萍乡市健康人群手足口病肠道病毒隐性感染状况分析

摘要:目的　分析萍乡市健康人群手足口病肠道病毒隐性感染的状况,为萍乡市手足口病防控提供科学依据。方法　收集668名健康儿童及112名孕妇血清进行HEV71中和抗体检测,同时采集总计100名幼教人员、幼儿及儿童家长的手及咽部涂抹样,进行手足口病肠道病毒核酸检测（包括PE、EV71 和CoxA16）。结果　668名儿童中,HEV71中和抗体阳性率为56.0%,平均几何滴度为1∶16.34,不同年龄组儿童抗体阳性率有统计学差异（χ2＝51.12,P＜0.05）,各年龄组的中和抗体构成不一致（χ2＝154.39,P＜0.05）。112名孕妇,阳性率为92.9%,平均几何滴度为1∶29.89。100名健康人群检出肠道病毒核酸阳性率为18.0%,幼教人员、儿童家长、儿童3组人群的阳性率有统计学差异（χ2＝12.78,P＜0.05）,手部涂抹样和咽拭子的检出阳性率无统计学差异（χ2＝2.85,P＞0.05）。结论　≤3岁儿童是手足口病防控的重点人群,肠道病毒感染状况对儿童手足口病的流行有一定的影响,儿童和成人勤洗手、室内常通风是防控手足口病的重要措施。建议儿童在7月龄开始接种EV71疫苗。     

哈尔滨市儿童肠道病毒71型中和抗体水平调查研究

目的了解哈尔滨市0岁~14岁不同人群儿童肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)中和抗体(neutralizing antibody,NA)水平,为防控EV71引起的手足口病流行提供科学依据,为手足口病疫苗效果评价提供基础数据。方法选取哈尔滨市4家医院作为样品采集点,采集临床排除手足口病者的样本413份,应用假病毒系统检测样本EV71中和抗体滴度,样本率的比较用χ~2检验。结果 413份样本EV71中和抗体阳性率为37.05%;不同性别、时间EV71阳性率差异均无统计学意义(P0.05);不同年龄组儿童EV71阳性率不同,差异有统计学意义(χ~2=19.63,P0.05)。其中≤6个月组EV71中和抗体阳性率最高,为68.00%;7个月~12个月组EV71中和抗体阳性率最低,为20.83%。结论中和抗体较低的人群及时间点为手足口病防治的重点。     

肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型抗体筛查在手足口病中的应用及相关性

目的 探讨肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CA16)抗体筛查在手足口病中的应用及相关性.方法 采用酶联免疫吸附法对确诊的281例手足口病患儿进行血清EV71-IgM抗体和CA16-IgM抗体检测.结果 EV71-IgM抗体阳性144例(51.2％,144/281),CA16-IgM抗体阳性90例(32.0％,90/281),EV71-IgM和CA16-IgM双阳性17例(6.0％,17/281),即抗体阳性确切例数为217例,抗体阳性率为77.2％(217/281).EV71-IgM抗体阳性率与CA16-IgM抗体阳性率比较差异有统计学意义(x2=21.35,P＜0.01),总体男性与女性抗体阳性率[95.1％(135/142)比71.2％(99/139)]比较差异有统计学意义(x2=8.22,P＜0.01).结论 早期进行EV71-IgM和CA16-IgM抗体联合检测,对临床诊断手足口病及监控治疗具有重要意义.     

2013-2014年泉州地区手足口病病原学监测结果分析

摘要:目的　了解2013-2014年福建泉州地区手足口病（HFMD）的病原学特征,为手足口病防治提供科学依据。方法　采集2013-2014年泉州市妇幼保健院·儿童医院收治的3839例手足口病患儿空腹静脉血标本,采用捕获法酶联免疫吸附技术检测肠道病毒71型（EV71-IgM）和柯萨奇病毒A组16型（CA16-IgM）。结果　3839例被检标本共检测出阳性标本2176例,阳性率为56.68%;其中32.87%（1262/3839）为EV71阳性,23.81%（914/3839）为CA16阳性,两者间阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）。5岁以下HFMD患者3679例,占95.83%,其中1～2岁组患儿最多,占68.56%。3～4岁组患儿EV71阳性率（48.28%）和CA16阳性率（35.09%）最高。不同年龄组,EV71阳性率和CA16阳性率均存在统计学差异（P＜0.05）。手足口病发病随季节而发生变化,不同月份EV71和CA16阳性率均存在统计学差异（P＜0.05）。发病以4-7月份为主,占56.37%,2014年9-10月份发病率出现一定程度反弹。结论　2013-2014年泉州地区手足口病肠道病毒EV71型的阳性检出率高于CA16型,4-7月份为发病高峰期,5岁以下儿童为高发人群,其中1～2岁组手足口患儿居多,而3～4岁组病毒阳性率最高,需引起重视。     

微量细胞病变法检测健康人群EV71和CVA16中和抗体水平

目的了解深圳市福田区健康人群中肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇A16型(CVA16)隐性感染情况。方法应用微量细胞病变法,对2011年和2012年一般人群流感抗体水平调查采集的471份血清标本进行EV71和CVA16中和抗体检测,并对检测结果进行统计学分析。结果 471份健康人群血清中EV71和CVA16中和抗体阳性率分别为25.50%和33.10%;EV71抗体由0～岁组的7.14%上升至15～岁组的42.65%(χ2=42.12,P<0.01),上升5.97倍,抗体几何平均滴度(GMT)呈缓慢上升趋势;CVA16抗体由0～岁组的9.18%上升至5～岁组的58.73%(χ2=61.87,P<0.01),上升6.39倍,抗体GMT呈波峰状;各年龄组两种抗体混合感染阳性率为11.25%(χ2=64.95,P<0.01)。结论本地区健康人群中存在肠道病毒隐性感染,各年龄组CVA16抗体阳性率均高于EV71;5～25年龄人群EV71和CVA16中和抗体阳性率、GMT和混合感染情况均高于其他年龄组,应加强5～25年龄人群的流行病学监测。     

IgM抗体检测对EV71感染手足口病诊断价值的探讨

目的探讨检测血清EV71-IgM抗体在EV71感染手足口病早期诊断中的应用价值。方法综合收集广西地区2014年4月-10月和2016年4月-10月临床诊断手足口病患儿436例,对所有患儿血清进行EV71-IgM抗体检测。其中136例患儿同时采集咽拭子或肛拭子通过荧光定量RT-PCR检测EV71-RNA。录入数据后采用SPSS 17.0进行统计学分析。结果临床诊断手足口病436人中EV71-IgM抗体阳性256例,阴性180例,危重症组和重症组的EV71-IgM抗体阳性率高于轻症组,差异有统计学意义(χ2=88.016,P0.001)。以荧光定量RT-PCR检测为标准,同时检测136例患儿肛拭子或咽拭子EV71-RNA和血清EV71-IgM抗体,2种方法的检测一致性中等可靠(Kappa=0.575,P0.001)。EV71-IgM检测的灵敏度为93.67%(74/79),特异度为61.40%(35/57)。EV71-IgM抗体阳性检出率在病程1~3 d逐渐升高,在病程d3检出率达到92.31%,在病程4~10 d检出率达到100.00%。结论血清EV71-IgM抗体检测具有较高的灵敏度,可行性强,操作方便,对早期诊断手足口病病原学有良好的应用价值。     

杭州市手足口病医务人员隐性感染状况研究

目的分析传染科手足口病医务人员肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的隐性感染情况。方法 2016年6~9月杭州市儿童医院儿科医务人员63人(其中传染科医务人员23人),健康成人体检43人,采用荧光PCR法进行粪便EV71和CA16病毒核酸检测,利用酶联免疫分析(ELISA)间接法检测血清EV71和CA16的IgG抗体。结果医务人员与非医务人员粪便肠道病毒核酸均阴性。医务人员与非医务人员血清EV71抗体IgG阳性率分别为17.46%及18.60%,差异无统计学意义(χ~2=0.023,P=0.88);血清CA16抗体IgG阳性率分别为95.24%和53.49%,差异有统计学意义(χ~2=26.219,P=0.00)。传染科与非传染科医务人员比较,血清EV71抗体IgG阳性率分别为26.09%和12.50%,差异无统计学意义(χ~2=1.047,P=0.31);血清CA16抗体IgG阳性率分别为91.30%和97.50%,差异无统计学意义(χ~2=0.247,P=0.62);医生与护士比较,血清EV71抗体IgG阳性率分别为11.11%和35.71%,差异无统计学意义(χ~2=1.72,P=0.19);血清CA16抗体IgG阳性率分别为100.00%和92.86%,差异无统计学意义(χ~2=0.672,P=0.41)。结论儿科医务人员CA16隐性感染要高于健康人群。手足口病医务人员虽然存在着一定程度EV71和CA16隐性感染情况,但粪便均未能检测出EV71和CA16病毒核酸,说明传播风险系数较低。另手足口病病房与其他病房医务人员EV71和CA16隐性感染情况无差异。     

宿州市295例手足口病病原学监测结果分析

目的：了解宿州市2013年手足口病的病原型别和分布特征,为制订手足口病的防治策略提供依据。方法：采集295例临床诊断手足口病例的生物标本,采用Real-time RT-PCR方法检测肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）及柯萨奇病毒A组6型CoxA6）的特异性核酸。结果：295例手足口病患者标本,肠道病毒核酸总阳性数94例,总阳性率31.9%,EV71阳性67份,阳性率22.7%,CoxA16阳性数0份,阳性率0%,CoxA6阳性数13份,阳性率4.4%,其他肠道病毒13份,阳性率4.4%。男女比为1.5∶1,男女阳性率分别为32.4%和31.1%,差异无统计学意义（χ^2=0.055,P〉0.05）。结论：2013年宿州市手足口病流行的病原体优势株为EV71,同时伴有CoxA6和其他肠道病毒感染。发病以5岁以下婴幼儿为主（97.9%）,无性别差异,分布无地域差别。全年均可发病。     

荆门地区2010年-2012年手足口病病原学检测结果分析

目的探讨荆门地区2010年-2012年手足口病病原学特征。方法采用real-time RT-PCR方法,对荆门地区618例手足口病儿童的778份标本进行肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)以及肠道病毒通用型(EV)的核酸检测。结果 2010年-2012年手足口病肠道病毒阳性率为65.86%,病原体分别以EV71、EV71和CVA16为主,此外有4例CVA16和EV71混合感染。不同类型样本肠道病毒阳性率均超过50%。核酸检测阳性以1岁~3岁儿童最为集中(阳性构成比为83.04%);男女手足口病病毒阳性率分别为68.22%和62.45%,差异无统计学意义(χ2=2.211,P0.05)。荆门市直阳性率最低(53.89%),与其他3个地区比较差异有统计学意义(χ2=18.993,P0.05)。4例重症患儿和1例死亡患儿由EV71感染引起。结论 2010年-2012年荆门地区手足口病病原体以EV71和其他EV为主,EV71是引起手足口病重症和死亡的主要病原;咽、肛拭子混合液作为一种新的手足口病标本类型具有较好的应用前景。     

汕头地区手足口病病原体检测及临床分析

目的 对汕头市97例疑似手足口病患者进行病原体检测及分型情况分析. 方法 采用RT-PCR检测97份疑似手足口病患者的咽拭子标本. 结果 97份咽拭子标本中检测肠道病毒阳性63例,病毒阳性率为64.95％,其中EV71阳性19例,阳性率19.59％,占30.16％,CoxA16阳性34例,阳性率35.05％,占53.97％,其他型肠道病毒10例,阳性率10.31％,占15.87％,EV71和CoxA16的阳性检出率差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 汕头地区手足口病的病原体感染以CoxA16为主,其次为EV71,也发现少量的其他型肠道病毒感染.     

天津市河东区健康人群EV71和CoxA16隐性感染状况

目的调查天津市河东区健康人群肠道病毒71型（EV71）和科萨奇病毒A组16型（CoxA16）隐性感染状况,为手足口病的预防与控制提供依据。方法采集148名天津市河东区健康人静脉血标本进行EV71和CoxA16中和抗体测定,对检测结果进行分析。结果以抗体滴度1∶4作为临界值,调查对象EV71中和抗体阳性率为79.05%（117/148）,CoxA16中和抗体阳性率为80.41%（119/148）;其中,EV71中和抗体阳性率和CoxA16中和抗体阳性率最高的年龄组均为36-45岁,分别为93.10%和96.55%;0-5岁年龄组的EV71中和抗体阳性率和CoxA16中和抗体阳性率最低,分别为50.00%和46.15%。不同年龄组的EV71中和抗体阳性率和CoxA16中和抗体阳性率差异均有统计学意义（均P〈0.01）。EV71和CoxA16中和抗体滴度≥1∶256的人数分别占20.95%（31/148）和16.22%（24/148）。结论人群对EV71和CoxA16普遍容易感染,健康人群中存在较高的隐性感染,因此隐性感染人群也是病原体传播的传染源之一。     

珠海市某医院手足口病病例流行病学分析

目的 了解手足口病的流行病学及病原学特征,为手足口病防治提供一定的依据.方法 收集2009～2012年某医院收治的2 965例手足口病病例资料,描述其流行病学特征,临床诊断病例的粪便标本送实验室检测.结果 2009～2012年该院收治的手足口病病例以4岁及以下幼儿为主,占95.0%,主要为散居儿童（56.2%）和托幼机构儿童（41.0%）,发病高峰在5～7月份,男女性别比为1.62;共检出CoxA16病毒感染病例64例,检出率2.2%;检出EV71病毒感染病例537例,检出率18.1%,普通病例和重症病例的CoxA16检出率差异无统计学意义（P＞0.05）,而EV71检出率重症病例要明显多于普通病例（P＜0.05）.CoxA16检出率最高的为2010年（4.1%）,EV71检出率最高的是2012年（37.7%）.临床表现以皮疹、发热为主,重症病例并发脑膜脑炎、神经源性肺水肿等,死亡病例1例.结论 手足口病以4岁及以下幼儿多发,散居儿童和托幼机构儿童为高危人群,应当加强托幼机构手足口病的预防,加强相关人员的健康教育.     

手足口病流行期间主要病原体所致疱疹性咽峡炎的临床分析

目的 对手足口病流行期间主要病原体所致疱疹性咽峡炎进行临床分析.方法 收集94例手足口病流行期间住院的疱疹性咽峡炎患儿的临床资料,采用实时-聚合酶链反应技术检测肠道病毒71型（EV71）、A组柯萨奇病毒16型（CoxA 16）感染情况,并进行相关指标比较.结果 94例疱疹性咽峡炎患儿中,EV71阳性34例（36.17％,34/94）（EV71阳性组）,CoxA 16阳性31例（32.98％,31/94）（CoxA 16阳性组）.EV71阳性组和CoxA 16阳性组白细胞计数、空腹血糖、红细胞沉降率、超敏C反应蛋白均较正常明显升高,但两组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）;而心肌酶谱、肌酐、尿素氮在正常范围内,两组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）.EV71阳性组和CoxA 16阳性组年龄＜3岁比例、持续高热（腋温＞ 39℃）的发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05）,而EV71阳性组神经、呼吸、循环系统异常的发生率明显高于CoxA 16阳性组[26.47％ （9/34）比6.45％（2/31）、23.53％（8/34）比3.23％（1/31）、20.59％（7/34）比3.23％（1/31）],差异有统计学意义（P＜0.05）.94例疱疹性咽峡炎患儿中,11例为重症（11.70％,11/94）,EV71阳性组9例,CoxA16阳性组2例.2例因肺出血死亡,出现瘫痪1例,均为EV71阳性组.结论 同一时期疱疹性咽峡炎与手足口病的主要病原体可能具有平行性,手足口病流行期间的疱疹性咽峡炎患儿应纳入到手足口病来进行统一管理;而且EV71阳性患儿病情较CoxA 16阳性患儿重,检测病原体有助于判断预后.     

2007-2010年上海市静安区儿童手足口病情况分析和病原学研究

目的 分析上海市静安区2007 -2009年手足口病发病情况,并分析2009-2010年静安区监测点儿童手足口病病原型别及肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71) VP1区基因特征.方法 分析上海市静安区2007 -2009年手足口病流行概况;收集2009年4月～2010年12月辖区内儿童医院、幼托机构手足口病患儿咽拭标本,并进行实时荧光RT-PCR检测,确定手足口病病原型别.选择2010年不同月份共19份(含1份重症病例)EV71 PCR阳性标本,接种Vero细胞进行病毒分离培养,并设计特异引物对EV71 VP1全序列进行核苷酸序列测定、比对,构建系统发生树.结果 2008年静安区手足口病发病率明显增高,2009年发病数稳中略降,病例以发生在幼托机构为主.2009年病例咽拭标本实时荧光RT-PCR检测结果显示,柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CoxA16)阳性率为51.0％ (52/102),EV71阳性率为15.7％ (16/102),其他肠道病毒属阳性率2.9％ (3/102);2010年CoxA16和EV71阳性率均为31.3％ (36/115),其他肠道病毒属阳性率10.4％( 12/115).19株EV71分离株与2008年安徽阜阳EV71分离株同属C基因型中的C4a亚型,核苷酸同源性达95.0％ ～97.1％,氨基酸同源性为95.1％ ～98.3％.结论 静安区手足口病发病率2008年明显增高,2009年发病数稳中略降.2009-2010年静安区手足口病主要病原体为EV71和CoxA16,其他肠道病毒属引起的手足口病有所增加,需加强对其他肠道病毒属的鉴定.     

大鼠抗肠道病毒71型衣壳蛋白VP1特异性中和单克隆抗体的研制与应用

目的研制大鼠抗肠道病毒71型（EV71）衣壳蛋白VPl特异性中和单克隆抗体（单抗）,并用Westem印迹、ELISA和免疫荧光检测（IFA）等方法验证其特异性。方法采用单克隆杂交瘤技术人工合成包含EV71 VP1中和抗原决定簇位点SPT0的多肽偶联载体蛋白KLH,腹腔内注射免疫大鼠数次后,取有预期免疫应答的脾细胞与SP2／0小鼠骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA法筛选和有限稀释法亚克隆获得稳定的阳性单克隆杂交瘤细胞株并鉴定其IgG亚型。选取其中1株单克隆杂交瘤细胞系BC6,体外培养后注射于SCID裸鼠腹腔制备腹水以产生大量抗体,用ProteinA层析柱亲合纯化后获得纯化抗体。细胞培养微量中和试验测定该单抗中和EV71的滴度,并将其用于多种方法检测EV71特异性抗原。结果共获得8株稳定的单克隆杂交瘤细胞系,分别有6株属于IgGl亚型,2株为IgG2a亚型。通过制备腹水大量产生抗EV7l大鼠单抗BC6并纯化,其对EV71的中和滴度为1：32。BC6用于Western免疫印迹可特异检测大肠埃希菌表达的EV71VPl重组蛋白和EV71样品中的VPl,用于ELISA可灵敏特异地定性或定量检测EV71抗原含量,用于IFA可特异识别被感染Vero细胞内的EV71颗粒,而对柯萨奇病毒A16型无交叉反应。结论成功制备获得了大鼠抗EV71VPl的特异性中和单抗,可应用于Western免疫印迹、ELISA、IFA等方法,成为灵敏特异地检测EV71VPl或全病毒颗粒的有效工具。     

２０１０－２０１２年长沙市手足口病病原学监测结果分析

摘要：目的　探讨２０１０－２０１２年长沙市手足口病的病原学特征,为长沙市手足口病的预防和控制提供科学
依据。方法　使用肠道病毒通用引物和ＥＶ７１型、ＣＡｌ６型的特异性引物,对２０１０－２０１２年长沙市的２１７３
例手足口病患者的肛拭子、粪便、咽拭子等各类样本,进行实时荧光ＰＣＲ 检测,使用ＳＰＳＳ１３．０对检测结
果进行χ
２ 检验分析,犘＜０．０５为差异有统计学意义。结果　在收集到的２１７３ 例手足口临床病例样本中,
１５３２例核酸检测结果为阳性（７０．５０％）,其中８０２例为ＥＶ７１型病毒核酸阳性（３６．９１％）,３５５例检测为
ＣｏｘＡｌ６型阳性（１６．３４％）,３７５例检测到其他肠道病毒（１７．２１％）,ＥＶ７１型病毒阳性率显著高于其他两
项（χ
２＝３２６．４０５,犘＜０．０５）。男女性别比为（１．５６∶１）,发病年龄主要集中０～５岁儿童（９３．９７％）,尤
其是在１～３岁年龄组幼儿发病最高（占７２．８５％） （χ
２＝６７．２９５,犘＜０．０５）;流行季节几乎贯穿全年,以
４～６月最为流行。结论　２０１０－２０１２年在长沙地区手足口病易发于０～５岁儿童,应在４～６月重点加强这
一人群的预防和控制措施。
关键词：手足口病;荧光定量ＰＣＲ;病原学;流行病学
中图分类号：Ｒ７１９．３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０５ ０４８２ ０４     

尤溪县2008-2013年手足口病流行病学分析

目的 分析2008-2013年尤溪县手足口病流行特征,为制定预防控制手足口病应对措施提供科学依据.方法 对2008-2013年国家“疾病监测信息报告管理系统”网络直报的尤溪县手足口病资料进行流行病学分析.结果 2008-2013年累计报告手足口病1 920例,年均报告发病率为84.04/10万,不同年份手足口病的报告发病率差异有统计学意义（x^2=824.82,P＜0.01）;发病高峰呈双峰流行,分别为5～7月份和9～ 10月份;男女性别比平均为2.37∶1;手足口病高发于0～5岁儿童,年龄分布差异有统计学意义（x^2=33 990.35,P＜0.01）;以散居儿童及幼托儿童为主,职业分布差异有统计学意义（F=801.71,P＜0.01）.EV71型占53.85％,重症和死亡病例均为EV 71病毒感染所致.结论 尤溪县手足口病发病呈逐年上升趋势,防控形势严峻,应采取进一步明确工作职责、注重医疗救治、强化专业培训及加大督查力度等有效防控措施。     

EV71所致手足口病70例临床分析

目的 探讨肠道病毒71型（EV71）所致手足口病临床特点。方法对某院2008年5—8月收治的确诊『手足口病的70例患儿临床资料进行回顾性分析。结果70例手足口病患儿,48例（68．57％）为单纯手足口病,;例（25．71％）有中枢神经系统症状,3例（4．29％）有呼吸系统症状,1例（1．43％）出现循环系统症状;43岁者641（91．43％）;EV71特异性核酸检测,63例（90．00％）阳性,特异性EV71抗体检测70例均为阳性。70例患儿经。疗后,全部好转出院;随访1个月,均无不适,无后遗症发生。结论EV71所致手足口病临床表现较严重,可致：器官损伤。发病者以学龄前儿童为主,尤以≤3岁年龄组发病率高。     

2008-2012年河南省手足口病流行特征分析

目的了解掌握河南省手足口病流行特征和病原种类,为制定防控策略提供科学依据。方法采用描述性流行病学方法描述2008-2012年河南省手足口病流行特征,采用分析性统计学方法分析病原检测结果。结果 2008-2012年全省共报告手足口病病例338 792例,各年的发病率分别为12.63/10万、107.82/10万、101.97/10万、63.44/10万和73.28/10万;3～6月发病数占总发病例数的68.27%;3岁及以下年龄组病例占发病总数的87.61%;23 213例实验室诊断病例中,EV71阳性占62.43%,CA16阳性占12.97%,其他肠道病毒占24.60%。不同年份EV71、CA16、其他肠道病毒阳性构成差异有统计学意义(x2=819.68,P<0.05)。结论 2008-2012年河南省手足口病报告发病率逐年下降,发病有明显的季节性,散居儿童是主要发病人群;主要病原是EV71和CA16,EV71为优势流行株。