p73基因在肺腺癌组织中的表达

目的：p73基因在肺腺癌与癌旁正常组织中表达情况及突变的研究。方法：采用竞争性定量RT－PCR和PCR－SSCP方法检测62例肺腺癌及其癌旁非癌组织中p73基因突变情况。结果：（1）通过定量PCR分析，肺腺癌组织中p73的表达量与正常对照组表达量存在显差异（P＜0．01）。（2）在21例中高分化标本中检出9例呈中高表达，在41例低分化标本中检出32例呈中高表达，两之间存在显差异（P＜0．01）；（3）p73基因表达程度在29例Ⅰ-Ⅱ期标本中检出14例呈中高表达，33例Ⅲ-Ⅳ期标本中检出18例呈中高表达，两之间无显差异（P＞0．05）。（4）PCR－SSCP未检测出基因突变。结论：p73基因mRNA的表达可能与肺腺癌发生，发展和分化程度有关，与临床分期无关。     

上皮性钙粘蛋白与肝细胞癌侵袭、转移的关系研究

目的探讨上皮性钙粘蛋白（E-Cadherin）在人肝细胞癌（HCC）中的表达及其与肝癌侵袭、转移性的关系。方法选择56例有完整随访资料的原发性肝细胞癌及相应癌旁组织标本、20例正常肝组织标本，用RT-PCR方法检测E-Cadherin mRNA的表达；用免疫组织化学方法检测E-Cadherin的表达。结果1．E-Cadherin在肝细胞癌组织中的表达低于癌旁组织和正常组织，差异有显著性意义（P〈0．05）；癌旁组织和正常组织中E-Cadherin的表达无显著性差异（P〉0．05）；2．E-Cadherin在肝癌组织中的表达与术后复发时间呈正相关（P〈0．05；R^2=0．786），与病理分期呈负相关（P〈0．05；R^2=0．678）；3．癌组织中E-Cadherin表达与肝外转移呈负相关（P〈0．05；R^2=0．704）；4．癌旁组织中E-Cadherin表达与术后复发时间呈正相关（P〈0．05；R^2=0．742）。结论E-Cadherin与肿瘤的分化程度，侵袭转移能力，复发倾向相关，在临床中有望作为肿瘤分化、复发、转移的评估指标之一。     

MMP-2表达与肝细胞癌侵袭、转移的关系研究

目的：探讨人肝细胞癌中基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）的表达与肝癌侵袭、转移的关系。方法：选择52例有完整随访资料的原发性肝癌及相应癌旁组织标本、20例正常肝组织标本，用RT-PCR方法检测癌、癌旁组织及正常组织中MMP-2mRNA的表达。结果：①MMP-2mRNA在肝癌中的表达高于癌旁组织和正常组织，差异有统计学意义（P〈0．05），癌旁组织和正常组织中MMP2mRNA的表达差异无统计学意义（P〉0．05）；②癌组织中MMP-2mRNA表达与术后复发时间呈负相关（r^2=0．868，P〈0．05），与病理学分级呈正相关（r^2=0．786，P〈0．05）；③癌组织中MMP-2mRNA的表达与肝外转移呈正相关（r^2=0．812，P〈0．05）；④癌旁组织中MMP-2mRNA的表达与术后复发时间呈负相关（r^2=0．854，P〈O．05）。结论：MMP-2mRNA与肿瘤的分化程度，侵袭、转移能力，复发倾向相关，在临床中可望作为肿瘤分化、复发、转移的评估指标之一。     

S100A4基因差异表达与肾癌细胞分化、转移关系的研究

目的 探讨S100A4基因mRNA表达与肾癌细胞分化、转移的关系。方法 提取31对肾癌及正常组织配对标本的总RNA，用RT—PCR方法测定S100A4基因的表达，并结合临床资料，对S100A4基因差异表达与肾癌病人临床表现的相关性进行研究分析。结果 29例标本肿瘤组织中S100A4基因mRNA表达明显高于癌旁正常肾组织；其中低分化肿瘤组病人的阳性表达率高于高分化组（7．94vs5．06，P〈0．001）；发生转移（包括淋巴结转移和远处转移）者高于无转移者（9．61vs5．53，P〈0．001）；低年龄组病人（≤50岁）阳性表达率与高年龄组（〉50岁）差异无显著性（6．31vs6．66，P〉0．05）；肾颗粒细胞癌组与透明细胞癌组差异无显著性（6．98vs6．02，P〉0．05）；肿瘤直径≤5cm组与〉5cm组差异无显著性（5．95vs6．93，P〉0．05）。结论 S100A4基因表达与肾细胞癌分化有关，癌组织S100A4mRNA测定有助于判定肿瘤的预后；S100A4基因差异表达与肾细胞癌转移明显相关，肾癌组织中S100A4基因mRNA可望作为肾细胞癌的病情发展及指导临床治疗的标记物之一。     

Bmi-1蛋白在肺癌组织中的表达及临床意义

目的研究原癌基因鼠类淋巴瘤滤过性病毒致癌基因（Bmi-1）在人非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达,探讨Bmi-1作为新的肿瘤标志物在NSCLC临床诊断、分期及预后评估中的意义。方法应用免疫组化方法检测48例肺癌组织、29例癌旁肺组织及13例肺良性病变组织中Bmi-1蛋白的表达情况,并分析与NSCLC临床病理特征之间的关系。结果Bmi-1水平的表达在NSCLC组织中明显高于肺良性病变（P〈0．05）,而在肺良性病变组织及癌旁组织之间无明显差异（P〉0．05）。Bmi-1在鳞癌和腺癌组织中的表达并无明显差异（P〉0．05）;在低分化肺癌中的表达明显高于中分化和高分化肺癌（均P〈0．05）,但中分化和高分化肺癌间无明显差异（P〉0.05）;Ⅲ、Ⅳ期肺癌标本中Bmi-1阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期肺癌,差异有统计学意义（均P〈0．05）,但Ⅰ、Ⅱ期肺癌间无明显差异（P〉0.05）;Bmi-1在有淋巴结转移的肺癌患者中阳性表达率明显高于无淋巴结转移患者（P〈0．05）。结论Bmi-1在肺癌组织中表达增高,并与肺癌的分期、淋巴结转移相关;Bmi-1可作为评估肺癌患者病变范围和预后的标志物。     

肺癌中细胞凋亡水平和p73基因的转录表达的研究

目的：通过观察肺癌癌组织,对应癌旁组织和远癌肺组织中细胞凋亡及p73基因转录表达水平的变化,探讨细胞凋亡及P73基因转录表达水平与肺癌发生,发展的关系。方法：采用TUNEL及RT－PCR技术检测32例非小细胞肺癌癌组织,癌旁组织和7例肺良性病变组织,以及对应正常肺组织细胞凋亡和P73 mRNA的表达水平,并结合临床病理学资料进行统计学分析,结果：（1）肺癌组织中的凋亡指数明显高于癌旁肺组织和远癌肺组织（P＜0．01）,细胞凋亡水平与肺癌组织学类型,分化程度和P－TNM分期无明显关系（P＞0．05）;（2）肺癌组织中p73 mRNA表达水平和表达率明显高于癌旁肺组织,远癌肺组织和肺良性病变组织（P＜0．01）;（3）组织中凋亡指数的升高和P73基因转录表达水平的增加呈显著的正相关（P＜0．01）。结论：肺癌组织中存在细胞凋亡水平的升高和P73基因的过度转录表达。     

Mus81和GEN1基因在肺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究肺癌组织中Mus81及GEN1的表达及其临床意义。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot检测30例肺癌组织及其相应癌旁组织中Mus81及GEN1 mRNA和蛋白的表达情况,分析其临床意义。结果30例肺癌组织中Mus81mRNA和蛋白表达水平低于相应癌旁组织,差异具有统计学意义（t=-3．529,P〈0．05;t=-4．273,P〈0．05）;30例肺癌组织中GEN1 mRNA和蛋白表达水平同癌旁相比无统计学差异（t=-2．006,P〉0．05;t=0．957,P〉0．05）。30例肺癌组织中Mus81表达水平和GEN1表达水平无明显相关性（P〉0．05）。结论肺癌组织中Mus81表达低于癌旁组织,提示Mus81表达下调可能和肺癌的发生相关;GEN1在肺癌组织中的表达水平同癌旁相比无统计学差异,提示GEN1在肿瘤的发生、发展过程中可能不起主要作用;肺癌组织中Mus81的表达水平和GEN1的表达水平无明显相关性。     

胃癌相关易感基因W41的原位表达分析

目的：进一步分析人胃癌相关易感基因W41在胃癌组织的表达情况。方法：利用循环引物介导原位标记（C-PRINS）技术，检测胃癌标本的W41mRNA表达，并采用生物素连接辣根过氧化物酶标记，DAB显色法，以提高石蜡切片检测mRNA表达的敏感性。用Image-Pro Plus图象分析软件计算每个细胞胞浆中阳性染色信号的单位面积光密度值（IOD），每例标本IOD的平均值代表W41表达水平。结果：W41在胃癌、有肠化癌旁组织、无肠化癌旁组织和正常胃黏膜中表达结果经，检验有显著性差异（F=8．810，P=0．001）。组间比较结果示胃癌组织表达高于正常组织（P〈0．05），癌旁肠化组织和无癌旁肠化组织的表达亦高于正常组织（P〈0．05），而癌与癌旁肠化组织和无癌旁肠化组织之间的表达没有差异（P〉0．05）。W41在腺癌和印戒细胞癌的表达经t检验无显著性差异（t=1．304，P=0．029）。结论：W41在胃癌及癌旁组织中表达高于正常胃黏膜，在肠化组织有明显表达，提示W41表达水平与胃黏膜癌变有关；C-PRINS法在信号强度、操作便利和时间上明显优于经典原位杂交。     

GLI1基因在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨胰腺癌组织中Hedgehog信号通路成员GLI1 mRNA的表达情况及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测25例胰腺癌组织及其相应近癌旁组织、癌旁正常组织GLI1 mRNA的表达,并分析胰腺癌组织中GLI1 mRNA表达与肿瘤大小、分化程度及转移的关系。结果GLI1 mRNA在胰腺癌组织、近癌旁组织及癌旁正常组织中的阳性表达率分别为68．0％（17／25）、24．0％（6／25）、0;胰腺癌组织GLI1 mRNA阳性表达率显著高于近癌旁组织及癌旁正常组织（均P〈0．01）;GLI1 mRNA阳性表达率与肿瘤分化程度相关（P=O．014）,与肿瘤大小、有无淋巴结及远处转移无关（P〉0．05）。结论GLI1 mRNA在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,且其表达率与肿瘤分化程度相关。检测GLI1表达有助于胰腺癌的诊断,可能作为判断胰腺癌恶性程度及预后的指标。     

肺癌中GRIM-19 mRNA的表达及其临床意义

目的了解干扰素／维甲酸诱导凋亡相关基因（GRIM-19）在肺癌中的表达及其临床意义。方法RT-PCR检测40例肺癌患者的癌组织和癌旁组织中GRIM-19mRNA表达水平,用Western blot法验证20例肺癌组织中GRIM-19蛋白表达情况,并分析GRIM-19mRNA表达与临床病理参数之间的关系。结果肺癌组织中GRIM-19mRNA表达水平低于癌旁组织,两组间差异有显著性（P〈0．05）,并且mRNA表达水平的降低伴随有蛋白表达水平的相应下降。GRIM-19mRNA水平与临床病理分期之间有关联（P〈0．05）,Ⅰ-Ⅱ期Grim19mRNA表达量显著高于Ⅲ～Ⅳ期中的表达,而与患者性别、年龄、组织分型、吸烟指数之间均无关联（P〉0．05）。结论GRIM-19mRNA的表达下降是肺癌发生过程中的重要事件,可能与肺癌的发生及进展有关。     

环氧化酶-2基因在人乳腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨环氧化酶2(COX-2)在乳腺癌发生发展中的表达及其临床意义。方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测了30例乳腺癌患者的癌组织及配对的癌旁组织、6例远离肿瘤的正常乳腺组织中COX-2 mRNA的表达;同时应用免疫组织化学技术检测了COX-2蛋白的表达。结果 COX-2 mRNA在86％的乳腺癌组织(26／30)中表达显著增高,与β-肌动蛋白产物带的积分吸光度比值为0～1．180;癌旁组织表达明显增高,吸光度(A)值为0～0．652：在正常乳腺组织中几乎不表达。癌组织与癌旁组织、正常乳腺组织COX-2 mRNA的表达差异有显著意义。免疫组织化学显示80％(24／30)的乳腺癌组织COX-2呈阳性表达;58％(17／30)癌旁组织COX-2呈不同程度阳性表达,两者比较差异有显著意义;正常乳腺组织未见COX-2蛋白表达。结论 COX-2 mRNA及COX-2蛋白表达在部分癌旁病变中增高,在绝大多数乳腺癌组织中明显增高。COX-2的过度表达发生在乳腺癌的早期,并在其发生发展中起重要作用。为选择性COX-2抑制剂用于乳腺癌高危人群的预防提供了理论依据。     

转移相关基因cd44v在胃癌中的表达及其临床意义

为探讨ｃｄ４４ｖｍＲＮＡ拼接和异常表达与胃癌临床病理之间的相关意义,用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测正常胃粘膜、癌旁组织及癌组织的转移相关基因ｃｄ４４ｖｍＲＮＡ表达。对４０份胃组织标本（２０份胃癌组织,１０份癌旁组织,１０份正常胃粘膜）中ｃｄ４４ｖ变异表达产物进行检测。结果显示：有ｃｄ４４ｖｍＲＮＡ阳性表达者：胃癌组织１６／２０,癌旁组织５／１０,正常粘膜０／１０;有淋巴转移者１５／１６,无淋巴结转移者１／４,表达有差异（Ｐ＜０．０５）;有远处转移者５／５。所有４０份胃癌组织、癌旁组织、正常粘膜都表达标准型ｃｄ４４（ｃｄ４４ｓ）,而且两型胃癌中ｃｄ４４ｖ表达有差异（Ｐ＜０．０５）,高分化腺癌（肠型）中２／５,低分化癌（弥漫型）中１４／１５。提示ｃｄ４４ｖｍＲＮＡ在胃癌中的异常表达有普遍性,既可能是早期癌变出现的生物学指标,也可能是判断胃癌转移的有用指标。     

趋化因子受体CXCR4在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的探讨CXCR4在肺癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测84例肺癌组织、20例正常肺组织中CXCR4的表达,其中84例肺癌中包括36例淋巴结转移。结果 CXCR4蛋白在肺正常组织表达较低,在84例肺癌组织中的阳性表达率高达60.7%(51/84)。CXCR4的表达与肺癌患者的年龄、性别无关,而与分化程度、TNM分期、病理类型和淋巴结转移有相关性。低分化组肺癌组织CXCR4阳性表达率(78.95%)明显高于高中分化组(45.65%)。临床Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期的肺癌组织CXCR4蛋白阳性表达率分别为50.81%和86.96%;伴淋巴结转移组肺癌CXCR4蛋白阳性表达率为77.78%,没有淋巴结转移组阳性表达率为47.92%;而病理类型中腺癌的阳性表达较高(86.36%)。结论肺癌组织中高表达的CXCR4很可能是促进肺癌侵袭和转移的一个重要分子。     

Paxillin基因在肺癌组织中的表达研究

目的:研究桩蛋白(Paxillin)基因在人肺癌组织中表达,探讨它与肺癌患者病理特征、临床分期、淋巴结转移、预后的关系。方法:应用免疫组织化学S-P方法检测120例肺癌、80例癌旁无癌浸润的肺组织、53例正常肺组织的桩蛋白的基因表达。结果:肺癌、癌旁无癌浸润肺组织、正常肺组织桩蛋白的阳性表达率分别为39.1％(47/120),81.3％(65/80),83.3％(44/53),三者的阳性表达差异有高度显著性(P<0.05)。桩蛋白表达低下与肺癌P-TNM分期、病理分级、淋巴结转移有关(P<0.05),小细胞肺癌(SCLC)中桩蛋白的阳性表达率6.251％(1/16),显著低于非小细胞肺癌(NSCLC)桩蛋白的阳性表达率44.2％(46/104)(x~2=8.40,P<0.05)。结论:肺癌组织中Paxillin基因的表达低下与肺癌侵袭转移有关,可作为评价肺癌浸润转移的生物学标志之一。     

人肺癌组织一氧化氮合酶及总RNA表达水平的梯度改变

目的：探讨一氧化氮合酶（NOS）在肺癌组织中的表达与作用机制。方法：按自身配对原则收集人肺癌癌灶组织、癌灶周围组织及远离癌灶的肺组织各26份,作病理组织学检查并制备肺组织匀浆,分析不同肺组织中总癌周围组织＞远离癌灶肺组织的梯度分布;癌组均显著高于癌周及远癌组织（P＜0．001）,癌组织中总RNA水平与NOS浓度呈显著正相关（P＜0．01）;鳞癌组与腺癌组间总RNA和NOS的表达水平未见明显差异（P＞0．05）;分化程度高的肺癌组NOS表达水平较中分化和低分化肺癌组低;癌灶组织中NO浓度明显高于远癌组织（P＜0．05）。结论：肺癌组织中RNA的高度表达说明肿瘤组织中蛋白质合成旺盛,而NOS的过度表达则可能与加速生成NO以杀伤肿瘤细胞有关。     

甲硫腺苷磷酸化酶基因在非小细胞肺癌中的转录表达及临床意义

目的 探讨甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)基因在非小细胞肺癌中的转录表达变化情况及其临床意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了15例新鲜肺癌标本及相应癌旁组织中MTAP mRNA的表达情况。同时运用Western印迹法检测了MTAP蛋白质的表达情况。结果 MTAP在73．30%,(11／15)的肿瘤标本中不表达或转录水平降低,而MTAP在癌旁对照组织中的表达率却高达93．3％(14／15);对于11例RT-PCR分析认定低表达或不表达的样本,再通过Western印迹方法进一步验证,发现与RT-PCR结果一致。另外,MTAP在肺腺癌和鳞癌中低表达现象差异无显著意义,但在中／低分化肺癌中的低表达与高分化癌相比增高,差异有显著意义。结论 MTAP基因低表达或丢失可能与肺癌的恶性程度密切相关。     

Bcl-xL在非小细胞肺癌中的表达研究

目的:观察非小细胞肺癌组织与癌旁组织中Bcl-xL的基因转录和蛋白表达水平,探讨Bcl-xL在非小细胞肺癌发生发展中的可能作用,为非小细胞肺癌的诊断和治疗提供参考。方法:反转录PCR和免疫印迹的方法分别检测60例临床确诊的非小细胞肺癌组织与癌旁组织中Bcl-xL基因表达和Bcl-xL蛋白的水平,并与肺良性病变组织比较。结果:非小细胞肺癌组织的Bcl-xL mRNA水平明显高于癌旁组织和肺良性病变组织(P<0.01),mR-NA水平与临床分期呈正相关,与其他临床病理相关因素(性别、年龄、肿瘤大小、发生部位、组织学类型、分化程度)无明显相关,而癌旁组织和肺良性病变组织Bcl-xL mRNA水平之间没有差别(P>0.05)。蛋白表达检测结果与mR-NA水平高度一致。结论:非小细胞肺癌组织中Bcl-xL基因和蛋白表达水平明显升高,可能促进了肿瘤的发生发展,可以考虑作为非小细胞肺癌临床分期和评价临床预后的参考指标。     

胃癌组织p16基因微卫星DNA的不稳定性

目的 :检测胃癌组织中p16基因D9s171、D9s16 0 4微卫星位点杂合性缺失 (LOH) ,探讨p16基因微卫星不稳定性 (MI)与胃癌发生发展的关系。方法 :采用PCR 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染技术对 2 0例胃癌和癌旁组织LOH进行分析。结果 :癌组织D9s171和D9s16 0 4的LOH分别为 3例和 10例 ,癌旁组织分别为 2例和 4例。两位点LOH发生率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。胃癌组织较癌旁组织LOH发生率明显增高 (P <0 .0 5 ) ;早期胃癌与进展期胃癌两个微卫星位点LOH的发生率分别为 5 0 % (4/ 8)和 5 8.3% (7/ 12 ) (P >0 0 5 ) ;两位点LOH发生存在相关性(P <0 0 5 )。结论 :D9s171,D9s16 0 4微卫星位点的LOH与胃癌的发生发展有关 ,而与癌细胞的分化程度或胃癌的临床分期无显著相关性     

非小细胞肺癌中基质金属蛋白酶-10的表达

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中基质金属蛋白酶-10(matrix metalloproteinase-10,MMP-10)的表达及其与临床参数间的关系.方法:使用RT-PCR法及免疫组化法,检测32对NSCLC癌组织及癌旁正常组织中MMP-10的表达水平,并分析其与性别、年龄、分期、分级、肿瘤大小、淋巴结转移及病理类型之间的相关性.结果:MMP-10 的表达在mRNA水平与蛋白质水平表达有差异:MMP-10 mRNA在NSCLC癌组织中的表达要显著低于癌旁正常肺组织(P＜0.05),MMP-10蛋白在肺癌癌组织中的表达要显著高于癌旁正常肺组织(P＜0.01);在NSCLC癌组织中MMP-10 mRNA 的表达与MMP-10蛋白的表达呈正相关(r=0.4672, P＜0.05),而在癌旁正常肺组织中,两者表达相关性无显著统计学差异(r=-0.003022,P＞0.05).结论:MMP-10 mRNA在肺癌癌组织中表达要低于正常组织,MMP-10蛋白在肺癌癌组织中表达要高于正常组织.     

MDR基因在食管癌中表达的临床意义

目的　探讨食管癌患者肿瘤组织中多药耐药 (MDR)基因表达及其在临床上的应用价值。方法　采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)检测 5 0例食管癌组织中的mdr - 1基因表达水平 ,同时检测 10例正常食管组织中的mdr- 1表达水平。结果　mdr- 1基因在食管癌高、中、低分化之间的表达水平具有极显著差异 (P <0 .0 1和 P <0 .0 0 1) ,癌与正常组织中有极显著差异 (P <0 .0 0 1) ;在不同年龄、性别及临床分期之间无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　mdr- 1基因的检测可预测患者对化疗的敏感性 ,使化疗个体化 ,也可以评估患者的预后