伏核脑深部刺激对吗啡成瘾心理依赖大鼠的作用研究

目的研究伏核脑深部刺激（DBS）对吗啡成瘾大鼠心理依赖的作用。方法将60只SD大鼠随机等分为三组：假刺激（ShS）组、DBS组、正常对照（NS）组。刺激前后行条件性位置偏爱实验，并观察伏核、海马、前额叶脑组织的形态学变化。结果刺激前DBS组与ShS组大鼠在伴药箱平均停留时间均长于NS组，差异显著（P〈0．01）；刺激后，DBS组较ShS组在伴药箱平均停留时间明显缩短（P〈0．01），而与NS组差异无统计学意义（P〉0．05）。刺激前，DBS组与ShS组大鼠伏核、海马神经元部分丢失，且水肿明显，细胞器减少；刺激后，DBS组较ShS组细胞水肿明显减轻，以伏核变化明显。结论伏核DBS有效治疗了大鼠的吗啡成瘾心理依赖作用。     

脑深部电刺激对吗啡心理依赖大鼠伏核多巴胺受体的影响

目的探讨脑深部电刺激(DBS)对大鼠双侧伏核多巴胺D1A受体(D1AR)和D2受体(D2R)表达的影响以及多巴胺受体(DAR)在DBS治疗吗啡心理依赖中的作用。方法将60只SD大鼠随机分为假刺激组(ShS组)、电刺激组(DBS组)和生理盐水对照组(NS组),20只/组。用免疫组化法和RT-PCR法检测各组大鼠伏核多巴胺D1AR和D2R表达的变化。结果ShS组伏核D1AR阳性细胞数较NS组、DBS组明显增多(P0.01),而DBS组与NS组比较,差异无统计学意义(P0.05);三组间D1ARmRNA比较,差异无统计学意义(P0.05)。DBS组大鼠D2R阳性细胞数较NS组明显下降(P0.01),但较ShS组明显上升(P0.01);ShS组大鼠伏核D2RmRNA较NS组及DBS组显著上升(P0.01),而DBS组与NS组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论DBS对吗啡心理依赖大鼠伏核D1AR和D2R的表达起反向调节作用。     

电刺激伏核对吗啡成瘾心理依赖大鼠行为学的影响

目的 通过建立脑深部刺激(deep brain stimulation,DBS)SD大鼠双侧伏核的动物模型,探讨DBS伏核对吗啡心理依赖大鼠行为学的影响.方法 40只大鼠同期依大鼠立体定向图谱行双侧伏核刺激电极的植入术,20只为吗啡假刺激组,20只为DBS组.术前(用药后第15天)、术后(刺激后第2～6天)对戒断症状进行评分,术前(用药后第15天)和术后(刺激后第2、4、6天)行条件性位置偏爱实验,研究大鼠的行为学变化40只大鼠成功地同期双侧伏核植入DBS刺激电极, 条件位置偏爱实验结果为吗啡成瘾大鼠在伴药箱平均停留时间长于非伴药箱,与生理盐水组比较具有统计学意义(P<0.01);DBS组与术前及吗啡假刺激组相比在伴药箱平均停留时间均明显缩短,具统计学意义(P<0.01),提示高频电刺激伏核能有效减轻大鼠吗啡心理依赖症状.术前戒断症状评分结果表明吗啡成瘾大鼠模型的成功建立(P<0.01);术后DBS大鼠的戒断症状与术前相比具统计学意义,证实DBS减轻了大鼠的躯体依赖症状.结论 高频刺激吗啡成瘾大鼠双侧伏核,能够有效地减轻大鼠吗啡心理依赖症状,为DBS伏核治疗吗啡等成瘾药物的心理依赖提供了实验依据.     

深部电刺激伏隔核对吗啡成瘾大鼠复吸后伏隔核内γ-氨基丁酸含量变化的影响

目的研究深部电刺激(deep brain stimulation,DBS)双侧伏隔核对吗啡成瘾大鼠复吸后伏隔核内γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric Acid,GABA)含量的影响。方法手术前使用条件性位置偏爱试验(conditionedplace preference,CPP)筛选无自然偏爱大鼠,随机分组后DBS组行电极植入术,术后10天采用固定剂量吗啡皮下注射(10mg.Kg-1)建立吗啡成瘾大鼠模型(使用CPP证实)。通过改进的DBS电路进行电刺激(频率130Hz,电流300uA,电压1V,1h.d-1),在不同的时间点使用CPP证实DBS组大鼠戒断成功后再皮下给予小剂量吗啡(3mg.Kg-1),24h后使用CPP验证吗啡成瘾大鼠复吸模型建立成功。CPP试验结束后于冰台上按大鼠脑立体定位图谱取伏隔核行高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定GABA含量。结果①皮下注射固定剂量吗啡能够使大鼠成瘾,DBS能够有效抑制吗啡复吸行为;②morphine+DBS组大鼠伏隔核内GABA含量与吗啡组,morphine+sham组差异明显。结论 DBS双侧伏隔核使吗啡成瘾大鼠复吸后伏隔核内GABA含量增加。     

吗啡成瘾对大鼠伏隔核神经元自发放电的影响

目的 研究吗啡成瘾对大鼠伏隔核电生理的影响及静脉吗啡注射对吗啡成瘾大鼠伏隔核神经元自发放电的影响探讨伏隔核在吗啡成瘾过程中的作用.方法 通过连续14日递增腹腔吗啡注射,建立急性大鼠吗啡成瘾模型,通过玻璃微电极记录吗啡依赖大鼠伏隔核单细胞细胞外放电,观察吗啡成瘾及静脉注射吗啡对大鼠伏隔核神经元放电的影响.结果 与生理盐水组相比,吗啡依赖组大鼠伏隔核神经元单位自发放电的频率分布组间差异显著(P<0.05),放电形式无明显差异.吗啡依赖大鼠伏隔核神经元放电频率静脉注射吗啡前为14.40±4.92Hz,静脉注射吗啡后降为4.10±2.65Hz.结论 吗啡成瘾对大鼠伏隔核神经元自发放电有影响,吗啡可以显著抑制吗啡成瘾大鼠的伏隔核神经元放电,伏隔核在吗啡成瘾过程具有重要作用.     

6-羟基多巴胺单侧纹状体注射对大鼠双侧多巴胺能神经元的影响

目的探讨帕金森病大鼠模型中6-羟基多巴胺（6-OHDA）单侧纹状体注射对双侧黑质纹状体多巴胺能神经元的影响。方法大鼠随机分成模型组和对照组，模型组自一侧纹状体注射6-OHDA，对照组注射PBS；用免疫组织化学方法分别检测大鼠双侧黑质和纹状体区酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞和纤维的表达；高效液相色谱检测双侧纹状体多巴胺（DA）及其代谢产物3，4-二羟基苯乙酸（DOPAC）和高香草酸（HVA）含量。结果模型组大鼠双侧（毁损侧与其对侧）黑质致密区TH阳性细胞数量均少于对照组（P〈0．01），模型组双侧纹状体区TH阳性纤维密度均低于对照组；模型组大鼠双侧纹状体区DA含量均低于对照组（P〈0．01）；双侧DOPAC和HVA含量也降低。结论6-羟多巴胺单侧纹状体注射制作的帕金森病大鼠模型的对侧黑质纹状体也有损伤。     

白介素6在脂多糖致大鼠脑水肿中的表达

目的 探讨白介素6（IL-6）在脂多糖（LPS）致大鼠脑水肿发病过程中的表达及纳洛酮对其干预作用。方法 SD大鼠84只，对照组（NS组）28只，0．2ml生理盐水颈内动脉注射；内毒素组（LPS组）28只，颈内动脉注射LPS 200μg；纳洛酮治疗组（NAL组）28只，颈内动脉注射LPS后10min、1h、2h、6h、12h及处死前2h腹腔注射纳洛酮lmg／kg。于不同时间点测定脑组织匀浆IL-6的含量。干湿法测定脑组织含水量，甲酰胺法测定伊文思兰（EB）含量。结果 LPS组脑组织含水量和EB含量显著高于NS组（P〈0．01）。NAL组脑组织含水量和EB含量显著低于LPS组（P〈0．01），但仍较NS组高（P〈0．01）。注射LPS后4h，LPS组脑组织IL-6含量即增加，于6h达高峰，与NS组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。NAL组IL-6含量低于LPS组（P〈0．05或P≤O．01），但高于NS组（P〈0．01）。LPS组脑组织含水量和EB含量呈正相关（r=0．743，P〈0．01），IL-6含量与含水量呈正相关（r=0．459，P〈0．05），IL-6含量与EB含量呈正相关（r=0．568，P〈0．05）。结论IL-6参与脑水肿的发生发展，纳洛酮可以抑制IL-6的生成，减轻脑水肿。     

高频电刺激伏隔核对吗啡诱导大鼠条件性位置偏爱行为的影响

目的研究高频电刺激伏隔核(nucleus accumbens,NAc)对吗啡诱导戒断大鼠觅药行为的影响,分析NAc在大鼠成瘾行为中的作用。方法26只雄性SD大鼠通过吗啡强化形成条件性位置偏爱后,13只予以120Hz高频电刺激伏隔核(吗啡刺激组),另13只予以假刺激(吗啡假刺激组)。15d后给予注射吗啡,诱导大鼠恢复位置偏爱行为,测量并比较两组的位置偏爱得分。结果吗啡电刺激组大鼠在注射吗啡诱导下不易恢复对吗啡的条件性位置偏爱,位置偏爱得分为(237.59±79.89)s,吗啡假刺激组为(441.29±212.68)s,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论电刺激NAc能阻断注射吗啡诱导戒断大鼠恢复觅药行为。在成瘾药物诱导戒断动物觅药行为的过程中,NAc起重要作用。     

雌激素对喹啉酸致大鼠纹状体神经元损害的影响

目的 探讨雌激素对喹啉酸（QA）所致的大鼠纹状体神经元损伤的影响。方法 将成年雌性大鼠切除双侧卵巢后随机分为卵巢切除组（非替代组）和卵巢切除＋雌二醇组（替代组）;向纹状体注射QA,采用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）黄递酶组化法检测纹状体NADPH阳性神经元数,记录阿朴吗啡诱发大鼠旋转次数,分别用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥法测定纹状体超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量。结果 与非替代组比较,替代组大鼠损伤侧纹状体NADPH阳性神经元明显增多（P〈0．05）,SOD活性明显增高（P〈0．05）,MDA含量明显降低（P〈0．01）,阿朴吗啡诱发的大鼠旋转次数明显减少（P〈0．01）。结论 雌激素可能通过减轻氧化应激反应对QA引起的纹状体神经元损害起保护作用。     

脑梗死后遗症大鼠模型脑组织ATP、ADP及单胺类神经递质含量的变化

目的 研究脑梗死后遗症大鼠模型脑组织ATP、ADP及单胺类神经递质含量的变化。方法 建立脑梗死后遗症大鼠模型，用高效液相色谱（HPLC）法测定大鼠脑组织ATP、ADP及单胺类神经递质含量。结果 刺激组（SG）毛发相对黯淡无光、卷曲，精神萎靡，惊恐，消瘦，肢体无力，摄食减少，饮水减少，手术伤口愈合迟缓，符合中医脑梗死后遗症征候。正常组（NG）大鼠脑组织ATP、ADP含量显著高于SG组、术后不刺激组（SG）（P〈0．01），同时NSG组大鼠脑组织ATP、ADP含量显著高于SG组（P〈0．05）。SG组大鼠脑组织NE、DA和5-HT含量显著低于NG组（P〈0．01），NSG组（P〈0．05）；NSG组大鼠脑组织DA含量显著低于NG组（P〈0．05）。结论 脑梗死后遗症大鼠由于能量代谢障碍而出现脑组织的ATP、ADP含量降低，并且伴有大脑释放单胺类递质增加及脑细胞内的单胺类递质含量减少，单胺类递质分泌增加又加重了脑组织的损伤，加剧ATP、ADP等能量物质代谢障碍，形成恶性循环。     

吗啡成瘾大鼠脑内核团毁损后的行为学研究及形态学变化

目的研究脑内核团毁损对吗啡成瘾大鼠戒断症状及行为学方面的影响．以及毁损前后的脑形态学变化。方法将120只雄性SD大鼠随机分成对组、吗啡成瘾组、伏核毁损组、海马毁损组及伏核、海马假毁损组，通过旷场实验和隔离残杀实验观察大鼠目的性探究行为和攻击行为的变化．并在光镜和电镜下观察脑内伏核、海马的形态学变化。结果成瘾组和毁损组在自然戒断症状、旷场实验、隔离残杀实验方面经统计学分析，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；成瘾大鼠伏核、海马的神经元细胞器减少、线粒体肿胀、染色质边集、核固缩甚至坏死。结论长期使用吗啡可导致脑内神经元超微结构损害：毁损伏核、海马后可改善成瘾大鼠的戒断症状．使其探索行为和攻击性行为发生变化。     

脑深部电刺激伏核对自身给药大鼠海洛因觅药行为的影响

目的观察脑深部电刺激(deep brain stimulation,DBS)伏核对大鼠海洛因自身给药觅药行为的影响。方法用固定比率程序建立大鼠海洛因自身给药复吸模型。将18只大鼠随机分成对照组、假刺激组和DBS组,假刺激组及DBS组大鼠行双侧伏核核心部微电极植入术。DBS组大鼠在消退期每天给予高频电刺激1h(刺激参数:方波,频率130 Hz,电流150μA,波宽100μs),共7d。消退后采用条件性线索和小剂量海洛因诱导引燃大鼠海洛因觅药行为。结果在条件性线索诱导的复吸测评中,DBS组大鼠有效鼻触数(8.00±5.33)明显少于对照组(36.50±9.16)和假手术组(34.00±7.93),具统计学意义(P<0.01);在小剂量海洛因诱导的复吸测评中,DBS组大鼠有效鼻触数(11.17±7.78)明显少于对照组(29.67±5.24)和假手术组(28.00±11.92),具统计学意义(P<0.01);DBS组、对照组和假手术组大鼠在总活动度和每阶段活动度上的差异均无统计学意义(P>0.01)。结论DBS高频电刺激伏核可减少海洛因自身给药大鼠条件性线索和小剂量海洛因诱导的觅药行为,且不会影响其活动度。     

丘脑底核脑深部电刺激对纹状体区细胞外液谷氨酸含量的影响

目的 探讨长期丘脑底核脑深部电刺激(DBS)对猴偏侧帕金森病模型纹状体区细胞外液中谷氨酸含量的影响.方法 在猴偏侧帕金森病模型的基础上植入DBS系统,刺激电极位于病侧丘脑底核.在给予DBS前后不同时间微透析检测双侧壳核、尾状核细胞外液谷氨酸的含量变化.结果 与开机前比较,DBS后双侧尾状核和壳核的谷氨酸含量均明显升高,1周时升高最显著,1个月以后含量保持稳定;DBS后12个月电极侧壳核谷氨酸含量仍比开机前和非电极侧升高明显(P＜0.05),而尾状核电极侧谷氨酸含量已接近非电极侧(P＞0.05).结论 对猴偏侧帕金森病模型行丘脑底核DBS后,纹状体区细胞外液中谷氨酸的含量明显升高.     

Effect of morphine applied by intrapallidal microdialysis on the release of dopamine in the nucleus accumbens

The effect of morphine, administered intrapallidally, on extracellular concentrations of DA, DOPAC, and HVA in the nucleus accumbens and striatum was studied in the behaving rat using the in vivo microdialysis technique. Unilateral application of morphine hydrochloride was perfomed through microdialysis probes into the rat ventral pallidum (10 μ1 of 0 2.6 4.0, 13.0, and 26.0 mM) or globus pallidus (10 μ1 of 0 and 26.0 mM). The levels of DA, DOPAC, and HVA were measured using the HPLC with EC detection in dialysates collected from the nucleus accumbens, anteromedial, and anterolateral striatum. Samples were taken every 45 min over 3 h before and over 5 h after morphine or vehicle administration. Administration of morphine into the ventral pallidum resulted in increased DOPAC and HVA concentrations in the nucleus accumbens. Pretreatment with naloxone (1 mg/kg, SC) abolished this effect of morphine. Administration of morphine into the globus pallidus resulted in increased DA, DOPAC, and HVA concentrations in the nucleus accumbens and DA in the anteromedial striatum. The levels of DA and metabolites in anterolateral striatum remained rather unchanged following morphine administered into the ventral pallidum or the globus pallidus. The changes in DA neurotransmission into the nucleus accumbens induced by morphine application into the ventral pallidum and globus pallidus are reminiscent of a phasic and tonic release of DA respectively. The results show that intrapallidal morphine increases DA neurotransmission in nucleus accumbens and suggest that the effect of morphine is mediated by ventral pallidum/mesolimbic and globus pallidus/thalamocortical pathways, depending on the site of injection.     

纳络酮早期干预对大鼠弥漫性轴索损伤的影响

目的观察纳络酮早期干预对大鼠实验性弥漫性轴索损伤(DAI)的治疗效果。方法采用改良Marmarou的方法制作大鼠颅脑DAI模型。将Wister雄性大鼠99只随机分为对照(假损伤)组、损伤组和干预组,干预组用纳络酮2mg/kg于伤后45min腹腔一次性注射给药,于伤后2、6、24、72h观察动物行为、脑组织含水量及组织病理学变化。结果损伤组大鼠伤后2、6、24、72h,行为学评分(满分为21.00±0.00分)分别为(9.05±1.52)、(12.12±1.41)、(17.23±1.34)和(19.36±0.92)分;干预组各时间点分别为(9.32±1.23)、(14.48±1.54)、(18.68±1.09)和(20.18±0.75)分;其中干预组伤后6和24h与损伤组比较差异显著(P0.05)。对照组24h脑组织含水量测定结果为(78.19±0.35)%;伤后2、6、24、72h脑组织含水量,损伤组分别为(79.91±0.18)%、(80.70±0.49)%、(81.69±0.40)%和(80.32±0.42)%;干预组分别为(79.22±0.33)%、(79.59±0.46)%、(80.44±0.49)%和(79.50±0.44)%。同损伤组比较,干预组致伤6h后脑含水量均明显减轻(P0.01)。干预组光镜下病理损害明显减轻。结论纳络酮伤后早期干预,有助于减轻大鼠DAI后继发性脑损害。     

Dopamin促进出血性卒中大鼠恢复的作用机制研究

目的应用多巴胺(dopamine)对实验性脑出血大鼠进行腹腔注射,研究dopamine对出血性卒中的神经保护作用机制。方法 SD雄性大鼠60只,体质量300±20g,造脑出血模成功后随机分为dopamine治疗组、生理盐水(NS)对照组(n=30),同一条件下饲养。每天进行神经功能评分,不同亚组按相应时间点取材。分别测定出血周围脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和脑源性神经营养因子(BDNF)的免疫组化评分。取脾组织制作匀浆,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),测定转录调节家族中叉头翼状双螺旋家族的一个独特的成员Foxp3与β-actin的相对密度值,表示CD4+、CD25+、T细胞的活性。结果 dopamine组大鼠与NS组在对应时间点进行神经功能评分,显示前者高于后者差异有统计学意义(P<0.05)。GFAP和BDNF在实验大鼠脑组织中的表达,dopamine组均高于相应对照组差异有统计学意义(P<0.01)。Foxp3mRNA在dopamine组的大鼠脾脏中的表达与相应的对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 dopamine能上调实验性脑出血大鼠脑内GFAP和BDNF蛋白表达水平,促进神经症状的好转。CD4+、CD25+、调节性T细胞对中枢神经系统损伤的恢复有抑制作用;dopamine可下调CD4+、CD25+、调节性T细胞对D4+Th1细胞的抑制作用,促进出血性卒中大鼠脑损伤的恢复。     

脑深部电刺激双侧丘脑底核治疗PD对嗅觉功能的影响

目的 研究脑深部电刺激双侧丘脑底核治疗帕金森病(PD)对患者嗅觉功能的影响.方法 对15例合并有嗅觉障碍的散发性PD患者行双侧丘脑底核电极植入术,分别于术前1 w、术后6、12个月应用“五味嗅觉测试液”检测PD患者嗅觉觉察阈值(DT)和嗅觉识别阈值(TT),进行统计学分析.结果 术后15例PD患者运动功能症状改善良好.手术前后不服药刺激器“关”状态下患者的DT、IT比较均无明显差异(P＞0.05),术后6、12个月DT在刺激器“开、关”状态下对比均无明显改变(P＞0.05),但IT在刺激器“开”状态下较“关”状态显著改善(P＜0.05).结论 脑深部电刺激双侧丘脑底核(STN DBS)可明显改善PD患者的嗅觉认知功能,可能与改善了纹状体多巴胺代谢及增加了纹状体、中脑、扣带回、前额叶运动区皮质、顶枕叶高级躯体感觉联合区皮质葡萄糖代谢有关.     

亚低温联合丁苯肽对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察亚低温联合丁苯肽对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法制备SD大鼠MCAO模型,梗死2 h后再灌注,并分为假手术组、模型组、丁苯肽组及亚低温联合丁苯肽组（联合组）,再灌注24 h后进行神经功能缺损评分检测脑组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）浓度、病理变化及大脑缺血面积并比较.结果 （1）丁苯肽组与联合组的神经功能缺损评分明显低于模型组,且联合组的神经功能缺损评分明显低于丁苯肽组（P＜0.01）.（2）与假手术组相比,模型组SOD活性降低,MDA含量增加（P＜0.01）;与模型组相比,丁苯肽组与联合组SOD活性增高,MDA含量降低（P＜0.01）,且联合组与丁苯肽组相比差异有统计学意义（P＜0.01）.（3）模型组、丁苯肽组及联合组病理学检查均较假手术组差,但联合组好于丁苯肽组好于模型组（P＜0.01）.（4）模型组、丁苯肽组及联合组脑缺血面积较假手术组增大,而联合组＜丁苯肽组＜模型组,差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论 亚低温联合丁苯肽对脑缺血再灌注损伤有较好的保护作用.