肢体缺血预处理在未成熟心脏移植中的应用

背景:有学者提出远隔器官预处理概念,即在心脏以外的器官施行缺血预处理,同样能达到缺血预适应效果.肢体缺血预处理是一项机体自我调节的保护机制,但是对未成熟心肌保护的研究较少,在心脏移植方面的利用价值尚未明确.目的:通过对未成熟幼犬进行肢体缺血预处理,与传统心脏保存方法比较,试图分析肢体缺血预处理在供体心脏保存中的应用价值.方法:纳入未成熟幼犬12只,按随机数字表法分为2组,每组6只,采用有创性方法游离股动脉,肢体缺血预处理组夹闭股动脉10 min,开放5 min,3个循环后常规开胸,游离心脏,插灌注管,灌注st.Thomas停跳液,离体心脏于保护液中4℃保存(离体前取上腔静脉血3 mL).对照组游离股动脉但不夹闭,余同实验组.在心脏保存时期(3 h)内每隔半小时取左心室心肌样本,3 h后取心尖部心肌烘干测得干湿比.测量心肌组织丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性及肌钙蛋白I含量.结果与结论:离体前心肌组织肌钙蛋白I含量无明显变化(P>0.05),离体后肢体缺血预处理组的心肌丙二醛含量及干湿比均低于对照组(P<0.05),超氧化物歧化酶活性高于对照组(P<0.05).结果提示,肢体缺血预处理对未成熟心脏有明显的保护作用,在未成熟供体心脏离体前进行缺血预处理可以提高供体心脏的保存效果,降低心肌水肿.离体前肌钙蛋白I含量无变化说明肢体缺血预处理对心肌没有损伤,是一种安全的保护措施.     

猪不停跳心脏离体模型的建立

背景:保持供心离体跳动,可以减少供心的缺血时间,延长供心的离体保存时间.目的:建立稳定简便的猪不停跳心脏离体模型.方法:12只健康家猪随机等分为不停跳组和冷晶体灌注组.不停跳组经升主动脉建立冠状动脉灌注,经右心房进右心室建立静脉引流,经左心耳放置软管入左心室引流,建立猪的不停跳心脏离体模型.冷晶体灌注组按常规心脏移植实行心脏离体保护.结果与结论:不停跳组共施行6例猪心脏离体手术,术后2,4 h离体心脏不停跳成功率为100%(6/6),6 h离体心脏不停跳成功率为83%(5/6).与对照组相比,不停跳组丙二醛水平降低,超氧化物歧化酶活性升高(P < 0.05),心肌超微结构保持良好.说明猪的不停跳心脏离体模型成功率高,是研究离体不停跳心脏仪器的稳定可靠动物模型.     

金属硫蛋白在供心中的表达和作用的研究

目的　探讨金属硫蛋白 (MT)在供心中的表达和作用。方法　Wistar大鼠 2 4只 ,分为 4组 :对照组 (C ,n =6 ) ,腹腔注射蒸馏水 0 5mL 2 4h后取离体心脏行Langendorff灌注 ,然后灌注HTK心脏保护液 ,4℃保存 3h后再行Langendorff灌注12 0min ;实验组 1组 (E1,n =6 )腹腔注射ZnSO412h后取离体心脏 ,处理方法同C组 ;实验组 2组 (E2 ,n =6 )腹腔注射ZnSO42 4h后取离体心脏 ,处理方法同C组 ;实验组 3组 (E3,n =6 )腹腔注射ZnSO448h后取离体心脏 ,处理方法同C组。测定心肌细胞中MT含量、心肌含水量 (MWC)、血清肌酸激酶 (CK)和乳酸脱氢酶 (LDH)漏出率、ATP含量、丙二醛 (MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)活性、心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 -ATPase活性及其Ca2 含量、心肌线粒体合成ATP能力 [ATP]m。结果　MT含量E2和E3组较C、E1组明显增高 (P <0 0 1) ;E2和E3组ATP含量、SOD活性方面均优于C组 (P <0 0 5 ) ,心肌含水量、MDA含量、CK、LDH漏出率方面均低于C组 (P <0 0 5 ) ,心肌线粒体Ca2 -ATPase活性、[ATP]m 均优于C组 (P <0 0 1) ,心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 含量低于C组 (P <0 0 1)。结论　腹腔注射ZnSO4可诱导供心MT长时间表达 ,MT对鼠离体供心具有明显保护作用     

猪供心离体不停跳保存的体外循环

背景:目前供心保存方法主要是单纯低温保存,安全时限为4～6 h,不可能长途运送,势必影响组织配型和有效的应用每一颗供心.因此,开展不停跳供心保存方法的研究很有必要.目的:建立猪供心离体浅低温不停跳保存的体外循环模型,为供心不停跳保存提供实验保障.方法:取体质量25～30 kg的广西巴马小型猪12头,随机分为2组.实验组取出有完整心包的供心后头臂干插灌注针连接体外循环灌注装置,左心引流,灌注流量60～80 mL/min,使心脏保持跳动8 h.对照组按常规方法摘取供心后用低温UW保护液保存心脏8 h.实验组生理记录仪监测心脏跳动心率及灌注压,保存1～8 h各时点抽取动脉血查血气分析、电解质.两组8 h后取心肌组织行ATP测定和超微结构检查.结果与结论:①实验组保存跳动8 h的心脏中,有1头猪出现短暂的2:1下传,其余的都保持完好跳动,②实验组保存跳动期间灌注压没有上升;血气分析pH和BE有逐渐降低的趋势;游离钙离子和钾离子有逐渐升高的趋势.⑨实验组ATP含量高于对照组(p<0.05).④实验组心肌超微结构仅有少数线粒体肿胀,大致接近正常的心肌结构.对照组心肌细胞内外水肿,较多空泡变性.结果提示,利用体外循环装置进行离体不停跳心脏保存是可行的,体外循环管理有其特殊性.     

自制心脏保存液保存离体兔心的研究

目的：初步探讨自制心脏保存液对离体兔心的保存效果。方法：取18只新西兰白兔，随机成分3组，建立非循环式Langendorff灌注模型，分别用晶体停搏液、uⅣ液和我院自制的心脏保存液在低温下保存4h；复灌后检测左心室压力、心肌酶学指标及心肌含水量。结果：自制心脏保存液组左心室压力、心肌酶学指标及心肌含水量与晶体停搏液组有显著差异，与UW液组无显著差异。结论：实验证实我院自制的心脏保存液与uⅣ液心肌保护效果相近，其配方设计基本可行。     

强力霉素对心肌间质缺血再灌注损伤影响的研究

目的：探讨不同浓度的强力霉素对离体鼠心缺血再灌注心肌间质损伤的影响。方法：Sprague—Dawley(SD)大鼠40只，随机分为对照组、缺血再灌注组和强力霉素1、2、3组，每组8只。分别建立改良的Langendorrf离体心灌注模型，测定左室收缩峰压及其压力微分，氯胺T法测定心肌胶原含量，免疫组化法测定I／Ⅲ胶原比例，酶谱法检测心肌基质金属蛋白酶—2(MMP—2)的表达，电镜观察心肌超微结构。结果：强力霉素对离体心缺血再灌注后心肌间质损伤，以及心功能有明显的保护作用，且与浓度有关。其保护作用与抑制MMP—2的表达有关。结论：强力霉素对离体鼠心缺血再灌注后心肌间质损伤有与浓度相关的保护作用。     

金属硫蛋白对离体缺血再灌注未成熟心肌细胞功能的影响

背景：实验已证实金属硫蛋白对成熟心肌有保护作用,但对于未成熟心肌的保护作用尚缺乏实验证据.目的：探讨诱导金属硫蛋白在未成熟心肌中的表达及对缺血再灌注未成熟心肌细胞功能的影响,为未成熟心肌的保护提供有效的方法.设计：完全随机分组设计,对照实验.单位：青岛大学医学院附属青岛市立医院妇产科和心脏外科,华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科.材料：实验于2001-10/2002-09在华中科技大学同济医学院药理实验室（安全级别一级）完成.选用出生14～21 d日本长耳大白兔27只,雌雄不拘.随机将兔分为4组：对照组9只,腹腔注射ZnSO4 12,24,48 h组各6只.方法：①对照组：腹腔注射蒸馏水0.3 mL,按注射后12,24和48 h取离体心脏,灌注重碳酸氢盐缓冲液15 min转为工作心15 min,全心停灌45 min,恢复灌注15 min改为工作心30 min.腹腔注射Zn-SO412,24,48 h组：分别按腹腔注射36 g/L ZnSO4 12,24和48 h后取离体心脏,余方法同对照组.②计算心肌肌酸激酶和乳酸脱氧酶15 min漏出率=心肌肌酸激酶（乳酸脱氢酶）（IU/L）&;#215;15 min漏出液（L）/[1000&;#215;心肌湿重（g）].③采用荧光素酶法心肌组织三磷酸腺苷含量.④心肌线粒体Ca^2＋-三磷酸腺苷酶活性按Jones方法在Shimadzu UV-1200型紫外分光光度计上测定.⑤在电感耦合等离子体原子发射光谱仪上测定线粒体Ca2＋含量.⑥取制备的心肌线粒体悬液按Nayler法测定线粒体合成三磷酸腺苷能力.⑦采用109Cd-血红素饱和法测定心肌组织中金属硫蛋白含量.组间计量资料差异比较采用t检验.主要观察指标：各组兔心肌细胞中金属硫蛋白含量、肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、三磷酸腺苷含量、心肌细胞内Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋-三磷酸腺苷酶活性及线粒体Ca^2＋含量、心肌线粒体合成三磷酸腺苷能力比较.结果：日本长耳大白兔27只均进入结果分析.①乳酸脱氧酶漏出率、肌酸激酶漏出率、心肌Ca^2＋含量、线粒体Ca^2＋含量：腹腔注射ZnSO424,48h组明显低于对照组和腹腔注射ZnSO412 h组（P＜0.01）;.②心肌三磷酸腺苷含量、心肌线粒体Ca^2＋-三磷酸腺苷酶活性、心肌线粒体合成三磷酸腺苷能力、心肌金属硫蛋白含量：腹腔注射ZnSO4 24,48 h组明显高对照组和腹腔注射ZnSO4 12 h组（P＜0.05～0.01）.结论：腹腔注射ZnSO4可诱导心肌金属硫蛋白长时间表达,金属硫蛋白可减轻未成熟心肌细胞缺血再灌注损伤.     

金属硫蛋白对离体缺血再灌注未成熟心肌细胞功能的影响

背景实验已证实金属硫蛋白对成熟心肌有保护作用,但对于未成熟心肌的保护作用尚缺乏实验证据.目的探讨诱导金属硫蛋白在未成熟心肌中的表达及对缺血再灌注未成熟心肌细胞功能的影响,为未成熟心肌的保护提供有效的方法.设计完全随机分组设计,对照实验.单位青岛大学医学院附属青岛市立医院妇产科和心脏外科,华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科.材料实验于2001-10/2002-09在华中科技大学同济医学院药理实验室(安全级别一级)完成.选用出生14～21 d日本长耳大白兔27只,雌雄不拘.随机将兔分为4组对照组9只,腹腔注射ZnSO4 12,24,48 h组各6只.方法①对照组腹腔注射蒸馏水0.3 mL,按注射后12,24和48 h取离体心脏,灌注重碳酸氢盐缓冲液15 min转为工作心15 min,全心停灌45 min,恢复灌注15 min改为工作心30 min.腹腔注射Zn-SO412,24,48 h组分别按腹腔注射36 g/L ZnSO4 12,24和48 h后取离体心脏,余方法同对照组.②计算心肌肌酸激酶和乳酸脱氧酶15 min漏出率=心肌肌酸激酶(乳酸脱氢酶)(IU/L)×15 min漏出液(L)/[1000×心肌湿重(g)].③采用荧光素酶法心肌组织三磷酸腺苷含量.④心肌线粒体Ca2+-三磷酸腺苷酶活性按Jones方法在Shi-madzu UV-1200型紫外分光光度计上测定.⑤在电感耦合等离子体原子发射光谱仪上测定线粒体Ca2+含量.⑥取制备的心肌线粒体悬液按Nayler法测定线粒体合成三磷酸腺苷能力.⑦采用109Cd-血红素饱和法测定心肌组织中金属硫蛋白含量.组间计量资料差异比较采用t检验.主要观察指标各组兔心肌细胞中金属硫蛋白含量、肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、三磷酸腺苷含量、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+-三磷酸腺苷酶活性及线粒体Ca2+含量、心肌线粒体合成三磷酸腺苷能力比较.结果日本长耳大白兔27只均进入结果分析.①乳酸脱氧酶漏出率、肌酸激酶漏出率、心肌Ca2+含量、线粒体Ca2+含量腹腔注射ZnSO424,48h组明显低于对照组和腹腔注射ZnSO412 h组(P＜0.01);.②心肌三磷酸腺苷含量、心肌线粒体Ca2+-三磷酸腺苷酶活性、心肌线粒体合成三磷酸腺苷能力、心肌金属硫蛋白含量腹腔注射ZnSO4 24,48 h组明显高对照组和腹腔注射ZnSO4 12 h组(P＜0.05～0.01).结论腹腔注射ZnSO4可诱导心肌金属硫蛋白长时间表达,金属硫蛋白可减轻未成熟心肌细胞缺血再灌注损伤.     

热休克蛋白70对心脏移植大鼠供心心肌生化指标的影响

目的:观察应激情况下产生的热休克蛋白70对心脏移植大鼠供心心肌相关生化指标的影响。方法:实验于2006-04/09在青岛市市立医院中心实验室完成。①实验动物及分组:取成年SPF级雄性Wistar大鼠18只,按随机数字表法分为2组,每组9只。对照组腹腔注射生理盐水0.5mL,注射后24h取离体心脏,灌注HTK心脏保护液,并置于HTK液4℃保存3h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注K-H液2h。实验组腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素(溶于生理盐水中)3.1μmol/kg(0.53mg/kg),24h后取离体心脏,余处理步骤同对照组。②实验评估:应用全自动生化分析仪测定心肌肌酸激酶、乳酸脱氢酶含量;计算心肌肌酸激酶(乳酸脱氢酶)10min漏出率、心肌含水量;采用羟胺法测定超氧化物歧化酶活性,采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量,采用双缩脲法测定组织蛋白含量;采用免疫组织化学法,以染色阳性面积占视野面积的百分比作为心肌组织热休克蛋白70的表达量。结果:18只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①心肌组织热休克蛋白70含量:实验组高于对照组(t=17.96,P<0.01)。②相关生化指标:实验组大鼠心肌肌酸激酶、乳酸脱氢酶10min漏出率、心肌含水量及丙二醛含量显著均低于对照组(t=4.13～15.81,P<0.01),实验组大鼠心肌超氧化物歧化酶活性显著高于对照组(t=10.89,P<0.01)。结论:热休克蛋白70的高表达能减少氧自由基对供心心肌的损害,是热休克蛋白70发挥其供心心肌保护作用的可能途径之一。     

供心保存研究中大鼠心脏异位移植模型的制作

目的 为探索心脏移植中供心保护快速可靠的研究方法。方法 快速摘取供体心肺，采用离体供心灌注停跳；在松弛的状态下结扎静脉，将其胸主动脉与受者的腹主动脉、肺动脉与受者的下腔静脉端侧吻合，采取间断+连续的缝合方法；开放血流时，先开放远心端再开放近心端，同时按摩心脏。结果 预实验组(n=20)成功14只，动脉吻合口出血2只、心脏复跳失败2只、吻合口狭窄2只；正式实验组(n=20)成功18只，2只死于吻合口出血。预实验组手术成功率为70％，正式实验组为90％(p>0.05)。结论 （1）快速摘取心肺，然后再进行离体心脏灌注保护，操作简单，热缺血时间很短，灌注效果肯定，对供心的保护效果好。（2）离体心肺组织结扎静脉，对心房、冠脉影响非常小。（3）采取间断+连续的缝合方法，因吻合口狭窄造成手术失败的可能性很低，（4）合理定位，避免吻合完毕供心动脉扭曲，从而影响复跳。（5）注意受体鼠的保温、消毒及血容量丧失非常关键。（6）利用心外膜起搏导线获得了供心的动态心电图。     

重组人碱性成纤维细胞生长因子对缺血心肌的保护作用

目的：探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子（rhbFGF）在急性心肌缺血中对缺血心肌细胞的保护作用。方法：无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支（LAD），建立急性心肌梗死动物模型；制备rhbFGF蛋白，将其直接四点注入兔缺血心肌内，通过心肌酶学及电镜病理观察rhbFGF对缺血心肌的保护作用。结果：①血清心肌酶学观察：结扎LAD后24h及48h心肌酶AST、LDH、LDH-1、CK、CK-MB、HBDH与术前比较显著升高，术后48h rhbFGF组心肌酶CK-MB较生理盐水对照组明显降低；术后48h与24h相比较，LDH-1在生理盐水对照组升高而在rhbFGF组降低；②电镜观察：与生理盐水对照组相比rhbFGF组心肌细胞间可见大量毛细血管生长，新生血管周围可见趋于正常的心肌细胞。结论：rhbFGF可缩小心肌梗死面积，对缺血心肌细胞可能有直接的保护作用。     

心脏移植术供心切取术的护理

目的 总结同种异体原位心脏移植术供心切取术的护理配合经验。方法 回顾性总结2002年9月-2005年11月9例心脏移植术供心切取术的护理配合经验。结果 9例供心切取术均获得成功，供心热缺血时间为2～6min，冷缺血时间110～175min。结论 手术配合方法及心肌保护方法简便、安全、可靠，获取的供心为其后心脏移植术的成功及术后患者的远期存活质量打下了良好的基础。     

常温不停跳保存供心的超微结构和动力学变化

背景：心脏移植供心保护方法有向心脏正常生理状态改进的趋势,以期延长供心保存时间,改善供心的保存质量。理论上供心常温不停跳灌注保存是一种最接近生理状态的保存方法,有良好的发展潜力。目的：观察连续灌注不停跳供心常温长时间保存心肌超微结构和左室血流动力学的变化。方法：广西巴马小型猪24只,按随机数字表法分为不停跳连续灌注组和冷保存组,每组各6对。不停跳连续灌注组供心在顺行连续灌注跳动状态下切取,应用氧合血37℃、保存8h后移植。冷保存组供心应用UW停搏液灌停后,0-4℃UW液保存8h后移植。移植主动脉开放3h观察供心左心室收缩压、左心室舒张压、左室平均压、左室舒张末压、左室内压最大上升和下降速率。记录移植后心律变化,需要除颤例数,以及主动脉开放3h后能否脱离体外循环。主动脉开放3h后取供心左心室前外侧壁心肌组织,观察线粒体及肌膜改变。结果与结论：不停跳连续灌注组供心移植后左心室收缩压、左室平均压、左室舒张末压、左室内压最大上升和下降速率均优于冷保存组（P〈0.05）;主动脉开放后不停跳连续灌注组均可保持窦性心律,冷保存组仅1例自主恢复窦性心律;主动脉开放后3h不停跳连续灌注组5例可顺利脱机,冷保存组1例可以脱机;不停跳连续灌注组心肌超微结构保存良好。提示供心常温灌注不停跳方法有良好的心肌保护效果,适于供心的长期保存。     

复方虫草精华对心脏缺血/再灌注损伤的保护作用

目的：观察复方虫草精华（Lungfit)对大鼠离体心脏缺血／再灌注损伤是否存在保护作用。方法：Lungfit分小、大两个剂量（160、325mg/kg.d^-1)给大鼠连续灌胃给药10天后，取心脏，用Langendorff装置逆行恒压灌流，左心室内置乳胶水囊和换能器相连，分别测定缺血前后各组心脏的心功能参数值。结果：缺血前，Lungfit灌胃大鼠离体心脏的各项心功能参数值与对照组相比无显著差异（P＞0．05）；缺血30min后的再灌注期间，Lungfit灌饲的大鼠心脏的心率、冠脉流量及心肌舒缩功能的改善明显优于对照组（P＜0．05或P＜0．01）。结论：Lungfit对心肌缺血／再灌注损伤具有保护作用。     

不同器官保存液对停搏供心的保护

背景：有研究已经证实应用人停搏供心进行心脏移植可以取得与非停搏供心移植相同的效果，但如何对停搏供心进行处理使之达到或接近非停搏供心移植的效果是一个新的课题。 目的：采用新西兰大白兔离体停搏供心模型，探讨3种不同的器官保存液Celsior液、Pioacidile液和UW液对停搏供心的保护效果。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005—03／2006—04在中南大学湘雅二医院胸心外科实验室心功能室完成。材料：选用新西兰大白兔24只，随机分成3组：UW液灌注组、Celsior液灌注组、Pinacidil液灌注组。 方法：制作免离体停搏供心的模型，当心热缺血10min后，分别应用4℃的UW液、Celsior液、Pinacidil液经主动脉根部冠状动脉开口灌注后4℃保存。4h后取出免心固定在Langendorff灌流装置上复灌。 主要观察指标：复灌后30，60，90，120min兔心脏血流动力学、2h内平均冠状动脉流量、心肌含水量及丙二醛含量。 结果：复灌后120min Pinacidil灌注组左室发展压、左室内压最大上升速率、左室内压最大下降速率均优于其余两组（P〈0．05）。UW液灌注组复灌后120min心率高于另两组（P〈0．05）。Pinacidile液灌注组和Celsior液灌注组心肌中含水量少于UW液灌注组，UW液灌注组心肌丙二醛含量高于Celsior液和Pinacidile液灌注组。复灌后120min内Pinacidile液灌注组心肌平均冠状动脉流量大于Celsior液和UW液灌注组。 结论：Pinacidil液对停搏供心的保护优于UW液和Celsior液，表现为左室心功能及冠状动脉流量恢复得更好。     

四逆汤对供心冷保存和再灌注期间ATP的影响

目的：探讨四逆汤(SD)对供心冷保存和再灌注期间ATP的影响，以了解SD对供心的保护作用。方法：新西兰大白兔16只随机分成2组，1组为对照组，2组为实验组。取心前，取心肌测ATP。1组用4℃ UW液灌洗、2组用4℃ UW SD液灌洗；常规取心后，1组在4℃ UW液中，2组在4℃ UW SD液中保存6h。取心肌测ATP。然后在Langendorff模型上，1组用KHB液，2组用KHB SD液再灌注30min，再取心肌测ATP。结果：2组取心后各时点ATP均高于1组。结论：在灌洗液、保存液及再灌液中加入SD能使供心冷保存和再灌注期间ATP维持较高水平。SD对供心有保护作用。     

曲美他嗪对离体兔心肌顿抑的保护作用

目的　探讨曲美他嗪对离体兔心肌顿抑的保护作用及可能机制。方法　使用改良的非循环式Langendorff离体心灌注装置复制心肌顿抑模型 ,比较未使用曲美他嗪和分别在低温缺血停跳时 ,复灌后使用曲美他嗪对顿抑心肌心功能恢复的影响 ,同时测定缺血前和复跳前、复跳 30min后的心肌ATP含量变化 ,测定实验末的心肌含水量 ,观察心肌细胞超微结构的变化。结果　实验组的心功能各项指标恢复及对心肌的保护明显优于对照组 ,实验组间差别无显著意义 ;低温缺血停跳时使用曲美他嗪可改善顿抑心肌的ATP储备。结论　曲美他嗪可显著改善顿抑心肌的心功能。其作用机制可能与维护缺血心肌的ATP能量储备 ,调节再灌注后心肌脂肪酸及葡萄糖氧化代谢失衡 ,减轻心肌细胞损伤有关。     

心脏移植脑死亡供体的目标管理及心肌保护

背景：心脏移植是治疗终末期心力衰竭患者获得长期生存的有效方法。目的：探讨心脏移植脑死亡供体的管理和选择以及心肌保护作用。方法：通过数据库检索的方式对心脏移植脑死亡供体的管理和选择以及心肌细胞的保护研究进行分析。心脏移植的实施,需要有合格的供体器官。首先,要做好供体的管理和选择,其次,需要供体心肌保护和转运,减轻离体心脏缺血再灌注损伤。结果与结论：对于心脏移植脑死亡供体的管理,国家卫生部及相关部门制定标准和规范,使器官移植更加公开化、规范化、合法化,提高供心功能保护的效果,延长供体心脏的保存时间。心脏移植的全过程普遍应用低温停搏法,供心运输期间常用冷浸法保护心肌。随着脑死亡标准等相关规定的出台,供心保护的深入研究,边缘供体的拓宽,会使器官移植供体数量有所增加。     

缺血再灌注大鼠心肌细胞钙黏蛋白的表达

目的：分析N-钙黏蛋白在缺血再灌注大鼠心脏中的表达分布特征与心肌结构功能的关系。方法：实验于2004—10在新乡医学院形态实验室完成。①选择出生后3～5个月的健康雄性Wistar大鼠27只。随机分为3组，每组9只：正常对照组、心肌缺血组和心肌缺血再灌注组。②麻醉大鼠，暴露心脏，在肺动脉圆锥与左心耳间，离冠状动脉起始约2mm处穿线进行结扎，造成急性心肌缺血，分别做缺血30，45，60min的不同处理（心肌缺血组），心肌缺血再灌注组同心肌缺血组处理，在心肌缺血30min后松开结扎线，再灌注30和60min。正常对照组只做穿线不作结扎。③模型制作完毕，处死大鼠，迅速取心脏病变部位，制成常规石蜡包埋切片，以备组织学检查。应用免疫组化方法检测各组大鼠的心肌细胞钙黏蛋白的表达。结果：大鼠27只均进入结果分析。正常对照组细胞N-钙黏蛋白免疫标记呈阶梯形典型的集中分布于心肌细胞成熟的端闰盘处。镜下观察缺血30和45min N-钙黏蛋白的表达与正常对照组比较，差异不明显；缺血60min后，心肌细胞分布混乱，肌膜出现破损，钙黏蛋白在心肌细胞闰盘处的表达减少。缺血30min，再灌注30和60min后，心肌细胞端闰盘处N-钙黏蛋白的表达与正常对照组比较，差异也不明显。结论：①N-钙黏蛋白的降解和分布模式的改变是急性缺血后心肌在分子水平上发生的最初重构，也是心肌细胞间机械偶联失常和收缩功能异常的解剖学基础。②短时间的缺血再灌注可使心肌代谢迅速改善并恢复正常，N-钙黏蛋白的表达变化反映了心肌细胞结构和功能的改变。     

开放MitoKATP通道对缺血再灌注心肌内皮细胞保护作用的研究

【目的】观察线粒体内膜ATP敏感钾离子通道开放剂二氮嗪加入停搏液内对缺血再灌注大鼠心 肌内皮细胞的保护作用。【方法】50只大鼠随机分为5组,每组10只,取离体心脏,A组取正常心肌,其余制 备Langendorff灌注模型;B组停灌30min,复灌60min;其余3组分别灌注不同的停搏液:C组灌注停搏液,D 组灌注含二氮嗪的停搏液,E组灌注含二氮嗪停搏液之前10min给予格列苯脲。实验终了取冠状动脉流出液 4ml,放免法测定一氧化氮、内皮素含量;取心肌,制备冷冻切片,免疫组化检测细胞间粘附分子 1表达;制备 心肌组织匀浆液,测定肿瘤坏死因子 α、髓过氧化物酶,病理切片观察内皮细胞与心肌细胞损伤。【结果】缺血 再灌注心肌内皮细胞损伤,炎症介质表达增高(P<0.05),而二氮嗪处理组相应指标显著改善(P<0.01)。 【结论】含二氮嗪停搏液能够改善缺血再灌注心肌内皮细胞结构与功能。