醋酸铅对原代培养大鼠皮层神经元的毒性效应

目的探讨醋酸铅对体外培养大鼠皮层神经元的毒性效应。方法用不同浓度的醋酸铅(50、100和200μg/ml)染毒后,原代培养乳大鼠皮层神经元,通过中性红染色和PI-Hoechst 33342双染色法观察醋酸铅作用6、12、24和48h对细胞存活的影响;结果PI-Hoechst 33342双染色结果表明,各组醋酸铅染毒12h后,部分细胞出现核固缩,随着醋酸铅浓度的增加和培养时间的延长,出现核固缩细胞增多,呈红色荧光细胞比例增加,凋亡细胞增加。对照组细胞凋亡比例明显低与中浓度和高浓度醋酸铅组P0.05)。中性红染色结果表明,不同浓度醋酸铅作用皮层神经元不同时间后各染铅组细胞活性随时间的延长而降低,但除高醋酸铅染毒组在24和48h较6h差异有统计学意义(P0.05)外,其余差异均无统计学意义(P0.05)。各染铅组细胞活性随染铅剂量的增加而降低,尤其是高铅组与对照组及低铅组相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论低、中、高浓度醋酸铅(50、100、200μg/ml)作用皮层神经元12h后细胞存活都明显低于正常对照组,并呈剂量和时间依赖关系。     

不同浓度锂对大鼠原代培养大脑皮层神经元的影响

目的　通过研究不同浓度锂对原代培养的皮层神经元生长及存活的影响 ,进一步探讨锂的神经元保护作用以及锂对脑发育的影响。方法　建立新生大鼠皮层神经元原代培养技术 ,通过加载 0 .6 2 5、1.2 5 0、2 .5 0 0、5 .0 0 0和 10 .0 0 0mmol L浓度的氯化锂 ,镜下观察神经元的生长和存活情况 ,测量神经元最长突起长度 ,通过噻唑蓝 (MTT)还原法进一步观察细胞的生长活力。结果　与对照组相比 ,氯化锂处理组的神经元胞体透亮 ,出芽快 ,神经元突起明显增长 ;且生长活力强于对照组 ,以5 .0 0 0mmol L浓度 [(5 3.80± 5 .84 ) μm]的锂作用最强 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　锂可促进原代培养皮层神经元的生长和存活。     

不同浓度牛磺酸对原代培养皮层神经元的影响

目的研究不同浓度牛磺酸对原代培养的皮层神经元生长及存活的影响。方法建立新生大鼠皮层神经元原代培养技术，加载不同浓度牛磺酸对培养皮层神经元进行干预，观察神经细胞的生长和存活情况。结果适当浓度的牛磺酸能够促进培养的皮层神经元存活，突起生长，促进神经元间网络的形成。结论牛磺酸能够促进原代培养皮层神经元生长。     

牛磺酸拮抗铅对原代培养皮层神经元的影响

目的:研究牛磺酸拮抗铅对原代培养的皮层神经元生长及存活的影响。方法:通过建立新生大鼠皮层神经元原代培养,用不同浓度醋酸铅染毒和给予牛磺酸干预,观察神经细胞的生长和存活情况。结果:终浓度为10-8mol/L的醋酸铅即可抑制神经元突起生长,导致细胞生长活力下降,终浓度为1.6×10-3mol/L的牛磺酸能够抑制这种损害作用,促进神经元生长。结论:牛磺酸能够拮抗铅抑制神经元生长和存活的毒性。     

低剂量铅对原代培养的海马神经元的影响

目的 研究低剂量铅对原代培养的海马神经元生长及存活的影响。方法 建立新生大鼠海马神经元原代无血清培养技术，通过不同浓度PbCl2染毒后，于不同时间点观察神经细胞的生长和存活情况。结果 极低浓度的铅(10^-7mol／L)即可引起神经元出芽延迟，突起长度缩短，细胞存活率下降，随剂量增加和时间延长，毒效应越严重。结论 低剂量铅具有抑制神经元生长和存活的毒性。     

铅硒联合作用对原代培养海马神经元影响

目的观察铅、硒对原代培养的海马神经元生长及存活的影响，研究硒对铅的神经细胞生长抑制的拮抗作用。方法建立新生Wistar大鼠海马神经元原代无血清培养技术，通过PbCl2，Na2SeO3单独及联合作用，观察神经细胞的生长和存活情况。结果10^-5mol／L铅明显抑制了原代培养的海马神经元突起生长，引起神经元存活率下降；单独硒（2×10^-6mol／L）有明显促进海马神经元突起生长的作用．尤其在神经元突起生长早期；但对海马神经元存活率的影响不明显。铅和硒共同孵育时，培养早期硒能拮抗铅对神经元突起延伸的抑制．但随着培养时间延长，这种拮抗作用消失；从神经元存活率来看，在实验剂量下，未见硒能拮抗铅对神经元存活的抑制作用。结论铅具有抑制神经元生长和存活的毒性。本实验剂量下的硒在细胞培养早期有促进神经元突起生长和拈抗铅对神经元生长和存活的抑制作用。     

甲醛对原代培养大鼠皮质神经元能量代谢的影响

目的　探讨甲醛对中枢神经系统毒作用的机制。方法　本文对新生大鼠原代培养皮质神经元进行了剂量分别为1,2 ,4 ,8mg L培养基的甲醛暴露实验,以在培养基中添加甲醛的方式染毒,每小时染毒一次,4小时后,用细胞化学方法,以细胞色素氧化酶(cytochromeoxidase ,COX)活力为指标,观察甲醛对神经元能量代谢的影响。结果　与对照组相比,各实验组神经元COX活力均明显降低(P <0. 0 1) ,并呈剂量-效应关系(R值为- 0 .92 ,P <0 . 0 1)。结论　本文结果提示,过量甲醛暴露可降低神经元COX活力,导致能量代谢障碍,进而影响其正常的生理功能。     

吡虫啉对原代培养的大鼠海马神经元的影响

吡虫啉是一种新型的高效硝基亚甲基类内吸杀虫剂 ,作用于昆虫神经系统的烟碱型乙酰胆碱受体 (ｎＡｃｈＲ) [1 ] 。吡虫啉对实验动物的急、慢性毒性研究已有报道[2 ] ,但其对神经系统的影响国内尚未见报道。为探讨吡虫啉对中枢神经系统的作用 ,我们研究了吡虫啉对原代培养的大鼠海马神经元的影响。一、材料与方法1 材料 :吡虫啉 (99% ,国家农药质量监督检验中心 ) ,二甲亚砜 (ＤＭＳＯ ,ＡＲ ,天津化学试剂一厂 ) ,ＤＭＥＭ培养液及新生牛血清 (济南爱博公司 ) ,乳酸脱氢酶 (ＬＤＨ)、总蛋白测定试剂盒 (南京建成生物工程研究所 )。其他试剂…     

铅对原代培养大鼠神经元能量代谢及谷氨酸受体2蛋白和mRNA表达的影响

目的　探讨铅影响神经元细胞内钙稳态的机理。方法　对新生大鼠原代培养海马神经元进行了Pb2 + 剂量为 5 0 0 μg/L升培养基的铅暴露实验 ,观察铅对神经元能量代谢和谷氨酸受体 2 (GluR2 )蛋白和mRNA表达的影响。结果　细胞化学、免疫组织化学和原位杂交结果表明 ,染毒 3天后 ,与对照相比 ,实验组神经元细胞色素氧化酶 (CytO)活力、GluR2蛋白和mRNA的表达均明显降低 (P <0 0 1)。结论　铅可能通过影响共同转录因子 ,一方面使神经元CytO活力降低 ,导致能量代谢降低 ,生理功能受到影响 ,另一方面减少GluR2蛋白和mRNA表达 ,引起Ca2 + 大量内流 ,从而导致细胞内钙超载。     

镉对原代培养小鼠大脑皮层神经元磷酸化c-Jun氨基末端激酶的影响

目的探讨原代培养的小鼠大脑皮层神经元经不同浓度镉(cadmium,Cd)处理不同时间后磷酸化c-JNK氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)表达的变化。方法原代培养的小鼠大脑皮层神经元经0、5、10、20μmol/L氯化镉染毒0、6、12、24 h后,采用MTT法检测细胞活性;用蛋白免疫印迹法检测p-JNK蛋白的表达水平。结果Cd浓度为5、10、20μmol/L时,随着Cd浓度的升高及染毒时间的延长,神经元突起变细,甚至断裂,胞体变为球形后脱落,漂浮于培养液中。与对照组比较,随着Cd浓度的升高和处理时间的延长,原代培养的小鼠大脑皮层神经元的存活率明显下降(P0.05),且大脑皮层神经元中p-JNK的表达量升高(P0.05)。结论 Cd可能通过上调p-JNK的表达引起原代培养小鼠大脑皮层神经元的死亡。     

Comparative effects of feeding lead acetate and phospholipid-bound lead on blood and tissue lead concentrations in young and adult rats

Summary Two different forms of lead, lead acetate and phospholipidbound lead, were fed to young and adult male rats for 10 weeks at the 300 ppm dietary level. Based on the lead concentrations found in selected tissues, our results indicate that the bioavailability of phospholipid-bound lead is similar to that of lead acetate at the 300 ppm level. Young rats had higher concentrations of lead in tissues than did adult rats.     

Effect of ascorbic Acid and thiamine supplementation at different concentrations on lead toxicity in liver

OBJECTIVE: To investigate the effect of ascorbic acid [vitamin C (VC)] on liver damage parameters in the lead-exposed mice, when given in combination with thiamine [vitamin B1 (VB(1))] at different concentrations. METHODS: Sixty-six male mice were randomly assigned into 11 groups (n = 6). Mice in Group I were supplied with only the tap water as the drinking water; mice in Group II were provided with a tap water containing 0.2% lead acetate; mice in Group III-XI were given different dose of VC (140, 420, 1260 mg kg(-1) bw) and VB(1) (10, 30, 90 mg kg(-1) bw) according to 3 x 3 factorial design by oral gavages, along with ingestion of 0.2% lead acetate. After 42 test days, DNA damage of liver cells was assessed using single-cell gel electrophoresis. The apoptosis rate of liver cells was determined by flow cytometry. The activities of superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) in blood and the level of reduced glutathione (GSH) in liver cells were measured based on individual biochemical reactions. RESULTS: Compared with the Group I, sub-chronic lead ingestion (Group II) resulted in a significant decrease of Hb, GSH-P(X), SOD in blood and GSH level in liver cells; lead exposure induced also a significant increase in DNA damage and apoptosis of liver cells (P < 0.05). Supplementation with VC and VB(1), however, reversed these effects. The best effective combination was VC (420 mg kg(-1) bw) and VB(1) (10 mg kg(-1) bw), followed by the combination of VC (420 mg kg(-1) bw) and VB(1) (30 mg kg(-1) bw). But no reversion was shown in the combination of the highest combination of VC (1260 mg kg(-1)) and VB(1) (90 mg kg(-1)). CONCLUSIONS: These findings strongly indicated that combination of VC and VB(1) can lessen the damage to liver cells from oxidative stress induce by lead, but the antioxidant effects are dependent on their concentrations.     

铅对大鼠成骨细胞标志物的影响

目的研究铅对成骨细胞的功能标志物的影响,探讨铅对骨骼系统影响的可能机制。方法分离并培养乳鼠成骨细胞,加入不同浓度的醋酸铅培养3 d,对-硝基苯磷酸盐法检测碱性磷酸酶活性,放射免疫法检测骨钙素水平。结果铅浓度≥0.1μmol/L时即可影响骨钙素水平,≥0.5μmol/L时可以抑制碱性磷酸酶(ALP)。结论铅对成骨细胞标志物有显著影响,推测铅可能对成骨细胞有特异性损伤。     

醋酸铅暴露对雄性大鼠心血管系统功能的影响

目的探讨醋酸铅经口暴露对雄性大鼠心血管系统功能的影响。方法 40只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为低、中、高3个醋酸铅剂量组灌胃法染毒(分别给予45、90、180 mg/kg醋酸铅),对照组(灌服等量蒸馏水),每组10只,每周5次,共染毒60 d。每组随机选取6只大鼠,尾袖法测定末次染毒12 h后血压和心率水平;末次染毒24 h后摘眼球收集血液,脱颈处死大鼠,分离心脏和胸主动脉。石墨炉原子吸收光谱法测定全血血铅水平;全自动生化分析仪测定外周血血清心肌酶水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血血清氧化应激指标GSH、SOD和MDA水平;HE染色法观察大鼠心脏和胸主动脉组织病理学变化。结果染毒之初各组大鼠体重差异无统计学意义,随染毒时间增加,与对照组相比,各染毒组大鼠体重增长量呈下降趋势;各染毒组大鼠血铅水平均显著高于对照组(P0.05),且与染毒剂量呈显著正相关(r=0.614,P0.05);染毒组大鼠收缩压(SBP)水平均显著高于对照组(P0.05),舒张压、平均动脉压和心率在各组间差异无统计学意义(P0.05);中、高剂量染毒组大鼠CKMB和C反应蛋白(CRP)水平显著高于对照组,各染毒组大鼠外周血血清LDH和HBDH水平均显著高于对照组(P0.05),MDA水平显著高于对照组(P0.01),低、中剂量染毒组大鼠GSH水平低于对照组(P0.05);病理组织学检查发现,随醋酸铅染毒剂量的增加,大鼠心肌细胞肥大,胞核染色变深,变形、聚集,排列紊乱,心肌间质增宽,并出现炎细胞浸润,心肌纤维多处肿胀断裂,肌横纹消失;胸主动脉未见明显病理变化。结论醋酸铅暴露可引起雄性大鼠的血压升高、心肌酶谱改变及氧化损伤,直接损伤心肌组织。