眼镜蛇毒因子的研究进展

目的：介绍眼镜蛇毒因子的性质,应用现状及发展前景,方法：参考国内外的文献,介绍眼镜蛇毒因子的理化性质,分子生物学特性,免疫学作用机制及其临床应用。结果与结论：眼镜毒因子的一种强效的补体抑制剂,具有突出的优点和特异的临床应用范围,有广阔的开发前景。     

眼镜蛇毒粗纯蛋白的柱层析分离及其各馏分的抗肿瘤活性研究

目的:眼镜蛇毒粗纯蛋白的分离及其馏分抗癌活性研究。方法:应用离子交换层析法分离眼镜蛇毒粗纯蛋白,通过高效液相色谱行为分析、含量测定和抗肿瘤活性试验对各馏分进行了性质研究。结果:以Tris-HCl缓冲液(20 mmol.L-1,pH8.0)为洗脱体系,在DEAE-sephacel填料离子交换柱上对眼镜蛇毒粗纯蛋白以0～0.5 mol.L-1氯化钠的Tris-HCL溶液进行线性梯度洗脱,可得到4个洗脱峰。第1个洗脱峰馏分抗癌活性最强,含有两类疏水性、紫外吸收特性各异的蛋白混合物;另3个洗脱峰对应馏分蛋白成分较单一。结论:眼镜蛇毒粗纯蛋白分离馏分对体外培养的癌细胞株有一定的抑制作用。     

眼镜蛇毒的化学成分研究进展

眼镜蛇毒具有广泛的生物学活性。文章综述了近年来眼镜蛇毒中研究较为深入的一些组分的分离提纯、理化性质及其生物活性等方面的研究进展。     

眼镜蛇毒因子对实验性家犬呼吸窘迫综合征的保护作用

观察从中华眼镜蛇(Najanajaatra)蛇毒中分离纯化的眼镜蛇因子对油酸型呼吸窘迫综合征的保护作用。方法利用质谱仪、呼吸流量计和压力换能器分别连续监测麻醉狗的主要呼吸功能参数 ,实验后取肺组织作病理学检查。结果预先用足量眼镜蛇毒因子使体内补体耗竭95 %以上 ,可显著减轻油酸引起的肺功能障碍 ,组织学检查发现在透明膜形成、肺泡内出血及肺小动脉栓塞等方面均有显著改善。结论活化的补体在油酸引起的肺损伤的发展过程中发挥着重要作用 ,眼镜蛇毒因子通过耗竭血清补体可抑制呼吸窘迫综合征的发展目的观察从中华眼镜蛇(Najanajaatra)蛇毒中分离纯化的眼镜蛇因子对油酸型呼吸窘迫综合征的保护作用。方法利用质谱仪、呼吸流量计和压力换能器分别连续监测麻醉狗的主要呼吸功能参数 ,实验后取肺组织作病理学检查。结果预先用足量眼镜蛇毒因子使体内补体耗竭95 %以上 ,可显著减轻油酸引起的肺功能障碍 ,组织学检查发现在透明膜形成、肺泡内出血及肺小动脉栓塞等方面均有显著改善。结论活化的补体在油酸引起的肺损伤的发展过程中发挥着重要作用 ,眼镜蛇毒因子通过耗竭血清补体可抑制呼吸窘迫综合征的发展     

蛇毒抗补体蛋白atrase B抑制补体活化引起的血小板聚集

目的观察眼镜蛇毒抗补体蛋白atrase B抑制补体活化引起的血小板聚集。方法采用眼镜蛇毒因子激活补体诱导血小板聚集,观察atrase B对补体活化引起人凝胶过滤血小板聚集的影响,并采用流式细胞仪测定血小板膜P-选择素和GPⅡb/Ⅲa表达情况。结果Atrase B能抑制补体激活引起的血小板聚集和P-选择素、GPⅡb/Ⅲa在血小板膜上的表达。结论眼镜蛇毒抗补体蛋白atrase B能有效抑制补体激活引起的血小板活化、聚集。     

眼镜蛇毒因子对实验性家犬呼吸窘迫综合征的保护作用

目的：观察从中华眼镜蛇（Naja naja atra)蛇毒中分离纯化的眼镜蛇因子对油酸型呼吸窘迫综合征的保护作用。方法：利用质谱仪、呼吸流量计和压力换能器分别连续监测麻醉狗的主要呼吸功能参数，实验后取肺组织作病理学检查。结果：预先用足量眼镜蛇毒因子使体内补体耗竭95％以上，可显减轻油酸引起的肺功能障碍，组织学检查发现在透明膜形成、肺泡内出血及肺小动脉栓塞等方面均有显改善。结论：活化的补体在油酸引起的肺损伤的发展过程中发挥着重要作用，眼镜蛇毒因子通过耗竭血清补体可抑制呼吸窘迫综合征的发展。     

眼镜蛇毒细胞毒素的分离、纯化及其抗癌活性

目的：研究眼镜蛇毒细胞毒素的抗癌活性。方法：应用Ｓｅｐｈａｄｅｘ　 Ｇ１００和 ＣＭ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ柱层析,从眼镜蛇毒中分离、纯化细胞毒素组分,用ＭＴＴ法测定该组分对体外培养的人癌细胞的细胞毒性作用。结果：眼镜蛇毒细胞毒素对人癌细胞ＳＧＣ－７９０１、Ｂｅｌ－７４０２、Ｋ５６２和Ｕ９３７的抑制作用呈良好的量效关系,半数抑制浓度分别为 ４．１０、 ２． ０８、 ０． ２９和 ０．１７ μｇ／ｍｌ。结论：眼镜蛇毒细胞毒素对体外培养的人癌细胞有很强的杀伤作用。     

眼镜蛇毒细胞毒素CTX-d的分离纯化及抗肿瘤活性

目的 分离纯化眼镜蛇毒细胞毒素,测定其体内外抗癌作用.方法 应用柱层析及RP-HPLC,从眼镜蛇毒粗毒中分离纯化细胞素素(CTX).体内外抗癌作用利用噻唑兰(MTT)法及对荷瘤小鼠U14瘤的抑瘤作用.结果 分离纯化获得的CTX-d不混有PLA2,在体内外实验中显示明显的抗肿瘤作用.结论 结合阳离子交换层析和RP-HPLC可从眼镜蛇毒中高效分离获得不含PLA2的CTX.     

中华眼镜蛇毒核糖核酸酶的分离纯化及其特殊生物学活性

目的从中华眼镜蛇毒中分离纯化核糖核酸酶,并研究其生物学活性。方法以中华眼镜蛇毒为原料,采用SP-Trisacryl阳离子交换色谱、Sephadex G-75凝胶色谱、C8反相色谱等纯化方法,分离纯化具有核糖核酸酶活性的蛋白质,表征其酶学性质,检测其抑菌性、抗肿瘤细胞作用及抗氧化作用。结果 SDS-PAGE电泳显示纯化的中华眼镜蛇毒核糖核酸酶(Na-RNase)为相对分子质量为13 000的单一成分。该酶最适反应温度为40℃,最适pH值为6.5,米氏常数为3.67μmol/L,最大反应速率为3.52 pmol/s。在体外抑菌实验中,在8μmol/L的浓度下对大肠艾希菌和金黄葡萄球菌均未显示出显著抑制作用;在体外细胞毒性实验中,对于Hela肿瘤细胞和正常的人成纤维细胞在8μmol/L的浓度下无明显抑制作用;在抗氧化实验中,浓度达到71.5μmol/mL时,对小鼠肝微粒体脂质过氧化反应的抑制率为41.30%。结论中华眼镜蛇毒中的核糖核酸酶具有抗氧化作用,可能作为氧化还原的调节剂,在有关的疾病治疗方面具有应用的潜能。     

治疗神经痛新药——蛇毒注射液

我院应用精制的眼镜蛇毒,制成1∶10000的注射液,治疗血管神经性头痛、慢性头痛、坐骨神经痛、三叉神经痛,风湿痛等,经中山医学院等六所医院临床验证,临床疗效显著,特别对血管神经性头痛,疗效更为明显,尚未见有任何毒副反应,深受广大患者欢迎。现将制剂工艺、临床应用情况简要报告如下。一、制剂工艺取精制的眼镜蛇毒1.0g,溶于5000ml生理盐     

眼镜蛇毒细胞毒素抗肿瘤作用的研究及进展

本文以近年来国内外相关文献为依据,对眼镜蛇毒细胞毒素的分离、理化性质及抗肿瘤方面的研究及进展进行了综述,并对细胞毒素的实用提出展望。     

眼镜蛇毒中神经再生因子和神经毒素的分离

本研究采用Sephadex G-100柱层析,用中性Tris-HCl缓冲液洗脱,分离眼镜蛇全毒.结果不仅有效地分离出神经再生因子和神经毒素,而且保持了各自的生物活性.     

中华眼镜蛇毒诱导HL-60细胞凋亡及其机制探讨

目的　观察中华眼镜蛇毒体外对白血病细胞凋亡的影响 ,并探讨其可能的作用机制。方法　本研究采用血清药理学方法 ,以人白血病细胞HL 60细胞为靶细胞 ,通过流式细胞仪分析、DNA片段凝胶电泳、免疫组织化学 (S P法 )观察中华眼镜蛇毒兔血清体外对细胞凋亡的诱导作用及癌基因表达的影响。结果　经DNA电泳、流式细胞仪分析显示 :中华眼镜蛇毒兔血清与HL 60细胞共同培养 48h可诱导其细胞凋亡增加 ,bcl 2、c myc基因蛋白表达下调。结论　中华眼镜蛇毒兔血清体外抑制HL 60细胞增殖可能与其诱导细胞凋亡及使细胞bcl 2、c myc基因蛋白表达下调密切相关     

眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶分离纯化及对血管内皮细胞的抑制作用

目的从眼镜蛇毒中分离纯化L-氨基酸氧化酶(L-a-mino acid oxidase of Naja atra venom,NAV-LAAO),观察其对血管内皮细胞是否有抑制作用。方法应用阳离子交换层析和亲和层析方法分离纯化NAV-LAAO;采用MTT法、Western blot测定caspase及细胞小管形成实验观察NAV-LAAO对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长和血管生成的影响。结果眼镜蛇毒粗毒经两步层析法得到的LAAO,分子量约为58 ku。NAV-LAAO抑制HUVEC细胞的生长和细胞小管形成,其抑制细胞生长的IC50为21.42 mg.L-1。与对照组相比,LAAO组caspase-3、caspase-8升高。结论应用两步层析法从眼镜蛇毒中分离出的NAV-LAAO具有剂量依赖性的抑制HUVEC细胞的生长和影响细胞小管形成的作用。     

舟山眼镜蛇毒细胞毒素的分离纯化及其体外抗肿瘤活性

目的从眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素 F(CTX F)并鉴定其活性。方法应用凝胶过滤、离子交换柱色谱及疏水柱色谱等方法从舟山眼镜蛇毒中分离纯化CTX F ,以SRB法观察CTX F对体外培养癌细胞的杀伤作用。结果眼镜蛇毒粗毒经凝胶过滤获得 4个蛋白峰 ,将CTX所在第Ⅳ峰用阳离子交换柱色谱获A、B、C、D、E、F和G等7个组分 ,其中E、F和G具CTX活性 ,将F组分再经凝胶过滤和疏水色谱进一步纯化得不含磷酯酶A2 (PLA2 )的CTX纯品 ,暂定名为CTX F ,它对多种癌细胞株有杀伤作用。结论应用凝胶过滤、离子交换和疏水色谱等方法可从眼镜蛇毒中获得不含PLA2 的CTX ,其组分F有抗肿瘤活性     

中华眼镜蛇毒口服给药镇痛作用的研究

目的：研究中华眼镜蛇毒灌服给药对小鼠的镇痛作用。方法：将ICR和昆明种小鼠,采用3种致疼痛模型,即冰醋酸所致扭体反应、小鼠热板法致痛实验和甲醛致炎性疼痛反应;中华眼镜蛇毒经热变性复性处理,将其灌胃给药30-270μg／kg。结果：中华眼镜蛇毒粗毒灌服给药能减少腹腔注射醋酸引起的扭体次数,延长热引起的疼痛反应潜伏期和减少甲醛引起的舔足反应。结论：中华眼镜蛇毒灌服给药具有良好的镇痛作用,且给药途径方便、安全范围大,具有进一步开发成新型镇痛药的潜力。     

中华眼镜蛇毒血清抑制HL60细胞增殖及诱导凋亡的实验研究

目的　探讨中华眼镜蛇毒血清体外对白血病细胞系(HL6 0 )的抑制作用及其机制。方法　以人粒细胞白血病细胞系 (HL6 0 )为靶细胞 ,观察口服中华眼镜蛇毒血清对肿瘤细胞增殖的影响 ,并采用DNA片断凝胶电泳、流式细胞仪分析药物体外诱导细胞凋亡情况。结果　中华眼镜蛇毒血清在体外显著抑制HL6 0细胞的生长 ,其抑制作用随着剂量的加大而增强 ,高剂量 (7 5g·L-1)的抑制效果相近于阿霉素(5mg·L-1) ,和空白对照组比较差异有显著性。经DNA电泳、流式细胞仪分析显示中华眼镜蛇毒血清与HL6 0细胞共同培养可诱导其发生细胞凋亡。结论　中华眼镜蛇毒血清体外能显著抑制HL6 0细胞的生长 ,此作用可能与诱导白血病细胞发生凋亡有密切关系。     

抗眼镜蛇毒血清对眼镜蛇毒磷酯酶A的作用

<正> 国内生产的抗眼镜蛇毒血清已用于治疗眼镜蛇毒咬伤,我们在眼镜蛇神经毒素抗体和心脏毒素抗体的亲和层析研究中,对抗眼镜蛇毒血清中和神经毒素和心脏毒素的抗体含量及其效价进行了实验(孙欣等1981),无论用全毒还是用纯毒免疫动物,发现抗毒血清对神经毒素的中和能力比对心脏毒素的大,抗毒血清对另一个主要成分——磷酯酶A的中和能力如何则是值得注意的(Lysz et al,1974. Habermann et al,1975。Lo et al 1975.Rosenberg,1979),     

眼镜蛇毒胶囊治疗糖尿病肾病临床初探

眼镜蛇毒胶囊治疗糖尿病肾病临床初探朱崇昭李红杨秋萍佟力沈旭曹剑鸣王婉瑜从眼镜蛇毒提纯的蛇毒抗栓酶针剂静脉注射治疗糖尿病有较好疗效，已有报告〔１，３，５〕。本文旨在探讨口服混合制剂的蛇毒胶囊对糖尿病肾病（ＤＭＮ）的血糖、血、尿的β２微球蛋白...     

眼镜蛇毒分泌型磷脂酶A_2的研究进展

眼镜蛇毒分泌型磷脂酶A2(sPLA2)作为眼镜蛇毒中的一个重要成分,有着广泛的生物学活性,近年来的研究热点正日益从眼镜蛇粗毒转向毒素中的某个单体,如sPLA2的研究。该文简要综述了眼镜蛇毒sPLA2的结构特征、分离纯化以及分子生物学特性,着重论述了sPLA2多样的药理毒理作用,并对其作用机制和发展前景进行了探讨。