大黄对体外肾小管细胞增殖的影响

本实验通过体外肾小管细胞培养,观察了大鼠服大黄后血清及大黄素对肾小管上皮细胞增殖的影响.结果发现,大鼠服大黄后血清以及大黄素,均对以~3H-TdR 掺入量为指标的细胞增殖有明显抑制作用,从而部分地解释了大黄治疗慢性肾功能衰竭的机理。     

一氧化氮对体外肾小管细胞增殖的影响

目的 探讨ＮＯ对肾小管细胞增殖的抑制效应。方法 应用体外培养的人集合管（Ｈ５）和负鼠近端小管（ＯＫ）细胞株,以Ｌ－精氨氨酸、硝普钠、内毒素γ－干扰素,肿瘤坏死因子－α,Ｎ－单甲基－Ｌ－精氨酸刺激或抑制合成,观察两种细胞＾３Ｈ－胸腺嘧啶摄 的变化。结果 ＮＯ引起Ｈ５和ＯＫ细胞＾３Ｈ－胸腺嘧啶摄入量浓度依赖性减少,结论ＮＯ可抑制这两种肾小管细胞增殖。     

白蛋白对肾小管上皮细胞增殖的影响

目的探讨蛋白尿检在不同时间点对大鼠近端。肾小管上皮细胞增值的影响。方法观察组采用体外培养大鼠近端肾小管上皮细胞（Rat proximal renal tubular epithelial cells,NRK-52E）,取生长状态良好,待其接近融合时模拟体内大量蛋白尿环境,给予不同浓度（10、20、30mg·ml^-1）去脂牛血清白蛋白（fat free bovine serum albumin,BSA）刺激,共同孵育6、12、18、24h;对照组给予同体积无血清培养基共同培养。采用MTT试验检测BSA对体外培养NRK-52E细胞毒作用。结果与对照组比较,白蛋白浓度为10mg·ml^-1时对NRK-52E细胞分别作用6、12、18和24h后,对细胞增殖程度影响没有差异（P〉0．05）。当白蛋白浓度为20mg·ml^-1时,对NRK-52E细胞作用6h后,细胞增殖程度与对照组比较没有差异（P〉0．05）,但随着作用时间的延长,细胞增殖低于对照组（P〈0．05）。当白蛋白浓度为30mg·ml^-1时,随着作用时间的延长细胞增殖几乎停滞,与对照组比较有统计学差异（P〈0．05）。结论白蛋白以时间和剂量依赖方式抑制NRK-52E细胞增殖,并可促进肾小管上皮细胞凋亡。     

生物人工肾小管体外构建的研究

目的：探讨体外构建生物人工肾小管（RAD）的方法和RAD重吸收钠离子（Na^ )、肌酐（Cr)、葡萄糖（Glu)的功能鉴定。方法：采用猪肾近曲小管上皮细胞株（LLC－PI1）体外培养,然后植入FH66血液滤过器内腔继续培养, 体外制作模拟血液滤过加肾小管细胞的系统,即ARD。测定本系统对Na^ 、Cr、Glu的重吸收功能,并与未植入LLC－PKI的滤过系统做对照。同时观察哇巴因、根皮苷对重吸收的特异性抑制作用。结果：实验组Cr重吸收率较对照组明显降低（5．9％：84．8％,P＜0．001）,Na^ 、Glu重吸收率大于85％,且明显受哇巴因及根皮苷抑制（重吸收率＜10％）,祛除药物抑制因素后,重吸收率又能恢复,与阴性对照组比较有明显差异。结论：本实验在体外成功构建RAD,并且具有选择性重吸收功能。     

大黄对体外内毒素诱生的肺泡巨噬细胞分泌功能的影响

采用细胞分离及培养技术观察了中药大黄对内毒素（LPS）体外诱生的肺泡巨噬细胞分泌细胞因子，如肿瘤坏死因子（TNF－α），白细胞介素-1（IL－1）和白细胞介素-6（IL－6）的作用。结果表明，大黄能够明显抑制LPS诱生的肺泡巨噬细胞分泌TNF－α、IL－1和IL－6，与对照相比P＜0．01。从而减轻由于TNF－α、IL－1、IL－6过度分泌所致的肺脏损害，这可能是大黄对肺脏具有保护作用的分子机制。     

大黄对体外系膜细胞增殖的抑制作用

中药大黄用于慢性肾功能不全治疗,可明显地改善肾功能,延缓肾脏病恶化的进程。鉴于系膜细胞在维持正常肾脏生理以及肾脏病发生发展中起重要作用,本实验以~3H-TdR摻入率作为指标,研究了大黄对体外培养的系膜细胞增殖的影响。大鼠灌服大黄后的血清和大黄素纯品直接加入培养基中,均能抑制系膜细胞的体外增殖。大黄的这种抑制作用,在一定浓度范围内具有剂量依赖性。灌服大黄后6小时收集的血清抑制最为明显,灌服100mg大黄后血清和50μg/ml大黄素纯品,对系膜细胞增殖的抑制率分别为43％、70％;大黄的这种抑制作用与培养的细胞密度无关。在一定浓度范围内,这种作用具有可逆性。这一研究可能有助于解释大黄治疗某些肾脏疾病的机理,以及指导大黄的临床应用。     

庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞损伤作用的研究

目的探索庆大霉素(GM)对体外培养的肾小管上皮细胞的损伤情况.方法采用MTT比色法和3H-TdR掺入法,观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞增殖的影响.结果一定浓度下(0.4 mmol·L-1)的庆大霉素能够使体外培养的肾小管上皮细胞MTT值下降(P＜0.05),而3H-TdR掺入率升高(P＜0.05);当庆大霉素浓度为1.0 mmol·L-1时,能够使体外培养的肾小管上皮细胞MTT值下降(P＜0.05),3H-TdR掺入率也下降(P＜0.05).结论一定浓度下(0.4 mmol·L-1)的庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞就有损伤作用,只有当GM浓度达到1.0 mmol·L-1时3H-TdR掺入率才有减少,肾小管上皮细胞的增殖作用才会减少.     

庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞损伤作用的研究

目的探索庆大霉素(GM)对体外培养的肾小管上皮细胞的损伤情况。方法采用MTT比色法和3H-TdR掺入法,观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞增殖的影响。结果一定浓度下(0·4mmol·L-1)的庆大霉素能够使体外培养的肾小管上皮细胞MTT值下降(P<0·05),而3H-TdR掺入率升高(P<0·05);当庆大霉素浓度为1·0mmol·L-1时,能够使体外培养的肾小管上皮细胞MTT值下降(P<0·05),3H-TdR掺入率也下降(P<0·05)。结论一定浓度下(0·4mmol·L-1)的庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞就有损伤作用,只有当GM浓度达到1·0mmol·L-1时3H-TdR掺入率才有减少,肾小管上皮细胞的增殖作用才会减少。     

原代肾小管上皮细胞的培养和鉴定

目的:建立大鼠肾小管上皮细胞原代培养及鉴定方法.方法:采用研磨、消化培养法,用免疫细胞化学和RT-PCR鉴定细胞.结果:培养的细胞CK18蛋白表达阳性,基本没有α-SMA 和Vimentin的蛋白表达,E-cadherin mRNA强表达.结论:成功建立大鼠肾小管上皮细胞原代培养方法,为肾脏疾病的研究提供实验平台.     

肾小管细胞培养技术研究进展

自Ｌｅｎｇｈｔｏｎ等建立小猎犬肾远曲小管的可传代细胞株以来 ,小管细胞培养技术渐趋完善 ,为肾脏的细胞生理学、免疫学、病理学和药理学进一步研究提供了条件。目前 ,国内外已成功地建立了鼠、兔、猴、狗、猫、牛、狒狒和人肾小管细胞的培养技术 ,并将该技术应用于肾小管细胞缺血、缺氧和中毒性损伤及修复机制的研究 ,从中发现有多种因素参与了肾小管细胞损伤的病理过程和损伤后的修复过程。本文就肾小管细胞培养技术进展作一简要回顾。1　取材及培养用液肾小管细胞培养主要采用肾皮质组织 ,其培养基常选用ＤＭＥＭ/Ｈａｍ’ｓＦ12按 1:1…     

大黄对大鼠实验性创伤性脑水肿的影响

目的 研究大黄对大鼠脑创伤后脑水肿的影响,进一步探讨其对实验性创伤性脑水肿的防治作用和可能机制.方法 SD大鼠96只,随机分成3组,假手术组、模型组、大黄治疗组.每组分4个时间点:1、3、5、7 d,每个时间点各8只.除假手术组外,各组大鼠复制Feeney自由落体大鼠脑外伤模型.其中,治疗组大鼠造模后给予大黄500 mg/(kg·d)灌胃.各组大鼠分别在1、3、5、7 d处死,分别测量脑含水量;观察各组脑组织的超微结构以及应用western blot测量各组大鼠AQP4的表达.结果 脑外伤后与模型组相比,大黄组脑组织含水量明显减少;通过电镜观察提示,大黄组毛细血管周围星形胶质细胞足突肿胀减轻,线粒体等细胞器完整.另外,模型组创伤后第1 dAQP4的表达略升高,而到第3 d达最低,从第5 d起AQP4的表达逐渐升高,第7 dAQP4的表达仍高于假手术组.在颅脑创伤早期以血管源性脑水肿为主的第1、3 d时,大黄组AQP4的表达较模型组上调,对脑水肿起保护作用,在第5、7 d细胞毒性脑水肿出现后大黄可明显抑制AQP4的表达减轻脑水肿.结论 大黄可减轻创伤性脑水肿;它可能是调节脑外伤后创伤脑组织周围的AQP-4的表达来实现的.     

载脂蛋白M对肾小管上皮细胞增殖凋亡的影响

目的:探究载脂蛋白M(ApoM)缺失对肾小管上皮细胞(RTECs)增殖及凋亡的影响,为肾脏疾病的防治提供新的思路.方法:收集野生型小鼠(WT)及ApoM基因缺失型(ApoM-/-)小鼠尿液并检测尿蛋白、尿酸及尿肌酐的含量.原代培养两组小鼠的RTECs,EdU试剂盒检测其增殖活力;Western blot法检测凋亡相关关...     

大黄对肝硬化患者血浆 内毒素水平的影响

肝硬化是临床常见病,因患者机体免疫功能低下及门体侧支循环的建立,极易出现内毒素血症,而内毒素血症常导致肝硬化病情进一步加剧并难以控制。笔者观察了大黄对肝硬化患者血浆内毒素水平的影响,报道如下。1临床资料选取2009年—2012年本院消化科诊治的肝硬化患者56例,诊断参照2000年中华医学会(西安)会     

白介素18对肾小管上皮细胞分泌FN、Ⅰ型胶原的影响

目的 检测RTECs在IL-18刺激下分泌细胞外基质（extracellular matrix，ECM）纤维连接蛋白（fibronection，FN）、Ⅰ型胶原的量，为揭示肾间质纤维化机制提供新的途径。方法 用分别含0、1、10和100ng／mL浓度的IL-18培养液于24孔板中体外培养细胞株HK-2，24、48和72h分别收集一次每一浓度上清液6孔，利用ELISA法分别检测上清液中FN、Ⅰ型胶原的含量。结果 酶联免疫吸附法（ELISA）检测结果显示，RTECs上清液中FN、Ⅰ型胶原的含量存在1L-18浓度依赖关系，在分别作用24、48和72h时，不同浓度之间差异有显著性（P〈0．0001）。结论 IL-18通过刺激RTECs分泌ECM，可能在肾间质纤维化发挥着重要作用。     

大黄对急性胰腺炎炎症反应的影响

目的：探讨白介素－1（IL－1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）在急性胰腺炎发病中的作用，观察大黄对急性胰腺炎的治疗效果。方法：将120只大鼠随机分成：假手术组，对照组，大黄喂养组，大黄腹腔灌洗组。采用1．5％牛磺胆酸负逆行胰胆管注射建立AEP模型，并于模型制成后24h,48h,72h测定血液，腹水中IL－1、TNF-α及淀粉酶的水平。结果：对照组大鼠血液，腹水中IL－1、TNF-α及淀粉酶的水平较假手术组明显增高，以大黄喂养及腹腔灌洗后上述指标均明显下降，结论：IL1－、TNF-α参与AEP发病机理，大黄显著降低血液，腹水中IL－1、TNF-α的含量可能是大黄治疗急性胰炎的一种机制。     

外源性三磷酸腺苷对肾小管上皮细胞增殖的影响

观察外源性三磷酸腺苷（ＡＴＰ）对肾小管上皮细胞株ＬＬＣＰＫ１增殖的影响。方法通过测定３Ｈ－胸腺嘧啶掺入、细胞计数以及细胞内丝裂素活化蛋白激酶活性，并与表皮生长因子（ＥＧＦ）的作用比较。结果发现ＡＴＰ呈浓度依赖性促进细胞的ＤＮＡ合成，并可使细胞计数增加，同时激活细胞内的丝裂素活化蛋白激酶，其作用与ＥＧＦ相似。腺苷与ＡＴＰ有类似作用，但较弱。核苷酸转运蛋白抑制剂对４－硝基苯６－硫基甙并不能抑制ＡＴＰ及腺苷的作用。结论细胞外ＡＴＰ可促进肾小管上皮细胞增殖，并可增强ＥＧＦ的促增殖作用，这一作用可能是通过膜受体介导的细胞内丝裂素活化蛋白激酶活化而实现的     

大黄对消炎痛引起的大鼠小肠溃疡的影响

本文用消炎痛10mg/kg,皮下注射造成大鼠小肠溃疡,观察大黄对小肠溃疡形成的影响.结果表明,口服大黄对消炎痛引起的大鼠小肠溃肠有防治作用.     

人参二醇组皂甙对肾小管细胞增殖的影响

目的　探讨人参二醇组皂甙 (Panaxadiolsaponins ,PDS)对肾小管细胞增殖的影响。方法　应用噻唑蓝 (thia zollblue ,MTT)染色法观察PDS对正常的和庆大霉素 (Gentamicin ,GM)损伤的肾小管细胞增殖的影响。结果和结论　在一定浓度范围内 (5～ 2 5 μg/ml)PDS促进正常肾小管细胞增殖 ,10 μg/mlPDS作用最明显。PDS浓度过高 (>75μg/ml)则抑制其生长 (P <0 .0 5 )。适量PDS可促进庆大霉素损伤肾小管细胞的增殖     

酒大黄对动脉粥样硬化兔血脂水平的影响

目的：探讨酒大黄对实验性动脉粥样硬化（AS）兔血脂水平的影响。方法：将健康雄性新西兰兔32只随机分为4组（n=8）：空白对照组给予南通颗粒饲料;AS模型组给予高脂饲料;酒大黄低、高剂量组给予高脂饲料＋不同药量的酒大黄粉,连续给药12wk,分别于实验前及第12周末经耳缘静脉采血,测定4组家兔血脂水平。结果：酒大黄高、低刘量组血清中总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量显著低于模型组,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量显著高于模型组;低剂量组HDL-C水平显著高于高剂量组;酒大黄高剂量组甘油三酯（TG）水平较模型组显著降低,低剂量组TG下降不明显。结论：酒大黄可降低动脉粥样硬化兔模型的血脂水平,能够预防和延缓动脉粥样硬化的发生发展,其降血脂作用存在一定的量效关系。