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氧化苦参碱抑制血小板源性生长因子诱导的人成纤维细胞增殖 总被引：1，自引：0，他引：1
氧化苦参碱 (Ｏｘｙ ｍａｔｒｉｎｅ)又称苦参素 ,能抗ＣＣｌ4 所致的肝损伤[1] 。本研究调查其对人成纤维细胞增殖的影响 ,探讨其可能存在的抗纤维化作用及机制。1 材料与方法1 1 主要试剂 苦参素注射液 (宁夏制药厂 ,批号9910 14) ,血小板源性生长因子ＢＢ (ＰＤＧＦ ＢＢ ,Ｒｏｃｈｅ) ,ＢｒｄＵＥＬＩＳＡｋｉｔ (Ｒｏｃｈｅ )。ＰＤＧＦ ＢＢ用10ｎｇ ｍｌ的浓度[2 ] 。1.2 细胞增殖实验 成纤维细胞取自两名行瘢痕切除术的幼儿皮肤 ,用含 10 %小牛血清 (ＦＢＳ)的ＤＭＥＭ培养基培养 ,但实验氧化苦参碱对ＰＤＧＦ ＢＢ诱导的细胞… 相似文献
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目的：探讨ＭＢＰ对外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）与人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）粘附性的影响,以揭示中枢神经系统（ＣＮＳ）炎症时ＰＢＭＮＣ进入ＣＮＳ的可能原因。方法：用细胞粘附试验,研究ＰＢＭＮＣ与ＨＵＶＥＣ的粘附性,用细胞免疫化学法、ＦＡＣＳ分别观察ＶＣＡＭ－１和ＩＣＡＭ－１的表达。结果：ＭＢＰ活化的ＰＢＭＮＣ与ＭＢＰ刺激的ＰＢＭＮＣ培养上清作用的ＨＵＶＥＣ的粘附性较对照有显著提高。ＩＣＡＭ＿１ 相似文献
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血小板源生长因子对培养内皮细胞移行的影响及其与血管内皮细 … 总被引：3，自引：0，他引：3
一、材料与方法1 材料与试剂 :人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)株(ＥＣＶ30 4)由武汉大学菌种保存中心提供。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＤＭＥＭ/Ｆ12 、胎牛血清 (ＦＢＳ)及青霉素 链霉素均为美国Ｇｉｂｃｏ公司产品。血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)抗血清为ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司产品。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＳＡＢＣ试剂盒抗血清及二氨基联苯胺(ＤＡＢ)由博士德公司提供。2 血小板源生长因子 (ＰＤＧＦ)对培养ＨＵＶＥＣ移行的影响 :参照Ｇａｊｄｕｓｅｋ等[1] 介绍的方法 ,并加以改进。选用生长良好的ＨＵＶＥＣ悬液 ,调整细胞密度为 2× 10 4 个 /… 相似文献
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目的：研究ＥＢＶ－ＬＭＰ及二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）对人鼻咽癌（ＮＰＣ）细胞体外生长分化的影响。方法：以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象，采用电穿孔基因转染技术，将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞，以载体质粒转染及ＣＮＥ１细胞为对照，用细胞体外增殖实验、流式细胞仪和免疫组化等方法，观察细胞生长分化的变化情况。结果：ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞的增殖，实验组与空白组及阴性对照组比较Ｐ＜０．０１，实验组Ｓ期细胞明显增多，细胞角蛋白表达显著下降（Ｐ＜０．０５），有向低分化鳞癌发展倾向；ＤＭＳＯ诱导后ＣＮＥ１细胞增殖力明显下降（Ｐ＜０．０１），细胞角蛋白表达显著增高（Ｐ＜０．０１）；ＬＭＰ可明显抑制ＤＭＳＯ对ＣＮＥ１细胞的诱导分化作用，转染细胞诱导后增殖力和角蛋白表达无显著改变（Ｐ＞０．０５）。结论：ＤＭＳＯ可在一定程度上诱导ＣＮＥ１细胞分化；ＥＢＶ－ＬＭＰ对ＣＮＥ１细胞生长有明显的促进作用，可抑制细胞分化及降低细胞对终末分化信号的反应，有助于深入研究ＮＰＣ的发生机理及防治 相似文献
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为探讨抗ＡＰＯ－１单抗处理的金黄色葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ）活化的淋巴细胞胞浆中游离Ｃａ２＋浓度的变化，用形态学观察、流式细胞光度术观测了鼠抗人ＡＰＯ－１单克隆抗体对ＳＥＢ活化不同天数的人外周血淋巴细胞凋亡的诱导作用，同时采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针检测了ＡＰＯ－１单抗处理的淋巴细胞胞浆内游离Ｃａ２＋浓度。结果表明，抗ＡＰＯ－１单抗对ＳＥＢ活化１ｄ和对照组淋巴细胞无明显的促凋亡作用，但对ＳＥＢ活化５ｄ的淋巴细胞不仅可明显促进其凋亡，而且可使其胞浆游离Ｃａ２＋浓度升高，而Ｚｎ２＋则抑制了抗ＡＰＯ－１单抗的凋亡诱导作用。由此可见，抗ＡＰＯ－１单抗与其特异性抗体结合后可能是通过使胞浆中游离Ｃａ２＋浓度升高，激活了Ｃａ２＋／Ｍｇ２＋依赖的内源性核酸内切酶而导致ＳＥＢ活化的淋巴细胞凋亡。 相似文献
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EB病毒潜伏膜蛋白对人鼻咽癌细胞系CNE1生长分化的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
目的 研究ＥＢ病毒潜伏膜蛋白（ＥＢＶ－ＬＭＰ）对人高分化鼻咽癌细胞生长分化的影响。方法 以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象,采用电穿孔基因转染技术,将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞。以载体质粒转染及ＣＮＥ１细胞为对照,用细胞体外增殖实验、流式细胞信（ＦＣＭ）和裸鼠体内丰瘤实验等,观察细胞生长分化的变化。结果 ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞地增殖,实验组平均吸光度（Ａ） 相似文献
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EB病毒潜在膜蛋白对鼻咽癌细胞系CNE1生长及HLA表？… 总被引：1，自引：0，他引：1
研究ＥＢＶ－ＬＭＰ对高分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１生长及ＨＬＡ表达的影响。方法 以人高分化鼻咽癌细胞株为对象，采用电穿孔基因转染技术，将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒ｐＣＭＶａ－ＬＭＰ转染ＣＮＥ１细胞。用细胞体外增殖试验，免疫组化和流式细胞术等方法，观察细胞生长及ＨＬＡ表达的变化。结果 ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞的增殖，增殖吸光度比值试验组与空白组及阴性对照组比较有显著性差异；实验组细胞软 相似文献
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EB病毒潜在膜蛋白对鼻咽癌细胞系CNE1生长及HLA表达的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
目的研究ＥＢＶ－ＬＭＰ对高分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１生长及ＨＬＡ表达的影响。方法以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象，采用电穿孔基因转染技术，将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒ｐＣＭＶａ－ＬＭＰ转染ＣＮＥ１细胞。用细胞体外增殖试验、免疫组化和流式细胞术等方法，观察细胞生长及ＨＬＡ表达的变化。结果ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞的增殖，增殖吸光度（Ａ）比值试验组与空白组及阴性对照组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；实验组细胞软琼脂克隆形成率显著高于空白及阴性对照组（Ｐ＜０．０１）；细胞ＤＮＡ含量明显增高（Ｐ＜０．０１／０．０５）；ＦＣＭ法测定细胞角蛋白表达，实验组比空白及阴性对照组阳性率显著降低（Ｐ＜０．０５）；ＨＬＡ免疫组化检测结果表明，ＬＭＰ表达细胞系ＨＬＡⅠ类及Ⅱ类抗原的表达都明显下降（Ｐ＜０．０１）。结论ＥＢＶ－ＬＭＰ对ＣＮＥ１细胞生长有明显的促进作用且可明显抑制细胞分化，ＬＭＰ可致鼻咽癌细胞ＨＬＡ抗原的表达改变。 相似文献
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目的 :观察流体切应力对内皮细胞粘附分子ＩＣＡＭ 1、ＶＣＡＭ 1及单核细胞趋化蛋白质 (ＭＣＰ 1)表达的影响以及在动脉粥样硬化发病中的意义。方法 :以人静脉内皮细胞(ＨＵＶＥＣ) ,作观测对象 ,采用平行板流动腔产生一定大小的切应力 ,采用免疫组化ＡＢＣ法观测经 0 .72Ｐａ作用不同时间 (30ｍｉｎ、5ｈ)后 ,粘附分子表达的变化 ,采用ＥＬＩＳＡ方法测定灌流液中ＭＣＰ 1蛋白浓度 ,反映内皮细胞表达ＭＣＰ 1的变化。结果 :粘附分子测定的结果如下 :切应力作用 30ｍｉｎ后 ,ＩＣＡＭ 1的阳性表达率 (% )为 5 6 .3± 10 .2 ,作用 5ｈ后为 5… 相似文献
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龙中奇 《四川生理科学杂志》2002,24(2):88-90
正常人体动脉血压 (ＢＰ)是生命活动的重要体征 ,是内环境保持稳态的重要内容。ＢＰ受着中枢神经系统 (ＣＮＳ)和多种体液因子复杂而精确的调控。1 边缘前脑内重要的升、降压系统及其作用机制 近年来对边缘前脑内各升、降区之间以及它们与脑干各区间的机能联系及其所形成的系统有了进一步研究。1 1 边缘前脑内的升压系统1 1 1 岛皮层 (ＩＮＳ) 中央杏仁核 (ＡＣ) 室旁核(ＮＰＶ) 延髓头端腹外侧区 (ＲＶＬ)系统 ＩＮＳ参与情绪反应 ,且有纤维投射到ＡＣ ,ＡＣ的神经纤维投射到多个升压区 :包括蓝斑 (ＬＣ)、臂旁核 (ＮＰＢ)、… 相似文献
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目的：研究ＥＢＶ－ＬＭＰ及二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）对人鼻咽癌（ＮＰＣ）细胞体外生长的影响，方法：以人高分化鼻咽癌细胞体（ＣＮＥ１）为对象，采和电穿孔基因转染技术，将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞，以载体质粒转染及ＣＮＥ１细胞为对照。用细胞体外增殖实验，流式细胞仪和免疫组化方法，细胞生长分化的变化情况，结果：ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞的增殖，实验组与空白组及阴性对照组比较（ 相似文献
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ＥＮＡ全称为Ｅｘｔｒａｃｔａｂｌｅｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉ ｇｅｎ,即可提取性核抗原 ,包括Ｓｍ、Ｕ1 ＲＮＰ、ＳＳＡ、ＳＳＢ、Ｊｏ 1、Ｓｃ1 70、ｒＲＮＰ、Ｋｕ、ＰＣ ＮＡ、Ｍｉ 1、Ｍｉ 2、ＰＭ 1等。ＥＮＡ抗体是抗核抗体中种类最多、最为重要的一族抗体谱 ,是自身免疫性结缔组织病中常见的自身抗体。本文拟从兔胸腺和猪脾中制备ＥＮＡ丙酮粉 ,探索简便可行的浓缩ＥＮＡ蛋白抗原的方法 ,以达到提高检测抗ＥＮＡ抗体阳性率的目的 ,最终向基层医院推广。兔胸腺和猪脾冻存于 80℃超低温冰箱 ,首先 ,4℃下分别以磷酸盐缓冲液(ＰＢＳ)和… 相似文献
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系统性红斑狼疮 (ＳＬＥ )小鼠模型是研究人ＳＬＥ发病机制的主要工具。本室曾发现狼疮性ＢＸＳＢ小鼠Ｂ细胞增生异常升高 ,更新速度明显加快[1] 。另一方面 ,ＢＸＳＢ小鼠血清ＩｇＧ2ａ和ＩｇＧ3水平及相应亚类的自身抗体显著升高[2 ,3 ] ,而一般认为ＩｇＧ类型抗体负反馈性抑制Ｂ细胞的功能是机体免疫调节的重要机制之一。本实验初步探讨了正常的 2月龄ＢＡＬＢ/ｃ小鼠和发病的 4月龄雌雄ＢＸＳＢ小鼠Ｂ细胞体外增殖反应状态以及ＩｇＧ类型的兔抗小鼠Ｉｇ (ＲａＭＩｇ )对此的调节作用。1 材料和方法1 1 动物 ＢＸＳＢ小鼠由北医大三院… 相似文献
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EB病毒LMP1促鼻咽癌细胞生长与CD23、bcl-2表达和凋亡的关系 总被引：1，自引：0，他引：1
目的 :探讨ＥＢ病毒ＬＭＰ1表达的促鼻咽癌细胞生长作用与ＣＤ2 3、ｂｃｌ- 2表达和细胞凋亡的关系。方法 :用免疫组化ＬＳＡＢ法检测ＬＭＰ1、ＣＤ2 3和ｂｃｌ- 2蛋白的表达 ;用ＭＴＴ法测定鼻咽癌细胞的生长能力 ;用ＤＮＡ电泳法、流式细胞仪测定法和末端脱氧核苷酸转移酶介导核苷酸缺口标志 (ＴＵＮＥＬ)法检测癌细胞凋亡 ;用ＭＴＴ法观察ＣＤ2 3单克隆抗体对鼻咽癌细胞生长能力的影响。结果 :用含ＬＭＰ1基因质粒转染并表达ＬＭＰ1的鼻咽癌细胞 (Ｌ -ＣＮＥ1 )在 1 5%血清和无血清培养液培养下的生长能力均明显增强 ,并表达ＣＤ2 3蛋白 … 相似文献
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ANAE染色和抗Thy
1-SPA菌体花环双标记法的建立
及其用于检测小鼠T淋巴细胞的研究报告 总被引：1，自引：0，他引：1
Ｔｈｙ抗原 [Ｔｈｙ(θ)ａｎｔｉｇｅｎ]是Ｔ淋巴细胞表面特异标志 ,系由第 9对染色体等位基因编码的抗原分子。Ｍｕｅｌｌｅｒ发现 ,抗θ血清可破坏ＡＮＡＥ阳性淋巴细胞 ,ＡＮＡＥ阴性者则否。设想 ,小鼠ＡＮＡＥ阳性淋巴细胞可能正是携有Ｔｈｙ 1表面标志物的淋巴细胞 ,应该可以直接获得证明。为此 ,作者进行了小鼠淋巴细胞抗Ｔｈｙ 1 -ＳＰＡ菌体花环与ＡＮＡＥ染色双标记的实验研究。目的 :建立ＡＮＡＥ染色联合抗Ｔｈｙ 1 -ＳＰＡ菌体花环双标记法 ;利用此法证明抗θ抗体对ＡＮＡＥ阳性淋巴细胞的特异作用。方法 :利用双标记法对正常… 相似文献
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生物素与亲和素有相当强的亲和力 (Ｋｄ10 15Ｍ ) ,已被广泛用于细胞化学、免疫组织化学、免疫测定以及核酸原位分子杂交。但是生物素 亲和素系统中 ,亲和素是一种高碱性 (ｐＨ0 5 )糖蛋白 ,易引起较强的非特异性结合。最近Ｂａｇｅｒ报道抗生物素抗体有模拟亲和素功能作用 ,并显示较好的特异性[1] 。本文报道建立二株抗生物素单克隆抗体 ,并初步用于乙型肝炎ＤＮＡ的检测。1 材料和方法1 1 材料 生物素、Ｎ 羟基琥珀酰亚胺、二环已基碳二亚胺、ＢＳＡ、ＰＥＧ、ＨＡＴ、ＤＡＢ (3,3 ｄｉａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｄｉｎｅ )、羊抗小鼠Ｈ… 相似文献
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钙调素 (ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ ,ＣａＭ )是普遍存在于真核细胞内的Ｃａ2 受体蛋白 ,是细胞内信号传导系统的重要成分 ,可缩短细胞周期 ,促进细胞增殖。近年来发现ＣａＭ也存在于细胞外 ,细胞外ＣａＭ能促进Ｋ5 6 2细胞、Ｂｕｒｋｉｔｔ细胞的增殖[1,2 ] 。本课题用抗ＣａＭ抗体 (ＲＡＣａＭ )及纯化的重组人钙调素 (ｒｈＣａＭ )进行的研究结果初步表明 ,抗ＣａＭ抗体可抑制Ｋ5 6 2细胞增殖。1 材料和方法1 1 细胞及试剂 Ｋ5 6 2细胞 (本中心保存 ) ;ＭＴＴ (Ｓｉｇｍａ ) ;Ｎ 羟基琥珀酰亚胺基 3 (2 吡啶二硫 ) 丙酸酯 (ＳＰＤＰ ,… 相似文献
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目的 :目前认为动脉粥样硬化 (ＡＳ)是一种炎症性疾病 ,其致病因素多种 ,细胞因子生长因子等在其发病机制中起着重要的作用。因而通过ＴＮＦ α作用于内皮细胞 (ＥＣ)后 ,观察单核细胞对其粘附的变化 ,粘附分子表达以及对调控粘附分子基因的转录因子 (ＮＦκＢ)变化 ,以探讨ＴＮＦ α在ＡＳ发生早期细胞行为中的作用。方法 :人脐静脉内皮细胞和γＴＮＦ α(5ｎｇ/ｍｌ)作用 4ｈ后 ,用细胞计数法测Ｕ937细胞以ＥＣ粘附率 ,用ＥＬＩＳＡ法检测ＥＣ膜上粘附分子ＶＣＡＭ 1、ＩＣＡＭ 1、Ｐ ｓｅｌｅｃｔｉｎ的表达 ,以及采用细胞免疫化学方法测… 相似文献
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目的 :探讨ＥＢＶ -ＬＭＰ1促进细胞增殖 ,参与ＥＢＶ相关疾病致瘤的分子机制和ＥＢＶ -ＬＭＰ1通过ＮＦκＢ介导的信号传导途径活化细胞周期重要正性调节因子ＣｙｃｌｉｎＤ1表达的机制。方法 :利用已建株的 ,ＬＭＰ1表达受四环素衍生物强力霉素严密调控的ｐＴｅｔ-ｏｎ -ＬＭＰ1 -ＨＮＥ2稳定鼻咽癌细胞系 ,用强力霉素诱导ＬＭＰ1的表达 ,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ从蛋白质水平分析ＬＭＰ1诱导ＣｙｃｌｉｎＤ1表达的表达动力学 ,包括时间效应及剂量效应 ,进一步在ＬＭＰ1稳定表达的鼻咽癌细胞系ＣＮＥ -ＬＭＰ1中 ,用反义硫代磷酸化… 相似文献