逼尿肌不稳定大鼠肾上腺素β及β3受体密度和功能变化的研究

为研究β肾上腺素受体(β-AR)及其亚型β3-AR在膀胱出口梗阻(BOO)型逼尿肌不稳定中的作用,建立大鼠BOO型逼尿肌不稳定动物模型,以离体逼尿肌条拉力实验观察逼尿肌不稳定时异丙肾上腺素(ISO)和选择性β3-AR激动剂BRL37344A对逼尿肌舒张功能的影响,采用放射配基结合法测定BOO型逼尿肌不稳定组和稳定组及正常对照组大鼠逼尿肌β及β3-AR的受体最大结合容量(Bmax)和平衡解离常数(Kd).结果显示,ISO和BRL37344A对不稳定组的作用强度明显低于正常对照组及梗阻后稳定组,梗阻后不稳定组β-AR密度(Bmax)较正常对照组及稳定组明显降低(分别为66.23±6.39、85.85±7.53和81.36±6.72fmol/mg蛋白),β3-AR密度不稳定组同样较对照组及稳定组明显降低(分别为42.34±3.16、61.02±6.38和60.17±5.72fmol/mg蛋白),三组之间β-AR和β3-AR的Kd无明显差异(P＞0.05).提示逼尿肌不稳定时β-AR激动剂松弛逼尿肌的作用减弱,β-AR密度变化可能参与了大鼠BOO后逼尿肌不稳定的发生,高选择性β3-AR激动剂可能用于不稳定膀胱的治疗.     

逼尿肌不稳定的机制研究——神经源性?肌源性?

为探讨逼尿肌不稳定（DD）的产生机制，利用能量化调节肌张力和长度的体外肌条试验装置，对膀胱出口梗阻（BOO）和骶髓上脊髓横断（SCD）后DI进行分组对照研究和药理学研究。结果发现，①逼尿肌在适当的张力负荷下均可出现自发性兴奋和收缩；②DI逼尿肌在较小的张力负荷下即出现兴奋和收缩；在同等张力下DI逼尿肌自发兴奋频率明显高于正常副尿肌；③M受体拮抗剂、ATP和VIP对正常逼尿肌以及DI逼尿肌的自发兴奋均无明显的抑制作用；④M受体兴奋剂能显著增加逼尿肌的自发兴奋和收缩频率。提示逼尿肌自身兴奋性增加在DI的发生中有着重要作用，这种自发性并不依赖于M受体、ATP和VIP等神经因素。     

逼尿肌不稳定超微结构改变的实验研究

为了观察大鼠逼尿肌不稳定的超微结构改变，探讨逼尿肌不稳定的发生机制，建立Wistar大鼠不稳定膀胱模型，行充盈性膀胱侧压，根据测压结果分为逼尿肌稳定组（DS）和逼尿肌不稳定组（DI)。取对照组和DI组逼尿肌行光镜、电镜检查。结果显示不稳定膀胱逼尿肌细胞的排列紊乱，细胞间中间连接显著减少，代之以大量的胞突连接和缝隙连接。结果提示，逼尿肌细胞间的电偶联显著增强是逼尿肌不稳定发生的重要机制。     

逼尿肌不稳定与肾上腺能β受体关系的研究

目的 :研究 β肾上腺素受体 ( β -AR)在膀胱出口梗阻 (BOO)型逼尿肌不稳定中的作用。 方法 :建立大鼠BOO型逼尿肌不稳定动物模型 ,离体逼尿肌条拉力实验观察逼尿肌不稳定时异丙肾上腺素 (IsoprenalineISO)对逼尿肌舒张功能的影响 ,采用放射配基结合法侧定BOO型逼尿肌不稳定和稳定组及正常对照组大鼠逼尿肌 β受体最大结合容量 (Bmax)和平衡解离常数 (Kd)。结果 :ISO对逼尿肌的松弛作用呈浓度依赖性 ,对不稳定膀胱组的作用强度明显低于正常对照组及梗阻后稳定组 ,P <0 0 5 ,对逼尿肌的松弛作用呈浓度依赖性 ,对不稳定膀胱组的作用强度明显低于正常对照组及梗阻后稳定组 ,P <0 0 5 ,梗阻后不稳定组 β-AR密度 (Bmax)较正常对照组及梗阻后稳定组明显降低 ,结果分别是 ( 6 6 2 3± 6 39)fmol/mg蛋白、 ( 85 85± 7 5 3)fmol/mg蛋白和 ( 81 36± 6 72 )fmol/mg蛋白 ,三组动物之间β -AR的Kd无明显差异 ,P >0 0 5。结论 :逼尿肌不稳定时 β -AR激动剂松弛逼尿肌的作用减弱 ,β -AR密度变化可能参与大鼠BOO后逼尿肌不稳定的发生 ,选择性 β-AR激动剂可以用于不稳定膀胱治疗。     

膀胱逼尿肌细胞的培养及鉴定

目的：建立膀胱逼尿肌细胞的分离、培养、扩增的常规方法。方法：采用胶原酶消化法分离大鼠膀胱逼尿肌细胞，在含15％胎牛血清DMEM中培养，观察细胞形态及扩增情况，用特异性抗α-SM-Actin抗体进行免疫组化鉴定细胞类型。结果：膀胱逼尿肌细胞生长照好，培养12h后细胞开始贴附瓶底，3～4d后可观察到细胞融合现象，7d可覆盖培养瓶底部75％～80％以上。α-Actin免疫组化染色鉴定，光镜观察梭形细胞胞浆内见纵行排列的棕黄色丝状物。结论：该培养方法简单、可靠，短期内可获得大量较纯的膀胱逼尿肌细胞。     

神经源性、梗阻性和特发性逼尿肌不稳定模型的建立和尿动力学测定

目的：比较不同原因所致逼尿肌不稳定（detrusor instability,DI）在尿动力学测定结果方面有无异同。方法：建立大鼠膀胱流出道梗阻（bladder outlet obstruction,BOO）、脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）以及特发性逼尿肌不稳定（idiopathic detrusor instability,IDI）的模型,6周后再行充盈性膀胱测压,观察膀胱容量、顺应性变化及DI的发生情况。结果：成功建立不同DI模型,DI-BOO发生率为75.9%,DI-SCI发生率100%,IDI发生率为21.3%。与正常对照组相比,各模型组膀胱最大容量和顺应性变化有显著性差异（P〈0.05）。结论：不同原因所致的逼尿肌不稳定的尿流动力学表现不尽一致,但却均有逼尿肌不稳定收缩波存在,其发病机理有无共性有待进一步探讨。     

经腹超声测量膀胱质量检测膀胱出口梗阻的价值

目的:探讨经腹超声测量膀胱质量(ultrasound-estimated bladder weight,UEBW)对膀胱出口梗阻(bladder outlet ob-struction,BOO)的临床意义及尿动力学指数的相关性。方法:将有下尿路症状的70例患者分为膀胱出口梗阻组、非膀胱出口梗阻组和对照组,比较组间的UEBW与年龄、最大尿流率、残余尿量、国际前列腺症状评分的差异。结果:梗阻组与非梗阻组、对照组UEBW比较,P<0.001,有显著性意义。单回归曲线中UEBW与残余尿量有显著相关性(r=0.49;P<0.001)。它对BOO的诊断准确率为87.1%(61/70),假阳性率和假阴性率分别为11.4%(5/44)、14.3%(3/21)。结论:UEBW可作为一种非侵袭性预测BOO的指标,有广泛的临床应用价值。     

膀胱出口梗阻诱导膀胱纤维化分子机制及治疗策略研究进展

膀胱出口梗阻(BOO)诱导的膀胱纤维化可导致膀胱不可逆转的功能和结构变化,是膀胱重塑的终末期改变,严重影响患者生活质量。机械应力、缺血缺氧和炎性浸润是长期梗阻下启动膀胱纤维化的重要因素,一方面促进细胞外基质和胶原的产生,一方面抑制其降解,大量沉积于膀胱壁,使得膀胱壁顺应性降低,容量减少,收缩力下降。目前预防膀胱纤维化和改善膀胱功能的药物研究已取得重大进展,包括临床药物、天然中药成分、高分子材料及干细胞治疗等。本综述主要总结了BOO诱导膀胱纤维化的分子机制和治疗策略,为后续研究提供一定的思路和方向,也为相关药物的研发和使用提供了理论基础。     

PBOO对豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞形态结构的影响

目的探讨豚鼠膀胱流出道梗阻(PBOO)对膀胱卡哈尔间质细胞(ICC)形态结构的影响。方法建立雌性豚鼠PBOO模型,并根据尿动力学检测结果将模型分为PBOO后逼尿肌不稳定(DO)组和PBOO后逼尿肌稳定(DS)组,以假手术组作为对照,饲养4周后取膀胱组织,制成全层组织铺片和冰冻组织切片,c-kit免疫荧光染色分别观察各组膀胱肌层和黏膜下ICC的形态和分布情况。结果PBOO4周后,DO组豚鼠膀胱出现排尿频率、排尿压力的增加(n=12,P<0.05),并且观察到明显的储尿期膀胱不稳定收缩。对照组、DS组和DO组豚鼠膀胱均观察到c-kit染色阳性且呈典型长梭形有突起的ICC,主要分布于平滑肌肌束间和黏膜下层;在DO组豚鼠的膀胱中c-kit染色阳性的ICC分支突起增加且互相连接呈网络状,而在对照组和DS组中ICC呈散在分布,细胞之间联系较松散。结论在PBOO所致DO豚鼠膀胱中ICC发生了形态和结构的变化,相互之间连接呈网络状,ICC的形态和结构的变化可能是逼尿肌不稳定的重要发病基础。     

胃流出道恶性梗阻的金属支架置入治疗

目的探讨金属支架治疗胃流出道恶性梗阻的操作技术及其临床疗效。方法12例胃流出道恶性梗阻患者中,胃恶性淋巴瘤1例,胰体癌术后浸润胃肠吻合口1例,胃窦癌6例,胰头癌4例。在X线电视监视下经口置入国产镍钛合金网状裸支架。除4例体质虚弱外,余8例均接受动脉插管化疗或全身化疗。结果12例患者共放置金属支架14枚,其中,2例放置2枚支架。10例放置1次成功,2例放置2次成功。所有病例梗阻症状均明显缓解,并逐渐能进半固体软食,生活质量明显提高。随访2～18个月,2例出现支架梗阻后再次置入支架,1例胆道梗阻行胆道外引流术。未发生出血、穿孔、支架移位等严重并发症。结论金属支架是胃流出道恶性梗阻安全有效的治疗方法,可迅速缓解症状,改善患者体质,提高患者的生活质量,结合化疗有望延长患者的生存期。     

钙拮抗剂对脊髓损伤所致逼尿肌不稳定模型下离体逼尿肌的功能影响

目的：探讨钙拮抗剂对脊髓损伤引起的不稳定逼尿肌的兴奋性、收缩性的影响。方法：建立大鼠脊髓损伤动物模型，6周后行充盈性膀胱测压及离体逼尿肌条机械牵拉、钙拮抗剂刺激试验。结果：脊髓损伤后逼尿肌不稳定的发生率为100％；模型组与对照组相比，自律性和收缩性明显升高，收缩力增强；在L型、T型钙通道阻滞剂作用下，两组自律性、收缩力均明显降低，其中正常组更明显（P〈0．05）；结论：逼尿肌不稳定的发生与其自身兴奋性增高密切相关，而钙通道数量表达和功能改变可能是逼尿肌兴奋性增高的重要原因。     

Usefulness of percutaneous transesophageal gastrotubing for gastric outlet obstruction secondary to duodenal ulcer,a case report

Severe duodenal ulcer stenosis requires continuous decompression, which makes oral ingestion difficult, yet poor nutritional status before surgery increases the risk postoperative complications. Double percutaneous transesophageal gastrotubing (dPTEG) is a new treatment that provides both decompression and enteral nutrition. We report a case of duodenal ulcer scar stenosis in which dPTEG was used for preoperative management. A man in his 40s visited our hospital with vomiting as a chief complaint. CT scan showed duodenal ulcer stenosis. As the existence of malignant disease could not be ruled out, surgery was planned. Before surgery, dPTEG was inserted to achieve decompression and nutritional management. The patient''s gastric distension and nutritional status improved significantly, and laparoscopic distal gastrectomy was performed 22 days after the insertion. dPTEG may be an effective management method for patients with pyloric stenosis due to duodenal ulcer.     

P—糖蛋白在膀胱肿瘤中的表达及临床意义

选择４９例膀胱移行细胞癌标本，１０例正常膀胱组织标本。应用免疫组化法观察多药耐药基因产物Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）在膀胱肿瘤组织中的表达及临床意义，结果显示：（１）正常膀胱组织中Ｐ－ｇｐ无表达，膀胱肿瘤组织中Ｐ－ｇｐ阳性表达率为７１．４％：（２）Ｐ－ｇｐ阳性表达的膀胱肿瘤复发率为５１．６％：（３）在死亡组中Ｐ－ｇｐ阳性表达＊率为８３．３％。表明膀胱肿瘤中Ｐ－ｇｐ的高阳性表达提示其复发率高，预后差，可作为临床上判定膀胱肿瘤患者预后情况及选择治疗方案的一个参考指标。     

A Spanner in the works: the use of a new temporary urethral stent to relieve bladder outflow obstruction after prostate brachytherapy

PURPOSE: Assessment of the Spanner, a new temporary urethral stent to relieve bladder outflow obstruction and urinary symptoms after brachytherapy. METHODS AND MATERIALS: Five patients with unusually severe urinary morbidity after (125)I brachytherapy were recruited. The mean time after implant was 40 days (range 25-90). Spanner intraprostatic stents were introduced using topical anesthetic without complication. RESULTS: All patients were able to void spontaneously with no post-void residual volume of urine. The flow rates increased in all cases (p=0.03) and the International Prostate Symptom Scores were significantly improved after stent insertion in all patients (p=0.03). All patients experienced some degree of pain or dysuria during stent use. CONCLUSIONS: Bladder outflow obstruction was effectively treated with the Spanner intraprostatic stent, however pain limited the use of the device in the early post-brachytherapy patient group. Pharmacotherapy, stent design modification, or smaller stent diameter may increase the utility of stents after brachytherapy.     

miRNA-218在膀胱癌中表达及意义

目的探讨miRNA-218在膀胱癌细胞中的表达及其对膀胱癌5637细胞活性与侵袭增殖能力的影响。方法采用RT-PCR法检测正常膀胱细胞与膀胱癌细胞中miRNA-218的表达情况;分别在膀胱癌5637细胞中加入miRNA-218序列模拟物(miRNA-218 mimics)与无关序列模拟物(scramble mimics)后,采用MTT法检测细胞活性、Transwell法检测细胞侵袭增殖能力。结果 miRNA-218在正常膀胱细胞中的表达明显高于低级别与高级别尿路上皮癌,差异有统计学意义(P<0.05)。与未处理的膀胱癌5637细胞比较,加入miRNA-218 mimics的膀胱癌5637细胞中,miRNA-218表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);加入scramble mimics的膀胱癌5637细胞中,miRNA-218表达差异无统计学意义(P>0.05)。加入miRNA-218mimics的膀胱癌5637细胞的活性与侵袭增殖能力明显低于未处理的膀胱癌5637细胞与加入scramble mimics的膀胱癌5637细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miRNA-218与膀胱癌的发生、侵袭转移有关,miRNA-218表达上调可抑制膀胱癌。     

大鼠脊髓星形胶质细胞损伤后的cDNA文库构建及其基因表达变化

目的比较星形胶质细胞损伤前后的基因表达变化。方法提取新生大鼠脊髓星形胶质细胞体外损伤后2d（损伤组）及未损伤细胞（对照组）的总RNA，采用5’端RNA转录开关机制技术和抑制性消减杂交方法，构建大鼠脊髓星形胶质细胞损伤前后差异表达基因的消减cDNA文库，并将差异性表达片段进行序列分析及基因库中的同源性检索，获得大鼠脊髓星形胶质细胞损伤2d后细胞基因的整体变化趋势。结果脊髓星形胶质细胞损伤后2d，热休克蛋白70、钙调素Ⅱ等基因表达上调；同时β-肌动蛋白等基因表达下调。结论在大鼠脊髓星形胶质细胞机械性划痕损伤后的星形胶质细胞反应中，既有热休克蛋白等基因表达上调，也有β-肌动蛋白等基因表达下调。