人胃癌顺铂耐药细胞系的建立过程

目的:建立人胃癌顺铂耐药细胞系方法:采用逐步递增顺铂浓度,间歇作用体外诱导法建立人胃癌顺铂耐药细胞系SGC7901/ DDP,每月作相关检测;MTT法测定药物敏感性:光镜、电镜、MTT法计数活细胞、流式细胞仪等方法观察其生物学特征的改变.结果:历时4 mo建成人胃癌顺铂耐药细胞系SGC7901/DD P,1,2,3,4mo的耐药指数分别为2.13,5.32,12.60,12.93,并且与5-氟尿嘧啶、丝裂霉素等多种抗癌药有不同程度的交叉耐药性:SGC7901/DDP的细胞形态逐渐发生改变;体外群体倍增时间较亲代细胞逐渐延长:细胞周期分析发现其S期与G_2/M期细胞逐渐减少,G_0/G_1期细胞逐渐增多.结论:SGC7901/DDP细胞具有耐药表型特征,耐药性能稳定,增殖能力逐渐下降.     

苏州地区集贸市场淡水鱼虾华支睾吸虫囊蚴感染情况调查

淡水鱼虾类是华支睾吸虫的第二中间宿主,人食入含华支睾吸虫活囊蚴的淡水鱼虾后可被感染,引起华支睾吸虫病[1]。苏州地区鱼类资源极其丰富,拥有鱼类107种(不包括引进鱼种),其中大多是淡水鱼类,在分类学上属鲤科的就有54种。为了解苏州地区集贸市场淡水鱼虾华支睾吸虫囊蚴感染情况,作者等于2004年9~12月,对苏州市彩香、南环两大集贸市场销售的淡水鱼虾进行了调查。1材料和方法从苏州彩香、南环两大集贸市场收购7种淡水鱼虾:鲫鱼、中华鰟鮍鱼、鳊鱼、麦穗鱼、鲹条、泥鳅、鳌虾。尽量选择个体较小者。将所购鱼虾分类,分别量体长,称体重,编号、…     

2′-O-meRNA对人胃癌细胞的抑制作用及对5-FU和BCNU疗效的影响

目的探讨2'-O-meRNA通过抑制端粒酶来杀伤胃癌细胞系SGC-7901的作用及对化疗药5-FU和BCNU疗效的影响.方法培养人胃癌细胞系SGC-7901,分为5-FU组、BCNU组、2'-O-meR-NA组、反义对照组、化疗药与反义抑制剂合用组,观察用药后该细胞系存活情况及端粒酶活性.结果5-FU、BCNU、2′-O-meRNA可有效抑制SGC-7901细胞的活性(P＜0.05),BCNU、2'-O-meRNA可有效抑制细胞端粒酶活性,1 μM 2′-O-meRNA可加强6.25μg/ml BCNU的疗效(P＜0.01),但是不能加强12.5μg/ml 5-FU的作用(P＞0.05).结论2'-O-meRNA抑制胃癌细胞系SGC-7901的生长.1μM 2′-O-meRNA与6.25μg/ml BCNU合用时有协同作用,2′-O-meRNA与5-FU合用时无协同作用.     

MGrl-Ag维持耐药表型与蛋白激酶C有关

目的探讨MGrl-Ag维持耐药表型与蛋白激酶C的关系, 方法用免疫细胞化学方法检查MGrl-Ag在胃癌SGC7901细胞系及耐药亚系的表达;ELISA及点印迹方法检测胃癌SGC7901细胞系及其耐药亚系细胞培养上清中MGrl-Ag的表达;免疫荧光双标记及共聚焦显微镜技术观察MGrl-Ag与PKCa的相关表达;竞争蛋白结合法检测单克隆抗体MGr-1对PKC活性的影响。结果MGrl-Ag在胃癌SGC7901细胞系及耐药亚系均有表达,以耐药细胞表达明显增多;ELISA及点印迹实验证实在表达MGrl-Ag的细胞培养上清中均可检测到MGrl-Ag;耐药细胞PKCa与MGrl-Ag的相关表达较药敏细胞明显增强;单克隆抗体MGr-1与耐药细胞共同孵育后,耐药细胞PKC的活性减低,以细胞质的PKC降低比较明显。结论 MGrl-Ag可能是一种分泌蛋白,MGrl-Ag维持SGC7901/VCR耐药细胞系的耐药表型可能受PKC信号转导通路的调节。     

鱼类本尼登虫病的发育和防治研究进展

海水网箱养殖鱼类新本尼登虫（又称贝尼登虫）病是近年来我国南方海水养殖鱼类的重要寄生虫病之一。自MacCallum1927年首先报道纽约水族馆鱼类本尼登虫以来^[1],国外文献中至今已记载鱼类本尼登虫种类有16属57种,并已建立本尼登亚科（Benedeniinae）^[2]。     

维拉帕米逆转胃癌细胞系SGC7901/VCR多药耐药性的研究

目的研究维拉帕米对人胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR多药耐药性的逆转效应.方法利用RT-PCR、免疫组化以及MTT等方法,观察维拉帕米对体外培养SGC7901/VCR细胞系耐药性的逆转作用.结果RT-PCR、免疫组化和MTT结果表明维拉帕米可以使SGC7901/VCR的MDRl基因表达水平和P-gP糖蛋白表达降低,细胞对丝裂霉素、替加氟等药物的敏感性明显增加.结论维拉帕米在体外有逆转SGC7901/VCR胞多药耐药的效应.     

miR-29通过调节抗凋亡蛋白Mcl-1表达参与胃癌细胞多药耐药的发生

目的研究miR-29在胃癌多药耐药细胞株[SGC7901/长春新碱(vincristine,VCR)及SGC7901/阿霉素(adriamycin,ADR)]及其亲本细胞(SGC7901)中的表达差异,探讨其在胃癌多药耐药发生中的作用及可能机制.方法 qRT-PCR检测miR-29在不同胃癌细胞系中的表达差异,通过细胞转染调控miR-29的表达水平,MTT法检测不同化疗药物对转染后胃癌细胞的IC50值变化;流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化;并应用Western blot、双荧光素酶报告基因实验等方法探讨其可能机制.结果 SGC7901/VCR及SGC7901/ADR细胞中miR-29家族(miR-29a/b/c)相对表达量均显著低于其亲本细胞SGC7901(P0.05);MTT实验表明,下调miR-29表达后SGC7901细胞对不同化疗药物的IC50值显著增高(P0.05);而上调miR-29表达后SGC7901/VCR及SGC7901/ADR细胞对不同化疗药物的IC50值则显著降低(P0.05);流式细胞术检测结果显示,miR-29表达变化可显著改变5-氟尿嘧啶诱导胃癌细胞的凋亡水平(P0.05);Western blot、双荧光素酶报告基因实验等证实髓细胞白血病因子-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)是miR-29直接调控靶基因.结论 miR-29表达下调是人胃癌细胞多药耐药发生的机制之一,其可能与负性调控抗凋亡蛋白Mcl-1表达有关.     

2'-O-meRNA对人胃癌细胞的抑制作用及对5-FU和BCNU疗效的影响

目的探讨2'-O-meRNA通过抑制端粒酶来杀伤胃癌细胞系SGC-7901的作用及对化疗药5-FU和BCNU疗效的影响。方法培养人胃癌细胞系SGC-7901,分为5-FU组、BCNU组、2'-O-meR- NA组、反义对照组、化疗药与反义抑制剂合用组,观察用药后该细胞系存活情况及端粒酶活性。结果5- FU、BCNU、2'-O-meRNA可有效抑制SGC-7901细胞的活性(P<0.05),BCNU、2'-O-meRNA可有效抑制细胞端粒酶活性,1μM 2'-O-meRNA可加强6.25 μg/ml BCNU的疗效(P<0.01),但是不能加强12.5μg/ml 5-FU的作用(P>0.05)。结论2'-O-meRNA抑制胃癌细胞系SGC-7901的生长。1 μM 2'-O- meRNA与6.25 μg/ml BCNU合用时有协同作用,2'-O-meRNA与5-FU合用时无协同作用。     

苏州地区集贸市场淡水鱼虾华支睾吸虫囊蚴感染情况调查

淡水鱼虾类是华支睾吸虫的第二中间宿主,人食入含华支睾吸虫活囊蚴的淡水鱼虾后可被感染,引起华支睾吸虫病.苏州地区鱼类资源极其丰富,拥有鱼类107种（不包括引进鱼种）,其中大多是淡水鱼类,在分类学上属鲤科的就有54种.为了解苏州地区集贸市场淡水鱼虾华支睾吸虫囊蚴感染情况,作者等于2004年9～12月,对苏州市彩香、南环两大集贸市场销售的淡水鱼虾进行了调查.     

抗Fas mAb和IFN联合诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

目的观察联合应用抗Fas单克隆抗体(mAb)和干扰素-γ(IFNγ)诱导人胃癌细胞系SGC-7901细胞凋亡,并探讨其在胃癌治疗中的意义.方法应用细胞形态观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度术检测抗Fas mAb,IFN-γ单独及联合应用诱导的人胃癌细胞系SGC-7901细胞凋亡,并应用流式细胞光度术检测IFN-γ对人胃癌细胞系SGC-7901细胞表达Fas抗原的影响.结果抗Fas mAb显著诱导SGC-7901细胞凋亡(19.3%),细胞DNA裂解片段呈现典型的"阶梯状"排列的条带.联合应用抗Fas mAb和IFN-γ处理人胃癌细胞系SGC-7901细胞凋亡率(29.4%)显著高于对照组、IFN-γ及抗Fas mAb处理组(1.2%,1.9%,19.3%,t=17.345,17.276,5.425,P＜0.01及P＜0.05).IFN-γ处理组人胃癌细胞系SGC-7901细胞Fas抗原的表达阳性细胞数(59.3%)显著高于对照组(27.1%,t=12.995,P＜0.05),抗Fas mAb诱导SGG7901细胞凋亡的敏感性与Fas抗原的表达水平显著相关.结论抗Fas mAb可以诱导SGC-7901细胞凋亡.联合应用抗FasmAb和IFN-γ具有协同诱导人胃癌细胞凋亡的作用,其机制可能与干扰素-γ显著上调人胃癌细胞系SGC-7901细胞Fas抗原的表达水平有关.