巩膜细胞外基质在近视发生发展中的作用

巩膜作为近视过程中的最后一层靶组织,其细胞外基质（ECM）的生物分子及生物力学特性在近视的形成和发展过程中发生重要变化。大量研究证实巩膜ECM的主动重塑是近视过程中的关键环节,近几年,探索巩膜ECM的重塑机制以及通过调控ECM的重塑过程来防治近视已成为屈光领域的研究热点。现就近年来有关巩膜ECM在近视发生发展中的作用做一综述。     

病理性近视巩膜细胞外基质中胶原蛋白的研究进展

病理性近视(pathological myopia),亦称高度进行性近视,属近视的一种亚型;常伴发眼后极部的变性改变,包括巩膜变薄、脉络膜萎缩变薄及眼轴的增长。在所有屈光不正中,病理性近视危害最大,多导致视力不佳,甚至最终失明。近年来研究表明:病理性近视的发展与巩膜组织细胞外基质的生物化学特性改变有密切关系,而胶原作为巩膜组织细胞外基质的重要组成部分,其表达和积聚的改变与病理性近视的发展明显相关。本文就目前病理性近视发展中巩膜组织细胞外基质中胶原改变的研究进展进行综述。     

基质金属蛋白酶家族及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与常见眼内恶性肿瘤的关系

基质金属蛋白酶家族包括基质金属蛋白酶及其抑制剂。基质金属蛋白酶是一组Zn2+依赖性蛋白水解酶,能降解细胞外基质,基质金属蛋白酶抑制剂则能抑制其活性。细胞外基质金属蛋白酶诱导因子广泛地存在于人类各种肿瘤细胞,刺激与肿瘤有关的成纤维细胞和肿瘤细胞自身的基质金属蛋白酶合成增加。三者常在眼部肿瘤中异常表达,与眼肿瘤的发展及浸润转移关系密切。本文就其与眼部常见恶性肿瘤视网膜母细胞瘤及脉络膜黑色素瘤的关系作一综述。     

基质金属蛋白酶-2和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在视网膜母细胞瘤中的表达

目的：：探讨基质金属蛋白酶-2( matrix metalloproteinase-2, MMP-2)和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)在视网膜母细胞瘤( retinoblastoma,Rb)中的表达及其与临床病程的关系。方法：用免疫组织化学 SABC 法分别检测39例 Rb 中MMP-2及EMMPRIN的表达;用LEICA IM 50型全自动医学图像分析系统测量其平均灰度值,比较不同临床和病理阶段Rb中表达MMP-2和EMMPRIN的差异及二者阳性表达之间的关系。结果：Rb患者39例中MMP-2阳性表达35例(灰度值为109.64±14.52),占90％;EMMPRIN阳性表达33例(灰度值为108.01±13.60),占85％;青光眼期Rb中MMP-2和EMMPRIN 的表达(灰度值分别为108.21±11.47,107.56±14.32)明显高于眼内期(灰度值分别为121.13±11.32,119.34±12.66;P<0.01,P<0.05),眼外期二者表达(灰度值分别为91.03±11.71,92.26±12.93)明显高于青光眼期(P<0.01,P<0.05);视神经浸润组Rb中MMP-2和EMMPRIN的表达(灰度值分别为103.89±13.39,105.23±14.00)明显高于无视神经浸润组(灰度值分别为118.39±15.11,117.53±16.13;P<0.01,P<0.05)。结论：MMP-2及EMMPRIN的表达水平可能与Rb的浸润转移有关。     

形觉剥夺性近视小鸡模型巩膜中基质金属蛋白酶-2的测定

目的通过建立动物的近视眼模型,观察近视眼发展期和恢复期屈光状态的改变以及基质金属蛋白酶(MMP-2)的含量变化,探讨小鸡近视眼模型巩膜重塑过程中的生物化学变化机制。设计随机对照实验性研究。研究对象32只2天龄SPF美国进口白种莱航鸡。方法将32只鸡随机分为A、B、C、D四组,每组8只,A、B组为实验组,用透明眼罩遮盖小鸡的右眼进行单眼形觉视觉剥夺,左眼为对照；C、D组为正常对照。21天后去遮盖,检测双眼屈光状态和眼轴,处死A组和C组并分离7mm直径的后巩膜组织；继续饲养B组和D组至去遮盖后21天,检测双眼屈光状态和眼轴后处死并分离7mm直径的后巩膜组织。用酶活性分析法测定所有动物巩膜中MMP-2的含量,并将实验组和对照组的数据进行统计学分析。主要指标遮盖后及去遮盖后小鸡的屈光度、眼轴,巩膜中MMP-2的含量。结果遮盖21天A、B组左右眼屈光度比较,差异有统计学意义(P= 0．000),平均相差(-28．38±6．72)D；A组左右眼眼轴相比差异有统计学意义(P=0．000),平均相差(1．47±0．37)mm；遮盖眼后极部巩膜中的MMP-2含量显著性升高,A组遮盖眼与对侧无遮盖眼间比较差异有统计学意义,平均增加(76．00±15．20)％。去遮盖21天B组左右眼屈光度比较差异无统计学意义,平均差值(0．19±0．92)D；B组左右眼眼轴比较差异无统计学意义,平均差值(0．15±0．50)mm；去遮盖眼后极部巩膜中的MMP-2含量明显下降,与对照组之间差异无统计学意义(P=0．47)。结论形觉剥夺性近视眼的小鸡模型中,近视眼的形成与后巩膜中的MMP-2水平有关,而且MMP-2的含量在近视眼发展期和恢复期存在一定的变化规律。(眼科,2006,15：334-337)     

近视性巩膜重塑相关因子研究进展

近视患病率近年来逐年上升，已成为影响青少年视力健康的主要问题。研究表明，眼球后极部巩膜重塑是近视发展和眼轴进行性延长过程的关键事件。其中，基质金属蛋白酶、生长因子、视黄酸等相关因子在近视性巩膜重塑过程中发挥了重要作用。本文就影响近视巩膜基质重塑的相关因子及其在近视发展过程中的作用进行综述，为近视防控与治疗提供新的思路。     

实验性近视眼巩膜金属蛋白酶活性分析

近视的致病原因复杂 ,其临床特征性改变为眼轴长度增加和眼球体积增大。近年来文献报道近视眼的组织病理改变主要与巩膜的主动生长和重新塑形有关 ,与结缔组织生长相同 ,其包括细胞外基质 (ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ ,ＥＣＭ)不断合成和降解的过程[1] 。基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏ ｐｒｏｔｅｉｎｕｓｅ ,ＭＭＰｓ)属于锌内肽酶 ,在ＥＣＭ的代谢调节中具有重要作用[2 ] 。我们通过对实验性近视眼巩膜中ＭＭＰｓ活性的测定 ,探讨了ＭＭＰｓ与近视的关系 ,现将结果报告如下。一、材料和方法1 形觉剥夺性近视动…     

基质金属蛋白酶在角膜疾病中的作用

MMP作为降解细胞外基质的酶家族。参与许多生理及病理过程。同样其在角膜表达水平的改变与许多角膜疾病密切相关。随着对其研究的不断深入,使得从一个新的角度来预防和治疗角膜疾病成为可能。所以十分有必要了解MMPs的结构、功能、生物合成的调节及其在角膜疾病中的作用。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制剂与白内障

基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)是一类金属依赖的水解酶家族,是细胞外基质(extracelluarmatrix,ECM)降解的主要介质,其主要功能是降解细胞外基质,在细胞迁移、组织重建和修复等病理生理过程中发挥作用。MMPs的蛋白水解活性主要靠与其抑制剂(tissueinhibitorofMMPs,TIMPs)之间平衡来调节。近年来研究表明,MMPs/TIMPs功能异常同眼部许多疾病有关,如原发开角型青光眼、白内障、翼状胬肉、年龄相关性黄斑变性等有关。     

豚鼠形觉剥夺早期后极部巩膜基质金属蛋白酶2及其抑制剂动态表达

目的探讨豚鼠形觉剥夺性近视（form-deprivation myopia, FDM ）早期后极部巩膜基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase-2, MMP-2）及基质金属蛋白酶抑制剂2（tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-2,TIMP-2）mRNA的表达。方法4周龄三色豚鼠50只,随机分成实验组和正常对照组各25只,实验组又随机分为5组,单眼形觉剥夺（monocular deprivation, MD）右眼1、4、7、14、21d制备FDM动物模型,未遮盖眼为自身对照组。各组豚鼠进行检影验光和A超测量眼轴长度。提取后极部巩膜总RNA,二步法逆转录聚合酶链反应检测各组后极部巩膜MMP-2及TIMP-2mRNA的表达水平。结果除1d外,各组MD后极部巩膜MMP-2mRNA的表达与正常对照组、自身对照组差异均有统计学意义（P〈0,05）,MD组间差异也有统计学意义（P〈0．01）;而TIMP-2mRNA的表达则逐渐下降。各自身对照组MMP-2、TIMP-2mRNA的表达与MD组变化趋势大致相同。结论MMP-2／TIMP-2之间动态平衡失调可能是启动豚鼠FDM巩膜细胞外基质早期主动重塑的重要因素。（中国跟耳鼻喉科杂志,2010,10：75—78）     

后巩膜加固术治疗儿童高度近视疗效评估

目的 :评估后巩膜加固术对 12岁以下儿童高度近视的疗效。方法 :应用异体的硬脑膜或巩膜做后巩膜加固术的加固材料 ,将其中的 2 7例 ( 4 9只眼 )手术病例与同期未予手术的对照组比较分析。结果 :后巩膜加固术组与对照组相比 ,有稳定屈光度及阻止眼轴加长的作用。结论 :后巩膜加固术对阻止儿童高度近视的发展有确切的疗效 ,且安全。     

高度近视眼巩膜细胞外基质中相关胶原分子机制的研究进展

高度近视眼是目前为止全球范围内主要的不可逆性致盲性眼部疾病之一。高度近视眼在发生和发展的过程中,眼球后部巩膜可能异常薄变或扩展。巩膜薄变、脉络膜萎缩性薄变及不同程度的眼轴延长,且伴有巩膜细胞外基质(ECM)的过度降解是高度近视眼不断发展的根本原因。近年来,随着相关研究的不断深入,国内外学者发现巩膜ECM生化特性的改变与近视眼的发展有着十分密切的关系,而胶原作为巩膜ECM的重要组成部分,其表达和积聚的改变与病理性近视眼的发展呈显著正相关的关系。目前,临床医学领域对此尚无有效的治疗方法,常用的药物及手术疗法的疗效尚未确定且毒副作用较大,并不适合在临床上进行大范围的推广和使用。本文就目前高度近视眼巩膜ECM中胶原分子机制的研究进展进行综述。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制剂在大鼠慢性高眼压模型筛板区巩膜组织中的表达

目的 探讨大鼠慢性高眼压模型筛板区巩膜组织中基质金属蛋白酶(MMP)及其抑制剂(TIMP)的表达与青光眼发病机制的关系.方法 实验研究.将43只Wistar大鼠的左眼成功地建立为慢性高眼压模型,对侧右眼为对照组.采用计算机随机数字表法将实验大鼠分为3组,分别应用免疫组织化学法(13只鼠)、免疫印迹法(15只鼠)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法(15只鼠)检测大鼠筛板区巩膜组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达情况.应用SAS统计学软件,对免疫印迹法和RT-PCR法榆测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达的4个定量指标,分别采用具有一个重复测量的两因素设计定量资料的方差分析,以P＜0.01作为差异有统计学意义.结果 (1)免疫组织化学检测结果:实验眼筛板区巩膜组织中细胞核和细胞浆巾MMP-2、MMP-9表达明显,对照眼均未见MMP-2、MMP-9表达;实验眼和对照眼筛板区巩膜组织中细胞核和细胞浆中均未见TIMP-1、TIMP-2表达.(2)免疫印迹法检测结果:平均灰度值:实验眼的MMP-2为193.88±8.84,MMP-9为202.65±8.37,TIMP-1为283.63±5.65,TIMP-2为284.75±5.50;对照眼的MMP-2为117.38±10.76,MMP-9为134.13±5.06,TIMP-1为186.88±7.14,TIMP-2为183.0±5.58.(3)RT-PCR法检测结果:平均灰度值:实验眼的MMP-2为200.50±3.25,MMP-9为200.13±2.95,TIMP-1为201.88±3.14,TIMP-2为195.50±3.55;对照眼的MMP-2为181.88±9.36,MMP-9为181.75±5.85,TIMP-1为179.25±9.21,TIMP-2为179.75±7.12.实验眼与对照眼的表达差异有统计学意义(MMP-2:F=405.55,MMP-9:F=436.11,TIMP-1:F=1167.77,TIMP-2:F=4629.64;均P＜0.01).结论大鼠慢性高眼压模型筛板区巩膜组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达明显增加.(中华眼科杂志,2009,45:260-265)     

视网膜Egr-1与细胞外基质重塑通路对闪烁光诱导小鼠近视的调控

目的探讨Egr-1在低频闪烁光（FL）诱导的小鼠近视中的表达及与细胞外基质重塑通路可能的调控机制。方法实验研究。将28日龄健康C57BL/6J（B6）小鼠（100只）随机分为正常对照组和FL组。闪烁光组光照频率为2 Hz,明暗周期为50%。分别于实验前,实验后1 h、1 d、1周、2周、恢复1周（FL诱导2周后撤除FL,于正常光照下继续饲养1周）,使用红外偏心验光仪和动物专用A超测定仪测量所有小鼠右眼的屈光度及眼轴。于实验后每个时间点每组各提取10只小鼠右眼的视网膜组织进行RT-PCR检测Egr-1、膜型基质金属蛋白酶1（MT1-MMP）、金属基质金属蛋白酶2（MMP-2）、组织抑制金属蛋白酶2（TIMP-2）的动态表达,Western Blot及免疫组化、免疫荧光观察Egr-1与MT1-MMP蛋白表达及定位。FL组与对照组各指标组内均数行ANOVA分析,组间均值行独立样本t检验比较分析。结果FL光照2周后,小鼠的屈光度相比对照组发生了近视改变[（0.32±0.14）D vs. （3.42±0.31）D,t=29.08,P<0.01],眼轴也显著增长[（2.97±0.01）mm vs. （2.93±0.01）mm,t=6.914,P<0.01]。FL光照1 h后Egr-1 mRNA和蛋白快速下调,且随诱导时间持续低于正常,MT1-MMP mRNA和蛋白水平快速持续上调,实验1 d MMP-2 mRNA水平开始上调,趋势与MT1-MMP相同,TIMP-2 mRNA在实验1周和2周的时候明显低于正常组。恢复1周后,Egr-1和TIMP-2明显上调,而MT1-MMP和MMP-2表达下调,Egr-1与MT1-MMP呈现负相关关系（r2=0.6478,P<0.05）。免疫荧光双标示Egr-1与MT1-MMP在视网膜神经节细胞存在共表达。结论视网膜中Egr-1可能通过调控MT1-MMP的表达来影响MMP-2的活化,进而参与闪烁光诱导的小鼠近视的发生及恢复过程。     

基质金属蛋白酶与眼科疾病的研究进展

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)属于Zn2+和Ca2+依赖性内肽酶家族,是参与降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的最重要的蛋白酶。因其参与了多种眼科疾病的病理过程,故对其活化与抑制,以及如何高表达进行研究,可为预防和控制各类眼科疾病的发生发展提供崭新的研究方向,现就其最近的科研进展做一综述。     

基质金属蛋白酶在圆锥角膜发病机制中的作用

圆锥角膜是一种先天性发育异常,是一种以角膜扩张为特征,致角膜中央部向前凸出、变薄呈圆锥并产生高度不规则散光的角膜病变。其病因不明,有研究表明基质金属蛋白酶可能参与了它的发病过程,现将这方面的研究近况作一综述。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子与眼病的相关性研究进展

基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌离子依赖的结构和功能同源的内肽酶家族,能降解细胞外基质(ECM)的多种成分.基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)是基质金属蛋白酶的特异性组织抑制物,是参与基质金属蛋白酶的活性调节的重要组织因子.它们共同参与多种重要的病理生理过程.目前国内外的许多研究发现MMPs和TIMP与眼科疾病的发生、发展和转归密切相关.人们对人工合成MMPs抑制剂也有很大的兴趣.     

小鼠单纯疱疹病毒性角膜炎中基质金属蛋白酶的表达及活性研究

目的 探讨角膜感染Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)后基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制剂(TIMPs)在角膜中的分布及酶活性表达。方法 BALB／c小鼠眼角膜接种HSV-1(KOS株)以诱发单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)。分别收集正常眼球及感染后第2、7、14及28天的感染眼球。应用免疫组织化学法和Western blot方法检测MMP-2、-8、-9及TIMP-1、-2在角膜组织中的表达,并应用酶谱(Zymography)技术检测MMPs的酶活性。结果 感染后第2天,感染眼的MMP-2、-9及TIMP-1、-2表达比未感染眼增加且表达主要位于浅表基质层及上皮下的炎性细胞中。感染后第14和28天可见坏死性角膜炎及角膜溃疡形成,同时角膜基质和浸润的炎性细胞中尤其溃疡处,可见MMP-2、-9及TIMP-1、-2表达显著增加。溃疡区域有大量MMP-8阳性染色的中性粒细胞。角膜感染HSV-1后,明胶酶(MMP-2、-9)活性和胶原酶(MMP-8)活性均增强。结论 HSV-1角膜感染后,由角膜细胞和浸润的炎性细胞分泌产生的MMPs可能对上皮性角膜炎与溃疡形成过程起重要的促进作用。MMPs与TIMPs的相互作用可能对HSK的坏死性病变起重要调节作用。（中华眼科杂志,2004,40：395-399)     

汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶的影响

目的:观察汉防己甲素(Tet)对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶(MMP)分泌及表达的影响.方法:收集正常球结膜与初发翼状胬肉成纤维细胞培养的上清液,ELISA法检测两种细胞培养上清液中MMP-1,MMP-3,MMP-9的含量及10-5mol/L的Tet作用48h翼状胬肉成纤维细胞培养的上清液中含量的变化.荧光定量PCR检测10-5mol/L的Tet对翼状胬肉成纤维细胞MMP-3mRNA表达的影响.结果:培养的初发翼状胬肉成纤维细胞上清中MMP-1,MMP-3含量较正常成纤维细胞上清中含量高[MMP-1:26928±1135→3148±74(ng/L),MMP-3:52593±1031→12490±3126(ng/L),P＜O.01],加入10-5 mol/LTet作用48h后明显下降[MMP-1:26928±1135→15064±533(ng/L),MMP-3:52593±1031→29943±561(ng/L),P＜O.01].培养的正常结膜及初发翼状胬肉成纤维细胞上清中未检测到MMP-9.初发翼状胬肉成纤维细胞MMP-3 mRNA是正常结膜组织成纤维细胞的3倍,10-5mol/L的Tet作用24h后表达量下降了27.1%.结论:Tet对翼状胬肉成纤维细胞MMP-1,MMP-3的分泌有明显的抑制作用,并能抑制其细胞MMP-3 mRNA表达量.