蛇床子总香豆素对去卵巢大鼠骨质疏松的影响

目的观察蛇床子总香豆素对去卵巢大鼠骨质疏松的影响。方法40只大鼠随机分成假手术组、模型组、蛇床子总香豆素20mg/kg组和尼尔雌醇组,对后3组大鼠行卵巢切除术,12周后检测大鼠体重、子宫重量、子宫内膜腺体数及血清钙、磷、碱性磷酸酶、肌肝、E2、CT、TGF-β1、BGP含量和大鼠股骨骨密度及形态改变。结果与模型组相比,蛇床子总香豆素组大鼠体重、子宫重量和子宫内膜腺体数未见有明显增加或降低(P>0.05),而血清钙含量明显增加(P<0.05),血清磷含量下降(P<0.05);蛇床子总香豆素组大鼠血清E2、CT、TGFβ1、BGP含量均显著升高(P<0.01或P<0.05),股骨近端干骺端骨密度明显增加(P<0.01),光镜下可见骨小梁增多、增粗,呈网状,髓腔变小,与假手术组大鼠相似。结论蛇床子总香豆素能提高去卵巢大鼠股骨骨密度,改善股骨组织形态,预防骨质疏松的发生。其作用机制可能与增加血清E2、CT、TGFβ1和BGP含量等相关。     

蛇床子素抑制大鼠动脉粥样硬化形成的实验研究

目的观察蛇床子素对大鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、蛇床子素大剂量组（40 mg/kg）、蛇床子素中剂量组（20 mg/kg）、蛇床子素小剂量组（10 mg/kg）和罗格列酮组（4 mg/kg）。在给药的同时采用高脂乳剂灌胃加一次腹腔注射维生素D3法复制动脉粥样硬化大鼠模型,连续给药6周后,检测大鼠血清总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量以及肝中TC、甘油三酯（TG）的含量。用光镜检查胸主动脉的病理变化。结果蛇床子素能显著降低动脉粥样硬化大鼠血清中TC和LDL-C含量以及LDL-C/HDL-C比值（均P〈0.01）,蛇床子素也能同时显著降低血清中TNF-α的含量（P〈0.01）,蛇床子素40 mg/kg能显著降低肝组织中TC的含量（P〈0.01）。光镜检测结果显示蛇床子素能改善大鼠早期动脉粥样硬化的形态学改变。结论蛇床子素可通过它的调脂和抗炎作用抑制大鼠动脉粥样硬化的形成。     

蛇床子素对大鼠的降血脂作用

目的观察蛇床子素对大鼠血脂水平的影响。方法采用去卵巢大鼠和高脂血症模型大鼠，用比色法分别测定连续给予蛇床子素5～20mg／kg12周和20d后的血脂水平。结果在去卵巢大鼠模型上，蛇床子素10mg／kg和20mg／kg，可使血清TG和LDL-C／HDLC比值明显降低，但对血清LDL-C仅有一定的降低作用。在高脂血症大鼠模型上，蛇床子素5～20ing／kg可明显抑制高脂引发的血清TC和TG的升高，而且对血清LDL-C和LDL-C／HDL-C比值的降低作用具有剂量依赖趋势。结论蛇床子素具有明显的降血脂作用，尤其对高脂血症大鼠的作用更为明显。     

蛇床子总香豆素对激素致大鼠骨质疏松的骨密度影响

用骨密度测定来探讨蛇床子总香豆素（TCCM）对激素所致雄性大鼠骨代谢变化的影响。结果表明：与对照组比较，激素组大鼠股骨近段、中段和远段的骨密度（BMD）分别减少了12．4％（P＜0.05）、13．9％（P＜0.05）和11．9％（P＜0.05）；与激素组相比，预防组大鼠股骨近段、中段和远段的BMD分别增加了25．9％（P＜0．01）、34．4％（P＜0．01）和30．6％（P＜0．01）。提示，TCCM能预防激素所致的骨质丢失。     

蛇床子素对大鼠实验性静脉血栓形成的影响

目的研究蛇床子素对大鼠实验性静脉血栓形成的影响。方法利用大鼠静脉血栓形成模型测定给予蛇床子素10 mg.kg-1,20 mg.kg-1,40 mg.kg-1后血栓湿重和干重。结果蛇床子素10 mg.kg-1组对大鼠静脉血栓形成影响不大,但蛇床子素20 mg.kg-1,40 mg.kg-1组可以明显抑制大鼠静脉血栓形成,减轻血栓湿重和干重,对血栓湿重抑制率分别为64.8%和84.1%,对血栓干重抑制率分别为55.9%和83.8%。结论蛇床子素可明显抑制大鼠实验性静脉血栓形成。     

HPLC法测定大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度

目的 建立一种同时测定大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度的方法.方法 采用迪马Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为:甲醇∶水=70∶30(v/v),流速为1.0 mL·min-1,紫外检测波长为320 nm,米非司酮为内标.取大鼠血样 90 μL 进行血浆样品的处理,测定大鼠血浆中蛇床子素和欧前胡素的色谱行为、标准曲线、提取回收率、精密度和准确度、稳定性等.结果 蛇床子素、欧前胡素在大鼠血浆中质量浓度测定方法 的线性范围分别为10.94～700.00 μg·L-1 和15.63～1 000.00 μg·L-1,线性关系均良好(r=0.999 8、0.999 9,均P＜0.05).大鼠血浆蛇床子素、欧前胡素最低可定量的质量浓度分别为10.94 、15.63 μg·L-1 (以s/n＞4计).大鼠血浆蛇床子素、欧前胡素低、中、高质量浓度的提取回收率分别为98.96%、95.30%、94.88% 和98.23%、98.94%、97.99%,大鼠血浆蛇床子素和欧前胡素低、中、高质量浓度的RSD均＜15%.结论 建立HPLC法具有检测简便、灵敏度高等优点,可快速、可靠地检测大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度.     

蛇床子素对新生大鼠颅盖骨成骨细胞的作用

目的：研究蛇床子素（ｏｓｔｈｌｅ）在体外对新生大鼠颅盖骨成骨细胞增殖及成骨作用的影响。方法：酶消化法分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞;改良Ｇｏｍｏｒｉ钙钴法染色鉴定,＾３Ｈ－胸腺嘧啶和＾３Ｈ－脯氨酸掺入法分别测定细胞增殖和胶原合成;磷酸苯二钠法测定细胞内骨碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性;并以抗骨质疏松症药物依普黄酮（ｉｐｒｉｆｌａｖｏｎｅ,ＩＰ）作为阳性对照药物。结果：蛇床子素对新生大鼠颅盖骨成骨细胞的增殖、ＡＬＰ的活性和胶原合成都有促进作用。其对成骨细胞的增殖作用比ＩＰ强,但对胶原合成的促进作用弱于ＩＰ。结论：蛇床子素通过增加成骨细胞数量、促进细胞胶原蛋白及ＡＬＰ的合成而促进成骨作用。     

蛇床子素对肾性高血压大鼠心肌肥厚的治疗作用

目的观察蛇床子素对肾性高血压诱导大鼠心肌肥厚的治疗作用并探讨其可能的机制。方法采用两肾一夹建立肾性高血压大鼠心肌肥厚模型,用蛇床子素（10mg／kg和20mg／kg）治疗4周后检测大鼠血压、心质量指数及心肌超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）含量、血糖及血和心肌游离脂肪酸（FFA）含量。用光镜检查心肌组织的病理学变化。结果蛇床子素可降低心肌肥厚大鼠的血压、心质量指数、心肌MDA含量和血及心肌FFA含量,尤其是大剂量组的作用更为明显（P〈0．05或P〈0．01）,同时蛇床子素也能明显升高心肌SOD和GSH-P含量及血糖水平（P〈0．05或P〈0．01）。光镜检查结果显示蛇床子素组大鼠心肌肥厚程度减轻。结论蛇床子素能治疗肾陛高血压诱导的大鼠心肌肥厚,其主要机制可能与抑制氧化应激和改善心肌能量代谢有关。     

梯形面积法研究蛇床子素在大鼠体内组织分布

目的：研究蛇床子素在大鼠体内的组织分布特征,为临床合理用药提供合理依据。方法：大鼠腹腔注射30,120 mg·kg^-1蛇床子素后,采用RP-HPLC法测定大鼠组织中不同时间点的药物浓度,分析蛇床子素在大鼠体内的组织分布特点。结果：大鼠ip蛇床子素后,组织分布较快,给药5 min均可检测到蛇床子素,10 min内心、肝、肺、肾均可达到峰值。当给药浓度增加4倍时,蛇床子素在各组织中的达峰时间没有显著性变化,只是相应时间点的药物浓度均略有升高,药物消除的时间也相应延长。结论：蛇床子素在大鼠组织中分布快广泛,消除也快,且可能穿越血脑屏障和血睾屏障。     

蛇床子素对大鼠原代软骨细胞增殖的抑制作用

目的：观察蛇床子素对大鼠软骨细胞增殖的影响。方法：分离出生24h内大鼠的软骨细胞,进行原代培养。细胞扩增至第2代时观察1周内细胞增殖情况,并用细胞免疫荧光法鉴定Ⅱ型前胶原基因（type Ⅱ procollagen gene,Col2a1）的表达。将第2代软骨细胞分为对照组和不同浓度蛇床子素（6．25、12．5、25和50μmol／L）组。药物作用24和48h后,观察细胞增殖情况,蛋白质印迹法和聚合酶链反应法检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）和细胞周期素D1（cyclinD1）的表达。结果：第2代原代软骨细胞活力正常,Col2al表达明显。蛇床子素可以抑制软骨细胞的增殖,并随浓度的增加,抑制作用愈明显。蛋白质印迹法和聚合酶链反应法检测发现,随着蛇床子素浓度的增加,软骨细胞中PCNA和cyclinD1的表达下降。结论：蛇床子素可能通过抑制PCNA和cyclinD1的表达发挥抑制软骨细胞增殖的作用。     

甘草酸配伍蛇床子素对大鼠酒精性脂肪肝的治疗作用

目的研究甘草酸配伍蛇床子素对大鼠酒精性脂肪肝的治疗影响,初步探讨组分配伍的作用机制。方法建立大鼠酒精性脂肪肝模型后,随机分为正常组、模型组、阳性药(力平之)组、蛇床子素组(Ost)、甘草酸组(GL)、蛇床子素与甘草酸配伍高、中、低剂量组。治疗组从实验第5周起,分别给予药物灌胃:阳性药组ig力平之20mg/(kg·d),蛇床子素组10mg/(kg·d)ig,甘草酸组22.5mg/(kg·d)ig,配伍低剂量组为ig蛇床子素5mg/(kg·d)和甘草酸11.25mg/(kg·d),配伍中剂量组为ig蛇床子素10mg/(kg·d)和甘草酸22.5mg/(kg·d),配伍高剂量组为ig蛇床子素20mg/(kg·d)和甘草酸45mg/(kg·d),正常组和模型组灌胃等体积的生理盐水连续灌胃6周。末次给药后,观察大鼠一般情况;光镜观察肝脏的病理变化,同时分别测定大鼠血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、谷丙转氨酶(ALT)水平以及肝组织匀浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;Western blot法检测大鼠肝组织PPARα蛋白的表达情况。结果各治疗组与模型组比较,肝组织病理变化有不同程度的改善;甘草酸配伍蛇床子素中剂量和高剂量组能显著降低血清ALT、AST和AKP水平(P0.05);大鼠肝组织药理活性测试结果显示配伍中剂量和高剂量组能显著降低肝组织MDA含量,提高SOD的活性,差异具有统计学意义(P0.01),配伍中剂量组能显著降低大鼠肝脏TG和TC含量(P0.05);Western blot结果表明,各治疗组PPARα蛋白水平与模型组相比有不同程度上调,而配伍中剂量和高剂量组肝组织中PPARα蛋白水平表达量显著上调,具有统计学意义(P0.01)。结论甘草酸与蛇床子素合理的组分配伍能协同治疗酒精性脂肪肝,可能通过配伍改善肝脏功能、调节脂肪代谢、抗脂质氧化作用和增加PPARα蛋白的表达,促使损伤的肝组织得以修复。     

蛇床子素对丙泊酚诱导麻醉大鼠认知功能的影响与机制

目的 研究观察蛇床子素(osthole,OST)对丙泊酚诱导麻醉大鼠认知功能的影响,并探讨其作用机制。方法 将雄性SD大鼠分为空白组、模型组、治疗组。大鼠先行腹腔注射丙泊酚(100mg/kg)一次造模,治疗组自麻醉后灌胃给药OST(10mg/kg),每天1次,连续给药14d。Morris水迷宫实验观察大鼠的空间学习及记忆能力,Western blot检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α的蛋白表达。结果 Morris水迷宫结果显示,与空白组相比,模型组大鼠的记忆能力下降,逃避潜伏期明显延长;与模型组相比,治疗组大鼠的记忆能力得到改善,逃避潜伏期明显缩短。Western blot结果分析发现,与空白组大鼠相比,模型组大鼠海马组织中IL-1β和TNF-α蛋白表达均增加,给予OST灌胃治疗后,治疗组大鼠海马组织中上述蛋白表达均降低。结论 OST可改善丙泊酚诱导麻醉大鼠引起的认知功能障碍,其作用机制可能与降低大鼠海马组织中炎症因子IL-1β和TNF-α的表达有关。     

低分子RNA抑制ConA与J6－1细胞膜受体结合的研究

提取Ｂｒｕｋｉｔｔ淋巴瘤（Ｎａｍａｌｖａ）细胞低分子ＲＮＡ与Ｊ６－１细胞悬液培养７２小时，掺入Ｆｒｒｃ标记的ＣｏｎＡ，于荧光显微镜下观察膜荧光细胞总数和帽状细胞数。结果显示实验组帽状细胞数明显减少并呈剂量依赖关系。提示低分子ＲＮＡ对白血病细胞增殖的抑制是通过作用于细胞膜而产生效应。     

HPLC法测定羌活中阿魏酸、羌活醇、苯乙基阿魏酸酯和异欧前胡素

羌活为伞形科植物羌活Notopterygium incisumTing ex H.I.Chang、宽叶羌活N.forbesii Boiss.或川羌活N.franchetii Boiss.的根及根茎,有散表寒、祛风湿、利关节等功效,用于治疗感冒风寒、头痛无汗,风寒湿痹、项强筋急、骨节酸痛、风水浮肿、痈疽疮毒等[1]。本属植物的主要活性成分为香豆素类化合物。羌活为《中国药典》2005年版一部收载品种,但对羌活药材未作定量测定要求,其质量仅通过测定挥发油的量来控制,规定总挥发油不得少于0.028mL/g[2]。为了有效地控制羌活药材的质量,本实验选择羌活药用部分中量较高的4种有效成分(阿魏酸、羌活…     

低分子RNA抑制ConA与J6－1细胞膜受体结合的研究

提取Ｂｒｕｋｉｔｔ淋巴瘤（Ｎａｍａｌｖａ）细胞低分子ＲＮＡ与Ｊ６－１细胞悬液培养７２小时，掺入Ｆｒｒｃ标记的ＣｏｎＡ，于荧光显微镜下观察膜荧光细胞总数和帽状细胞数。结果显示实验组帽状细胞数明显减少并呈剂量依赖关系。提示低分子ＲＮＡ对白血病细胞增殖的抑制是通过作用于细胞膜而产生效应。     

蛇床子素在老年性痴呆模型大鼠血浆的药代动力学研究

目的研究蛇床子素在老年性痴呆模型大鼠血浆的人体药代动力学参数。方法对D-半乳糖致亚急性衰老合并鹅膏蕈氨酸损毁Meynert核的AD大鼠模型,以40mg/kg的剂量灌胃蛇床子素,采用高效液相色谱法测定大鼠的蛇床子素血药浓度。结果蛇床子素的体内动态过程呈二房室开放模型,Cmax为(2.742±0.83)μg/ml,tmax(0.56±0.18)h,MRT(6.03±3.2)h,t(5.26±2.6)h,AUC0-24(10.62±4.65)μg·h/ml,AUC00-∞(11.22±4.15)μg·h/ml。结论此方法简便、准确、重现性好,可用于蛇床子素血药浓度分析及药代动力学研究。12     

胰淀素治疗糖皮质激素性骨质疏松大鼠的实验研究

目的：探讨胰淀素对糖皮质激素性骨质疏松的治疗作用。方法：采用3月龄Wistar大鼠地塞米松肌注法建立糖皮质激素性骨质疏松症动物模型，随机分为4组：正常对照组、地塞米松组、胰淀素治疗组、维生素D组。12h后行骨密度、骨生物力学及血、尿生化检查。结果：①骨密度：与地塞米松组相比，胰淀素治疗组腰椎骨密度增加35％，股骨骨密度增加17％，其效果优于维生素D。②骨力学：胰淀素能显著提高类固醇大鼠股骨的生物力学性能。③生化指标：胰淀素治疗组骨钙素明显升高，同时尿羟脯氨酸/肌酐、尿钙/肌酐、尿磷/肌酐均普遍降低。结论：胰淀素可以有效地阻止糖皮质激素性骨质疏松大鼠的骨量丢失，不仅可以促进骨形成，同时还具有抑制骨吸收的作用。     

蛇床子素抗炎作用的实验研究

采用多种实验性炎症模型,观察了Ｏｓｔ的抗炎作用。Ｏｓｔ对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀,醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增高,角叉菜胶诱发的大鼠及切除双侧肾上腺的大鼠足抓肿胀均有明显的抑制作用,但不影响大鼠足爪类症组织内ＰＧＥ含量。Ｏｓｔ对琼脂引起的小鼠肉芽肿增生亦有明显的抑制作用。结果表明Ｏｓｔ对急性和慢性炎症模型均有抗炎作用。其抗炎机制并非通过垂体－肾上腺皮质系统,亦与ＰＧＥ的合成无关。     

蛇床子素诱导急性脊髓损伤家兔阴茎勃起的实验研究

目的探讨蛇床子素诱导家兔阴茎勃起的作用及其机制。方法检测蛇床子素对磷酸二酯酶5(PDE5)的抑制活性;检测蛇床子素对离体阴茎海绵体组织产生cGMP的诱导活性;建立急性脊髓损伤家兔模型,蛇床子素静脉注射给药(3mg/kg或10mg/kg),通过测量暴露的阴茎粘膜长度评价蛇床子素体内诱导勃起的功能。结果蛇床子素对PDE5直接抑制活性IC50为88.9nmol/L;对离体阴茎海绵体cGMP诱导活性ED50为58.2μmol/L;在一氧化氮供体硝普钠存在条件下,静脉注射蛇床子素对ASCI家兔模型具有剂量依赖性促进阴茎勃起作用。结论蛇床子素对勃起功能障碍具有治疗价值。     

丹参提取物对大鼠溃疡性结肠炎形态学变化的实验研究

目的探讨丹参提取物丹参素、丹参酮Ⅱ—A对溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型形态学变化的影响。方法用5％乙酸经结肠灌注制备UC大鼠模型，分成正常组、模型组、丹参素组、丹参酮Ⅱ—A组及二者混合组、SASP组各10只。正常组、模型组每天灌服生理盐水10ml／kg，用药组分别每天灌服丹参素．和丹参酮Ⅱ—A及其混合液和SASP各1次，每次2ml。3周后处死。测定肠溃疡发生数、充血指数、肠重量、肠重指数、组织形态学评分。结果中、西药物组形态学变化均与模型组有明显差异，而与正常组无明显差异。结论丹参提取物可以显著治疗溃疡性结肠炎，有治疗UC的前景。