雄性不育相关基因敲除小鼠模型

男性不育的发生机制复杂,建立雄性不育的动物模型,特别是小鼠模型,为研究不育相关基因功能和分子机制提供了模型基础,目前用于生物医学研究的小鼠模型主要有3种类型,例如敲除/敲入/基因捕获方法获得小鼠,转基因小鼠和化学诱导的点突变小鼠。本文对雄性不育相关基因敲除的小鼠模型进行了总结,以期为研究男性不育的发病机制寻找合适的动物模型。     

X-盒结合蛋白1条件性基因敲除小鼠模型的建立

目的建立可进行条件性敲除X-盒结合蛋白1(Xbp1)基因的flox杂合子小鼠。 方法通过ET-clone的方法构建基于cre-loxp系统和FLP-frt系统的条件性基因打靶载体。载体线性化后电转JM8A3 ES细胞,经G418和Ganc筛选获得抗性ES细胞克隆。经长片段PCR鉴定获得正确同源重组的阳性克隆。阳性ES细胞经克隆扩增后,注射入C57BL/6J小鼠的囊胚中,获得嵌合鼠,筛选出高比例嵌合小鼠与野生型C57BL/6J小鼠交配后获得阳性F1代小鼠,并分别进行PCR和测序鉴定。 结果成功构建打靶载体,共获得144个抗性ES细胞,克隆经长片段PCR鉴定,共获得4个正确同源重组的阳性克隆。获得4只阳性F1代小鼠,经测序鉴定正确。Xbp1基因flox杂合子小鼠表型无明显异常。 结论成功构建了条件性敲除Xbp1基因的flox杂合子小鼠,为未来研究器官或组织特异性的Xbp1生物学作用奠定了基础。     

脂多糖结合蛋白(LBP)基因多态性对LBP及细胞因子诱生的影响

目的探讨脂多糖结合蛋白（LBP）C1306→T单核苷酸多态性（SNP）对全血培养LBP表达及细胞因子生成的影响。方法采集118例健康献血员静脉血，运用聚合酶链反应（PCR）及限制性内切酶Stu Ⅰ对PCR产物的消化作用检测C1306→T基因多态性，并采用全血细胞培养模型检测内毒素刺激前后LBP、肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6及IL-10蛋白水平。结果118例健康献血员中，14例为T／C杂合子，104例为T／T纯合子。对照组及内毒索刺激组中T／C基因型上清液LBP浓度均明显高于T／T纯合子，而TNF-α、IL-6及IL-10对内毒索的反应性在两种基因型之间差异不明显（P〉0．05）。结论内毒素受体LBP C1306→T单核苷酸多态性可能间接影响LBP的蛋白水平，但与体外炎症介质的生成关系不明显。     

胆宁片对胆汁33.5kDa泡蛋白的影响

目的;探讨中药胆宁片预防胆固醇结石形成的作用机制。方法：建立胆汁成核因子（33．5kDa泡蛋白）ELISA快速检测法,监测正常人群组,胆固醇及胆色素结石组患者血清及胆汁中33．5kDa泡蛋白浓度,将另一组胆醇结石患者（n=45)按随机序贯原则分为胆宁片治疗组,胆酸钠治疗组及对照组,观察药物对33．5kDa泡蛋白浓度的影响。结果：胆固醇结石患者血液及胆汁中33．5kDa泡蛋白含量显著高于正常人群和胆色素结石组,胆宁片治疗2w后,血清及胆汁中33．5kDa泡蛋白明显降低（P＜0．05）,结论：胆宁片能降低血清和胆汁中的成核因子（33．5kDa泡蛋白）的含量,改变了胆汁中胆固醇的成石趋势。     

地塞米松对护骨素基因敲除小鼠骨微结构的影响

目的探讨小剂量地塞米松对生长期小鼠骨密度及骨微结构的影响及其与OPG途径的关系。方法 20只4周龄OPG~(-/-)雌性小鼠及20只野生型小鼠随机分四组(n=10):野生型安慰剂组(WT+saline),野生型地塞米松干预组(WT+DEX,地塞米松1mg/kg体重,肌肉注射,每周3次),OPG~(-/-)敲除小鼠安慰剂组(OPG~(-/-)+saline),OPG~(-/-)敲除小鼠DEX干预组(OPG~(-/-)+DEX,地塞米松1 mg/kg体重,肌肉注射,每周3次)。6周后处死小鼠,一侧胫骨行显微CT扫描分析。结果OPG~(-/-)组的组织骨密度、骨小梁体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度均较其他三组降低(P0.05)。OPG~(-/-)+DEX组的组织骨密度、骨小梁体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度均较WT及WT+DEX组降低(P0.05)。OPG~(-/-)组的骨小梁模型因子及骨小梁分离度均较其他三组增加(P0.05);OPG~(-/-)+DEX组的骨小梁模型因子及骨小梁分离度均较WT及WT+DEX组增加(P0.05)。WT及WT+DEX组之间骨小梁微结构参数均无统计学差异。结论在生长期小鼠OPG基因功能缺失时,地塞米松有部分拮抗骨量丢失的作用,表明除了OPG/RANKL途径,地塞米松对骨代谢的影响是多途径的。     

OPG基因敲除小鼠骨质疏松情况的研究

目的研究护骨素（Osteoprotegerin，OPG）基因敲除纯合子小鼠（homozygous OPG knockout mice，OPG^-1- mice）骨质疏松发生情况，为OPG^-1-小鼠骨质疏松模型的应用提供依据。方法非频密繁殖法获得OPG^-1-小鼠，PCR技术进行OPG基因表型鉴定。16周龄OPG^-1-子代小鼠和16周OPG野生型小鼠各10只，采用双能X线骨密度测量仪（DEXA）测定全身骨密度（Bone mineral density，BMD）、万能材料试验机测定股骨生物力学强度；骨组织形态计量学分析L5椎体骨小梁结构；实时荧光定量PCR检测L1椎体骨组织中BMP-2、Runx2 mRNA表达水平。结果OPG^-1-子代小鼠和亲代纯合子小鼠表现出相同的OPG基因缺失表型。与同龄野生型小鼠比较，16周龄OPG^-1-小鼠全身骨密度、股骨承受最大载荷、股骨结构刚度、腰椎椎体骨小梁数目、腰椎椎体骨小梁厚度显著下降（t=5．740，6．069，6．859，6．891，3．558，P〈0．01）；股骨承受破裂载荷、腰椎椎体骨小梁体积分数下降（t=3．157，3．329，P〈0．05）；股骨承受载荷后的最大位移、破裂位移显著增加（t=-3．868，-3．276，P〈0．01）；腰椎椎体骨小梁分离度增加（t=-2．575，P〈0．05），腰椎椎体Runx2 mRNA表达升高（t=-3．738，P〈0．05）；腰椎椎体中BMP-2 mRNA表达升高不明显，差异无统计学意义（t=-1．589，P〉0．05）。结论OPG^-1-小鼠表现出明显的骨质疏松，是一种理想的骨质疏松模式动物。     

p16与细胞因子基因联合基因疗法对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的 探讨瘤体内直接注射途径的ｐ１６抑癌基因疗法与细胞因子（ＧＭ－ＣＳＦ）基因疗法联合应用对荷瘤肾癌小鼠免疫功能的影响。方法 建立皮下荷瘤肾癌小鼠模型。于接种种瘤细胞３ｄ后将荷瘤小鼠随机分为５组,分别给予不同的治疗,检测每组小鼠的免疫功能,观察每组小鼠的存活期,并行肿瘤病理学分析。结果 与其它４组相比,ｐ１６和ＧＭ－ＣＳＦ联合治疗组小鼠机体免疫功能显著增强（Ｐ〈０．０１）,存活时间明显延长（Ｐ〈０．０５）。结论 ｐ１６与ＧＭ－ＣＳＦ联合基因疗法的应用可增强小鼠抗肿瘤免疫反应,并抑制肿瘤的生长。     

生长激素促分泌素受体基因敲除小鼠胚胎干细胞的建立

目的建立生长激素促分泌素受体（ghrelin receptor，GHS-R）基因敲除小鼠胚胎干细胞（ES细胞）杂合子模型，为研究GHS—R基因的功能奠定基础。方法用TK-neo置换原X-pPNT载体的PGK—neo构建目标载体。以小鼠基因组DNA为模板，用PCR方法扩增2条同源臂，将其按照一定方向装入含有TK—neo的X—pPNT载体，并测序鉴定。载体线性化及纯化后电穿孔转染小鼠ES细胞，用G418和更昔洛韦（Gancyclovir）对电穿孔转染后的ES细胞进行正、负筛选培养，得到双药抗性ES细胞，克隆后抽提基因组DNA，分别用PCR方法鉴定2条同源臂，并测序确定成功同源重组的ES细胞克隆。结果改建X—pPNT载体成功，PCR获得2条同源臂片段，测序正确，并按一定方向装入打靶载体，ES细胞转染后经双药筛选得到328个阳性ES细胞克隆，PCR及测序鉴定证实3个克隆发生同源重组。结论本研究成功获得了GHS-R（-／＋）杂合子小鼠ES细胞克隆，为进一步通过显微注射及杂交育种获得GHS—R基因敲除小鼠打下了基础。     

从基因敲除看生殖激素的作用

基因敲除技术已成为研究基因功能的一种重要手段 ,本综述主要介绍了雌激素受体、孕酮受体、前列腺素受体、促性腺激素释放激素、黄体生成素受体、卵泡刺激素受体、雄激素受体、催产素、泌乳素及其受体等主要的生殖激素或受体基因敲除后对小鼠生殖系统的发育、功能以及生殖行为的影响 ,并对这些激素可能的作用机理进行了讨论。     

特异性敲除β-连环蛋白基因对小鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的 通过构建特异性敲除小鼠模型观察β-连环蛋白(β-catenin)基因在小鼠肝缺血再灌注损伤中的作用.方法 应用Cre-lox系统构建肝细胞特异性敲除β-catenin基因小鼠模型,90 min半肝血流阻断制造肝脏缺血再灌注小鼠模型,分为β-catenin基因敲除组及对照组,再灌注后0、3、6、20 h测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及其肝脏组织学改变.结果 肝细胞特异性敲除β-catenin基因小鼠基因表型为:ctnnb纯合(loxP/loxP)并且Alb-Cre阳性表达,Western blot 方法证实其β-catenin蛋白表达丰度明显低于对照组.再灌注3、6、20 h敲除组小鼠血清ALT水平分别为282、405及128 U/ml;对照组分别为221、295及101 U/ml.敲除组AST水平分别为603、805及396 U/ml;对照组分别为421、398及336 U/ml,各时间点两组间差异均有统计学意义(P＜0.05).其肝细胞坏死、窦状隙充血以及炎细胞浸润程度明显重于对照组.结论 β-catenin对肝脏缺血再灌注引起的肝损伤起保护作用.

Abstract：

Objective To study the role of β-catenin in liver ischemia-reperfusion injury used a conditional knockout approach to delete p-catenin in the liver. Methods We adapted the Cre-lox recombination system to create the p-catenin conditional knockout (KO) mice and liver ischemia-reperfusion injury were made by 90min hemiliver blood supply block. Experimental animal were randomized into two groups:p-catenin conditional knockout group (KO group) and control group (C group). 0,3,6,20 h after reperfusion,serum samples were used for measurement of serum alanine transaminase ( ALT) and aspartate aminotransferase (AST) ,liver sections were subjected to hematoxylin-eosin staining. Results Genotyping identified that β-catenin KO mice showed ctnnb homozygosis ( - / - ) and Alb-Cre positive. Western blotting analysis showed an obviously lower expression of p-catenin in KO group. Three,6,20 h after reperfusion,KO group ALT level were 282,405 and 128 U/ml. C group were 221,295 and 101 U/ml. KO group AST level were 603,805 and 396 U/ml,C group were 421,398 and 336 U/ml. Hematoxylin and Eosin (HE)staining showed significant sinusoid inflation and congestion, extensive acidophilic necrosis, focal hemorrhages , hepatic lobula structure disorder and slightly lymphocyte inflammatory cells infiltration in KO group. In C group, HE staining show slightly sinusoid inflation and congestion, limited acidophilic necrosis and focal hemorrhages, hepatic lobula structure nearly integrity, slightly lymphocyte inflammatory cells infiltration.Conclusion β-catenin may play a protect role in liver ischemia-reperfusion injury.     

雄性Akt2基因缺失小鼠生殖表型研究

目的通过对雄性Akt2基因敲除纯合子小鼠（Akt2-／-）及野生型小鼠（Akt2＋／＋）基础指标、血清糖脂及性激素水平的评估,探讨Akt2基因缺失对糖脂代谢及睾丸功能的影响。方法雄性Akt2＋／＋及Akt2-／-小鼠各15只,行口眼糖耐量（OGTT）实验（2mg／kg）,予动力学实验,将纯合子和野生型小鼠分别随机分为2组,空白组和刺激组,刺激组予人绒毛膜促性腺激素（hCG）刺激4h,空白组予等体积的生理盐水刺激4h,检测各组小鼠体重、体内脂肪重量、血脂、空腹胰岛素及生殖激素水平。结果Akt2-／-小鼠同Akt2＋／＋小鼠相比,餐后随机血糖、0h、1h血糖均显著升高（P〈0．05）;睾丸重量显著增加（P〈0．01）。性激素检测发现Akt2-／-小鼠血清雄烯二酮（A2）（P〈0．01）和睾酮（T）（P〈0．05）显著升高;hCG刺激后,Akt2-／-与Akt2＋／＋小鼠的17-羟孕酮（17-OHP）、A2和T均显著升高,但Akt2＋／＋小鼠的T升高更明显。结论Akt2基因不仅影响糖代谢,同时影响睾丸功能,说明胰岛素调节糖代谢的关键信号分子可能对睾丸生殖功能同样具有重要的调节作用。hCG刺激后,同Akt2＋／＋小鼠相比,Akt2-／-小鼠A2和T升高的幅度较小,说明Akt2基因缺失使雄激素合成亢进,但降低了睾丸对hCG的敏感性。     

白介素6基因敲除小鼠肝脏移植后的肝脏再生研究

目的 观察白介素6基因敲除(interleukin 6 knockout,IL-6 KO)小鼠原位肝移植后存活时间和肝脏再生的情况. 方法建立正常小鼠(C57BL/6 wild type,C57BL/6WT)和IL-6 KO小鼠的肝移植模型.38只小鼠分为3组:C57BL/6 WT→C57BL/6 WT肝脏移植对照组(n=10),IL-6 KO→IL-6 KO肝脏移植组(n=14)和IL-6 KO→C57BL/6 WT肝脏移植组(n=14).移植后观察小鼠肝移植物的存活情况.溴脱氧尿核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)免疫组化检测移植肝脏的再生.结果 实验各组肝移植物的冷缺血时间均＜1 h.对照组小鼠肝移植后存活时间＞16 d.IL-6 K0→IL-6 KO组的肝移植后移植物不能存活(2 d).IL-6 KO→C57BL/6 WT组的肝移植后移植物不能存活(1.6 d).实验各组间存活时间比较,差异有统计学意义(F=190.09,P＜0.01).对照组小鼠肝脏移植后组织学检查证实肝脏组织损伤较轻,无组织坏死等改变.肝脏移植术后48 h BrdU摄取轻度增加.IL-6 KO小鼠肝移植后,组织学检查表现出片状坏死和肝细胞气球样变等改变.肝移植术后48 h免疫组化发现有极少数BrdU摄取.结论 IL-6 KO小鼠的肝移植后肝再生反应障碍,肝移植物不能存活.IL-6是肝脏再生反应中一个重要因子.     

细胞因子对异种脱细胞真皮基质免疫调节作用的临床研究

目的　探讨烧伤患者接受异种 /异体脱细胞真皮基质 (xeno /allo ADM )移植后全身和局部多种细胞因子与移植物近期转归的关系。　方法　在大面积烧伤患者的四肢切痂创面上 ,移植xeno ADM (12例 ,19块 )或allo ADM(15例 ,18块 ) ,其上覆盖自体超薄断层皮片 ,并以 6例单纯移植自体中厚断层皮片 (auto TTS)的烧伤患者为对照。移植物成活后 4～ 8周 ,收集局部组织标本、血清和xeno ADM排斥后的创面渗出液 ,采用免疫组织化学染色与酶联免疫吸附法 (ELISA) ,检测白细胞介素 (IL) 1β、IL 4、IL 6、肿瘤坏死因子α(TNF α)和γ型干扰素 (IFN γ)的含量。　结果　免疫组织化学染色结果显示 ,移植物内IL 1β、IL 4、IL 6、TNF α和IFN γ的阳性细胞密度或着色强度相比较 ,xeno ADM >allo ADM >auto TTS (P <0 .0 5 )。ELISA检测结果显示 ,xeno ADM被排斥后创面渗出液中IL 4、IL 6、TNF α和IFN γ水平明显高于自体血清 ,但其血清IL 4与IFN γ水平分别低于和高于未排斥时。xeno ADM移植后血清中IL 4、IFN γ水平明显高于allo ADM和auto TTS(P <0 .0 5～ 0 .0 1)。　结论　xeno ADM移植后可在局部检测到高水平的IL 1β、IL 4、IL 6、IFN γ ,可能与细胞杀伤和细胞因子介导的免疫放大作用有关。这些细胞因子的动态变     

氩氦刀冷冻消融治疗兔VX2肾癌外周血细胞因子的变化

目的研究冷冻消融治疗兔VX2肿瘤后外周血细胞因子的变化。方法建立兔VX2肾癌模型,将38只荷瘤兔随机分为：冷冻消融组（A组）,根治性肾切除组（B组）,肿瘤对照组（C组）,应用酶联免疫吸附试验法测定治疗前、治疗后21d外周血Th1型细胞因子（IFN-γ、TNF-α和Th2型细胞因子（IL-4、IL-6）浓度的变化。结果治疗后21d组间组内比较显示：冷冻消融组外周血IFN-γ、TNF-α浓度和IFN-γ／／IL-4比值明显升高,IL-6明显降低,与治疗前差异存在统计学意义（P〈0．05）,IL-4与治疗前相比差异无统计学意义（P〉0．05）;冷冻消融组外周血IFN-γ／、IL-4、IL-6浓度和IFN-γ／IL-4比值与肿瘤对照组相比,差异均有统计学意义（P〈0．05）;与根治肾切除组相比,冷冻消融组TNF—α浓度明显升高,IL-6明显降低,差异均有统计学意义（P〈0．05）,两组IFN-γ／、IL-4浓度差异无统计学意义（P〉0．05）。结论冷冻消融冶疗肾癌可使外周血IFN-γ／、TNF-α、IFN-γ／IL-4比值升高,IL-6浓度降低,增强机体的抗肿瘤免疫功能。     

腹腔镜胆囊切除术对细胞因子、内皮素和C反应蛋白水平的影响

目的:探讨开腹与腹腔镜胆囊切除术(LC)2种方法对胆囊疾病患者血中细胞因子、内皮素和C反应蛋白的影响,比较两种方法对机体损伤的程度及安全性。方法:选择行剖腹胆囊切除术(OC)患者50例,LC患者50例,分别于术前和术后抽取静脉血检测IL-2、IL-6、NK细胞活性、CD4/CD8、内皮素、C反应蛋白含量并进行比较。结果:OC组IL-2和NK细胞活性术后较术前下降(P<0.05),IL-6术后较术前明显上升(P<0.01)。IL-6术后OC组较LC组上升(P<0.05)。OC组IL-2术后较LC组降低(P<0.05)。CD4/CD8未发现明显变化。OC组血中内皮素术后含量明显高于LC组患者(P<0.01),C反应蛋白于术后亦高于LC组。结论:研究表明LC损伤小,是一种安全可靠的手术方式。     

脊髓损伤患者血清及脑脊液中髓鞘碱性蛋白的动态变化及意义

目的：研究急性脊髓损伤后血清、脑脊液髓鞘碱性蛋白（MBP）的动态变化与脊髓损伤程度、预后情况之间的关系。方法：ELISA法检测47例不同程度脊髓损伤患者伤后不同时间血清和脑脊液MBP含量,结合预后程度进行分析。结果：脊髓完全性损伤组病人伤后12h内即出现脑脊液MBP显著增高,伤后3d达高峰,并持续至伤后第14d,脊髓不完全性损伤组伤后,12h内也出现脑脊液MBP增高,高峰亦为伤后第3d,但各时间点增高幅度较完全性损伤组小,且伤后第14d时即恢复正常;脊髓震荡组不出现脑脊液MBP增高;各组血清检测结果与脑脊液结果平行。结论：血清和脑脊液MBP检测对于判断脊髓损伤程度、估计预后特别是骨髓损伤休克期选择正确的治疗方法具有积极的意义。     

细胞因子IL-1a、IL -6、TNF-a、MMP3与颈椎间盘退变机制的相关性研究

[目的]探讨细胞因子在颈椎间盘退变机制中的作用及其与神经功能的相关性.[方法]实验组椎间盘组织取自46例颈椎病患者,根据术前颈椎MRI及术中椎间盘突出情况分为两组:退变组(24例)和突出组(22例).对照组椎间盘组织取自15例无颈椎病病史的颈椎外伤患者.根据颈椎病患者术前JOA评分分为三组:轻度组(17例),中度组(15例)和重度组(14例).采用酶联免疫吸附法(ELISA法)分别检测不同退变程度颈椎间盘中IL-1a、IL -6、TNF -a和MMP3的表达水平.[结果]对照组、退变组和突出组三组之间比较,IL -1a、IL -6、TNF-a和MMP3的表达有统计学意义(P＜0.05),其表达水平与颈椎间盘退变呈正相关趋势;轻度组、中度组和重度组三组之间比较,MMP3、TNF -a的表达有统计学意义(P＜0.05),其表达水平与JOA评分呈负相关趋势.[结论]IL -1、IL -6、TNF -a和MMP3与颈椎间盘退变密切相关,其表达水平与椎间盘退变呈正相关趋势;TNF -a与神经功能有关,可能在神经损伤中起主导作用;MMP3与椎间盘突出有关,对TNF -a的神经功能损伤可能起促进作用.     

胆汁泡蛋白在胆石症人群的含量分布及其临床意义

目的探讨胆汁泡蛋白在胆石症人群的含量分布,并观察利胆药物对其活性的影响.方法将纯化的泡蛋白免疫新西兰大白兔获得高效价抗体,建立ELISA标准曲线;并应用ELISA法测定正常人、胆石症病人胆汁和血清中泡蛋白含量同时观察不同溶石防石药物如利胆冲剂、胆酸钠等对泡蛋白的影响.结果建立了ELISA标准曲线,其曲线方程为Y=0.035X(r=0.99);正常人胆汁和血清中Mr 33500泡蛋白含量都明显较胆固醇结石病人低[(0.007±0.003) g/L vs(0.050±0.011) g/L,(0.015±0.010) g/L vs(0.045±0.021) g/L,P<0.05];利胆冲剂治疗2周后,胆汁和血清泡蛋白含量显著降低,而对照组和胆酸钠治疗组未见明显变化.结论在不同人群胆汁泡蛋白的含量差异显著;利胆冲剂等溶石防石药物能降低胆汁和血清Mr 33500泡蛋白含量.     

Claudin-7基因敲除诱导小鼠肠道炎症及其致癌机制的研究

目的 初步探讨Claudin-7(Cln-7)基因敲除诱导小鼠肠道炎症及其致癌的机制.方法 Cln-7基因敲除组小鼠和正常对照组小鼠出生4d后被处死并观察其肠道黏膜病理变化;采用蛋白印迹技术检测NF-κB p65、P-p65、P-IκBα、磷酸化组蛋白H3和环氧合酶-2在小鼠肠道中的表达情况;采用实时荧光定量PCR技术检测小鼠肠道组织中炎症因子IL-1β、IL-6、TNFα的基因表达水平;采用免疫组化技术检测43例结直肠癌患者肿瘤标本及15例正常大肠黏膜组织中Cln-7蛋白的表达,并分析其与临床病理因素之间的关系.结果 Cln-7基因敲除小鼠在出生4d左右即出现明显脱水、且停止生长,并在出生后7d左右死亡.Cln-7基因敲除小鼠肠道黏膜出现明显的炎症、增殖现象;基因敲除小鼠肠道组织中NF-κB p65、P-p65、P-IκBα、磷酸化组蛋白H3、环氧合酶-2蛋白表达比对照组小鼠均显著升高(P＜0.01);Real-time PCR结果表明基因敲除小鼠肠道组织中IL-1β、IL-6和TNFα的mRNA水平与对照组小鼠比较差异均具有统计学意义[小肠分别为(24.45 ±0.12)比(0.35 ±0.42),t=8.468,P =0.001;(34.26±0.10)比(1.63±0.05),t=8.673,P =0.001;(12.35±0.02)比(1.37 ±0.01),t =4.743,P=0.025.大肠分别为(31.25 ±0.15)比(1.56 ±0.02),t=5.436,P =0.005;(21.75 ±0.11)比(1.97 ±0.02),t=4.217,P =0.025;(18.25±0.09)比(1.66±0.01),t=4.217,P=0.025)].免疫组化结果显示Cln-7在大肠癌组织中的表达明显低于正常大肠组织,且与大肠癌分化程度(x2 =12.421,P=0.001)和有无肝脏及淋巴结转移有关(x2=9.462,P=0.001;x2=9.875,P=0.001).结论 敲除Cln-7基因可通过激活NF-κB等通路诱导肠道炎症,参与了结直肠癌的发生和发展过程;Cln-7基因可能是潜在的抑癌基因.