黄韧带骨化超微结构的实验研究

目的研究实验性黄韧带骨化的超微结构演变特点.材料和方法将重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱发的骨化过程不同时期的动物黄韧带组织行超薄切片,用电镜进行观察.结果rhBMP-2植入2周,黄韧带内胶原纤维增生,弹力纤维减少、断裂,成纤维细胞代谢旺盛,其间可见散在的不成熟软骨细胞、2种细胞胞浆中均可见大量的粗面内质网和线粒体;4周黄韧带内软骨细胞明显增多、分化成熟,胞浆内可见丰富的粗面内质网和核糖体、线粒体,靠近细胞分泌端的基质陷窝中可见数量不等的电子致密小体,基质中胶原纤维大量增生;6周成熟的软骨细胞体积增大,呈圆形,胞浆内富含线粒体,并可见线粒体与细胞膜融合形成分泌小泡,细胞周围基质中可见大量的电子致密小体,尚可见数量不等的新生弹力纤维;8周肥大的软骨细胞退变、坏死,表现为细胞核皱缩,细胞膜及核膜广泛碎裂,残留物附近出现数量更多的电子致密小体;尚可观察到幼稚骨细胞和骨细胞的存在.结论黄韧带骨化过程中软骨细胞来源于成纤维细胞的软骨化生.     

黄韧带骨化超微结构的实验研究

目的：研究实验性黄韧带骨化的超微结构演变特点。材料和方法：将重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱发的骨化过程不同时期的动物黄韧带组织行超薄切片，用电镜进行观察。结果：rhBMP-2植入2周，黄韧带内胶原纤维增生，弹力纤维减少、断裂，成纤维细胞代谢旺盛，其间可见散在的不成熟软骨细胞、2种细胞脑浆中均可见大量的粗面内质网和线粒体；4周：黄韧带内软骨细胞明显增多、分化成熟，脑浆内可见丰富的粗面内质网和核糖体、线粒体，靠近细胞分泌端的基质陷窝中可见数量不等的电子致密小体，基质中胶原纤维大量增生；6周：成熟的软骨细胞体积增大，呈圆形，脑浆内富含线粒体，并可见线粒体与细脑膜融合形成分泌小泡，细胞周围基质中可见大量的电子致密小体，尚可见数量不等的新生弹力纤维；8周：肥大的软骨细胞退变、坏死，表现为细胞核皱缩，细脑膜及核膜广泛碎裂，残留物附近出现数量更多的电子致密小体；尚可观察到幼稚骨细胞和骨细胞的存在。结论：黄韧带骨化过程中软骨细胞来源于成纤维细胞的软骨化生。     

骨形态发生蛋白受体-ⅠA的单核苷酸多态性对后纵韧带骨化的影响

后纵韧带骨化症(OPLL)的特征是异位骨形成替代韧带组织^[1-2]。OPLL在亚洲人中的发生率高于欧洲人和美国人,有报道^[3]显示,OPLL在日本的发生率为1.9%~4.3%,在中国为0.44%~8.92%。目前OPLL的发生机制仍未完全阐明,遗传因素和环境因素在其发生过程中均起作用。既往研究[4-9]表明,遗传因素是OPLL的主要因素,并且和环境因素相互作用。骨形态发生蛋白(BMP)是转化生长因子-β(TGF-β)超家族的成员,BMP结合骨形态发生蛋白受体-ⅠA(BMPR-ⅠA)、BMPR-ⅠB和BMPR-Ⅱ,通过Smad信号转导通路刺激成骨细胞分化^[10-11]。BMPR-ⅠA是BMPR家族的一种亚型,在BMP信号转导通路中起着重要调节作用^[12-14]。既往研究^[10]表明,BMPR-ⅠA在异位骨化的发生、发展中起着重要作用。本研究旨在探讨BMPR-ⅠA在OPLL发展中的作用,评估其是否为OPLL的易感基因,现报告如下。     

重组人骨形态发生蛋白—2诱导成骨作用的动物实验研究

骨形态发生蛋白（ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）的主要作用和用途是诱导新骨形成和促进骨损伤的修复。作用采用多种动物模型，观察了大肠杆菌表达的重组人ＢＭＰ－２（ｒｈＢＭＰ－２）的生物学作用。小鼠股部肌肉内植入试验结果表明，ｒｈＢＭＰ－２具有较强的诱导成骨活性。植入后第２１天，局部有硬有的形成，新生骨有骨皮质和不规则的骨髓腔，植入区局部的股骨增粗，股骨重量明显增加。组织形     

骨化的胸椎黄韧带中骨形态发生蛋白的表达、CT值测定与骨化成熟度的研究

目的研究胸椎骨化黄韧带的组织病理学、骨形态发生蛋白(BMP)的表达与 CT 值及其对应关系,为临床间接通过 CT 值确定黄韧带骨化的病理类型、制订治疗方案提供参考依据。方法病例组23例均为胸椎黄韧带骨化患者(排除由 DISH 病、强直性脊柱炎、氟骨症等继发的胸椎黄韧带骨化),并按黄韧带骨化病理分型分为成熟型和非成熟型,平均年龄51岁,病程2个月～9年。对照组5例均无黄韧带骨化,为胸椎外伤行手术治疗的青年患者,平均27岁。采用 CT 测定黄韧带各个部位;SP 免疫组化法测定 BMP。结果根据病理分型,病例组有49节非成熟型和21节成熟型黄韧带骨化。病例组 CT 值(547.2±131.4)显著高于对照组(137.7±10.6)(t=6.922,P=0.000),而且成熟型骨化(702.9±17.7)显著高于非成熟型骨化(480.5±180.2)(t=5.623,P=0.000)。对照组和成熟型骨化中 BMP 均呈阴性表达,而在非成熟骨化中呈现高表达,成熟型骨化与非成熟型骨化表达有显著差异(x~2=70.000,P=0.000)。结论 CT 值与病理结果及 BMP 评价黄韧带骨化成熟度基本一致,可通过 CT 值术前评估胸椎黄韧带骨化的成熟度,从而为制订治疗方案提供理论依据。     

BMP—2 mRNA在实验性黄韧带骨化组织中的表达及其意义

目的从分子水平研究BMP-2在黄韧带骨化过程中的作用机理.方法以rhBMP-2诱导的黄韧带骨化(实验组,O组)为研究对象,分别于诱导物植入后2、4、6周取实验节段黄韧带,提取总RNA,采用Dot blot和Northern blot方法检测其BMP-2 mRNA的表达程度,设立PBS溶液/明胶海绵植入为实验对照组(EC组),未手术动物为阴性对照组(N组),pSBMP-2质粒为阳性对照组(P组).结果Dot blot和Northern bloe放射自显影图像显示rhBMP-2植入2周时,黄韧带内BMP-2 mRNA表达程度最高,然后逐渐下降,到6周时明显减弱,与病理组织学研究中所见的韧带组织中成纤维细胞软骨化生的活跃程度呈正相关.实验对照组和阴性对照组均未见BMP-2 mRNA表达.图像灰度扫描示02组、04组和06组BMP-2 mRNA的表达程度分别为0.615±0.1484、0.443±0.0982、0.232±0.0749.结论rhBMP-2诱导的骨化过程中黄韧带组织内存在不同程度BMP-2 mRNA的表达,其表达水平与成纤维细胞软骨化生的活跃程度呈正相关;内源性BMP-2可能参与黄韧带骨化的启动和持续发展.     

重组人骨形态发生蛋白—2治疗开放性胫骨骨折

最大限度地提高骨折愈合率、避免再骨折并发症,是开放性胫骨骨折治疗的关键。该研究采用前瞻、随机、对照及单盲的方法,评价重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)促进开放性胜骨干骨折愈合及减少再次干预措施的安全性与疗效。将450例开放性股骨干骨折随机分为三组:标准治疗(带锁髓内钉固定及常规软组织处理)的对照组(A组)、标准治疗 0.75mg/ml rhBMP-2植入(总剂量为6mg)组(B组)及标准治疗 1.5mg/ml rhBMP-2植入(总剂量为12mg)组(C组)。88％的患者应用静力性带锁髓内钉固定,钉直径为9mm。用可吸收牛Ⅰ型胶原海绵作为rhBMP-2的载体,在闭合切口前将rhBMP-2胶原海绵置于骨折端表面及粉碎     

重组人骨形态发生蛋白-2用于人工关节生物固定方法的研究

目的 探讨复合重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP2)植入体对骨-假体界面骨长入及结合强度的作用。方法将多孔金属表面植入体(PCA)与复合．rhBMP2的PCA植入体、HA涂层植入体及：PCA表面喷涂HA植入体植入犬皮质骨并综合运用X线摄片、软X线照相、不脱钙骨组织磨片、荧光显微镜检查、骨组织计量学分析及生物力学测定等方法对骨-植入体界面的骨长入及界面的结合强度进行了比较分析。结果术后软X线照相、组织学、骨组织计量学及生物力学比较分析显示复合rhBMP2的植入体在各时间组的新生骨形成率和界面剪切强度均优于其它各组;以4周时最为明显,且差异有非常显著意义。结论植入体复合rhBMP2后在促进早期骨-假体界面的骨长入和结合强度方面优于其它各种方法,有利于早期骨与假体间的结合和固定。     

脊柱后纵韧带骨化及黄韧带骨化的易感基因研究进展

脊柱后纵韧带骨化(ossification of posterior longitudi-nal ligamentum,OPLL)及黄韧带骨化(ossification of theligamentum flavum,OLF)均为发生于脊柱韧带的疾病,是导致颈胸部椎管狭窄、脊髓压迫的常见原因。外界因素及易感基因是影响OPLL与OLF发病率的重要原因。外界致病因子如慢性退行性变,内分泌和代谢性疾病,身高/体     

重组人骨形态发生蛋白-2/异体骨复合骨用于兔腰椎融合的显微CT研究

目的 观察重组人骨形态发生蛋白-2/异体骨复合骨、自体骨与异体骨分别用于兔腰椎融合后,不同时间点融合骨组织微结构的变化.方法 成年雄性新西兰大白兔45只,随机分为3组,每组15只.在每只兔的L5、L6横突间行腰椎后路植骨融合术,各组分别植入复合骨条,自体髂骨条以及单纯异体髂骨条,每组于术后第3、4、5周各处死5只大白兔,分离保存融合节段标本.用显微cT扫描后行骨组织定量分析.结果 术后3个时间点中,复合骨组和自体骨组新生骨小梁的强度和形态均要优于异体骨组且差异有统计学意义(P＜0.05).第3周,复合骨组的组织骨密度(TMD)为(433.98±2.64)mg/cm3,高于自体骨组(424.81±4.69)mg/cm3(P＜0.05);第4周,复合骨组的骨小梁厚度(Tb.Th)为(0.097±0.004)mm,高于自体骨组(0.082±0.003)mm(P＜0.01);第5周,复合组的组织矿含量(TMC)为(7.70±0.30)mg,高于自体骨组(7.00±0.24)mg(P＜0.01).结论 在兔腰椎后路横突间植骨融合中,重组人骨形态发生蛋-2/异体骨复合骨的成骨效应不低于自体骨,优于异体骨.     

Activation and localization of cartilage-derived morphogenetic protein-1 at the site of ossification of the ligamentum flavum

Localization and expression of cartilage-derived morphogenetic protein (CDMP)-1 in tissues at the site of ossification of the ligamentum flavum (OLF) were examined by immunohistochemistry and in situ hybridization. The CDMP-1 protein and messenger ribonucleic acid (mRNA) were localized in spindle-shaped cells and chondrocytes in the OLF tissues. CDMP-1 was not detected in cells in non-ossified sites. These data indicate that CDMP-1 is locally activated and localized in spindle-shaped cells and chondrocytes at the site of OLE. Given the previously reported promoting action of CDMP-1 for chondrogenesis, the current results suggest that CDMP-1 may be involved in the progression of OLF, leading to the narrowing of spinal canal and thus causing severe clinical manifestations.     

胸椎黄韧带骨化的病理组织学研究

目的：探讨黄韧带骨化的病理变化特点和发生机理。方法：利用组织病理学、组织化学和影像学检查对比研究正常黄韧带和12例骨化黄韧带的病理形态学特点。结果：组织学上可见病变早期出现胶原纤维肿胀、融合,进一步发生软骨化生,最终出现钙化和骨化。在肿胀融合的胶原纤维和软同有化生处可见阿新蓝（pH2.5）阳性的粘液性物质,根据病理学检查特点,结合影像学表现可将黄韧带骨化分为结节型（增生性）、周围型和弥漫型3种类型。结论：韧带的退行性改变是黄韧带骨化的基本原因;胶原纤维的肿胀融合及其粘液样变性是黄韧带骨化的起始病变;黄韧带骨化的大体类型代表着同一病变发展的不同阶段。     

胸椎黄韧带骨化症的影像诊断

目的:探讨胸椎黄韧带骨化症的诊断及影像学特点。方法:分析90例胸椎黄韧带骨化症患者的CT和/或MRI资料,并根据影像学特征进行分类。按照MRIT2WI轴位脊髓及硬膜囊的受压迫程度分为轻度、中度、重度。9例获CT或/和MRI检查2年以上随访的患者,选择扫描条件、部位一致的骨化节段对比研究其变化情况。结果:MRI扫描的73例患者共发现黄韧带骨化节段421个。骨化节段呈跳跃性分布35例(46.58%)。多节段发生68例(93.15%)。T2WI轴位扫描的365个节段呈现有压迫:轻度193个节段,中度80个节段,重度92个节段。9例2年以上影像随访患者,随访前CT示均匀性骨化的9个节段,随访时骨化块大小密度无变化;随访前不均匀性骨化6个节段,随访时骨化块增大、密度改变。随访前MRI示骨化为无信号9个节段,随访时骨化块的形态、内部信号、对脊髓的压迫程度均无改变;随访前低信号18个节段,随访时15个节段有不同程度的生长,即对脊髓和硬膜囊的压迫程度加重,骨化块形态改变,3个节段只有骨化块信号的改变,脊髓的受压程度无明显变化。结论:胸椎黄韧带骨化多数病例为多节段,分布无明显规律性。骨化程度与对脊髓的压迫程度并不一致。CT和MRI检查可以作为判断胸椎黄韧带骨化是否成熟的手段。     

Ossification of the ligamentum flavum of the thoracic spine in adult kyphosis

Summary Ossification of the ligamentum flavum has been recognised as a definite clinical entity as is ossification of the posterior longitudinal ligament. The incidence of both is high in Japan. This study demonstrates that the incidence of ossification of the ligamentum flavum in persons who have a kyphosis of the thoracic or lumbar spine is higher than in those who do not. It is considered that localised mechanical stress affecting the ligamentum flavum is a contributing factor to the development of ossification, together with the generalised factors which may favour bone formation. However, the aetiology of this lesion is still obscure as is that of ossification of the posterior longitudinal ligament.

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Résumé L'ossification du ligament jaune représente une entité clinique définie, de même que celle du ligament longitudinal postérieur. Les deux affections sont fréquentes au Japon. Cette étude montre que l'ossification du ligament jaune s'observe plus souvent chez les sujets qui présentent une cyphose dorsale ou lombaire. On peut penser que les contraintes mécaniques localisées au ligament jaune constituent un facteur contribuant au développement de l'ossification, et s'ajoutant aux facteurs généraux susceptibles de favoriser la formation osseuse. Cependant, l'étiologie de cette affection demeure mystérieuse de même que l'ossification du ligament longitudinal postérieur.

     

胸椎黄韧带骨化的流行病学调查———９９３例以胸部症状来诊患者的ＣＴ观察

目的:研究胸椎黄韧带骨化(ossification of the ligamentum flavum,OLF)发生年龄、节段分布、形态变化等的流行病学特点。方法:回顾性分析2010年2月以胸部症状来我院就诊的993例患者(男506,女487,年龄5～102岁,平均60岁)的胸部多排探测CT(multidetector computed tomography,MDCT)片、轴位片结合矢状位CT片,分析胸椎黄韧带骨化的患病率及发生的节段、厚度、位置、硬膜囊压迫等情况,观察性别、年龄及发生节段等与OLF的关系。患病率采用《北京市2008年人口年龄构成统计》进行人群标化。结果:总体标化患病率为63.9%;男性标化患病率(68.5%)高于女性(59.0%);50~59岁年龄组的患病率最高(79.2%),但10~19岁人群也有OLF发生,其患病率为50.0%;T10~T11(44.0%)和T11~T12(41.6%)节段OLF的患病率亦较高。结论:被调查人群中,胸椎OLF患病率较高,出现年龄较早,发生于下胸段多于中上胸段,患病率与年龄具有一定的相关性。     

胸椎黄韧带骨化的临床病因分析

目的 通过对142例胸椎黄韧带骨化症（TOLF）患者临床资料及影像学特点的回顾性研究,从临床的角度探讨该病的不同病因.方法 1989年7月至2005年11月,收治胸椎黄韧带骨化症142例,手术治疗121例.从临床病因学的角度分为三大类型：（1）原发性TOLF（组1,90例）,不合并与黄韧带骨化相关的疾病,且Ca、P、AKP均正常;（2）全身骨化疾病性TOLF（组2,30例）,其中强直性脊柱炎6例,弥漫性特发性骨肥厚症（DISH）3例,氟骨症10例,后纵韧带骨化症（OPLL）11例;（3）脊柱局部病变性TOLF（组3,22例）,其中陈旧性脊柱骨折5例,脊柱结核4例,椎体后缘骨内软骨结节13例.分析各组临床及影像特点,并测量胸椎、胸腰段后凸角,椎体楔变角.按Epstein标准评定手术效果.结果 （1）组1病变类型以连续型居多（67/90,74%）,以局灶型最少（4/90,5%）;组2中,以连续型居多（21/30,70%）,无局灶型病例,发病节数最多（平均每例6.2节）;组3以局灶型多见（18/22,82%）.（2）组1下胸椎及胸腰段最多见（225/486,47%）;组2中病变多累及整个胸椎,12例颈椎、腰椎同时发生OLF;组3骨化部位与原发疾病部位相近.（3）组1 81%（73/90）胸椎曲度无异常,组2 87%（26/30）有异常,组3 82%（18/22）无异常.结论 TOLF由不同病因引起,本研究发现与全身骨化性因素、脊柱的载荷改变、退变等因素有关;应根据病因进行临床分类.     

胸椎黄韧带骨化患者黄韧带细胞的体外培养及初步鉴定

目的探讨胸椎黄韧带骨化的发病机理。方法2004年3月-2004年12月对8例行后路减压的下胸椎黄韧带骨化患者（男性5例，女性3例，平均年龄55岁）进行术中取材，采用组织块培养法，体外培养下胸椎黄韧带骨化患者非骨化区域的黄韧带细胞，并进行细胞化学，免疫细胞化学等方面研究；同时对7例急性外伤性下胸椎压缩骨折行胸椎后路减压术的患者（男性5例，女性2例，平均年龄28岁）进行术中取材，体外培养青壮年患者的下胸椎黄韧带细胞作为正常对照。结果体外成功地培养出黄韧带细胞15株，其中骨化患者黄韧带细胞8株（OLF1～OLF8），正常黄韧带细胞7株（NLF1～NLF7），黄韧带细胞可以在体外增殖和传代，通常正常黄韧带生长较慢，而骨化患者的黄韧带细胞则生长较快，并且可形成典型的钙结节样结构；80％以上的细胞呈碱性磷酸酶（ALP）强阳性反应；细胞内的ALP活性及其合成的骨钙素（BGP）含量均较正常对照组明显升高；细胞浆有BMP-2与TGF—betal的阳性表达，表明体外培养的下胸椎黄韧带骨化患者非骨化区域的黄韧带细胞呈现典型的成骨细胞表型特征：而正常黄韧带细胞主要为成纤维细胞表型。结论胸椎黄韧带骨化患者的非骨化区域中存在大量具备典型的成骨细胞表型特征的细胞，可能被骨形成蛋白等骨生长因子所调控。     

Thoracic cord compression caused by contiguous multilevel ossification of ligamentum flavum in Chinese patients

OBJECTIVE: To explore the epidemiology, clinical presentation, radiology and surgical treatment outcome in Chinese patients with myelopathy caused by contiguous multilevel ossification of ligamentum flavum. METHODS: Medical notes and imaging data of 18 Chinese patients (14 males and 4 females, aged 43-72 years, mean: 57 years) with myelopathy caused by contiguous multilevel ossification of ligamentum flavum were studied retrospectively in this article. The diagnosis was based on clinical examination, X-ray films, computerized tomography (CT) and magnetic resonance imaging (MRI) scanning results and pathological results. Sixteen patients were treated by laminectomy and two by laminoplasty. The average follow-up duration was 34 months (range, 28-49 months). The outcome was evaluated by Japanese Orthopaedics Association (JOA) score. RESULTS: The average time for occurring clinical symptoms was 7.5 months (range, 2 days-16 months). All the 18 cases presented with clinical evidences of chronic and progressive thoracic spinal cord compression, which included bilateral leg weakness, spastic gait, numbness in lower limbs, paresthesia in terminal and perineum, and urinary incontinence. Neurological examination revealed severe spastic paraparesis, absence of abdominal reflexes, and reduction of the sensory function below the compression level. The mean JOA score before operation was 3.6 (range, 0-6). MRI and CT scans of the thoracic spine confirmed the presence of contiguous multilevel ossification of the ligamentum flavum. The mean recovery rate after surgery in terms of JOA score was 66.3% (range, 33.3%-100%), with a mean final JOA score of 8.3. Thoracic decompression laminectomy or laminoplasty could result in a good postoperative outcome. CONCLUSIONS: Contiguous multilevel ossification of the ligamentum flavum is not a common cause of myelopathy in Chinese population and should be treated as early as possible. MRI and CT scan examinations may diagnose the presence of thoracic ossification of ligamentum flavum (OLF). Posterior decompression, especially with en bloc dissection of the laminae, can obtain satisfactory results.     

胸椎黄韧带骨化症的诊断与手术治疗

目的：回顾性地研究了32例胸椎黄韧带骨化症（OTLF）的临床表现,诊断及手术治疗效果。方法：对1990年～1999年收治的32例OTLF病人的临床表现、影像学特征和手术方法及结果进行描述。其中黄韧带骨化95处,合并胸椎间盘突出（TDH）8例,后纵韧带骨化（OPLL）6例。32例病人均经手术治疗。结果 ：32例均经病理证实为OTLF。30例随访5～72月。根据下肢感觉和运动功能恢复情况进行评价：优11例;良10例;可7例;差2例,优良率73.3%,有效率93.3%。无严重并发症发生。结论：OTLF临床表现无特征性：MRI结合CT检查是诊断OTLF的最佳影像学手段;手术减压是唯一有效的治疗方法。