慢性乙型肝炎病毒感染树鼩Kupffer细胞TLR2和TLR4的表达及其意义

目的探索慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染树鼩Kupffer细胞Toll样受体(TLR)家族中的TLR2和TLR4在mRNA水平的表达情况及其对Kupffer细胞功能的影响。方法树鼩分为确定慢性感染HBV的树鼩、疑似慢性感染HBV的树鼩和未接种HBV的正常对照树鼩。全部动物定期抽血和进行肝活检手术,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析血清和肝组织的HBV DNA水平;对手术切取的树鼩肝组织进行Kupffer细胞的分离、纯化和原代培养,采用qRT-PCR检测TLR2、TLR4以及TNF-α的mRNA表达水平;采用迁移实验及溶酶体荧光探针等方法分析TLR2和TLR4对Kupffer细胞迁移能力及溶酶体数量的影响。结果确定慢性感染HBV的树鼩TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达水平均低于疑似慢性感染HBV的树鼩和未接种HBV的正常对照树鼩(P0.05),表达水平均与动物肝组织的HBV DNA拷贝数呈负相关(P0.05),与Kupffer细胞的细胞迁移数、溶酶体密度及TNF-αmRNA表达水平呈正相关(P0.05)。结论 Kupffer细胞中的TLR2和TLR4可能通过影响Kupffer细胞功能而参与树鼩HBV感染后肝脏病变的慢性化发展过程。     

跨种属研究Smad3在肝癌组织中的表达及意义

 目的：研究Smad3在人、大鼠、树鼩等不同种属的肝癌、癌旁及正常肝组织中的表达和意义,进一步验证跨种属筛选肝癌关键蛋白研究策略的可行性。方法：采用实时荧光定量PCR和Western blotting技术分别检测人、大鼠和树鼩的肝癌及其相应癌旁组织以及正常肝组织中Smad3 mRNA和蛋白表达水平。结果：Smad3 mRNA在人、大鼠和树鼩的肝癌中表达水平均低于其相应的癌旁组织（均P<0.05）;在大鼠肝癌组织中的表达低于正常肝组织（P<0.05）;在树鼩癌旁组织中的表达高于正常肝组织（P<0.05）;其余各组织间mRNA表达水平的差别无统计学意义（均P>0.05）。Smad3蛋白在人和大鼠的肝癌组织中的表达水平均低于其相应的癌旁组织及正常肝组织（均P<0.05）;在树鼩肝癌组织中的表达水平也低于相应的癌旁组织和正常肝组织,但差别无统计学意义（均P>0.05）;3个种属的癌旁组织与正常肝组织比较,差别无统计学意义（均P>0.05）。结论：Smad3在人、大鼠和树鼩3个种属的肝癌组织中的mRNA和蛋白表达水平均下调,提示该蛋白表达水平的改变可能在肝癌发生发展中起重要作用,有可能成为防治肝癌的靶分子。     

Cdc25a在跨种属肝癌组织中的表达及其意义*

 目的：研究细胞周期通路中的细胞分裂周期蛋白25a (Cdc25a)在人、大鼠和树鼩不同种属的肝癌、癌旁及正常肝组织中的表达和意义,进一步验证跨种属筛选肝癌关键基因研究策略的可行性。方法：采用实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测人、大鼠和树鼩的肝癌及其相应癌旁组织以及正常肝组织中Cdc25a mRNA和蛋白表达水平。结果：Cdc25a mRNA表达水平在人、大鼠和树鼩的肝癌组织中均高于正常肝组织（均P<0.05）;在人和大鼠肝癌组织中的表达高于其对应的癌旁组织（P<0.05）;其余各组织间mRNA表达水平的差别无统计学意义（均P>0.05）。Cdc25a mRNA在人肝癌组织中的表达水平与病人的临床分期、门脉癌栓及肝外转移明显相关,而与术后复发、肿瘤直径、肿瘤个数、血清甲胎蛋白水平和肿瘤分化无明显关系。Western blotting检测结果显示Cdc25a在人、大鼠和树鼩肝癌组织中的蛋白表达水平均较癌旁和正常肝组织显著上调。结论：Cdc25a有可能是影响肝癌发生和发展的重要分子之一,跨种属筛选肿瘤关键基因策略可能有助于发现肝癌关键基因。     

葛根素联用沙格列汀对2型糖尿病大鼠肾脏纤维化的影响

 目的：观察葛根素联用沙格列汀对2型糖尿病大鼠肾脏纤维化的影响。方法: Wistar大鼠50只,雄性,随机抽取8只作为正常对照组,其余复制2型糖尿病大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为糖尿病对照组、葛根素治疗组、沙格列汀治疗组、葛根素联用沙格列汀治疗组和二甲双胍联用沙格列汀治疗组。各治疗组给予相应药物治疗,2个对照组腹腔注射相应量的生理盐水。第8周后,测定各组大鼠肾重指数（肾重/体重）、血糖和糖化血红蛋白含量等;电子显微镜观察肾组织病理变化;ELISA法检测血清中炎症因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）和巨噬细胞移动抑制因子（MIF）含量;RT-PCR法检测大鼠肾组织TNF-α、MIF和巨噬细胞标记物CD68 mRNA表达。结果: 糖尿病对照组与正常组相比,大鼠肾重指数、血糖与糖化血红蛋白上升（P<0.01或P<0.05）,血清中TNF-α及MIF含量明显上升（P<0.01）,肾脏组织中TNF-α、MIF及CD68 mRNA 表达上升（P<0.05）;与糖尿病对照组比较,葛根素联用沙格列汀治疗组的肾重指数、血糖及糖化血红蛋白下降（P<0.01或P<0.05）,血清中TNF-α及MIF含量下降（P<0.05）,肾脏组织中的TNF-α、MIF及CD68 mRNA表达下降（P<0.05）;与单用药组比较,联用组在各指标改善程度上更显著。结论：葛根素联用沙格列汀能降低血糖和血清中TNF-α、MIF含量,下调TNF-α、MIF及CD68 mRNA在大鼠肾脏组织的表达。糖尿病大鼠肾脏纤维化被抑制的机制可能与上述指标的变化有关。     

肝细胞增殖因子促进受损肝细胞增殖的可能机制

目的： 探讨肝细胞增殖因子（ALR）促进受损肝细胞增殖的可能机制。方法: 采用细胞增殖试验（MTT法）观察经ALR刺激的大鼠肝枯否细胞(KC)的条件培养液(KCCM+)对受损肝细胞增殖的影响，同时用免疫组织化学方法检测正常大鼠肝脏组织中ALR的分布、大鼠枯否细胞膜表面结合的ALR以及ALR对枯否细胞IL-6表达的影响。结果: 受损肝细胞经枯否细胞条件培养液刺激后增殖明显。正常大鼠肝细胞内可表达合成ALR，枯否细胞膜表面可见ALR免疫反应颗粒，经ALR刺激后枯否细胞IL-6免疫反应信号增强。结论: ALR可能通过首先刺激枯否细胞，从而促进受损肝细胞增殖。     

核苷（酸）类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体-成纤维细胞生长因子19通路、枯否细胞极化的影响

目的 ：探究核苷（酸）类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体（FXR）-成纤维细胞生长因子19(FGF19)通路、枯否细胞极化的影响。方法 ：选取SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、核苷（酸）类似物（核苷酸）组、聚乙二醇干扰素（干扰素）组、联合组。除正常组外,均采用腹腔注射乙型肝炎病毒进行慢性乙型肝炎建模。建模成功后,对核苷酸组灌胃10 mg/kg拉米夫定,对干扰素组皮下注射5μg/kg聚乙二醇干扰素,对联合组给予拉米夫定联合聚乙二醇干扰素治疗,正常组、模型组同期灌胃同体积生理盐水。酶联免疫吸附法检测血清病毒,全自动生化分析仪检测肝功能,H-E染色法检测肝组织病理形态,免疫印迹法检测FXRFGF19通路蛋白表达,免疫组织化学法检测枯否细胞极化。结果 ：与正常组相比,模型组血清乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎E抗原（HBeAg）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）含量、iNOS、CD163阳性表达率显著升高,肝组织FXR、FGF19蛋白表达显著降低。与模型组相比,核苷酸组、干扰素组、联合组血清HBsAg、HBe...     

免疫性肝损伤中诱导型一氧化氮合酶的细胞来源

采用胶原酶-链霉蛋白酶灌流法对免疫性肝损伤大鼠肝实质细胞与枯否细胞进行分离与原代培养,Griess反应法检测细胞培养上清中一氧化氮（NO）生成量的变化。结果显示在刺激条件及细胞数量同等情况下,肝实质细胞NO生成量显著高于枯否细胞;肿瘤坏死因子（TNFα）单克隆抗体可拮抗枯否细胞由细菌脂多糖（LPS）刺激所致NO生成的增加,而对卡介苗（BCG）所致NO生成无显著影响。提示免疫性肝损伤中NO生成主要源于肝实质细胞;LPS通过使枯否细胞释放TNFα对NO生成进行调节。     

TNF-α增强人脐带间充质干细胞条件培养基的体外造血支持功能

 目的：研究肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α, TNF-α）刺激后所得的脐带间充质干细胞条件培养基对脐血CD34+细胞在半固体培养基中集落形成个数及种类的影响。方法：将3~6代人脐带来源间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUC-MSCs）以2×106接种到75cm2培养瓶中,其中刺激组加入TNF-α（10 g/L）,48 h后收集上清作为条件培养基。Real-time PCR检测hUC-MSCs中各类造血因子mRNA的表达量。密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,磁珠分选CD34+细胞,流式细胞术检测细胞纯度后分5组接种到6孔板内：TNF-α刺激hUC-MSC上清+不完全甲基纤维素培养基;hUC-MSC上清+不完全甲基纤维素培养基;TNF-α+DMEM/F12完全培养基+不完全甲基纤维素培养基;完全甲基纤维素培养基;DMEM/F12完全培养基+不完全甲基纤维素培养基。10 d后显微镜下计数各类集落形成单位（colony-forming unit, CFU）的数目,收集集落形成细胞,流式细胞术检测其表型特征。结果：（1）TNF-α刺激后hUC-MSCs中粒细胞集落刺激因子（granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF）和白细胞介素6（interleukin-6, IL-6）mRNA表达上调。（2）两种条件培养组均可见粒系CFU（granulocyte CFU, CFU-G）、巨噬系CFU（macrophage CFU, CFU-M）和粒巨噬系CFU（granulocyte-macrophage CFU, CFU-GM）,但TNF-α刺激组CFU-G和CFU-M的数目约为未刺激组的1.5倍,CFU-GM约为未刺激组的2倍;阳性对照组中除粒系、巨噬系集落外还可见红系集落;而DMEM/F12完全培养基加或不加TNF-α组10 d后均未见集落形成。（3）流式细胞术检测TNF-α刺激组与未刺激组集落细胞表型CD14、CD45和CD11b,未见明显差异。结论：hUC-MSC上清作为条件培养基可在体外促进CD34+细胞分化增殖为髓系细胞,具有造血支持作用,TNF-α刺激后此作用增强。     

封闭枯否细胞和脾切除对急性肝损伤影响的实验性研究

目的:探讨封闭枯否细胞与脾切除对肠源性内毒素血症形成及肝实质细胞损伤的影响。方法:采用硫代乙酰胺(TAA)给大鼠灌胃,同时分别采用GdCl₃封闭枯否细胞及脾脏切除作为实验组,观察吞噬指数、ALT、TNF-α、内毒素等指标。结果:GdCl₃封闭及脾脏切除组吞噬指数下降,内毒素水平明显升高(P<0.05),TNF-α水平减少(P<0.05),ALT、TB水平明显下降(P<0.05)。结论:抑制枯否细胞功能与脾切除均可使肠源性内毒素水平升高,由于分泌功能同时受到抑制,使TNF-α水平下降,肝损伤减轻。     

大鼠压力负荷性肥大心肌中TNF-α mRNA表达变化

目的：探讨大鼠压力负荷性肥大心肌中TNF-α mRNA表达的变化及卡托普利（captopril）对其的影响。方法：采用腹主动脉缩窄法复制压力超负荷心肌肥大模型，于术后42 d采血、摘取心脏，测定心肌肥大指数并采用酶联免疫法测定血清及左心室肌TNF-α含量；应用心肌原位杂交法结合图像分析系统检测心肌组织中TNF-α mRNA表达的变化，并观测TNF-α mRNA在心肌组织中的定位。结果：术后42 d心肌明显肥大，以左心室为主；主动脉缩窄（aorta-constriction, AC）组心室肌TNF-α含量比假手术（sham-operation, SO）组高98%（P<0.01）；卡托普利干预使心室肌TNF-α含量比AC组低64.14%（P<0.01），但未达到对照水平；心肌组织原位杂交显示TNF-α mRNA表达主要在心肌间质部位，假手术组心肌TNF-α mRNA表达水平极低，明显低于AC术后（P<0.01），captopril干预虽明显抑制AC术后心肌组织中TNF-α mRNA表达，但并未使其达到SO组水平。结论：心肌组织内源性TNF-α的表达增加在压力负荷性心肌肥大中具有重要的调控作用，其过表达可能与RAS激活促心肌间质TNF-α mRNA表达上调有关。     

肝细胞异型增生的产生及其与肝细胞癌发生关系的实验研究

82只实验树(鼠句)分为4组:A组26只,HBV阳性并加喂黄曲霉毒素B_1(AFB_1);B组34只,HBV阴性并加喂AFB_1;C组13只,为HBV感染者;D组9只,为HBV阴性。实验158周。A组发生LCD16例(61.53%),其中9例(56.25%)发生肝细胞癌(HCC)。B组出现LCD 18例(52.94%),其中3例发生HCC(16.66%)。C组出现LCD 6例(46.15%);D组无LCD产生。82只树(鼠句)有40只出现LCD,其中12只(30%)发生HCC;而无LCD的42只,只有1例(2.83%)产生HCC。它们之间发生HCC的危险性相差12.6倍。血清HBV阳性的树(鼠句),其LCD发生率显著高于HBV阴性者(6/13对0/9.P<0.05);在HBV阴性的动物中,摄入AFB_1的其LCD发生率也同样比未摄入者高(18/34对0/9,P<0.05)。表明HBV和AFB_1都能诱发LCD;LCD可能是HCC的癌前病变。     

Serial pathologic changes in livers of tree shrews and macaca assamensises infected with human hepatitis B virus]

BACKGROUND: To serially observe the pathologic changes in livers of tree shrews and macaca assamensises infected with HHBV. METHODS: 10 adult tree shrews and 28 macaca assamensises were inoculated with HBV rich human sera. The liver of the animals were regularly biopsied. The liver samples were examined histopathologically by HE staining. Some samples were stained for HBsAg by immunohistochemistry (IH), and HBV DNA by in situ hybridization (ISH). RESULTS: HBsAg in 80% of tree shrews infected with HHBV can be detected by IH, HBV DNA in 50% of those can be found by ISH.The positive rates of HBsAg in macaca assamensises' livers were 25% by IH, none HBV DNA was detected. CONCLUSION: The tree shrew model seems to be applicable for the research of human hepatitis B.     

树鼩、熊猴感染人乙型肝炎病毒肝细胞内感染指征的研究

目的 对树鼩、熊猴感染人乙型肝炎病毒(HHBV)后对肝细胞病变进行动态观察。方法 10只成年树鼩，28只熊猴接种含人乙型肝炎病毒(HBV)血清后，定期肝活检，采用HE染色、免疫组化、原位杂交对实验动物肝组织进行研究分析。结果 80％树鼩感染HHBV后，通过免疫组化在肝组织内可找到乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)，50％通过原位杂交可检测到HBV DNA。有25％熊猴的肝组织内可检测到HBsAg，但信号较弱，而肝组织内未发现HBV DNA。结论 树鼩感染HHBV后，肝细胞内出现病理改变，适用于对人乙型肝炎的研有．     

A study on primary liver cancer in tree shrews induced by human hepatitis B virus and aflatoxin B1

Among 41 tree shrews exposed to aflatoxin B1(AFB1), 17 were experimental infected by human hepatitis B virus (HHBV) and 24 were uninfected. After 158 weeks, 9 cases (52.94%) of primary liver cancer (PLC) were found out of the 17 tree shrews infected by HHBV and only 3 cases (12.5%) developed PLC in the 24 uninfected animals. Significant difference of PLC incidence was seen between the HHBV-infected and uninfected groups (P less than 0.05). Moreover, 1/9 of the tree shrews that had been infected by HHBV but without exposure to AFB1 developed PLC at the 83rd week. No PLC was found in 6 tree shrews that had neither been infected with HHBV nor been exposed to AFB1. These results demonstrate the possible etiologic relationship between HHBV infection and PLC, and the synergistic effects of HHBV and AFB1 during PLC development.     

Deficient Kupffer cell phagocytosis and lysosomal enzymes in the endotoxin-low-responsive C3H/HeJ mouse

Various substances, including lysosomal enzymes, are produced by Kupffer cells and other macrophages; their release has been implicated in the toxic response to endotoxins. C3H/HeJ mice exhibit little or no response to doses of endotoxin that are lethal in syngeneic C3HeB/FeJ mice. To explore the nature of this deficient response, the Kupffer cells of these mice were studied using in vivo microscopic as well as histochemical and electron microscopical methods. In vivo, the rate of phagocytosis of single 0.8 micron latex particles was measured in individual Kupffer cells as was the number of phagocytic cells per microscopic field. Frozen sections of livers were stained for a variety of lysosomal enzymes and liver specimens also were processed for electron microscopy. In comparison to the endotoxin-sensitive C3HeB/FeJ mice, the livers of the C3H/HeJ mice contained 60% fewer Kupffer cells that phagocytosed latex. However, the rate of phagocytosis by these cells was not statistically different and ranged from 19-26 sec. The volume density of acid-phosphatase-positive Kupffer cells was 40% less in the C3H/HeJ mice. Similar differences were observed with other lysosomal enzymes including cathepsins B and H and dipeptidyl peptidases I and II. However, light and electron microscopy revealed a relatively normal number of Kupffer cells in livers stained for peroxidase, a nonlysosomal enzyme. The results suggest that the insensitivity of C3H/HeJ mice to endotoxin may be related in part to a lysosomal enzyme deficiency and a paucity of phagocytic Kupffer cells in these animals.     

高血糖对树鼩脑皮层局灶性缺血时海马微环境离子稳态及神经元继发性损伤的影响

 目的：研究高血糖对树鼩脑皮层血栓性缺血时海马微环境离子稳态的影响,探讨高血糖在缺血后神经元继发性损伤中的作用及机制。方法：用链脲佐菌素复制树鼩高血糖模型,并用光化学方法诱导脑皮层局部血栓性缺血,用单泵等速微灌流系统和离子分析仪测定缺血4 h、24 h及72 h海马离子微环境（细胞外pH值、K+、Na+、Ca2+、Cl-）的动态变化,并观察脑组织的病理形态学改变及海马神经元密度变化。结果：树鼩脑皮层缺血后,其海马微环境内出现了pH值、Na+、Ca2+及Cl-含量的降低,K+含量升高,变化以缺血后4 h为著,24 h次之,72 h无显著差异;高血糖加缺血进一步加重离子稳态的紊乱,缺血后4 h的pH值、K+和Ca2+含量,以及缺血后24 h的pH值和Na+含量与正常血糖缺血组同期值相比,变化显著（P<0.05）。形态学观察显示,光化学反应后4 h照射区皮层可见梗死灶,且患侧海马CA1区也存在缺血损伤性改变;24 h病损达高峰;72 h伴随胶质细胞增生等修复性反应。相应时点高血糖加缺血组皮层及海马的损伤均大于缺血组,以缺血后24 h(P<0.01)和72 h(P<0.05)尤为显著。结论: 树鼩脑皮层血栓性缺血形成后,缺血中心区扩布所导致的微环境内酸碱平衡及离子稳态性异常可能是海马神经元继发性损伤的重要原因,高血糖可加剧缺血脑区离子微环境的紊乱。     

树鼩、熊猴感染人乙型肝炎病毒血清指征的研究

目的：验证树Qu、熊猴感染人乙型肝炎（乙肝）病毒（HHBV）血清感染指征。方法：用含HBV的人血清接种给233只树Qu，28只熊猕，每周定期采血，用不同公司生产的ELISA试剂检测接种后的动物血清感染指标。结果：树Qu感染HHBV后，90．0％呈急性感染，44．4％为可持续1年以上的慢性感染，33．3％持续2年2个月。熊猴感染HBV后，血清HBV标志物呈一过性。结论：熊猴对HHBV并不敏感，而树Qu对HHBV高度敏感，有望成为HHBV的动物模型。     

酒精对树鼩感染乙型肝炎病毒的影响

目的：验证酒精对树鼠句感染ＨＢＶ（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＢｖｉｒｕｓ）是否具有更高的易感性。方法：应用酒精性免疫抑制的树鼠句模型,观察酒精性免疫抑制树鼠句对ＨＢＶ的易感性。结果：酒精组树鼠句的肺泡巨噬细胞和外周血中性粒细胞的吞噬率明显低于对照组,白细胞移动指数明显高于对照组,ＨＢＶ感染率比对照组增高２５倍。结论：提示酒精组树鼠句在发生免疫功能明显受损的同时对ＨＢＶ易感性也显著增高。     

Characterization of liver lysosomal enzyme activity in hepatocytes, Kupffer and endothelial cells during aging: effect of dietary restriction

The specific activity of 4 lysosomal enzymes was studied in homogenate, hepatocytes, Kupffer and endothelial cells isolated from the livers of female Sprague-Dawley rats aged 3.5, 12 and 24 months. Cells were obtained by enzymatic digestion and centrifugal elutriation. Cell viability was not affected by age or diet. In hepatocytes, the activities of all enzymes (acid phosphatase, beta-galactosidase, arylsulfatase B and cathepsin D) increased with age in rats fed ad libitum (A) but were not altered significantly by dietary restriction. The activities of all enzymes except acid phosphatase were systematically higher at 3.5 months of age in Kupffer and endothelial cells than in hepatocytes. Acid phosphatase, arylsulfatase B and cathepsin D activities increased with age in both Kupffer and endothelial cells. Beta galactosidase was decreased significantly with age in Kupffer cells but was elevated in endothelial cells. Rats exposed to dietary restriction (R) showed higher activities of beta-galactosidase, arylsulfatase B and cathepsin D when compared to corresponding A animals with the exception of the younger age group. No clear cut pattern was observed in acid phosphatase activity. Thus, the activities of liver lysosomal enzymes increase with age but the pattern of change differs with respect to enzyme and cell populations. The heightened enzyme activity in Kupffer and endothelial cells from R rats may reflect a more efficient phagocytic capacity in these animals.     

HBV基因型、前S/S基因突变与HBV母婴传播免疫预防失败的关系

 目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因型、前S/S基因突变与HBV母婴传播免疫预防失败的关系。
方法：选择血清HBsAg阳性且HBV DNA定量≥1×1010 IU/L的孕妇及其新生儿,以新生儿是否发生免疫预防失败将孕妇分为免疫预防失败组（15例）和免疫预防成功组(45例),采用PCR扩增直接测序法对2组孕妇血中HBV进行基因分型和前S/S基因突变的检测,对比分析2组的不同。
结果：（1）基因型：2组孕妇血中HBV的基因型均为B和C型,均以B型为主,2组基因型分布相比,差异无统计学意义（P>0.05）。（2）突变率：HBV 前S/S基因2个片段的突变率在免疫预防失败组与免疫预防成功组间相比,差异均无统计学意义（P>0.05）;而B基因型与C基因型间相比,差异均有统计学意义（P<0.05）;但在同一基因型内,2个片段的突变率在免疫预防失败组与免疫预防成功组相比,差异均无统计学意义（P>0.05）。对HBV 前S/S基因2个片段的遗传树分析也显示不同基因型的基因突变率不同,但同一基因型的突变率在2组间差异无统计学意义（P>0.05）。（3）突变热点：在免疫失败组的4个病例中发现4个突变热点：529G-A、530A-G、826A-G1和166het-dupC各1例;在免疫成功组的6个病例中发现3个突变热点：A530T 1例,A530G 2例, T531C 3例。
结论：（1）不同HBV基因型间前S/S基因突变率不同。（2）HBV前S/S基因突变普遍存在,但并不是每个突变都与母婴传播免疫失败有关,仅分析基因突变率对研究免疫失败并无意义,寻找与免疫失败有关的特异性突变位点可能更有意义。