农药叶枯灵在大鼠原位灌流肝中的代谢研究

采用反相HPLC、TLC、UV、IR和MS对农药叶枯灵经大鼠原位灌流肝代谢后所形成的代谢产物进行分离和鉴定。结果表明,叶枯灵在大鼠肝脏中进行了广泛的代谢,包括S-氧化作用、水解作用、丙酮酸缩合作用和乙酰化作用,共分离鉴定出5种代谢产物。     

叶枯灵在大鼠尿内的代谢产物分析

大鼠ig叶枯灵后,用HPLC和TLC分离纯化尿提取液中的叶枯灵及其代谢产物,得到六个组分,经MS和UV初步鉴定为叶枯灵,苯甲酸,马尿酸和三个新化合物:肼叉-1.3-二噻茂烷,乙酰肼叉-1.3-二噻茂烷和丙酮酸缩肼叉-1.3-二噻茂烷,通过对代谢物的化学合成,进一步确证了它们的化学结构。     

含硫杀菌药叶枯灵代谢产物的合成

This paper reports the synthesis of the metabolites．1,3-dfthiolan-2-ylidenehydrazine(I)，acetic acid 1,3-dithiolan-2-ylidenehydrazide(II)，pyruvic acid 1,3-dithiolan-2-ylidenehydrazone(III)and benzoic acid l，3-dithiolan-2-ylidenehydrazide-S-oxide(IV)of yekuling，a new sulfurorganic fungicide(benzoic acid 1，3-dithiolan-2-ylidenehydrazide)．The structures of all the compounds synthesized were characterized by elemental analysis，IR，UV，MS and ¹HNMR spectra．     

兔血中叶枯灵的代谢产物的分离和鉴定

本文用 RP-HPLC 法从染毒兔血中分离出叶枯灵的两个代谢产物。用标准品核对色谱行为,再经质谱鉴定,证实保留时间 tr=8.07±0.15min,为苯甲酸 S-氧-N-1,3-二噻茂烷酰肼(Benzoicacid s-oxo-N-1,3-dithiolan-2-ylidene hydrazide)。保留时间 tr=16.69±0.10min,为苯甲酸(benzoic acid)。     

五灵胶囊有效成分对脂多糖诱导大鼠枯否细胞核因子的影响

目的观察五灵胶囊中有效成分对脂多糖（LPS）诱导大鼠枯否细胞核因子（NF-κB）的调节作用。方法分离大鼠肝细胞和枯否细胞,60μg·L~（-1）LPS诱导枯否细胞分泌促炎因子及NO。采用^125Ⅰ放射免疫测定法测定TNFα、IL-6、IL-8水平,比色法测定NO生成量,Western blot法检测ERK、p-ERK、NF-κB P50、NF-κB P65、p-NF-κB P65、IκB、p-IκB、IKK、P38、p-P38、CD14、Stat3蛋白的变化。结果五灵胶囊中的有效成分可显著抑制LPS诱导枯否细胞分泌TNF-α、IL-6、IL-8、NO的生成量。结论五灵胶囊有效成分能抑制枯否细胞释放促炎因子,是其治疗慢性肝炎的作用机制之一。     

大鼠枯否细胞活化与TNT肝毒性的关系

目的　探讨大鼠肝脏Kupffer细胞功能活化与TNT肝毒性的关系及可能机制。方法　运用Kupffer细胞功能活化的大鼠模型 ,观察TNT和VA TNT联合处理大鼠血清中ALT和AST及肝脏和血清中SOD、CAT和GSH Px活性的变化。结果　TNT组血清中ALT和AST活性明显低于对照组 ,而VA TNT组则明显高于对照组和相应TNT组。TNT组肝脏和血清中SOD、CAT和GSH Px活性显著和非常显著高于对照组 (P <0 0 5 ,P<0 0 1) ,VA TNT组某些酶活性显著和非常显著高于对照组和相应的TNT组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。TNT可加强对Kupffer细胞功能活化大鼠的肝毒性。结论　大鼠肝脏Kupffer细胞经VA活化后 ,可加强TNT肝毒性 ,推测可能与活性氧生成有关。     

(±)-瑞枯灵的合成

4-羟基-3-甲氧基苯乙胺和3-羟基-4-甲氧基苯乙酸经缩合、O-苄基保护得到2-(3-苄氧基-4-甲氧基苯基)-N-[2-(4-苄氧基-3-甲氧基苯基)乙基]乙酰胺,在POCl3作用下进行Bischler-Napieralski环合反应后,不经分离纯化直接与氯甲酸甲酯进行N-酰化得到7-苄氧基-1-(3-苄氧基-4-甲氧基苯亚甲基)-6-甲氧基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸甲酯,再经Pd-C氢化脱苄基和用四氢铝锂还原得到(±)-瑞枯灵,总收率23%.     

剂量对美托洛尔离体大鼠肝灌流消除的影响

用０．２，０．５，１．０和２．０ｍｇ美托洛尔进行离体大鼠肝灌流时，消除呈一级动力学。Ｔ１／２分别为８．３，８．８，９．６和１０．６ｍｉｎ。用４．０，８．０和１２．０ｍｇ美托洛尔灌流时，消除呈零级动力学。Ｖｍ分别为０．９８，１．０５和０．９４μｇ·ｍｉｎ＾－１·ｍｌ＾－１。Ｋｍ分别为１５．５，１６．９和１４．６μｇ·ｍｌ＾－１。提示低剂量美托洛尔肝消除无剂量依赖性，较高剂量呈剂量依赖性。     

乙酰紫堇灵对小鼠对乙酰氨基酚肝中毒的保护作用

乙酰紫堇灵（Ａｃｅ）是从中药紫堇中提取的生物碱，本文研究了Ａｃｅ对小鼠对乙酰氨基酚（ＡＰＡＰ）肝损伤的影响。Ａｃｅ显著降低ＡＰＡＰ引起的小鼠血清谷丙转氨酶升高，病理观察肝细胞损伤明显减轻。Ａｃｅ显著防止小鼠ｉｐＡＰＡＰ引起的肝脏谷胱甘肽耗竭，降低小鼠血中ＡＰＡＰ浓度。Ａｃｅ对肝脏细胞色素Ｐ４５０总量及谷胱甘肽巯基转移酶（ＧＳＨ－Ｓ－Ｔ）有显著诱导作用，而对代谢ＡＰＡＰ的Ｐ４５０同工酶ⅡＥ１有抑制作用。以上结果表明Ａｃｅ对小鼠ＡＰＡＰ中毒的保护作用与其选择性地调节Ｐ４５０同工酶，诱导ＧＳＨ－Ｓ－Ｔ，从而加快ＡＰＡＰ在体内的解毒代谢密切相关。     

大鼠离体肝脏灌流系统的建立

目的：建立大鼠离体肝动脉／门静脉灌流系统的实验方法。方法：雌性Wistar大鼠麻醉状态下,肝动脉、门静脉和肝静脉插管;经肝动脉冲净残留血液,灌流状态下游离肝脏;定量蠕动泵调节肝动脉或门静脉的Krebs—Henseleit平衡液（或加等渗葡聚糖）的灌流流速,泰盟BL-420S生物机能实验系统监测肝动脉或门静脉的压力变化,采用Prism-4非线型可变斜率回归获得“有或无胶体渗透压”KH液灌流的流速-压力曲线及方程式,计算半效流速及其95％的可信限。结果：无胶体渗透压灌流状态下的肝脏系数无差别,肝动脉的半效流速为2217（95％CI1209～4068）μl·min^－1,对数流速-压力直线方程为Y=142．4x＋706．9;门静脉半效流速为3791（95％CI3549～4049）μl·min^－1,对数流速-压力直线方程为Y：479．6X＋5034。等效胶体渗透压灌流状态下的肝脏系数无差别,肝动脉半效流速为3754（95％CI3175～4440）μl·min^－1,对数流速-压力直线方程为Y=133．5X-719．0;门静脉半效流速为6018（95％CI5565—6508）μl·min^－1,对数流速-压力直线回归方程为Y：538．3X4-4704。半效流速接近正常大鼠生理平均值,各半效流速95％可信限涵盖大鼠正常生理状态的变化范围。有或无胶体渗透压灌流状态之间总体无差别。结论：在恒流测压模式下,等渗灌流大鼠离体肝动脉和门静脉灌流系统的视窗时程长、机能变化稳定、操作流程简便,为认识肝动脉和门静脉离体舒缩机制奠定了基础。     

软肝灵对肝纤维化小鼠肝组织病理学及抗脂质过氧化作用的影响

目的探讨软肝灵对四氯化碳(CCl4)所致肝纤维化小鼠的影响。方法采用CCl4复制肝纤维化小鼠模型,60只昆明种小鼠分为模型组、对照组、软肝灵高、中、低剂量组、秋水仙碱组,每组10只。给药6周后检测小鼠血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)及羟脯氨酸(Hyp),并观察小鼠肝组织病理改变。结果模型组造模6周时ALT、AST、MDA、Hyp水平较对照组升高,SOD、TP及ALB的水平较对照组降低;病理检查提示模型组小鼠肝细胞变性、坏死严重,肝组织损害明显。软肝灵具有剂量依赖性地降低CCl4致小鼠肝损伤血清ALT、AST、MDA、Hyp水平升高(P<0.01)的功能,并能显著升高血清中SOD、TP及ALB的水平而达到延缓肝纤维化进程的作用。同时病理检查也提示,软肝灵中、高剂量组可明显减轻CCl4所致的小鼠肝细胞变性、坏死及肝组织损害程度。结论软肝灵具有延缓CCl4所致肝纤维化进程的作用。     

小儿增食灵颗粒对幼龄大鼠离体小肠平滑肌的影响

目的：观察小儿增食灵颗粒对离体小肠平滑肌收缩作用的影响。方法：采用Medlab生物信号采集处理系统分别描记幼龄大鼠离体小肠平滑肌给药前后的收缩曲线，观察其对离体小肠平滑肌的收缩效应。结果：小儿增食灵颗粒能明显增大离体小肠的收缩幅度，但对收缩频率影响不明显。结论：小儿增食灵颗粒能增强幼龄大鼠离体小肠平滑肌的收缩功能。     

离体肝灌流技术在药物和毒理学研究中的应用

肝脏在外源性化学物药物、毒物的代谢和处置中起着十分重要的作用,绝大多数药物和毒物进入体内经肝脏进行代谢后,转化为大极性的化合物排出体外或者被激活而导致毒性增加.在药物毒物代谢和毒理学研究中,原代肝细胞培养、肝组织切片、肝灌流、肝微粒体制备物温孵和基因工程细胞模型等体外实验被广泛应用[1-2].     

肼对离体灌流大鼠肝损伤的影响

<正> 肼是肼类化合物中毒性最大,而且在过去的体内研究中发现对肝脏的损伤也是最强的化合物。某些作者报道动物肼中毒后血浆ALT活性及BSP潴留率均有明显升高,而有些作者如Killane及Sass等则报道肼在体内及体外都明显地抑制ALT活性。本文采用大鼠离体肝脏灌流作为实验模型,用不同剂量肼灌流大鼠离体肝脏,观察了不同时间的乳酸、丙酮酸、ALT、LDH、BSP、K~+、Na~+及总蛋白的变化。结果表明,100ml灌流液含1.5     

扩管药及还原型谷胱甘肽对化学损伤离体大鼠灌流肝的作用

采用四氯化碳损伤离体大鼠灌流肝为模型，观察山莨菪碱、去甲肾上腺素及还原型谷胱甘肽对灌流量、ALT及病理形态学的影响。结果发现试验药品均使灌流量增加，ALT同时下降，形态学检查明显优于损伤组，揭示该模型可作为保肝药体外筛选模型。     

小鼠离体灌流肝生活力的估价

以不含血红蛋白的灌液对小鼠灌流肝的生活力作了估价。供氧灌流150min内LDH活力和蛋白质浓度均稳定,但在缺氧灌流情况下,酶活力和蛋白质浓度分别在40和60min后开始持续升高。葡萄糖水平在供氧与缺氧条件下均由高渐渐降低,但前者高于后者。钾、钠离子和pH在二种灌流情况下均无明显变化。电镜和病理所见,缺氧时主要出现胞浆内普遍的大空泡,肝组织有坏死等,供氧灌流无以上变化。以乙醇作为灌流药物,与LDH活力变化有极好的剂量效应关系。小鼠与大鼠有类同的灌流肝实验效果,供氧150min灌流肝脏能保持正常活力。     

大鼠肝贮脂细胞、枯否细胞的同时分离和培养

贮脂细胞（Ｉｔｏ细胞）又叫肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｔｅｃｅｌｌｓ，ＨＳＣ）,位于肝Ｄｉｓｓｅ间隙内,有合成细胞外基质(ＥＣＭ)的功能［１］。目前研究表明,枯否细胞介导的贮脂细胞激活是肝纤维化形成的主要机制,枯否细胞所产生的介质可能是肝纤维化形成的启动因素［２～４］。因此,建立同时分离贮脂细胞和枯否细胞的方法,为贮脂细胞和枯否细胞的共同培养,以及研究肝纤维化的机制和药物作用奠定基础。１材料１．１动物ＳＤ大鼠,雌雄兼用,体重３５０～４５０ｇ,安徽医科大学提供,皖实动准字第０１号。１．２试剂Ｎｙｃ…     

黄磷对大鼠肝微粒体Ca^2＋泵的影响

用离体实验和整体动物实验方法,发现不同浓度的黄磷对大鼠肝微粒体Ca~(2+)-ATP酶和~(45)Ca摄取有不同程度的抑制作用,并有随剂量增大而抑制作用加重的趋势,提示微粒体Ca~(2+)泵的损害在黄磷中毒性肝损害中具有重要作用。     

灯盏花素对离体大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的：研究灯盏花素对离体大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响,探讨灯盏花素在抗肝纤维化方面的作用。方法：用袁桃霞等的肝星状细胞分离方法获得原代培养的肝星状细胞,采用MTT比色法检测肝星状细胞的增殖,TUNEL法检测DNA断裂、凋亡情况。结果：①灯盏花素对肝星状细胞（HSC）增殖有一定的抑制作用,且与其浓度和作用时间有关;②灯盏花素处理组HSC凋亡率与对照组相比差异无显著性。结论：灯盏花素对大鼠肝星状细胞增殖有抑制作用。     

离体大鼠肝灌流美托洛尔消除的流量依赖性

用离体大鼠肝灌流方法，研究了稳态时美托洛尔的代谢模型，灌流量分别为１０，２０和３０ｍｌ．ｍｉｎ＾－１时；流入肝脏的浓度分别为７．６，５．０和３．４μｇ．ｍｌ＾－１，流出肝脏的浓度分别为３．４，３．２和３．０μｇ．ｍｌ＾－１；提示流入和流出浓度呈流量依赖性，与“平行管”模型相符，而与“充分搅拌”模型不符。