诱导性一氧化氮合酶及其调节机制

一氧化氮是由L-精氨酸在一氧化氮合酶的催化下产生的，其产生过程需要四氢生物蝶呤、血红素、钙调蛋白和黄素等多种协同因子的参与，尤其是钙调蛋白起到了一氧化氮合酶开关的作用。对一氧化氮合成过程的调节一般发生在底物水平、一氧化氮合酶的转录水平以及转录后水平，其调节剂以及调节途径十分复杂。而在一氧化氮合酶活性的衡量标准方面，目前尚存有争议。     

组织器官及培养细胞一氧化氮合酶活性测定

一氧化氮合酶有重要的病理生理功能，组织器官及增减细胞ＮＯＳ活性测定是主要研究手段。ＮＯＳ活性测定可分为分分光度法和同位素法，前者依反应原理不同又可分为三种。ＮＯＳＤ活性测定的样品制备要使用多种蛋白酶抑制剂，如不使用，则应尽快测定。同位素测定ＮＯＳ活性可不制备细胞提取物。     

慢性肾衰竭患者血小板一氧化氮合酶活性的改变

目的 通过测定慢性肾衰竭(CRF)患者血小板一氧化氮合酶(NOS)的活性,探讨CRF患者血小板损伤的机制.方法 取12例CRF患者外周静脉血,利用凝胶色谱柱法收集血小板,同位素二步色谱法测定血小板NOS活性.健康成人10名作为对照.结果 CRF患者血小板NOS活性明显低于正常人(P＜0.01).组胺刺激后血小板NOS活性仍低于正常(P＜0.05).结论 CRF患者血小板功能异常与其血小板NOS活性降低有关.     

组织器官及培养细胞一氧化氮合酶活性测定

一氧化氮合酶（NOS）有重要的病理生理功能，组织器官及培养细胎NOS活性测定是其主要研究手段之一。NOS活性测定可分为分分光度法和同位素法，前者依反应原理不同又可分为三种．NOS活性测定的样品制备要使用多种蛋白酶抑制剂，如不使用，则应尽快测定。同位素法规定NOS活性可不制备细胞提取物。     

急性一氧化碳中毒大鼠小脑组织一氧化氮及一氧化氮合酶活性的变化

目的 研究急性一氧化碳（ＣＯ）中毒大鼠小脑组织中一氧化氮（ＮＯ）、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性的变化,以探讨ＮＯ、ＮＯＳ与急性ＣＯ中毒脑损伤的关系。方法 实验用Ｗｉｓｔａｒ大鼠２６只,随机分为两组：正常对照组（Ｃ组）,ＣＯ染毒组（ＣＯ组）。采用改良的Ｇｒｉｅｓｓ法、分光光度法分别测定了小脑组织中ＮＯ、ＮＯＳ活性。结果：ＣＯ中毒后小脑组织中ＮＯ明显增高（Ｐ〈０．０５）,ＮＯＳ活性明显降低（Ｐ〈０．０１     

视网膜光凝治疗 Eales 病前后一氧化氮与一氧化氮合酶的检测分析

目的：观察Eales病患者视网膜光凝治疗前后血浆一氧化氮（NO ）水平及一氧化氮合酶（NOS ）的活性。方法选择沧州市中心医院眼科2006年5月至2013年7月经临床确诊的Eales病患者104例（170眼）为观察组,按照眼底荧光血管造影结果,将观察组分为激光治疗患者60例（78眼）,非激光治疗患者44例（92眼）。选择同期健康人群66例为健康对照组。对所有研究对象术前术后分别检测NO、NOS。结果观察组NO、总NOS及结构型NOS（cNOS）活性平均值低于健康对照组（P＜0．05）。激光治疗和非激光治疗患者各指标比较,差异均无统计学意义（P＞0．05）。激光治疗患者术前及术后NO、NOS比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。激光治疗患者中视力保持稳定或提高者共70眼（89．74％）。结论 NO与NOS可能参与 Eales病的发生发展,视网膜光凝治疗能有效控制Eales病的发展,但视网膜光凝治疗未能从根本上治疗Eales病。     

黄芪对急性脑损伤后一氧化氮合酶活性的抑制作用

背景：黄芪在机体免疫功能调节中具有重要作用，而在对急性颅脑损伤干预中是否具有神经元保护作用，且其发挥作用的途径何在。目的：观察黄芪对脑损伤后脑组织一氧化氮合酶活性的影响。设计：随机对照的实验。单位：兰州军区神经外科研究所。对象：实验于2001-09／12在兰州军区神经外科研究所实验室完成。取健康雄性SD大鼠54只，随机分为3组：脑损伤组(n=24)，黄芪组(n=24)，对照组(n=6)，损伤组与黄芪组均分为伤后0．5．2．6和24h4个时间点，每个时间点6只动物。方法：脑损伤组和黄芪组制备脑损伤模型，对照组仅开骨窗，不致伤。黄芪组致伤后立即腹腔注射黄芪200mg／kg．用化学定量法检测大鼠脑损伤后不同时间点脑组织中一氧化氮合酶的活性。主要观察指标：各组大鼠脑组织中一氧化氮合酶活性。结果：54只大鼠全部进入结果分析。脑损伤组、黄芪组大鼠在伤后0．5h一氧化氮合酶活性较对照组升高[46．44&;#177;13．45)(43．15&;#177;12．43)，(40．46&;#177;12．85)nkat／L，P&;lt;0．05]，伤后2h达高峰[(67．49&;#177;22．45)，(64．26&;#177;19．78)nkat／L，P&;lt;0．0l]，伤后6h开始下降[(63．46&;#177;24．68)，(52．9l&;#177;21．36)nkat／L．P&;lt;0．0l]，伤后24h降至基础水平[(41．23&;#177;12．57)，(40．92&;#177;12．25)nkat／L．P&;gt;0．05]。黄芪组在伤后2，6h一氧化氮合酶活性较损伤组明显降低(P&;lt;0．01．0．05)。结论：颅脑损伤后．受损脑组织中一氧化氮合酶活性呈节段性升高．黄芪可通过抑制损伤后脑组织中一氧化氮合酶活性．起到保护创伤神经元的作用。     

诱导性一氧化氮合酶及其调节机制

一氧化氮是由L 精氨酸在一氧化氮合酶的催化下产生的 ,其产生过程需要四氢生物蝶呤、血红素、钙调蛋白和黄素等多种协同因子的参与 ,尤其是钙调蛋白起到了一氧化氮合酶开关的作用。对一氧化氮合成过程的调节一般发生在底物水平、一氧化氮合酶的转录水平以及转录后水平 ,其调节剂以及调节途径十分复杂。而在一氧化氮合酶活性的衡量标准方面 ,目前尚存有争议。     

缺氧脑组织与一氧化氮及其合酶

目的：在脑缺血性损伤过程中，一氧化氮发挥着复杂的作用，多途径参与了生理和病理过程，许多实验的结论看似矛盾，但经过人们大量和细致的分析，已可以得出一些大致的规律性认识。资料来源：应用计算机检索Medline 1987-01／2001-03有关一氧化氮及其合酶与缺氧脑组织关系的献，检索词“Hypoxla，Nitricoxide，Nitric oxide synthase”，并限定语言种类为English。资料选择：对所选献进行初审，排除综述类献及Meta分析，然后全查找余下的献。质量评价主要考察资料的真实性，实施过程是否严格，统计学分析是否合理。资料提炼：共检索28篇关于一氧化氮及其合酶与缺氧脑组织关系的献，20篇献符合纳入标准，排除的8篇章中，4篇是因重复的同一实验，其他4篇为小样本实验结果。资料综合：在脑缺氧过程中一氧化氮起着复杂而关键的作用，在脑缺氧过程中，伴随着一氧化氮的变化。一氧化氮的释放受一氧化氮合酶的调控，一氧化氮合酶的活性与缺氧的相关因子有关。结论：一氧化氮在脑缺氧过程中起着保护与损伤双重作用，其对脑组织损伤或保护取决于脑缺氧的不同时期和一氧化氮局部含量等因素。适量的一氧化氮对脑缺氧有防护作用，而在脑缺血缺氧的大部分时期则应使用诱生型一氧化氮合酶和神经元型一氧化氮合酶的选择性抑制剂抑制一氧化氮的毒性作用。     

头痛患者血浆一氧化氮含量测定及与发病机制的关系探讨

头痛为神经科常见病，其发病机制尚不十分清楚。近年发现一氧化氮（ＮＯ）在头痛的产生机制中是一个十分关键的因素。对头痛患者血中ＮＯ进行研究国外仅有少量报道，国内尚无报道。本文间接测定了头痛患者血浆中ＮＯ含量以探讨头痛的发病机制。１资料与方法１．１临床资料...     

脑梗死患者一氧化氮合酶基因多态性及其对一氧化氮的影响

目的观察脑梗死患者内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因多态性及一氧化氮(NO)变化情况。方法采用前瞻性病例对照研究,脑梗死组193例,均为发病2周内经头颅CT或MRI证实存在颈内动脉分布区梗死灶者,对照组103例为正常体检者。对两组eNOS基因4号内含子多态性进行测定,并采用Griess重氮化反应法和酶标法分别检测血清NO含量、NOS活性。结果脑梗死组eNOS基因4号内含子a等位基因(eNOS4a)携带者48例,对照组为12例,携带频率有显著性差异(χ2=8.86,P=0.003);经Logistic回归分析,eNOS4a携带是脑梗死的独立危险因素(P=0.032);脑梗死组NO产物浓度中位数为6.04(3.83～11.49)μmol/L,低于对照组6.89(4.64～12.43)μmol/L(P=0.022)。eNOS4a携带者NO产物浓度中位数为5.07(3.18～7.62)μmol/L,低于非携带者6.86(4.39～11.76)μmol/L(P=0.001)。脑梗死组NOS活性为(2.97±1.47)U/ml,对照组(3.16±1.46)U/ml,无显著性差异(P=0.517)。eNOS4a携带者NOS活性(2.77±1.13)U/ml,与非携带者(3.12±1.54)U/ml无显著性差异(P=0.100)。结论eNOS4a携带可能通过减少NO生成而在脑梗死发生过程中发挥作用。     

血清一氧化氮及一氧化氮合酶水平与病毒性肝炎的关系

【目的】探讨血清一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (NOS)水平与病毒性肝炎的关系。【方法】作者检测了 5 9例病毒性肝炎患者的血清NO及NOS水平。【结果】各型肝炎患者的NO含量均显著高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,NOS含量以肝硬化 (LC)、急性肝炎 (AVH)、重型肝炎 (HG)增高显著 (P <0 .0 1) ,其中以LC组增高最为明显。在急性、慢性、重型肝炎的急性期或活动期时 ,NO含量与谷丙转氨酶 (ALT)及总胆红素 (TBIL)呈正相关。【结论】肝脏发生炎症时 ,NOS被诱导生成增多 ,从而产生大量的NO。NO含量升高与肝功能损害的程度有关。重症肝炎时 ,由于肝细胞大量坏死 ,导致NOS降低 ,NO生成也相应减少。肝硬化患者的血清NO及NOS增高 ,主要与内毒素有关     

L—精氨酸促进移植血管诱导型一氧化氮合酶活性实验研究

目的：探讨外源性L－精氨酸（L－Arg)对移植血管诱导型一氧化氮合酶活性影响,方法：新西兰大白兔15只随机分成3组,建立双侧颈动脉间置颈外静脉移植动物模型,高剂量组每日喂食L－Arg 250mg/kg,低剂量组每日喂食L－Arg 125mg/kg,对照组不喂食L－Arg,持续2周,观察移植血管术前,术后3周和术后6周血浆一氧化氮（NO）水平,组织匀浆一氧化氮合酶（NOS）活性和诱导型NOS的mRNA表达。结果：（1）血浆NO水平：实验组血浆NO水平显著高于对照组,高剂量组血浆NO水平高于低剂量组。（2）组织匀浆NOS活性：实验组组织匀浆NOS活性显著高于对照组,3组术后6周NOS活性高于术后3周。（3）组织匀浆iNOS mRNA表达：术后3周实验组iNOS mRNA表达,对照组无表达;术后6周3组iNOS mRNA均有表达,实验组iNOS mRNA表达高于对照组,高剂量组高于低剂量组,结论：外源性L－Arg促进移植血管NOS表达,增进NOS活性,提高体内NO浓度。     

哮喘病人血一氧化氮及其合成酶、血管内皮素的变化

目的:为探讨支气管哮喘与血一氧化氮及其合成酶、血管内皮素的关系。方法:测定了轻度发作的支气管哮喘病人31例及对照组30例的全血一氧化氮及其合成酶、血管内皮素。结果:哮喘组与对照组的血管内皮素分别为(44.45±25.76)pg/ml和(33.43±22.88)pg/ml(P<0.05),血一氧化氮两组分别为(37.65±17.20)μmol/ml和(42.81±19.42)μmol/ml(P>0.05),血一氧化氮合成酶活性分别为22.81±5.53和22.14±4.53(P>0.05)。结论:研究观察到血管内皮素可能在支气管哮喘气道炎症之中起重要病理生理作用,但未观察到一氧化氮及其合成酶在轻度发作的支气管哮喘病人中的变化。     

妊娠高血压综合征绒毛合体滋养细胞一氧化氮合酶活性的定量研究

目的探讨妊娠高血压综合征 (妊高征 )、正常妊娠合体滋养细胞一氧化氮合酶 (NOS)的活性变化及合体滋养细胞源性的一氧化氮 (NO)在妊高征发病中的作用。方法采用NADPH D组织化学方法显示 2 1例正常妊娠、15例重度妊高征 ,15例中度妊高征、14例轻度妊高征胎盘绒毛合体滋养细胞NOS活性 ,运用显微图像分析技术计算出每例胎盘绒毛合体滋养细胞NOS活性反应产物甲月替灰度值。结果中度妊高征 (79.9± 8.8)、重度妊高征 (78.7± 8.4 )胎盘绒毛合体滋养细胞NOS活性反应产物甲月替灰度值比轻度妊高征 (85 .6± 8.4 )及正常足月妊娠 (86 .8± 11.5 )低 (P <0 .0 5 )。结论妊高征病人胎盘绒毛合体滋养细胞NOS活性降低 ,导致其NO生成减少 ,在妊高症发病中起重要作用。     

Angiotensin-Converting Enzyme and Endothelial Nitric Oxide Synthase Polymorphisms in Patients with Atrial Fibrillation

GENSINI, F., et al. ; Angiotensin-Converting Enzyme and Endothelial Nitric Oxide Synthase Polymorphisms in Patients with Atrial Fibrillation. Experimental studies have shown a significant increase in angiotensin-converting enzyme (ACE) expression in atrial tissue of AF patients. ACE regulates the synthesis of endothelial nitric oxide (NO), which modulates autonomic nervous activity involved in the development of AF. The aim of the study was to evaluate the prevalence of ACE insertion/deletion and endothelial NO synthase (eNOS) T-786C, G894T, and 4a/4b polymorphisms in 148 patients with persistent AF, compared with 210 control subjects. ACE insertion/deletion polymorphism genotype distribution and allele frequency were significantly different between patients and controls (   P < 0.0001   and   P < 0.0001   , respectively). ACE DD genotype was significantly associated with the risk of AF   (OR DD/ID + II = 3.24, P < 0.0001)   . Analysis of eNOS polymorphisms showed no significant difference in genotype distribution and allele frequency between patients and controls. The results suggest a possible role of ACE DD genotype as a predisposing factor to AF and a pathophysiological mechanism of ACE inhibition in reducing the incidence of AF in patients with left ventricular dysfunction. (PACE 2003; 26[Pt. II]:295–298)     

肝硬化门脉高压大鼠组织中一氧化氮合酶分布及其活性研究

目的探讨一氧化氮 (NO)与门脉高压症的关系。方法采用四氯化碳 (CCl4)复制肝硬化模型成功后 ,用NADPH黄递酶组织化学染色方法观察一氧化氮合酶 (NOS)在肝组织、腹主动脉中的分布 ,并比较其活性。结果NADPH黄递酶组织化学染色法证实NOS主要分布于肝细胞、肝血管内皮、腹主动脉内皮及血管平滑肌细胞中 ,实验组总体NOS活性高于对照组。结论NO参与门脉高压及其高动力循环状态的发生     

雌性大鼠尿道壁内横纹括约肌一氧化氮合酶分布的免疫组化研究

目的研究神经型一氧化氮合酶（nNOS）在大鼠尿道壁内横纹肌的分布情况。方法雌性Wistar大鼠4只,水合氯醛腹腔注射麻醉后,解剖膀胱和尿道全长标本,福尔马林固定,石蜡包埋,2只做平行尿道长轴的纵行切片,2只做垂直尿道的横行切片,常规HE染色、Mallory磷钨酸苏木素染色了解尿道的显微解剖。定位尿道横纹括约肌后局部进行nNOS免疫组化染色。结果雌性Wistar大鼠的尿道为一长约1.5~2.0cm的管状结构。其典型的组织结构由外向内依次为：环行横纹肌纤维层、环行平滑肌纤维层、纵行平滑肌纤维层、致密结缔组织层和上皮层。全尿道标本纵切面显示,尿道壁内横纹括约肌并不分布于尿道全长,而是仅环绕尿道的中下段。横切面显示尿道壁内横纹括约肌呈封闭环形,约5~10层不等,但并不是均匀分布,后壁横纹肌层较前壁为厚,层数稍多。nNOS免疫活性在部分尿道壁内横纹肌内呈强阳性表达。结论nNOS在部分尿道壁内横纹肌内呈强阳性表达,提示其对尿道壁内横纹肌可能起重要的调节作用。     

葛根素抑制脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞表达诱导型一氧化氮合酶

目的观察葛根素对脂多糖（LPS）诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞表达诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的影响。方法用脂多糖刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7,与不同浓度的葛根素进行培养,采用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）和免疫蛋白印迹法测定（Western blotting）方法分别检测RAW264.7巨噬细胞iNOS mRNA和蛋白质表达。结果随着葛根素的浓度的增加,RAW264.7细胞iNOS的mRNA及其蛋白质表达逐渐减少(P<0.01)。结论葛根素可以通过调节RAW264.7细胞表达iNOS发挥抗炎的作用。     

腺病毒转染一氧化氮合酶基因抑制大鼠静脉桥血管内膜增生

目的探讨转染一氧化氮合酶（NOS）基因对自体移植静脉内膜增生的影响.方法制作20只自体颈静脉腹主动脉移植Wistar大鼠模型,实验组、对照组各10只.移植前,实验组血管行腺病毒介导的eNOS溶液浸泡,对照组仅行空载腺病毒溶液浸泡.术后2周取出移植血管,利用病理学、免疫组织化学、RT-PCR检测移植血管内膜厚度、管腔狭窄度、内膜血管平滑肌细胞（VSMC）数及PCNA阳性表达、血管eNOS mRNA表达情况.结果实验组移植血管内膜厚度、管腔狭窄度、VSMC数及PCNA阳性表达均较对照组明显减小或减少,而eNOS mRNA表达则明显增加（均P＜0.01）.结论移植血管转染NOS基因可有效抑制移植静脉内膜的增生.