重组人粒细胞克隆刺激因子在荷瘤大鼠放疗中的作用

重组人粒细胞克隆刺激因子(rhG-cSF)在放疗中的作用以往大多通过一次性全身大剂量照射进行研究,此次应用与临床放疗相同的分次照射放疗计划进行。     

重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子对6．5Gy不均匀照射犬造血功能的影响

重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）在白血病及肿瘤病人大剂量放化疗白细胞减少性疾病的治疗中显示出了良好的前景。ｒｈＧＭ－ＣＳＦ可明显改善屏蔽全骨盆后６．５Ｇｙ６０Ｃｏｒ线照射犬的临床症状，加速外周血白细胞的恢复，提高白细胞的最低值，缩短白细胞减少的持续时间。可明显增加照射犬骨髓有核细胞数及骨髓细胞数，促进骨髓ＣＦＵ－ＧＭ的增殖，提高骨髓细胞的粒／红比值。可应用于事故性骨髓型急性放射病病人的临床治疗。     

CD40L、IL－10和IL－17的辐射防护作用

CD40L(CD40配体)作为重要的共刺激分子，与CD40(白细胞分化抗原40)相互作用参与机体细胞和体液免疫调节，并在免疫应答中起着极其重要的作用。IL-17(白细胞介素17)可诱导IL-6(白细胞介素6)和G—CSF(粒细胞集落刺激因子)等细胞因子的产生，从而刺激造血祖细胞(CD34^ )增殖、分化。IL-10(白细胞介素10)可干扰共刺激分子的上调，抑制免疫刺激因子(如IL-12)的产生，用抗IL-10单抗可阻断紫外线诱导的免疫抑制。简要介绍了CD40L、IL-17和IL-10在辐射防护中的作用。     

rhGM－CSF对狗骨髓辐射损伤治疗作用的定量病理研究

目的；为了解细胞因子对骨髓辐射损伤的治疗作用。方法：用６０Ｃｏγ射线以５．５Ｇｙ照射１４只比格狗后，静脉注射低剂量（１０μｙ／ｋｇ·ｄ）及高剂量（２０μｇ／ｋｇ·ｄ）ｒｈＧＭ－ＣＳＦ，连续２０天，动物于照射后３０天活杀取胸骨，采用Ｈ·Ｅ及Ａｇ－ｎｏｒ嗜银蛋白染色和图像分析等技术，定量研究了ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对骨髓造血的促进作用。结果表明：高剂量的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对狗骨髓辐射损伤后造血重建有明显的促进作用，即ｒｈＧＭ－ＣＳＦ能使骨髓中有核细胞数显著增多；能使增殖活跃的单核系细胞亦增多，与照射对照组比，差异均具有统计学意义（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。讨论：高剂量ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对狗骨髓造血功能的重建有促进作用。     

低剂量电离辐射对小鼠肺、胸腺和脾细胞分泌CSF的影响

本实验采用X射线对小鼠全身照射, 剂量率为12.5mGy/mIn, 剂量为25～250mGy。发现低剂过辐射能明显刺激肺和胸腺细胞分泌造血细胞集落刺激因子(Colony-stimulating factors,CSF)。胸腺细胞反应较为敏感，50mGy即能明显促进CSF分泌，250mGy时胸腺细胞分泌CSF活性水平仍明显高于对照(P<0.01)，且以50mGy剂量照射对其分泌CSF的刺激作用最强;肺组织细胞反应较弱，仅在75mGy剂量照射后.CSF分泌量明显增加(P<0.05):低剂量照射对脾细胞分泌CSF未见有明显的促进作用。75mGy照射后不同时间检测CSF,发现照射后2天肺和胸细胞分泌CSF量明显增加，直到照射后7天，CSF活性水平仍明显高于对照(P<0.01)，说明低剂量X射线全身照射能明显 促进肺和胸腺细胞分泌CSF，这对促进机体造血和免疫功能，增强机体抵抗力有重要的意义.     

小鼠骨髓组织4种造血生长因子受体cDNA片段的克隆和序列测定

目的：探索大剂量照射后造血生长因子受体基因的表达规律。方法：应用逆转录PCR技术，从小鼠骨髓造血组织中扩增出造血生长因子受体的目的片段，PCR产物与克隆载体连续后转化感受态大肠杆菌，阳性菌落提取质粒后进行序列测定。结果：4种造血生长因子受体片段均扩增成功，PCR产物经测序证实。结论：粒细胞集落刺激因子受体（G－CSFR），促红细胞生长素受体（EPOR）、促血小板生成素受体（c-mpl)和干细胞因子受体（c-kit)cDNA片段的克隆成功，从为整体水平上研究照射后造血生长因子受体的表达规律打下了基础。     

rhIL-11+rhG-CSF对中子急性放射病狗的治疗作用

目的　探讨rhIL-11与rhG-CSF联用对中子急性放射病(ARS)的治疗作用。方法　18只雄性成年比格狗,随机分为照 射对照组、对症治疗组和两因子+对症联合治疗组。所有动物均接受90%中子照射,吸收剂量为2.0Gy。联合治疗组动物于照射后 即刻开始皮下注射rhG-CSF10μg/(kg·d)和rhIL-1150μg/(kg·d),给药时间分别为14天和21天,观察照射后动物外周血象及骨髓 有核细胞形成CFU-GM能力的变化。结果　对症治疗组和联合治疗组动物全部存活,而照射对照组动物30天存活率为57.1%。照 射后联合治疗组各检测点外周血白细胞数及恢复期血小板和红细胞数均明显高于照射对照组及对症治疗组。照射后1天,联合治疗 组骨髓CFU-GM数量是两个对照组的6倍(P<0.01),33天分别是照射对照组、对症治疗组的1.75和1.46倍(P<0.01)。结论　 rhIL-11与rhG-CSF联合给药可以升高2.0Gy裂变中子照射狗的外周血白细胞、血小板数的最低值,缩短白细胞最低值持续的时间, 加速骨髓造血功能的恢复,对2.0Gy中子照射狗有明显的治疗作用。     

局部屏蔽对裂变中子照射狗的防护作用——Ⅱ.照射剂量对防护效果的影响

在使狗产生轻度肠型(3Gy 照射)、极重度骨髓型(3和2.65Gy 照射)和重度骨髓型(2Gy 照射)中子急性放射病的全身照射剂量条件下,使用含硼橡胶屏蔽狗的下腹+骨盆部,均可使病情减轻。3Gy 和2.65Gy 时减轻为重度骨髓型放射病,2Gy 时减轻为中度骨髓型放射病。从屏蔽狗的活存率、临床症状及外周血白细胞数看,剂量低时比剂量高时的屏蔽效果明显。     

单肢和半身照射后骨髓的再生

用体外成灶试验(CFU-c)研究单肢和半身照射对新西兰白兔骨髓再生的影响。实验是在不同剂量照射和不同照射时间下,追踪观察骨髓干细胞的动力学。这一资料将为未来确定化疗和放疗的适宜剂量及程序提供根据,这样既可联合应用又可使骨髓仍能再生。     

重组人粒—巨噬细胞集落刺激因子对6.5Gy不均匀照射犬造血功…

重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）在白血病及肿瘤病人大剂量放化疗白细胞减少性疾病的治疗中显示出了良好的前景。ｒｈＧＭ－ＣＳＦ可明显改善屏蔽全骨盆后６．５Ｇｙ＾６０Ｃｏγ线照射犬的临床症状，加速外周血白细胞的恢复，提高白细胞的最低值，缩短白细胞减少的持续时间。可明显增加照射犬骨髓有核细胞数及骨髓细胞数，促进骨髓ＣＦＵ－ＧＭ的增殖，提高骨髓细胞的粒／红比值。可应用于事故性骨髓型急性放射     

西咪替丁对急性照射小鼠存活率及造血系统改变的影响

目的 观察西咪替丁对急性照射小鼠存活率及造血系统改变的影响.方法 采用137Cs γ射线全身照射小鼠,两次实验的照射剂量分别为6.0Gy和8.0Gy,剂量率均为1.01Gy/min.每次实验取健康雄性C57BL/6小鼠60只,按体重随机分为空白对照组?模型对照组?阳性药组(523)及33.3?100?300mg/kg西咪替丁组,每组10只.西咪替丁各剂量组于照射前6d灌胃给药,每天1次,照射后5h给药1次;阳性药组于照射前1d灌胃给药1次,照射后5h给药1次.检测8.0Gy照射后30d小鼠存活率,以及6.0Gy照射后30d小鼠外周血象?骨髓DNA含量和骨髓嗜多染红细胞微核率.结果8.0Gy照射后,模型对照组小鼠于第21天全部死亡,西咪替丁低?中?高剂量组30d存活率分别为50%?20%和30%;6.0Gy照射后第30天,与空白对照组比较,各照射组小鼠外周血白细胞明显降低(P<0.01),骨髓嗜多染红细胞微核率明显升高(P<0.05),骨髓DNA含量明显降低(P<0.05);与模型对照组比较,西咪替丁高剂量组外周血白细胞明显升高(P<0.01),西咪替丁各剂量组骨髓DNA含量明显升高(P<0.01,P<0.05),而骨髓嗜多染红细胞微核率明显降低(P<0.01,P<0.05)并趋于正常.结论 西咪替丁能提高急性照射小鼠30d存活率,且对其造血系统有较好的保护作用.     

大剂量全身照射比格狗生物效应观察

目的 :为极重度骨髓型急性放射病实验治疗提供依据 ,观察了不同剂量照射比格狗的生物效应。方法 :60 Coγ辐射源分别照射 6 .5 ,5 .5 ,5 .0 ,4.5 ,3.5 ,2 .5Gy ,照射剂量率为 7.2 2 4× 10 _2 C/(kg·min)。观察照射动物的一般临床表现、外周血细胞计数、骨髓细胞培养。结果 :所有比格狗于照射后 0 .5～ 2h均有呕吐。 6 .5Gy照射组动物于照射后第 2天出现腹泻 ,并伴有白色黏液 ,其中 3只动物出现血水样便或咖啡样便。 5 .5Gy组有个别动物出现水样便 ,而 4.5Gy以下剂量照射组动物出现一般稀便。比格狗除 2 .5Gy组有一只动物活存外 ,其余均死亡 ,各组死亡动物平均活存时间依剂量的大小分别为 5 .0 ,8.0 ,9.3,9.5 ,10 .5和 14.1d。照射后 1d骨髓造血祖细胞集落数随照射剂量的增加而明显减少。照射后外周血白细胞和血小板数最低值出现时间随照射剂量的增大而提前 ,且剂量效应关系显著。结论 :对临床症状、外周血白细胞及活存时间的分析结果表明 ,比格狗的极重度骨髓型急性放射病 (偏轻 )模型的全身照射剂量为 4.5～ 5 .0Gy。     

rhGM－CSF对狗骨髓辐射损伤治疗作用的定量病理研究

目的：为了解细胞因子对骨髓辐射损伤的治疗作用。方法：用＾６０Ｃｏγ射线以５．５Ｇｙ照射１４只比格狗条，静脉注射低剂量（１０μｇ／ｋｇ·ｄ）及高剂量（２０μｇ／ｋｇ·ｄ）ｒｈＧＭ－ＣＳＦ，连续２０天，动物于照射后３０天活杀取胸骨，采用Ｈ·Ｅ及Ａｇ－ｎｏｒ嗜银蛋白染色和图像分析等技术，定量研究了ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对骨髓造血的促进作用。结果表明：高剂量的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对狗骨髓辐射损伤后造血重建有明显的促     

抗凋亡细胞因子治疗急性放射病的实验研究进展

骨髓造血干细胞及各系造血祖细胞因其高度的增殖活性而成为辐射攻击的主要靶细胞,以往人们利用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)或粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等刺激残存定向造血干/祖细胞(HSPCs)增殖的造血因子作为急性辐射损伤(ARI)治疗研究的重点且卓有成效~([1]).随着科学的发展和研究的进一步深入,发现照射后造血细胞早期凋亡和坏死是导致体内造血干/祖细胞缺失的关键因素,不仅造血细胞而且非造血组织细胞在照射后都会发生凋亡~([2]).     

人骨髓CFU-c之辐射敏感性

本文报导了五名外周血像正常的不同疾病患者的骨髓在半固体琼脂培养中集落生成单位(CFU-c)的剂量活存曲线。3例胸廓成形术病人(2例患纤维空洞肺结核,1例患慢性结核性脓胸)的骨髓取自切除的肋骨;另2例(骨髓无转移的骨肉瘤和Даун氏病各1例)是无菌穿刺取得骨髓。骨髓悬液在融冰温度下以~(60)Co-γ射线照射,剂量率为100拉德/分。应用双层琼脂培养法在含有10%二氧化碳的空气中于37℃培养10～12天。往含有0.5%琼脂的培养基的下层,按浓度为10~6个/毫升,加入供体外周血白细胞,作为集落生成刺激因子(CSF);往含0.3%琼脂的上层按1～2×10~5个/毫升的浓度,加入骨髓细胞。培养结束后在70倍放大镜下计数超过50个细胞的集落,不足50个细胞的则属细胞丛。     

人巨噬细胞集落刺激因子(hM-CSF)对60C0γ射线照射后小鼠血细胞生成的影响

本文研究了人巨噬细胞集落刺激因子(hM-CSF)对经亚致死剂量⁶⁰COγ射线照射后小鼠血细胞生成的影响。细胞生成的影响。结果显示hM-CSF可刺激照射后小鼠CFU-M和CFU-S的形成,并增加BMC的数量。hM-CSF还可以增加照射小鼠外周血白细胞的总数,且增加的白细胞主要为单核细胞和中性粒细胞。hM-CSF对外周血红细胞和血红蛋白的影响无显著意义.上述结果提示hM-CSF可促进⁶⁰Coγ射线照射小鼠造血功能的恢复。     

低剂量辐射对人骨髓间充质干细胞影响的研究

目的 探讨低剂量辐射(LDR)对人骨髓间充质干细胞(hBM-MSC)生物学特性的影响。方法 应用体外培养传代的第四代hBM-MSC,采用X射线照射,照射剂量分别为50 mGy、75mGy、100 mGv,剂量率为12.5 mGy/min,分别观察LDR后hBM-MSC生长曲线、细胞周期与凋亡的变化及细胞因子、干细胞因子(SCF)、白细胞介素6(IL-6)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)表达量的变化。结果 LDR后,hBM-MSC从72 h起生长明显加快;LDR照射hBM-MSC后,在G0-G1期百分率逐渐减少,S期百分率在照射后48 h、72 h逐渐明显增多,以75 mGy照射后72 h的S期百分率增多最明显,为68.88%,而细胞凋亡的变化结果是LDR后在24 h、48 h有增多趋势,照射后72 h,凋亡细胞百分率有减少趋势;LDR照射hBM。MSC后24 h、48 h SCF分泌量均有升高趋势;50mGv、75mgy、100mGyX射线照射hBM-MSC后在培养的24 h、48 h,IL-6分泌量均有升高趋势;LDR照射hBM-MSC后,除50mGy照射后72h外,M-CSF分泌量在不同剂量照射后24 h、48 h、72 h均持续升高。结论 LDR后hBM-MSC从生长曲线、细胞周期与凋亡的变化及细胞因子表达量的变化均表现出兴奋性效应。     

造血干细胞移植中预先全身照射对全身及造血系统的影响及并发症治疗

目的 探讨全身照射联合高剂量化疗对造血干细胞移植患者全身和造血系统影响的特点和治疗,为急性放射病的诊治提供临床经验。方法 回顾分析64例接受造血干细胞移植患者,系统观察急性照射及大剂量化疗后患者血液学改变及临床不良反应,并分析其骨髓重建特点。结果 移植相关病死率3.12%。移植后随访9～72个月 (中位随访时间26个月)。1、3、5年生存率分别为(95.8±3.3)%, (89.8±4.7)%和(81.7±6.9)%。全身照射联合高剂量化疗后,所有患者均出现了血液学不良反应,以白细胞及血小板下降最为明显,白细胞总数最低值为(0.18±0.13) ×10⁹个/L,血小板最低值为(14.48±8.85)×10⁹个/L;在造血干细胞支持及粒细胞集落刺激因子(G-CSF)应用后,均可恢复。此外患者不同程度出现消化道反应、感染、肝功能受损及出血等不良反应,经相关治疗后好转。结论以TBI联合高剂量化疗为预处理,随后进行造血干细胞移植,患者恶性血液系统疾病治疗效果好,并且其临床情况在一定程度上模拟了急性放射病的临床过程,为急性放射病的救治提供了一定的临床经验。     

造血因子动员后自体外周血干细胞移植对急性放射病猴的治疗作用

目的　观察重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)或rhG CSF +重组人干细胞因子 (rhSCF)动员后外周血干细胞 (PBSC)自身移植对 7 0Gyγ射线照射猴的治疗效果。方法　 15只正常成年猕猴分成照射对照、rhG CSF和rhG CSF +rhSCF 3组。rhG CSF 10 μg/(kg·d) (μKD)连续 5天皮下注射 ,rhSCF 2 0 μKD连续 8天皮下注射 ,后 5天与rhG CSF联用。照射对照组注射等体积的生理盐水。照射当天收集PBSC ,7 0Gyγ射线照射后 3～4h做自体PBSC移植 ,观察其造血恢复情况。结果　在移植后恢复期rhG CSF +rhSCF组白细胞数明显高于对照组和rhG CSF组。rhG CSF+rhSCF和rhG CSF组外周血小板数的恢复优于照射对照组 ,骨髓CFU数明显高于对照组。病理组织学检查表明 ,rhG CSF组骨髓腔内造血细胞数量超过照射对照组 ,但比rhG CSF +rhSCF组少。结论　rhG CSF或rhG CSF +rhSCF组动员后自体PBSC移植可明显促进急性放射病猴的造血功能恢复 ,两因子联用组的效果优于单因子组。     

rhG—CSF对6.5Gy照射小鼠近期有远期造血恢复作用的影响

为了观察重组人粒细胞集落刺激因子对机体长期造血功能恢复的影响，设计了二次照射小鼠模型，即首次γ线照射后给予不同剂量的ｒｈＧ－ＣＳＦ治疗，待外周血细胞恢复正常后，给予等剂量第二次照射，照后不再接受任何治疗，观察前后两次照射后外周血细胞的恢复和活存率的改变。