PCR检测白细胞中乙型肝炎病毒前C区1896点突变

我们用3'端特异性引物聚合酶链反应(3'BS-PCR)分析原理,将慢性乙型肝炎(乙肝)患者血清及白细胞内的乙肝病毒(HBV)前C区1896位点突变的突变型及野生型分离,探讨HBV有意义突变中,最常见的1896位点突变在外周血白细胞内的存在状态,结合临床进一步阐明乙肝的发病机制.     

乙型肝炎病毒前C区及基本核心启动子区变异的临床研究

目的 研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)前C区G1896A变异、基本核心启动子(BCP)A 1762T/G1764A变异及二者联合变异在HBeAg阴性和HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者中的变异特点及与病情进展的关系.方法 将120例HBV DNA阳性CHB患者分为A、B两组,A组为HBeAg阴性CHB患者60例,B组为HBeAg阳性CHB患者60例,用荧光定量PCR检测A、B两组HBV DNA水平,用直接测序法检测A、B两组前C区G1896A及BCP区A1762T/G1764A变异的发生率.根据前C区及BCP区测序结果又分为变异组和无变异组,分析前C区及BCP区变异发生与病情进展的关系.结果 120例HBV DNA阳性CHB患者中A组检出变异株47例,B组检出变异株15例,A组和B组CHB患者中G1896A变异检出率分别为40.0％和10.0％ (x2=14.40,P=0.000);A1762T/G 1764A变异检出率分别为38.3％和15.0％(x2=8.35,P=0.003);联合变异的检出率分别为21.7％和0％(x2=14.58,P=0.000).120例CHB患者中G1896A、A1762/G1764A、联合变异的变异组HBV DNA含量明显高于无变异组HBV DNA含量,P＜0.05,差异有统计学意义.HBeAg阴性CHB患者轻、中、重度不同病情中,G1896A变异、A1762T/G1764A变异及联合变异的变异组与无变异组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 (1 )HBV前C区G1896A变异和BCP区A1762T/G 1764A变异是导致HBeAg阴性、HBV DNA持续阳性的主要机制之一.(2) HBV前C区G1896A变异和BCP区A1762T/G 1764A变异可能加重HBeAg阴性CHB患者病情的发展.     

乙型肝炎病毒前C区终28变异与临床

乙型肝炎病毒(H BV)感染在临床可产生不同的肝脏疾病谱,发生轻重悬殊的肝脏疾病。宿主对H BV抗原的免疫应答是肝细胞损害的可能机制,但宿主应答不同的原因迄今未充分阐明。近年分子病毒学的进展,发现H BV变异与临床关系密切,其中有关H BV前C区终28变异研究最多。1989年英国学者Carm an首次在地中海及远东地区国家,发现较严重的慢性活动性肝炎和重症肝炎患者中存在终28变异,在病人血中H BeAg阴性但H BV-DNA( ),序列分析后发现在前C区1896位点有G→A变异,使密码28由色氨酸(TGG)变成终止密码(TAG),导致H BeAg合成终止,以后有许多…     

乙型肝炎病毒前C／C基因变异的临床意义

乙型肝炎病毒（HBV）感染后可发生广泛的疾病谱，与宿主的免疫应答、也与病毒的变异有关。宿主的免疫应答是年龄、性别、遗传素质、营养状况等的综合反映；病毒变异是在长期受宿主的免疫压力后发生。与病变相关的HBV变异的热点，有前C区的A83和C基因的C289。前C区A83点突变使AA     

乙型肝炎病毒前C／C基因变异及其临床意义

乙型肝炎病毒前Ｃ／Ｃ基因变异及其临床意义庄林游晶综述马永良审校以往观点认为乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染后临床所产生的不同的肝脏疾病谱及血清学表现，是由于宿主抗病毒免疫应答反应的类型和程度不同所致，而非病毒的毒力差异所为。近年大量分子病毒学研究显...     

乙肝病毒C基因启动子和前C／C基因变异与慢性乙肝发作及病情严重性的关系

目的 研究乙型肝炎病毒（HBV）C基因启动子（CP）和前C/C基因变异与无症状慢性HBV携带者（ASC）的肝炎发作及慢性乙肝病情严重性的关系。方法 通过PCR及其产物直接测序,检测4例ASC、27例慢性乙肝和3例慢性重型乙肝病人血清的HBVCP和前C/C基因序列,并定量检测HBV DNA。结果 （1）CP主要变异为nt1726-1730聚集变异（1726A→C、1727A→T、1730C→G）和nt17621764双变异（1762A→T和1764G→A）。前C区主要变异为1896G→A。C基因变异常使C蛋白aa5、13、27、60、87、97及130发生置换,（2）CP聚集变异与ASC首次肝炎急性发作有关,11例中,8例出现CP聚集变异。（3）CP聚集变异合并CP双变异的乙肝病人。临床上或表现为重型肝炎或迅速进展为活动性肝硬化,HBVDNA高水平,、HBeAg/抗HBe转换。结论 同前C/C基因比较,CP变异与慢性乙肝病人的临床表现可能更为密切。     

乙型肝炎病毒前C区及BCP区变异的临床意义

乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的全球性疾病.据报道,目前全球慢性HBV感染者达3.5亿人,大约每年100万的患者死于肝衰竭、肝硬化,并有可能进展为肝细胞癌[1].机体感染HBV后临床表现各不相同,至今仍缺乏有效控制,造成这一局面的原因很多,其中HBV基因组变异可能是重要原因.本文就乙型肝炎病毒前C区及基本核心启动子(BCP)区突变与临床的关系做一综述.     

乙型肝炎病毒宫内感染影响因素研究

HBV感染时的年龄是影响慢性化的最主要因素。在围生（产）期和婴幼儿时期感染HBV者中,分别有90%和25%～30%将发展成慢性感染。而在青少年和成人期感染HBV者     

乙型肝炎病毒基因分型与C基因启动子变异临床意义研究

众所周之,HBeAg由前C／C基因表达,并受到C基因启动子(core promoter,CP)调控。CP和前C基因变异均能造成HBeAg表达下降或停止。本研究通过测序法检测基因型及CP基因序列,对基因型与C基因启动子变异的相关性进行探讨。     

乙型肝炎病毒宫内感染的研究与阻断措施探讨

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的严重危害人类健康的传染病。它不仅造成众多的HBV阳性携带者,也是导致成人慢性肝炎、肝硬化、肝癌的重要因素,我国是乙型肝炎病毒(HBV)感染的高发区,约有1.2亿人,资料表明有30%～50%HBV感染者源于母婴垂直传播[1]。近年国内外不少学者对阻断HBV母婴传播进行大量的研究,并提出可靠的阻断措施,但仍有15%～25%的失败率。本文对HBV宫内感染的机制和阻断效果的研究现状进行综合报道,为探讨更有效的阻断方法提供参考信息。     

HBeAg+HBV DNA高滴度乙肝孕妇替比夫定治疗对胎盘HBV感染的影响

目的评价妊娠晚期应用替比夫定治疗后阻断HBV宫内感染及胎盘HBV感染的效果。方法 38例HBeAg阳性、HBV DNA>7.00 log10拷贝/ml孕妇分为2组:替比夫定组18例,自妊娠(28±2)周行替比夫定600 mg/d阻断治疗至产后1个月;对照组20例,未予替比夫定治疗;新生儿均予主被动联合免疫。ELISA法定量检测孕妇和新生儿乙肝两对半,PCR方法定量检测外周血及胎盘组织HBV DNA。结果替比夫定组孕妇于分娩前血清HBV DNA显著下降至(3.87±1.12)log10拷贝/ml,明显低于对照组的(7.42±0.53)log10拷贝/ml(P<0.01)。替比夫定组胎盘组织HBV DNA为(4.35±0.56)log10拷贝/ml,也明显低于对照组的(5.16±0.40)log10拷贝/ml(P<0.01)。结论妊娠晚期替比夫定抗病毒治疗可有效降低母亲外周血HBV DNA,阻断宫内传播。     

HBsAg阳性孕妇肌肉注射HBIG预防HBV宫内感染研究

目的:探讨经母体对胎儿进行乙肝免疫球蛋白(HBIG)被动免疫预防慢性乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的效果。方法:以在太原市传染病医院进行产前检查及分娩的HBsAg阳性孕妇96例作为HBIG注射组(自妊娠28周起多次肌肉注射HBIG 200IU),同期分娩但未进行产前检查HBsAg阳性孕妇59例作为对照组,采集新生儿出生24 h内且未注射HBIG的股静脉血,检测HBV血清学标志物,分析比较注射与未注射HBIG的HBsAg阳性孕妇及注射HBIG孕妇不同注射次数间其新生儿HBV宫内感染的发生情况。结果:HBIG注射组HBV宫内感染率(12.5%,12/96)、HBsAg阳性率(10.2%,7/96)、HBV DNA阳性率(7.3%,7/96)均低于未注射组,但差异无显著性(P>0.05);将注射次数分为0~1次、2~3次和4~5次三个等级进行分析,HBV宫内感染率、HBsAg阳性率和HBV DNA阳性率随HBIG注射次数增加而减少,但差异无显著性(P>0.05)。结论:初步提示HBsAg阳性孕妇产前注射HBIG及增加HBIG注射次数可能降低HBV宫内感染的发生。     

乙肝病毒携带产妇乳汁的HBV-DNA研究

目的：研究HBV携带产妇血清、乳汁及脐血中的HBV-DNA含量与其血清HBV标志物之间的关系,探讨HBV携带产妇乳汁的传染性。方法：对207例HBV携带产妇,采用电化学发光方法检测产妇的乙肝五项及采用荧光定量PCR技术检测HBV携带产妇血清、乳汁及脐血中的HBV-DNA含量。结果：125例HBsAg和HBeAg双阳性的产妇,其乳汁HBV-DNA阳性率为9.6%,82例HBsAg阳性但HBeAg阴性的产妇,其乳汁HBV-DNA阳性率为2.4%。两组乳汁HBV-DNA阳性率差异有统计学意义（χ^2=4.027,P=0.045）;血清HBV-DNA〈106 copies/ml的产妇其产妇乳汁及脐血中HBV-DNA均为阴性。血清HBV-DNA≥10^6copies/ml的产妇其乳汁HBV-DNA阳性率为12.5%、其新生儿脐血阳性率为15.17%,与血清HBV-DNA〈10^6copies/ml的产妇相比较差异均有统计学意义（P均〈0.001）。结论：对于HBsAg阳性的产妇,HBsAg和HBeAg双阳性的产妇乳汁传染性高于HBsAg单阳性的产妇,血清HBV-DNA≥106copies/ml的产妇乳汁传染性高于血清HBV-DNA〈106copies/ml的产妇。     

基因芯片技术检测肝细胞癌前C区/BCP区基因突变

目的应用基因芯片技术探讨HBV慢性感染并发肝细胞癌(HCC)前C区/BCP区基因突变的临床意义。方法应用基因芯片杂交技术检测46例HBV慢性感染并发肝细胞癌前C区A1896、A1899及BCP区nt1762、nt1764四位点突变,比较各位点突变的发生率;据乙肝血清学标志熏将研究对象分为HBeAg阳性组、HBeAg阴性组两组,比较前C区/BCP区变异与HBeAg分泌障碍的关系,分析前C区/BCP区基因突变与血清HBVDNA定量的关系。结果①用基因芯片法测定46例患者,阳性率91.3%(42/46),A1896突变率52.4%,A1899突变率19%熏nt1762/nt1764联合突变率66.7%。②HBeAg阴性组与HBeAg阳性组比较,A1896突变率、nt1762nt1764联合突变率及多位点突变率明显为高,P<0.05。前C区/BCP区变异组与非变异组比较,HBVDNA定量无显著性差异。结论应用基因芯片法可一次同时检测乙型肝炎病毒多个突变位点熏HBV持续慢性感染并发的HCC前C区/BCP区变异的发生率较高,该变异与HBeAg分泌障碍有关,但与HBVDNA复制水平并无明显相关性。     

3643例孕妇宫内感染检测结果及随访

目的了解本地孕期感染的发病情况,以便制定预防措施。方法应用酶联免疫法(ELISA) ,对3643例孕妇进行风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)、弓形体(TOXO)、血清IgM及乙肝病毒(HBV)、血清HBsAg检测。结果RV、CMV、TOXO、HBV感染率分别为2 0%、0 1%、0 05%、10 8%。结论孕妇RV、CMV、TOXO、IgM阳性者适时终止妊娠,是减少出生缺陷发生的有效措施,HBsAg阳性者的新生儿采取加大疫苗剂量或联合免疫,能有效阻断HBV的母婴传播。     

Impact of precore and core promoter mutations on hepatic histology in patients with chronic hepatitis B

BACKGROUND: The details of liver histology of patients with precore and core promoter mutations are still not clear. AIM: To determine the role of precore and core promoter mutations in liver histology in Chinese patients with chronic hepatitis B. PATIENTS AND METHODS: Intrahepatic hepatitis B virus DNA (by COBAS Amplicor hepatitis B virus Monitor test) and precore and core promoter mutations (by a line probe assay) were measured in 54 chronic hepatitis B patients. Expression of hepatitis B core antigen, hepatitis B e antigen and hepatitis B surface antigen was determined by immunohistological staining. Histological activity index was scored according to Knodell's criteria. RESULTS: Compared with patients without core promoter mutations, patients with core promoter mutations had more severe intrahepatic inflammation and fibrosis, and more cytoplasmic expression of hepatitis B core antigen (P = 0.028). No such differences were found in patients with and without precore mutations. Logistic regression showed that core promoter mutations were independently associated with cytoplasmic expression of hepatitis B core antigen (P = 0.026). Intrahepatic hepatitis B virus DNA levels correlated with serum hepatitis B virus DNA levels (r = 0.71, P < 0.001) and the percentage of hepatitis B core antigen-positive hepatocytes (r = 0.37, P = 0.047), but had no correlation with serum alanine aminotransferase levels nor the degree of inflammation and fibrosis. CONCLUSIONS: Patients with core promoter mutations had more severe inflammation and fibrosis, and more frequent cytoplasmic expression of hepatitis B core antigen. This suggested that core promoter mutations might cause more serious liver disease.     

妊娠妇女尿路感染临床特征分析

目的：了解妊娠妇女尿路感染的临床特征,以提高诊治水平。方法：利用SPSS13.0软件,对892例妊娠尿路感染与育龄期非妊娠尿路感染患者临床资料进行回顾性分析。结果：妊娠组尿路感染无症状比例、尿液培养有菌生长比例及平均抗生素使用疗程均高于非妊娠组（P〈0.001）;两组患者菌种均以大肠埃希菌为主,但妊娠组菌种分布更集中;妊娠组尿路感染中高龄、有流产史、经产妇、中晚孕患者比例较高。结论：大肠埃希菌仍是妊娠尿路感染患者常见的感染菌,妊娠尿路感染患者临床症状不典型的发生率高,抗菌疗程长;注意应加强孕期尿常规及清洁中段尿培养检查,尤其应加强高龄、既往人工流产手术史、经产妇及妊娠中、晚孕期防治。     

慢性HBV感染患者HBV DNA前C区变异的临床意义

目的:探讨慢性HBV感染患者HBVDNA前C区变异的临床意义。方法:采用ELISA测定99例HBV感染患者血清肝炎病毒标志物,并采用RT-PCR检测HBVDNA前C区变异。结果:99例HBV感染患者中,乙型肝炎病毒携带26例,慢性乙型病毒性肝炎61例,慢性重型病毒性肝炎(乙型)11例和急性乙型病毒性肝炎1例。乙型肝炎病毒携带,慢性乙型病毒性肝炎和慢性重型病毒性肝炎中,变异株组HBVDNA前C区变异发生率与混合株组、野生株组相比,差异均无显著性(P>0.05)。与混合株和野生株两组相比,HBVDNA变异株组肝功能变化差异均无显著性(P>0.05)。结论:HBVDNA前C区变异可发生于HBV感染的不同临床状态。HBVDNA前C区变异可能与肝炎程度和病情进展无明显关系。