的关系.结果:PTEN蛋白在大肠癌组织中的表达(65.52%)显著低于癌旁正常组织(100%),CyclinD1蛋白在大肠癌组织中的表达(60.34%)显著高于癌旁正常组织(1.72%),两种蛋白在大肠癌组织中的表达呈负相关(r =-0.71);大肠癌组织的异倍体率(68.97%)显著高于癌旁正常组织(0);PTEN阳性组的DNA指数(DNA index,DI)、S期细胞比率(S-phase fraction ,SPF)均低于阴性组(P<0.05),CyclinD1阳性组的DI及SPF均高于阴性组(P<0.05);两者的表达与肿瘤病理分级、Dukes分期及淋巴结转移相关;淋巴结转移患者的异倍体率及SPF均高于无淋巴转移患者(P<0.05).结论:PTEN和CyclinD1基因的异常改变可能参与大肠黏膜细胞的恶性转化过程,两者的变化存在相关性;DNA含量的变化可能与淋巴结转移有关.联合检测PTEN、CyclinD1蛋白及DNA含量可作为评估大肠癌病理生物学行为和预后的重要指标.     

LivinmRNA在结直肠癌、腺瘤和正常黏膜中的表达差异及意义

目的探讨凋亡抑制蛋白Livin在结直肠癌、结直肠腺瘤及正常结直肠黏膜中的表达差异及意义。方法应用实时荧光定量法检测Livin mRNA在64例结直肠癌、36例结直肠腺瘤及12例正常黏膜中的表达,并用REST-XLC软件作基因表达的相对定量统计学分析。结果 Livin mRNA的表达量在正常结肠黏膜组织、结直肠腺瘤组织及结直肠癌组织中依次增高,结直肠癌与结直肠腺瘤及正常结直肠黏膜相比较,Livin mRNA的表达上调且差异有统计学意义（P=0.001）。与正常黏膜相比,结直肠腺瘤中Livin mRNA表达上调,但差异无统计学意义（P=0.19）。结论凋亡抑制蛋白Livin参与了大肠肿瘤的发生,且在大肠腺瘤-腺癌阶段起到了重要作用。     

凋亡诱导因子和caspase-3在结直肠腺瘤-癌序列中的表达及相关性

目的探讨非caspase依赖凋亡途径的凋亡诱导因子（AIF）与caspase依赖凋亡途径的caspase-3在结直肠腺瘤．癌序列中的表达变化及两种蛋白之间的相关性。方法采用免疫组织化学染色检测18例正常黏膜、84例结直肠腺瘤和72例结直肠癌中AIF及caspase-3的表达情况。结果结直肠腺瘤组织中AIF及caspase-3的阳性表达率均明显高于正常黏膜组织（P〈0．05）;腺瘤组织中AIF阳性表达率与腺癌之间的差异无统计学意义（P〉0．05）,而caspase-3阳性表达率则明显高于腺癌组织（P〈0．05）;腺瘤组内绒毛状腺瘤AIF阳性表达率明显低于管状腺瘤（P〈0．05）,而caspase-3阳性表达率在两种腺瘤之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。相关分析显示,AIF表达与caspase-3表达无显著相关性（P〉0．05）。结论AIF代表的非caspase依赖凋亡途径异常发生在腺瘤向癌突变早期．而caspase依赖途径的凋亡失控可能是更重要的促进结直肠癌发生的因素之一。非caspase依赖的凋亡途径与caspase依赖的凋亡途径是肿瘤发生中两条相对独立的细胞凋亡途径。     

结直肠癌微环境中细胞因子的表达及其与CD16a mRNA表达的相关性研究

目的探讨结直肠癌肿瘤微环境中细胞因子的表达及其与CD16a mRNA表达的关系。方法分别采用实时荧光定量PCR法和流式细胞术微球阵列法(CBA法)检测42例结直肠癌组织及其癌旁组织中CD16a mRNA和8种细胞因子[包括白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)和血管内皮生长因子(VEGF)]的表达水平,分析两者之间的相关性。结果结直肠癌组织中IL-6、TNF-α和VEGF的表达水平高于癌旁组织(P<0.05),而IL-2、IL-4、IL-10、IL-12和IFN-γ在2种组织中的表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术前CEA正常组的IL-6和VEGF的表达水平高于术前CEA升高组(P<0.05)。相关性分析结果显示:结直肠癌组中IL-6的相对表达水平与CD16a mRNA的表达水平呈负相关(P<0.05)。结论结直肠癌组织中IL-6、TNF-α和VEGF的表达水平较癌旁组织明显升高,提示促血管生成作用及免疫抑制增强。此外,结直肠癌肿瘤微环境中CD16a mRNA的表达与IL-6的表达呈负相关。     

黑色素瘤缺乏因子2和赖氨酰氧化酶在结直肠癌组织中的表达及与预后的关系

目的:探讨结直肠癌组织中黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)和赖氨酰氧化酶(LOX)表达与临床病理参数及预后的关系。方法:对2010年10月—2014年2月收治的98例结直肠癌患者进行研究,检测结直肠癌组织及癌旁组织中AIM2和LOX的表达,分析AIM2和LOX表达与临床病理参数的相关性,Kaplan-Meier生存曲线分析不同AIM2、LOX表达患者总生存率的差异,Cox比例风险回归模型分析结直肠癌患者预后的影响因素。结果:与癌旁组织相比,结直肠癌组织中AIM2表达下调,而LOX表达上调(P<0.05)。AIM2表达与TNM分期和肿瘤分化程度相关(P<0.05),而LOX表达与肿瘤浸润深度、TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05)。AIM2阳性患者的生存率明显高于AIM2阴性患者(P<0.05),而LOX阳性患者的生存率明显低于LOX阴性患者(P<0.05)。Cox比例风险回归分析结果显示,TNM分期、AIM2和LOX表达是结直肠癌患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论:结直肠癌组织中AIM2表达下调而LOX表达上调,并与结直肠癌的进展和患者的预后有关,检测AIM2、LOX有助于患者的预后评估。     

应用基因芯片技术筛选结直肠癌及癌旁组织基因的差异表达

目的用基因芯片技术筛选结直肠癌及癌旁组织基因差异表达,寻找结直肠癌相关基因并了解其在肿瘤发生及转移过程中的作用。方法选用有8000条人类基因的cDNA表达谱芯片,以6例临床手术切除的结直肠癌组织、癌旁3cm和5cm肠黏膜组织及正常肠黏膜组织为研究对象,筛查相关基因的差异表达。结果与正常对照组相比．在癌组织样品中存在显著性表达差异的基因有769个,其中发生上调表达的有363个．下调表达的有406个：在癌旁3cm样品中存在显著性表达差异的基因有155个．其中发生上调表达的有52个．下调表达的有103个：在癌旁5cm样品中存在显著性表达差异的基因有230个．其中发生上调表达的有46个,下调表达的有184个。在癌组织与正常对照组间,具有差异表达的基因较多（19．5％．769／3944）,而在癌旁3Cm、5cm两组直肠黏膜组织与正常对照组间．差异表达的基因则较少．占总体基因数量的3．9％～5．8％。差异表达的基斟中具有明显功能类型的基因主要包括肿瘤相关基因、细胞增殖与凋亡调控基因、基因转录调控基因及细胞外基质成份及其降解相关的基因。结论不同来源组织间在生物学性质上具有各自的特性,多种基因参与了结直肠癌的发生与发展。癌旁组织也存在着基因的差异表达．显示其也有恶变倾向。     

结直肠癌中Neu3基因的表达及产物活性的检测

目的 探讨神经苷节脂特异性的唾液酸酶（Neu3）基因与人类结直肠癌的关系。方法 用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测8例结直肠癌组织和正常黏膜之间Neu3 mRNA的表达差异；用硫巴比妥酸方法（TBA）检测32例结直肠癌组织和正常黏膜中唾液酸酶活性。结果 在转录水平，8对结直肠癌组织和正常组织中，癌组织中Neu3 mRNA的表达明显高于正常组织中Neu3 mRNA的表达水平；在蛋白质翻译水平．32例结直肠癌组织中的唾液酸酶活性平均为10．60U／mg，32例正常黏膜组织中的唾液酸酶活性平均为5．51U／mg（P〈0．05）。结论 Neu3基因的编码产物-神经苷节脂特异性的唾液酸酶与结直肠癌细胞的分化和生长密切相关。Neu3基因可能与人类结直肠癌有关。     

结直肠癌侵袭性与脾酪氨酸激酶基因Syk启动子甲基化的关系

目的　探讨脾酪氨酸激酶 (Syk)基因启动子甲基化与结直肠癌侵袭转移之间的关系。方法　采用巢式双重甲基化特异性聚合酶链反应 (MSP)和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)的方法检测Syk基因在 12 0例结直肠癌肿瘤组织、癌旁正常组织中的甲基化和表达情况。 结果　 12 0例结直肠癌患者中 ,48例未检测到SykmRNA的表达 ,而癌旁正常组织均有表达。癌旁正常组织未检测到Syk基因启动子甲基化 ,3 7例肿瘤组织发生Syk基因启动子甲基化(3 0 .8% ) ,癌组织Syk基因启动子甲基化率显著增高 (P <0 .0 0 0 5 )。在淋巴结转移的 5 6例中 ,2 4例发生Syk基因启动子甲基化 ,而无淋巴结转移的 64例中 ,13例发生甲基化 ,有淋巴结转移的Syk基因启动子甲基化发生率显著高于无淋巴结转移组 (P =0 .0 0 8)。发生甲基化的肿瘤组织中 ,均无SykmRNA的表达。结论　结直肠癌中 ,SYK基因启动子过甲基化导致其mRNA的失表达 ,从而引起结直肠癌的侵袭性增强 ,它可能是结直肠癌发生侵袭转移的又一种机制。     

miR-20b在乳腺癌的表达及对乳腺癌细胞增殖的影响

【摘要】〓目的〓观察miRNA-20b(miR-20b)在乳腺癌组织中的表达情况和对乳腺癌细胞株生长凋亡的影响。方法〓运用实时定量RT-PCR检测134例乳腺浸润性导管癌组织miR-20b的表达,并与临床病理资料和生存时间进行相关分析;瞬时转染miR-20b抑制物到乳腺癌细胞中,CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况。结果〓miR-20b在乳腺癌组织中表达量明显高于癌旁组织(P<0.001)。其表达与肿瘤大小、远处转移情况及Ki67表达相关(P<0.001)。miR-20b高表达组病人的无病生存期(DFS)和总生存期(OS)短于低表达组(P<0.05)。转染miR-20b抑制物后,细胞增殖减弱(P<0.05),凋亡增强(P<0.05)。结论〓乳腺癌组织中miR-20b表达与乳腺癌预后相关,可作为乳腺癌恶性程度的预测指标。     

应用结肠癌基因表达谱数据整合分析筛选肿瘤相关基因

目的 通过结肠癌基因表达谱数据整合分析筛选肿瘤相关基因.方法 基因芯片技术构建的结肠癌基因表达谱与转录组公共数据库SAGE DGED信息相结合,筛选肿瘤相关基因.定量聚合酶链反应(PCR)验证基因差异表达.组织芯片(腺癌22例、腺瘤20例、正常8例)和免疫组织化学技术检测基因蛋白表达.结果 119条基因(上调17条、下调102条)在基因芯片与SAGEDGED中表达变化结果一致.定量PCR检测TGFBI、NME1、IFITM3、FCGBP和TSPAN1基因表达,结果与基因表达谱数据一致.IFITM3蛋白表达在结肠腺瘤(20%,4/20)和腺癌(55%,12/22)中表达较正常结肠组织(0,0/8)明显升高(P<0.05).结论 基因芯片数据和SAGE DGED相结合,可快速、准确筛选结肠癌肿瘤相关基因.