坚龙胆主要次生代谢产物及分子差异的研究

目的:通过含量测定与DNA条形码分析,探讨坚龙胆主要次生代谢产物及分子的差异。方法:采用HPLC测定不同居群坚龙胆根及根茎、茎、叶、花中主要次生代谢产物龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、獐芽菜苷及苦龙胆酯苷含量,建立其指纹图谱共有模式,用单因素方差分析对主要次生代谢产物间的差异进行评价;并采用DNA条形码技术对不同居群坚龙胆样品进行ITS2测序。结果:不同居群坚龙胆根及根茎、茎、叶、花中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、獐芽菜苷及苦龙胆酯苷含量具有极显著差异(P0.01);同时ITS2序列结果显示不同居群坚龙胆分子差异较小。结论:不同居群坚龙胆主要次生代谢产物有一定差异,但分子间差异较小,亲缘关系较近。     

陕西产秦艽的化学成分研究

目的:对陕西产秦艽Gentiana macrophylla根的化学成分进行系统研究。方法:利用多种色谱手段对秦艽的脂溶及水溶部分进行分离;用UV,IR,MS,¹H-,¹³C-NMR等技术及对照品对照进行鉴定。结果:鉴定了8个化合物,其中脂溶部位4个,分别是:5-羧基-3,4-二氢-1H-2-苯并吡喃-1-酮(5-carboxyl-3,4-dihydrogen-1H-2-benzopyran-1-one1),红白金花内酯(erythrocentaurin 2),栎瘿酸(roburic acid 3),齐墩果酸(oleanolic acid 4)。水溶部位4个:龙胆苦苷(gentiopicroside 5),獐牙菜苦苷(swertiamarine 6),獐牙菜苷(sweroside 7),6′-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷(6′-O-β-D-gluco-sylgentiopicroside 8)。结论:1为新化合物,命名为红白金花酸,2为首次从本属植物中分得,8为首次从秦艽中分得。     

秦艽等龙胆属植物中龙胆苦苷含量测定及其与土壤元素和pH值相关性研究

目的测定19个不同产地秦艽等龙胆属植物根部龙胆苦苷的含量,并分析其与土壤的相关性。方法采用高效液相色谱法测定龙胆苦苷的含量,并用原子吸收分光光谱法、碱解扩散法和碳酸氢钠法分析其生境土壤的理化性质。结果龙胆苦苷含量在秦艽等龙胆属植物种间及种内不同产地间差异显著;秦艽根中龙胆苦苷含量与土壤中有效铁、有效锰和速效磷的百分含量成正相关,小秦艽根中龙胆苦苷含量与土壤中速效氮百分含量成正相关,与有效锰、有效铁和有效铜百分含量成负相关;秦艽、小秦艽根中龙胆苦苷含量与pH值无显著相关性。结论龙胆苦苷含量与土壤部分理化性质有一定的相关性,但各种之间又有所不同,因此在引种栽培时要充分考虑种质的因素,选择适合于不同种龙胆苦苷积累的土壤条件是培育优良秦艽原植物的重要环节。     

HPLC法同时测定青叶胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量

目的:建立青叶胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷的含量测定方法,为控制其质量提供科学依据。方法:采用高效液相色谱法。色谱条件:色谱柱为Phenomsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.02%磷酸溶液(23∶77);检测波长为243 nm;流速为1 mL/min;柱温为30℃。结果:3种成分均达到基线分离,獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷的线性范围分别为0.33～1.98μg(r=0.9997),0.16～0.96μg(r=0.9999),0.20～1.20μg(r=0.9997),回收率分别为100.2%,99.5%,98.2%。结论:该法快速、准确、稳定,可用于青叶胆药材质量评价。     

The Distribution, Uses, and Characteristic Components of Gentianaceae Plants in China

Extracts of Gentianaceae herbs have been widely used as food additives, teas, or medicinal remedies for various human diseases and disorders. Iridoids, secoiridoids, and analogs glycosides, mainly include gentiopicroside, sweroside, swertiamarin, and loganic acid, are the characteristic compounds found in the Gentianaceae plants. The uses of the medicinal herbs containing these secoiridoids have been described in Chinese Materia Medica. Herbal extracts containing iridoids, secoiridoids, and analogs could exert protective effects in multiple human tissues and cells. Some of these medicinal herbs have been studied using modern pharmacological means. The results indicate that they have analgesic, liver protective, anti?inflammatory, antiallergic, anti?pathogeny, and anti?bacterial functions. This review was aimed to summarize the use of Gentianaceae herbs for disease treatments and pharmacokinetic characteristics of the active compounds. In so doing, we hope to demonstrate that Gentianaceae herbs and bioactive compounds in them may have abilities to affect inflammation, hepatic metabolism and cell signaling. In addition, we would like to bring this to the attention of the field about the use and study of compounds derived from Gentianaceae herbs.     

SEMAC快速发现龙胆吸收成分群的研究

目的:建立基于肠吸收技术快速发现龙胆中吸收成分群的方法,为龙胆质量控制指标的选择提供依据。方法:采用大鼠外翻肠囊模型,分别收集3个质量浓度龙胆提取物给药后不同时间点的肠囊液样品,并以龙胆苦苷、马钱苷酸、当药苦苷、当药苷为代表成分,采用HPLC对4种成分进行检测,分别计算其累计吸收量。结果:龙胆中6种主要成分可进入肠囊,在90 min后均能检测到;不同质量浓度的龙胆提取物中龙胆苦苷、马钱苷酸、当药苦苷、当药苷在各肠段均为线性吸收,R2均大于0.9,符合零级吸收;龙胆苦苷和当药苦苷在空肠中的吸收速率常数(Ka)随着剂量增加而增加(P<0.05),符合被动吸收,而在回肠中大、中剂量的Ka无显著差异,且均高于小剂量,符合主动吸收;当药苷在空、回肠中大、中剂量的Ka无显著差异,且均高于小剂量,符合主动吸收;马钱苷酸在回肠与空肠中的Ka随着剂量增加而增加(P<0.05),符合被动吸收。结论:基于肠吸收的质量评价指标选择方法可以用于龙胆吸收成分群的研究,药物在不同肠段中的吸收具有选择性。     

基于UPLC-ESI-HRMS~n评价不同干燥方式对粗茎秦艽中环烯醚萜类及黄酮类成分的影响

目的通过化学成分测定,评价远红外干燥、真空干燥、冷冻干燥、阴干、烘干、"发汗"干燥对粗茎秦艽品质的影响。方法采用UPLC-ESI-HRMS~n测定秦艽中4个环烯醚萜类成分(獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苷)和4个黄酮类成分(木犀草素、异牡荆素、芹菜素、山柰酚)质量分数。并结合单因素方差分析、聚类分析、逼近理想值排序法(TOPSIS)分析综合评价不同干燥方式所得样品的品质,确定最佳干燥方式。结果不同干燥方法样品的獐牙菜苦苷差异不显著,龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苷、木犀草素、异牡荆素、芹菜素和山柰酚差异明显。其中,4个环烯醚萜类成分在冷冻干燥中保留最佳;4个黄酮类成分在"发汗"干燥中保留最佳。各成分在阴干样品中质量分数最低。聚类分析及TOPSIS分析表明"发汗"干燥具有与冷冻干燥相似的品质,且品质最好,其次是烘干干燥和远红外干燥,阴干干燥的样品品质最差。结论不同干燥方式对秦艽药材品质的影响值得关注。研究表明《中国药典》2015年版收载秦艽"发汗"的干燥方法具有科学性。但传统"发汗"过程时间较长,为了提高干燥效率,进一步研究方向应关注"发汗"干燥结合现代干燥技术如热风干燥、冷冻干燥、真空干燥以保证秦艽药材稳定品质的基础上缩短干燥时间。     

Inhibitory effects of secoiridoids from the roots of Gentiana straminea on stimulus-induced superoxide generation, phosphorylation and translocation of cytosolic compounds to plasma membrane in human neutrophils

Gentiana straminea Maxim. has been used widely as a traditional Chinese medicine for the treatment of rheumarthritis, icterepatitis, constipation, pain and hypertension. Five secoiridoids, gentiopicroside (GTP), 6'-O-(2-hydroxy-3-O-β-D-glucopyranosyl-benzoyl)-sweroside (HGBS), 6'-O-β-D-glucosylgentiopicroside (GGTP), sweroside (SW) and swertiamarin (STM) were isolated from the roots of G. straminea. The effect of these secoiridoids on stimulus-induced superoxide generation in human neutrophils was assayed by measuring the reduction of ferricytochrome c. Tyrosyl or serine/threonine phosphorylation of neutrophil proteins, and translocation of the cytosolic compounds to the cell membrane were also investigated using specific monoclonal antibodies. The five secoiridoids used in the present experiment suppressed N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine (fMLP)-induced superoxide generation in a concentration dependent manner. GTP and HGBS also suppressed phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and arachidonic acid (AA)-induced superoxide generation. However, the other three secoiridoids showed no effect on PMA- and AA-induced superoxide generation. fMLP-, PMA- and AA-induced tyrosyl or serine/threonine phosphorylation and translocation of the cytosolic proteins to the cell membrane were suppressed in parallel with the suppression of the stimulus-induced superoxide generation.     

Assessment of systemic interaction between Swertia chirata extract and its Bioactive constituents in rabbits

The plant Swertia chirata (Gentianaceae) is known for its multifarious medicinal value in the Indian system of medicine (Ayurveda). Its methanol extracts having antidiabetic activity contains mangiferin, amarogentin, amaroswerin, sweroside and swertiamarin as active constituents. The pharmacokinetics of mangiferin and amarogentin have been carried out after intravenous administration of pure standards and extract from S. chirata (CT) in rabbits to assess systemic interaction. The remaining three components were also monitored in plasma for pharmacokinetic estimation based on the ratio analysis method. Mangiferin was characterized by a relative low clearance (～0.14 L/h/kg) and a lesser volume of distribution (～0.15 L/kg), while amarogentin exhibited a rapid clearance (～2.62 L/h/kg) and wide distribution (～1.08 L/kg) from the systemic circulation. No significant difference was observed in pharmacokinetic parameters of mangiferin and amarogentin either administered alone or as CT formulation in rabbits. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

HPLC测定四川及青海地区獐牙菜植物中6种主要成分的含量

目的：建立反相高效液相色谱法同时测定四川及青海地区部分獐牙菜中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷、当药醇苷、异荭草苷、1,8-二羟基-3-甲氧基酮的含量。方法：采用RP-HPLC,使用Kromasil C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)柱；流动相甲醇-水（含0.02％磷酸）；梯度洗脱程序为0~50 min,甲醇的体积分数（下同）由20%上升至80%；50~55 min由80%增至100%,55~60 min为100%,流速1 mL·min^-1,检测波长254 nm；柱温35 ℃。结果：6种成分均达到基线分离,线性良好。结论：该方法快速、准确、重复性好,为该类药材的入药提供了理论依据。     

RP-HPLC测定当药中环烯醚萜和三萜类成分含量

目的：建立应用RP-HPLC测定当药及不同部位中獐牙菜苦苷、当药苷、龙胆苦苷和齐墩果酸的含量测定方法。方法：采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相分别为乙腈-水(10∶90)和甲醇-水(86∶14),流速1.0 mL·min^-1,检测波长分别为獐牙菜苦苷238 nm、当药苷246 nm、龙胆苦苷274 nm和齐墩果酸207 nm,柱温25 ℃。结果：獐牙菜苦苷、当药苷、龙胆苦苷和齐墩果酸分别在0.034 2～0.427 5,0.001 1～0.014 0,0.000 7～0.008 8,0.001 1～0.008 8 mg·mL^-1线性关系良好,R2分别为0.999 2,0.999 8,0.999 9,0.999 6。结论：本法方便、准确,可用于当药药材的质量控制。     

龙胆苦苷和龙胆碱的生物转化和药理活性研究进展

龙胆苦苷是重要的环烯醚萜类成分之一,是龙胆属植物的主要活性成分,具有促进胃排空和肠蠕动,还有保肝、镇痛、抗炎等作用。龙胆碱具有抗炎、解热、镇静催眠、抗惊厥等作用。龙胆苦苷等环烯醚萜类化合物在植物内生真菌、人体肠内菌等生物转化作用下可以转化成龙胆碱和新的活性成分。笔者将龙胆苦苷和龙胆碱近年在药理活性、生物转化和体内代谢研究进行综述,为进一步开发利用环烯醚萜类成分及其代谢产物提供一定的理论依据。     

基于全局非靶向代谢组学对黄蜀葵不同部位成分的差异分析

目的 通过代谢组学分析黄蜀葵叶、茎、根、花中主要化学成分及其相对含量，为提高黄蜀葵的药用和经济价值提供科学基础。方法 使用超高效液相色谱-质谱联用法对黄蜀葵各部位代谢物进行定性分析，通过全局非靶向代谢组学方法分析比较黄蜀葵不同部位主要代谢物的相对含量。结果 黄蜀葵主要功效成分黄酮类物质在叶、茎、根中也有大量分布，其中标志性化合物金丝桃苷在黄蜀葵叶中的相对含量最高。其他类活性成分，如生物碱、香豆素、萜类、氨基酸等在黄蜀葵叶中的相对含量也较高。结论 除了黄蜀葵花，其他部位如叶、茎、根中也含有较多的活性成分，在提取利用其中的活性成分时可以考虑全株提取或有针对性地部位提取，以提高黄蜀葵的药用及经济价值，减少资源浪费。     

龙胆斑枯病对龙胆产量及质量的影响

目的 :研究龙胆斑枯病对龙胆产量及龙胆质量的影响。方法 :采用同一等级龙胆种苗移栽 ,秋季调查每株病情 ,测定产量 ,采用HPLC法测定龙胆苦苷类成分含量。结果 :产量随病情加重而下降 ,在病情指数大于 60时 ,产量下降明显 ,龙胆苦苷类成分含量在病情指数大于 70时开始下降。结论 :龙胆斑枯病病情较重时才造成较大产量损失和质量下降 ,龙胆斑枯病病情指数小于 60时对龙胆生产造成损失很小。     

宁夏栽培秦艽与野生秦艽有效成分的比较

目的:通过对宁夏栽培秦艽不同品种与野生秦艽有效成分的比较,评价宁夏栽培秦艽的质量.方法:采用《中国药典》2010年版一部方法测量龙胆苦苷和马钱苷酸的含量;采用全自动氨基酸分析仪测定其氨基酸的含量;采用蒽酮-硫酸法测定其多糖的含量.结果:宁夏栽培的3种秦艽龙胆苦苷、马钱甘酸的含量都高于《中国药典》规定的限度;与野生秦艽相比,所含氨基酸的含量有显著性差异;多糖的含量无显著性差异.结论:宁夏栽培的3种秦艽品质良好,对于秦艽氨基酸和多糖的药用价值,可以进一步的研究开发和利用.     

云南野生抚育粗茎秦艽药材的品质评价

目的: 研究野生抚育粗茎秦艽药材的有效成分和化学指纹图谱,以期评价其质量,为粗茎秦艽药材的GAP种植提供科学依据。 方法: 采用Zorbax SB C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相甲醇-水,梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,检测波长238 nm,柱温为25 ℃。利用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004 A版软件,对15批3年生野生抚育粗茎秦艽药材进行指纹图谱分析。 结果: 15批粗茎秦艽药材环烯醚萜苷类有效成分及浸出物含量符合2010年版《中华人民共和国药典》要求,各样地药材化学指纹色谱相似度>0.981,质量均一性好。 结论: 方法具有良好的精密度、重复性、稳定性,可用于粗茎秦艽药材的质量综合评价。野生抚育模式药材可作为粗茎秦艽主要种植发展模式,对云南建设"云药之乡"和发展道地药材具有重要的现实意义。     

全萼秦艽的生药学研究

目的:对全萼秦艽和秦艽进行生药学的比较研究,为全萼秦艽的进一步开发和利用提供参考。方法:利用生药学鉴定方法,从微形态、形态及理化等方面对全萼秦艽和秦艽进行系统分析和评价。采用HPLC测定獐牙菜苦苷和龙胆苦苷含量,流动相甲醇-水梯度洗脱,检测波长254 nm。结果:全萼秦艽的内、外周皮的木栓细胞只有1层。全萼秦艽及秦艽中龙胆苦苷质量分数分别为6.24%和8.51%,獐牙菜苦苷依次为0.26%和0.36%。结论:全萼秦艽在生药学特征方面与秦艽存在部分差异,为全萼秦艽资源的开发利用提供了实验依据。     

正交实验法优选秦艽中龙胆苦苷提取工艺

目的优选出秦艽中龙胆苦苷的提取最佳工艺。方法采用正交试验法,以龙胆苦苷含量为指标,考察了乙醇浓度、浸取时间、溶媒用量及提取次数对秦艽中龙胆苦苷提取率的影响,优选出合理的提取工艺。结果用乙醇浓度为70%,浸取时间为36 h,溶媒用量为药材的10倍,提取次数为3次为最佳。结论经验证性实验证明所优选条件可靠,适合秦艽中龙胆苦苷的提取工艺参考。     

羊踯躅的代谢组学研究

目的:鉴定羊踯躅花、茎、叶的全部代谢物和不同部位间含量有差异的代谢物,分析差异代谢物的代谢通路。方法:采用广泛非靶向代谢组学对羊踯躅不同部位的代谢物进行比较分析。结果:共鉴定出535个代谢物,其中包括金合欢素、落新妇苷、苔黑酚龙胆二糖苷、去甲蟛蜞菊内酯、补骨脂定、秦皮素、络塞维等49个在其他植物中分离鉴定出的具有药用活性的化合物;鉴定出差异代谢物202个,包括β-氰基丙氨酸、蜀黍苷和黄曲霉毒素G23个有毒代谢物,且这3个有毒代谢物分别在花、茎、叶中含量最高;鉴定出百里香酚、丹皮酚、欧芹酚、东莨菪内酯、异泽兰黄素、野鸢尾黄素、石蒜碱和豆甾醇8个有药用价值的化合物,其在花、茎、叶中含量差异有统计学意义;排名前4位的差异代谢物通路中,花、茎、叶共有的通路为精氨酸生物合成,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,以及氨酰基-tRNA生物合成通路,其中涉及花的通路还包括氰基氨基酸代谢通路。结论:羊踯躅中存在丰富的天然药用活性产物,使其药用价值并不限于毒性成分;氨基酸的合成与代谢是不同部位代谢物差异的主要原因。研究结果可为进一步筛选解析羊踯躅中药用价值较高的关键代谢物提供参考。     

超声提取秦艽中龙胆苦苷的工艺优选

目的:优选提取秦艽中龙胆苦苷的最佳工艺。方法:采用正交试验法,以龙胆苦苷含量为指标,考察了乙醇用量、提取时间、提取次数及提取温度对秦艽中龙胆苦苷提取率的影响,优选出合理的提取工艺。结果:以乙醇用量为30 ml、提取时间为20 min、提取次数为4次、提取温度为50℃最佳。结论:经验证性实验证明所优选条件可靠,适合秦艽中龙胆苦苷的提取工艺参考。