霍乱毒素B亚单位-胰岛素原融合蛋白抗糖尿病

目的　观察雌性非肥胖糖尿病(NOD)小鼠口服胰岛素和霍乱毒素B亚单位 胰岛素原融合蛋白(CTB proinsulin) +霍乱毒素B亚单位五聚体(CTB五聚体)对糖尿病发生的影响,为社区非肥胖性糖尿病干预提供参考依据。方法　4 0只雌性3～4周龄NOD小鼠随机分为4组:分别给予磷酸缓冲液(PBS) 5 0 0 μl,胰岛素(insulin) 1mg ,CTB - proinsulin 10 0 μg +CTG五聚体1μg ,CTB - proinsulin 30 0 μg +CTG五聚体3μg。每周灌胃2次至12周龄;从12周龄起,动态监测小鼠尿糖、血糖至2 6周龄,观察糖尿病的发生,比较不同抗原诱导免疫耐受的作用。结果　与PBS组比较,CTB proinsulin +CTG五聚体与胰岛素均能延缓、减少NOD小鼠糖尿病的发生,2 6周龄时小鼠糖尿病的累积发病率:PBS组10 0 % ,CTB proinsulin 10 0 μg +CTG五聚体1μg组、CTG proinsulin 30 0 μg +CTG五聚体3μg组和胰岛素组分别为4 0 % ,4 0 %和5 0 % (P <0 .0 10 )。各组生存时间分布有差别。结论　不同剂量组的CTB proinsulin +CTG五聚体与胰岛素能够提高NOD鼠生存率,并可达到与胰岛素相同保护作用而所需抗原剂量较小。     

CD8+T细胞在糖尿病发病中作用

目的探讨CD8＋T细胞在糖尿病发病中的作用。方法利用非肥胖糖尿病（NOD）背景的转基因小鼠,将CD4＋T细胞和CD8＋T细胞过继转移到有T细胞缺陷的NOD小鼠（即NOD.scid小鼠）,同时转移到特异性地在β细胞上表达共刺激分子CD80的有T细胞缺陷的NOD小鼠（即NOD.scid.Rip.B7小鼠）,观察两组受鼠胰岛炎和糖尿病的发病情况,并分析其差异。结果转移CD4＋T细胞时,糖尿病发病率在NOD.scid受鼠和NOD.scid.Rip.B7受鼠组的差异无统计学意义（P〉0.05）,转移CD8＋T细胞时,NOD.scid受鼠糖尿病发病率低于NOD.scid.Rip.B7组受鼠,差异有统计学意义（P〈0.001）。结论CD8＋T亚群启动了胰岛的淋巴细胞浸润,CD8＋T细胞是通过与胰岛β细胞直接作用启动糖尿病的发生。     

NOD小鼠口服胰岛素诱导免疫耐受预防糖尿病研究

将5 周龄NOD 小鼠随机分成3 组,第1 组胰岛素灌胃,剂量1 m g ;第2 组小鼠给予PBS 稀释胰岛素,剂量0-1 mg ;第3 组为对照,以PBS 灌胃。观察25 周时间,对照组糖尿病发病率30-8 % ,1 m g 和0-1 m g 胰岛素灌胃的实验组发病率分别为0 % 和7-7 % 。生存分析表明,1 m g 胰岛素给NOD 小鼠灌胃,能显著提高生存率     

重组人胰岛素生长因子-1对非肥胖糖尿病小鼠Ⅰ型糖尿病的预防作用

目的　了解早期应用重组人胰岛素生长因子 1(rhIGF 1)对非肥胖糖尿病 (NOD)小鼠糖尿病发病的影响 ,并探讨其对细胞和体液免疫的影响。方法　将 4周龄雌性NOD小鼠随机分为 2组 :rhIGF 1组 (n =10 ) :腹腔注射rhIGF 137 5 μg·kg-1·d-12周 ;对照组 (n =10 ) :注射等体积生理盐水 2周。每周测体重、血糖 ,鼠龄 40周处死小鼠 ,测定血清C 肽和谷氨酸脱羧酶抗体 ,同时观察胰岛病理、免疫组化和脾脏T细胞亚群变化。结果　rhIGF 1组的糖尿病发病率 40 % ,明显低于对照组 ,发病时间也显著延缓 ;残存的胰岛数目亦明显高于对照组 ,且胰岛炎程度减轻 ,脾CD 4 T细胞亚群比例较对照组下降 ,CD8亚群显著增加 ;胰岛浸润CD 4 T细胞数量减少且局限在胰周。两组谷氨酸脱羧酶抗体阳性率之间差异无显著性意义。结论　rhIGF 1对NOD小鼠糖尿病发病有预防和延缓作用 ,其机制可能与提高小鼠缺陷的CD 8T细胞亚群、调节CD4 /CD8平衡和限制CD4 亚群向胰岛汇集有关。     

口服胰岛素对1型糖尿病小鼠预防与治疗作用

目的　探索口服胰岛素引起的免疫耐受对 1型糖尿病的预防与治疗作用。方法　将 4周龄雌性非肥胖型糖尿病 (NOD)小鼠随机分成 4组 ,任选 3组从鼠龄 4周、8周和 12周起开始灌胃给予 1mg胰岛素 ,对照组从鼠龄 4周起灌胃给予PBS。 4组均持续灌胃到鼠龄 35周。结果　各胰岛素给药组小鼠的 1型糖尿病累计发病率均显著低于对照组 (P <0 0 1) ,生存率显著高于对照组 (P =0 0 0 9)。结论　口服胰岛素对 1型糖尿病具有预防与治疗作用。     

过量碘通过p38和细胞间黏附分子-1促进小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎的发生发展

目的:探讨过量碘致小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）发生的分子机制。方法:选取60只雌性非肥胖糖尿病（NOD）小鼠,按照体质量[（25 ± 3）g]采用随机数字表法分为5组,每组12只：对照组（A组）,10倍高碘组（B组）,100倍高碘组（C组）,1 000倍高碘组（D组）,1 000倍高碘联合聚肌胞苷酸[Poly...     

碘过量对小鼠胰岛β细胞形态的影响

目的 探索碘过量对小鼠胰岛β细胞形态的影响。方法 将60只体重为（18～22） g/只的雌性（BALB/c）小鼠随机分为6组,每组10只,在饮水中加入不同浓度的碘,对照组给予正常浓度碘（5 μg/L）的自来水。碘过量的暴露组采用在饮用水中加入碘酸钾的方法,给予分别含有300 μg/ L、600μg/ L、1 200μg/ L、2 400μg/ L和4 800 μg/ L碘的饮用水。饲养1个月,取小鼠胰腺组织,光镜和电镜下观察胰岛β细胞形态。结果 对照组小鼠胰岛β细胞形态结构正常,呈椭圆形,与周围细胞界限清楚。高浓度碘水饲养小鼠1个月后,光镜下可见,从B组（300 μg/ L）开始胰岛β细胞形态发生改变,细胞体积增大,胰岛增生、肥大,胰岛β细胞肿胀、形态不规则。在电镜下可见,从D组（1 200 μg/ L）开始细胞超微结构发生明显变化,线粒体数量减少,出现肿胀、变性,胰岛β细胞肿胀、纤维化和变性,甚至出现缺如,内质网扩张、增粗,线粒体嵴向基底部聚集甚至断裂或呈空泡状等。结论 碘过量对小鼠胰岛β细胞形态产生影响,可以损伤小鼠胰岛β细胞。     

枳实对糖尿病小鼠肾脏抗氧化能力及胰岛影响

目的 研究枳实提取物对实验性糖尿病小鼠肾脏抗氧化能力及胰岛形态的影响.方法 将枳实提取物分成高、中、低剂量[5.1,3.4,1.7 g/(kg·bw)]治疗糖尿病小鼠4周后,观察其一般状况、肾脏的抗氧化能力及胰岛形态变化.结果 枳实高剂量组小鼠末期血糖为(20.37±5.25)mmol/L,明显低于糖尿病组的(25.74±2.99)mmol/L(P<0.05);枳实高剂量组谷胱甘肽(GSH)含量为[(34.40±8.54)mg/(g·prot)],明显高于糖尿病组的[(21.38±3.91)mg/(g·prot)](P<0.01);枳实高剂量组丙二醛(MDA)和NO含量分别为[(0.89±0.37)nmol/(mg·prot)],[(1.27±0.56)μmol/(g·prot)],明显低于糖尿病组的[(1.46±0.39)nmol/(mg·prot)],[(2.15±0.85)μmol/(g·prot)](P<0.01或P<0.05),光镜下枳实提取物治疗组胰岛细胞损伤程度较糖尿病组轻.结论 枳实提取物能增强肾脏的抗氧化能力;保护胰岛组织细胞并降低胰岛细胞损伤.     

环氧化酶2抑制剂对人胃癌转移抑制作用的研究

目的研究尼美舒利（环氧化酶2抑制剂）对人胃癌组织原位移植非肥胖性糖尿病（NOD）重度联合免疫缺陷（SCID）小鼠移植模型的肿瘤转移抑制剂、血管生成和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法建立人胃癌组织原位移植NODSCID小鼠胃癌移植模型，40只小鼠均分成2组。移植后1周，分别静脉注射0．9％氯化钠溶液（0．9％氯化钠溶液组）及50mg·kg^-1尼美舒利（尼美舒利组），每周2次，共2周。第5用处死动物，观察肿瘤转移情况，免疫组化法检测肿瘤组织微血管密度及VEGF表达。结果0．9％氯化钠溶液组20只小鼠18只有肿瘤转移，尼关舒利组20只小鼠只有5只转移，2组间差异有统计学意义（P〈0．05）。0．9％氯化钠溶液组平均微血管密度为9．5±2．9，尼美舒利组为3.9±2.1，2组间差异有统计学意义（P〈0．01）。0．9％氯化钠溶液组18只小鼠VEGF阳性表达，明显高于尼美舒利组的5只，2组间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论尼美舒利通过抑制肿瘤组织VEGF表达和血管生成，抑制肿瘤转移，尼美舒利无明显出血等不良反应。     

转基因番茄防龋疫苗的致突变性和生殖毒性研究

目的 研究表达变异链球菌表面蛋白PAcA、PAcP和霍乱毒素B亚单位(CTB)的转基因番茄防龋疫苗的致突变作用和生殖毒性作用.方法 将42只5周龄清洁级昆明小鼠随机分为7组,分别为高(5g/kg)、低(2 g/kg)剂量阴性对照(正常番茄汁)组和PAcA/CTB、PAcP/CTB蛋白-番茄汁染毒组以及阳性对照(100m...     

内毒素在小鼠过敏性哮喘模型所起作用的实验研究

目的建立小鼠过敏性哮喘模型,在过敏原的致敏和激发阶段给予不同剂量内毒素(即脂多糖LPS),探讨内毒素在哮喘模型中的作用机制。方法建立BALB/c小鼠哮喘模型,设立实验组和对照组开展后续实验。实验组包括:鸡卵清白蛋白(OVA)致敏,OVA激发组;OVA致敏,LPS激发组;OVA致敏,OVA+LPS联合激发组;LPS暴露于OVA致敏前,OVA激发组;对照组包括试剂对照组和健康对照组。各实验组的LPS剂量均分为高、中、低三个剂量组。通过测定小鼠气道阻力和肺顺应性来反映其肺功能改变;流式细胞术(FCM)测定FITC、PE阳性细胞数,表征CD4+CD2+5调节性T淋巴细胞(以下简称Treg细胞)的相对比例;荧光实时聚合酶链反应定量测定肺脏和脾脏Foxp3mRNA表达的水平;ELISA法测定血浆总IgE和OVA特异性IgE水平,抗体夹心ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中Th2细胞因子(IL-4和IL-5)的水平;计数BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞等各类白细胞所占百分比;常规病理切片观察肺组织改变情况。结果结果表明,与哮喘模型组小鼠相比,在LPS各处理组中,总体上能诱导Treg细胞的产生,改善肺功能,降低IgE滴度,降低Th2介导的免疫反应,同时诱导肺部炎症。尤其是在致敏阶段腹腔注射内毒素可以缓解由过敏原诱导的气道炎症和改善肺功能,诱导肺组织和脾组织Foxp3mRNA表达的增加。结论LPS抑制了Th2介导的过敏反应,可能与Foxp3表达量的增加相关,后者诱导Treg细胞增殖,对哮喘症状起到缓解作用。     

流行性出血热鼠间传播因素的调查

1987年12月和1989年5月在江苏省野鼠型和家鼠型流行性出血热(EHF)疫区进行EHF鼠间传播因素调查,发现EHF鼠间传播因素中,以皮肤破损为主要因素;鼠间密切接触和革螨叮咬为次要因素;而与食入EHF抗原污染的食物关系不密切。并提示在今后控制和消灭EHF疫源地时,除大面积和重点地区反复灭鼠外,还应加强消毒和杀虫等措施。     

生血胶囊对小鼠抗疲劳作用及其机制研究

目的研究生血胶囊对小鼠抗疲劳效果及其可能机制 ,为深入研究其作用及开发利用提供实验依据。方法选用成年雄性小白鼠 ,每日服用生血胶囊 (2g·kg- 1)并进行游泳训练 ,连续4周 ,检测耐缺氧时间和力竭游泳时间 ,以及力竭游泳运动后小鼠血液中乳酸脱氢酶 (LDH)活性及血尿素氮 (BUN)浓度、血红蛋白 (Hb)浓度与肾组织超氧化物歧化酶 (SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -Px)活性、总抗氧化能力和丙二醛含量。结果游泳训练后生血胶囊组小鼠力竭游泳时间〔(315 .33± 38.5 0 )min〕和耐缺氧时间〔(2 2 .4 4± 5 .2 3)min〕明显高于训练对照组〔(2 0 1.4 6± 32 .2 3)min ,(17.2 2± 5 .0 3)min ,P <0 .0 1,P <0 .0 5〕 ,力竭游泳后血液中Hb浓度和肾组织SOD、GSH -Px活性、总抗氧化能力也显著高于训练对照组 (P <0 .0 1) ,而血液LDH活性、BUN浓度和肾组织MDA含量则明显低于训练对照组 (P <0 .0 1)。结论生血胶囊有提高机体运动能力的作用 ,其作用机制可能与生血胶囊提高机体的耐缺氧能力 ,增加血红蛋白浓度 ,减少自由基 ,以及保护肾组织有关     

VSMC-Cx43-/-条件性基因敲除小鼠模型的构建及基因型鉴定

目的应用CRISPR-Cas9技术和LoxP-Cre系统构建血管平滑肌缝隙连接蛋白Cx43条件性基因敲除小鼠(VSMC-Cx43^-/-)模型。方法采用受精卵同源重组的方式,对Gja1基因进行flox修饰。通过体外转录的方式,获得Cas9 mRNA和gRNA;通过In-Fusion cloning的方法构建同源重组载体,该载体包含3.0 kb 5’同源臂、1.9 kb的flox区域和3.0 kb 3’同源臂。将Cas9 mRNA、gRNA和donor vector显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,获得F0代小鼠。PCR扩增及测序鉴定阳性的F0代小鼠与C57BL/6J小鼠交配获得3只阳性F1代小鼠(Cx43^flox/+)。将获得的flox杂合子Cx43^flox/+小鼠自交,获得flox纯合子Cx43^flox/flox小鼠。然后用Cx43^flox/flox小鼠和Myh11-CreERT2小鼠交配,最终获得flox纯合且Cre阳性的实验组小鼠(该小鼠简写为:VSMC-Cx43^-/-)和flox纯合且Cre阴性的对照组小鼠(Cx43^flox/flox)。用PCR进行基因型鉴定,用Western blot技术检测Cx43在大脑中动脉、冠脉、肺动脉和肾动脉组织中的表达,以明确基因敲除小鼠是否构建成功。结果基因型鉴定、免疫荧光和Western blot检测结果表明VSMC-Cx43^-/-基因敲除小鼠模型构建成功,小鼠一般性状无改变,小鼠大脑中动脉、冠脉、肺动脉和肾动脉组织中Cx43蛋白表达均下降。因此,可作为长期稳定模型研究血管平滑肌Cx43的功能。结论应用CRISPR-Cas9技术和LoxP-Cre系统成功构建了VSMC-Cx43^-/-基因敲除小鼠模型,为深入研究Cx43在血管疾病中的作用提供工具。     

IL—2激活的正常人PBL裸鼠体内抗肿瘤作用的研究

给裸鼠尾静脉注射Anip973人肺腺癌细胞造成人工肺转移癌模型。应用IL-2激活的PBL细胞进行体外扩增,诱导出具有杀伤活性的淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞),对裸鼠体内抗肿瘤作用进行研究。结果表明注入新鲜淋巴细胞组和单纯注入IL-2组均不能明显抑制肿癌的肺转移,单纯注入LAK细胞组可抑制肿瘤的肺转移,LAK细胞与IL-2同时注射时抑制肺癌转移率比LAK细胞组明显提高。病理检查证实了经LAK细胞和IL-2同时治疗的裸鼠,肺转移癌结节明显减少。LAK细胞与rIL-2伍用亦可显著延长荷瘤裸鼠的生存期。     

邻苯二甲酸(2-乙基已基)酯对小鼠脏器损伤作用

目的了解邻苯二甲酸酯（2-乙基已基）（DEHP）对小鼠各组织器官造成的损伤.方法将昆明种小鼠进行60d喂养实验后随机分为5组,DEHP浓度为250,500,1000,2000μg/ml等4个剂量组,称量体重和各脏器湿重并计算脏器系数.结果较高剂量组小鼠在染毒10d后,体重停止增长且有体重减轻的现象（P〈0.05,P〈0.01）,雌鼠接触DEHP 60d之后,各染毒剂量组小鼠其心脏/体、肺/体系数与对照组相比都增加（P〈0.05,P〈0.01）;肝脏/体、肾脏/体系数除250μg/ml剂量组外与对照组相比均有增长的趋势（P〈0.05,P〈0.01）.雄鼠接触DEHP 60d后,各染毒剂量组小鼠其心脏/体、肝脏/体、肺/体系数与对照组相比均增加（P〈0.05,P〈0.01）;而睾丸/体系数则显著减少（P〈0.05,P〈0.05）.结论 DEHP染毒60d后对小鼠的脏器造成一定程度的损伤.     

山东省肾综合征出血热死亡病例分析

目的探讨山东省2004~2005年肾综合征出血热（Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome,HFRS）病例的死亡原因,以便采取相应对策。方法按中国疾病预防控制中心《全国流行性出血热监测方案》中的个案调查表对山东省2004~2005年全部HFRS死亡病例进行调查,并进行统计学分析。结果山东省2004,2005年HFRS病死率分别比前一年上升95.45%和2.32%,死亡病例平均年龄为51.15岁,农民占77.78%,男女性别比例2.6∶1。对41例进行了特异性抗体检测,阳性率为75.61%。大部分病例临床症状不典型,从发病到就诊时间间隔平均为3.93 d,死亡前有鼠类接触史。结论山东省2004,2005年HFRS病死率有上升趋势;病例症状不典型、就诊时间晚、诊疗水平低和经济状况是造成病死率较高的重要原因;HFRS病死率升高可能是由于姬鼠型病例增多和病毒变异、毒力增加引起。     

两种矽肺造模方法比较

目的 比较两种矽肺造模方法的优劣,并探讨一次性气管滴注法造模的最佳时间。方法 口鼻暴露染尘小鼠20只,气管滴注染尘小鼠20只,分别于染尘后第7、14、21、28天处死;对照组小鼠5只,正常饲养28d处死。检测各时间节点小鼠肺湿重、脏器系数、肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量,并观察肺组织病理改变。结果 口鼻暴露法染尘21、28d小鼠肺湿重及脏器系数,7、14、21、28d小鼠肺纤维化评分,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),染尘28d小鼠肺组织形成矽结节;气管滴注染尘后第14、21、28天小鼠肺湿重、脏器系数,第28天小鼠HYP含量,第7、14、21、28天小鼠肺纤维化评分,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),染尘后第21天形成多个矽结节,第28天矽结节融合成大片状。结论 暴露法染尘28d小鼠开始形成矽结节,滴注法染尘后第21天小鼠即可完成矽肺造模。     

铁皮枫斗西洋参胶囊对小鼠免疫调节功能的影响

目的:探讨铁皮枫斗西洋参胶囊对小鼠免疫调节功能的影响。方法:选择低、中、高剂量的铁皮枫斗西洋参胶囊(58 mg/kg、117 mg/kg和350 mg/kg),采用免疫毒理学方法研究对小鼠免疫功能的调节作用。结果:每天补充中、高剂量的铁皮枫斗西洋参,30 d后小鼠的细胞免疫功能、体液免疫功能、单核—巨噬细胞吞噬功能和NK细胞活性明显增强(P<0.05,P<0.01)。结论:铁皮枫斗西洋参胶囊能增强小鼠的免疫调节功能。