汕头市畸形儿巨细胞病毒感染的检测

宫内病毒感染尤其是巨细胞病毒（CMV）感染是致畸的重要原因之一。为了解我市畸形儿病毒感染的状况，探讨CMV在致畸上的作用及相关性，本室从汕头市各医院收集了24例畸形儿（无脑儿、脊柱裂、异位心、多发性畸形、巨大肝等），取母、婴配对标本（包括羊水，母血、宫颈分泌物、乳汁及畸形儿心血、咽拭子）共128份进行常规病毒分离、鉴定，并用ELISA法测定母、婴血清中抗CMV、IgG、IgM抗体。结果从24例畸形儿中分离到CMV1例，HSV-2型1例，检出CMV-IgM3例（其中1例为CMV分离阳性），病毒检测阳性率为16.67%（4/24），而CMV占病毒感染的3/4。初步结果提示本市畸形儿病毒感染因素不容忽视，而在病毒感染中以CMV为主要病原。     

巨细胞病毒的分离

从3例正常孕妇的宫颈分泌物和2例有黄疸、肝脾肿大的病婴尿中分离到5株巨细胞病毒(CMV),在2BS细胞上引起CMV典型病变的时间分别是在接种后的7,9,10,28天,血清抗CMV效价:例1为1:32,其母>1:64,例3脐带血与母血均为1:16,例2为1:32,经SPA吸收后1:20的血清仍为++。     

应用多聚酶反应技术检测HBV宫内感染

采用多聚酶反应技术对218例孕妇－引产胎儿进行HBV宫内感染的检测。结果表明,（1）HBsAg阳性孕妇HBV DNA宫内感染率为66．67％。说明HBV宫内感染率较高。（2）HBsAg阴性孕妇静脉血中6．2％检出HBV DNA,提示HBsAg阴性孕妇也可能发生HBV宫内感染,应引起人们的重视。（3）母血中HBsAg、HBeAg、抗－HBc同时阳性其相应胎儿HBV DNA感染率为92．5％。进一步说明了乙肝大三阳是HBV宫内感染的危险因素。     

乙型肝炎病毒宫内传播的危险因素

目的 研究乙型肝炎病毒宫内传播的危险因素。方法 对87例乙型表面 抗原阳必孕妇采集脐血行乙肝标志物、PCR－HBV－DNA检测,孕妇产后1－4d内取静脉血进行乙肝标记物检测。结果 脐血PCR－HBV－DNA阳性1例占1．2％（1／86）。母血HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的宫内感染的危险度（OR)分别为0．697（0．586－0．786）、50．792（13．082－197．204）、0．103（0．032－0．338）、2．261（0．587－8．712）。母血HBeAg阳性（含HBcAb阳性）组的脐血HBsAg阳性百分数（31．0％）、HBeAg阳性百分数（72．4％）显高于HBsAg阳性组（分别3．92％,3．92％）。性别与是否宫内感染无显相关,母血HBeAg与脐血HBsAg阳性是胎儿宫内感染的危险因素;新生儿性别与宫内感染无关。     

抗HBe阳性慢性肝炎患者的HBV感染状态研究

本文结合肝内HBsAg与HBcAg的表达情况对15例抗-HBe阳性慢性肝炎患者进行了肝细胞内HBV DNA原位杂交分析。发现其HBV感染状态可分为3种类型;①HBV活动复制型(4例,26.7％),肝内HBV DNA、HBsAg、HBcAg三者或HBsAg、HBcAg阳性;②HBV不完全复制或表达型(8例,53.3％),肝内HBV DNA、HBsAg阳性;③HBV非复制型(3例,20.0％),肝内HBV DNA及HBV标志均阴性。提示:在血清HBeAg向抗-HBe转换的病例中,HBV感染状态不尽相同,部分患者仍存在HBV活动性复制,少数病例的HBV复制已停止,半数病例处于由活动性复制相向非复制相过渡阶段。     

外周血单个核细胞感染乙型肝炎病毒在母婴垂直传播中的作用

目的：探讨HBsAg、HBeAg阳性孕妇外周血单个核细胞(PBMC)内乙型肝炎病毒(HBV)DNA感染状况及其在宫内母婴垂直传播中的作用。方法：对HBsAg／HBeAg双阳性共67对孕妇及其新生儿静脉血分离和提纯PBMC后，经抽提、纯化后的DNA进入PCR扩增反应，引物为HBVC区基因序列。结果：67名HBsAg及HBeAg双阳性的孕妇中有35例(52．2％)PBMC中HBV DNA阳性，25例孕妇在血清及PBMC中均发现HBV DNA。67名新生儿有22例感染HBV DNA，感染率32．8％，其中血清HBV DNA阳性者10例，PBMC HBV DNA阳性者19例，二者均阳性者7例。结论：母亲PBMC内HBV DNA阳性可能导致新生儿PBMC中HBV DNA阳性，PBMC内的HBV DNA可能是HBV母婴垂直传播的一条重要途径，同时，HBsAg及HBeAg阳性母亲若血清HBV DNA为阳性就极大增加了其新生儿感染HBV的危险性。     

孕妇乙型肝炎病毒感染与胎儿宫内感染的关系

目的探讨孕妇血清中乙型肝炎病毒血清学标志物(HBVM)和DNA(HBV DNA)与胎儿宫内乙型肝炎病毒感染的关系。方法应用电化学发光和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对65例乙肝表面抗原(HBsAg)阳性孕妇的母血及产后婴儿外周血的乙型肝炎血清学标志物和DNA进行检测。结果65例HBsAg阳性孕妇血清中HBeAg和HBV DNA的检出率分别为32.2%、46.2%;所生婴儿外周血中HBsAg、HBeAg和HBV DNA的检出率分别为16.9%、23.1%、4.6%。HBeAg和HBV-DNA阳性孕妇所生婴儿外周血HBsAg检出率分别为38.1%和36.7%,显著高于HBeAg和HBV-DNA阴性者的4.5%和0(<0.01)。婴儿外周血中HBsAg阳性率随孕妇HBV DNA含量增加而增加。结论孕妇血清中HBeAg和HBV DNA阳性是胎儿宫内感染HBV的高危因素,胎儿宫内感染率随母血中HBV DNA含量增加而增加。     

胎儿宫内感染乙型肝炎病毒的实验研究

目的探讨胎儿宫内乙型肝炎病毒(HBV DNA)感染的实验诊断方法及其临床意义.方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对156例乙肝表面抗原(HBsAg)阳性孕妇的母血和产后婴儿脐血及婴儿外周血的乙型肝炎血清学标志物(HBV-M)和HBV DNA进行检测.结果156例HDsag阳性孕妇所生婴儿脐血和婴儿外周血HBsAg的检出率为8 3%(13/156)、6.4(10/156),HBeAg检出率分别为7.1%(11/156)、5.1%(8/156),母血、脐血、婴儿外周血HBV DNA阳性检出率分别为36.5%(57/156)、28.2%(44/156)、23.7%(37/156);57例HBV DNA阳性孕妇血病毒含量(拷贝数/ml的对数值)为7.34±2.28,37例阳性婴儿外周血HBV DNA含量为6.08±0.96;与婴儿外周血检测结果相比较,脐血中HBsag、HBeAg的阳性率不仅存在23.1%和37.5%的假阳性,HBV DNA也存在16.7%(7/42)的假阳性;在HBeAg或HBV DNA阳性孕妇中,婴儿外周血HBV DNA的检出率分别为73.8%(31/42)、64.9%(37/57),显著高于HBeAg或HBV DNA阴性者5.3%(6/114),(P＜0.01):婴儿外周血中HBV DNA阳性率随孕妇HBVDNA含量增加而显著增加(P＜0.005),其HBV DNA的含量与母血呈正相关,(r=0.39).结论婴儿脐血HBV检测是诊断胎儿宫内HBV感染的筛选指标,而婴儿外周血的检测才具有确诊意义;HBV DNA定量检测是胎儿宫内HBV感染和感染程度最为直接、敏感的诊断方法;孕妇HBeAg、HBV DNA阳性是胎儿宫内感染HBV的高危因素.     

乙型肝炎病毒的传播与防治

乙型肝炎(简称乙肝)是由乙肝病毒(HBV)感染人体后引起的传染病。它潜伏期长(6周至6月) ,症状轻,无黄疸,易被忽视;但其病程迁延,可能转成慢性肝炎、肝硬化甚至肝癌,因此 对乙肝应高度重视。一旦感染上HBV可能终身携带,有临床症状为乙肝患者;无临床症状为H BV携带者,两者均为传染源,而母婴传播是婴幼儿乃至成人HBV感染的重要途径。 　　乙肝表面抗原(HBsAg)是HBV的外壳蛋白,其检测方法简便,通常以检测HBsAg阳性代表HBV的 感染。我国HBsAg携带率高达10%-15%,且呈逐年升高的趋势。 1　HBV的传播途径 1.1　出生时感染 　　(1)母婴传播：母婴垂直传播包括产程感染与宫内感染(宫内感染比例约为5%-15%)世界各地 慢性H BsAg携带者母亲的HBV在围产期传播率不同,欧洲为10%,美洲为25%-30%,亚洲为30%-70%, 中国为60%。另有报道,HBsAg与HBeAg(乙型肝炎e抗原)阳性母亲所生婴儿可有90% 以上受到HBV感染,而且成为HBV持续携带者。以往认为在怀孕过程中因先兆流 产使子宫收缩,胎盘轻微剥离,母血混入胎儿体内是宫内感染HBV的主要原因。但唐时幸等 人的研究发现11例HBeAg阳性和9例HBV-DNA阳性孕妇引产胎儿,其心血HBeAg和HBV-DNA均阴 性;孕妇怀孕过程中没有先兆流产史,分娩后检查胎盘完整,说明怀孕期间母血的混入并不 常见。另从胎盘组织中检出HBV-DNA,其中1例母血和胎儿心血HBV-DNA均阴性,可排除母血 和胎儿血污染所致,表明HBV可通过胎盘屏障或者先感染胎盘组织并在其中复制,再感染胎 儿。此外还发现2例胎儿存在多种肝外组织HBV感染,进一步说明HBV的确是一种泛嗜性DNA病 毒。关于同时存在肝脏及多种肝外组织感染的原因仍不清楚,可能与HBV感染方式有关。     

165例乙型肝炎病毒携带产妇乳汁HBV-DNA检测及临床分析

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)携带产妇乳汁中HBV携带状况以及HBV携带母乳喂养的安全性。方法选择HBV携带产妇165例(肝功能均正常)及30例HBV标志物(HBVM)阴性产妇,分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测产妇血清HBVM和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测产妇初乳HBV-DNA,并对结果进行综合分析。结果(1)165例HBVM阳性组产妇乳汁HBV-DNA阳性53例(32.12%),对照组30例中无1例产妇乳汁HBV-DNA阳性;(2)165例HBV携带产妇中,母血HBsAg、HBeAg、抗-HBc(+)53例产妇乳汁中HBV-DNA阳性33例(62.3%),HBsAg、抗-HBe、抗-HBc(+)85例产妇乳汁中HBV-DNA阳性9例(10.6%),HBsAg、HBeAg(+)7例产妇乳汁中HBV-DNA阳性5例(71.4%),HBsAg、抗-HBc(+)13例产妇乳汁中HBV-DNA阳性4例(30.8%),HBsAg(+)7例产妇乳汁中HBV-DNA阳性2例(28.6%);(3)165例HBV携带产妇中,母血HBeAg(+)60例产妇乳汁中HBV-DNA阳性38例(63.3%),HBe...     

用美国NIH乙肝灭活疫苗阻断HBV母—婴传播的研究

本文报告以NIH乙肝灭活疫苗及PBS为对照,用随机双盲法对新生儿在0、1、6月龄时分别皮下注射1剂,试图阻断HBV母——婴传播,观察12个月。结果HBsAg和HBeAg均阳性母亲的10名新生儿中,接种疫苗的7名有6名(85.71％)产生抗-HBs应答,仅1名免疫失败。而注射PBS的3名新生儿HBsAg均持续阳性。母亲无HBV感染标记的5名新生儿中,3名接受疫苗的均产生抗-HBs应答;注射PBS的2名则未检出HBV感染标记。接受免疫的二组新生儿均无明显不良反应,表明乙肝疫苗阻断HBV母——婴传播安全有效。     

乙型肝炎病毒宫内感染相关因素的探讨

目的探讨孕妇乙型肝炎病毒感染状态及胎盘感染与宫内感染关系，进而分析乙型肝炎病毒宫内感染的危险因素。方法采用荧光定量PCR技术及酶联免疫吸附试验，对92例HBsAg阳性孕妇及其新生儿的外周血行HBV DNA及乙肝血清标志物检测。采用免疫组化S-P法，对92例HBsAg阳性孕妇分娩时胎盘组织行HBsAg及HBcAg的检测。结果（1）HBeAg阳性孕妇与HBeAg阴性孕妇HBV宫内感染率分别为21．2％（11／52）和0（0／40），差异有显著性（P〈0．01）；HBV DNA阳性孕妇与HBV DNA阴性孕妇HBV宫内感染率分别为18．64％（11／59）和0（0／33），差异有显著性（P〈0．025）。（2）92例HBsAg阳性孕妇的胎盘中共检测出43例HBsAg和（或）HBcAg阳性，阳性率由胎盘的母面至胎儿面有逐渐下降的趋势。由胎盘屏障的蜕膜细胞（DC）、滋养层细胞（TC）、绒毛间质细胞（VSC）和绒毛毛细血管内皮细胞（VCEC）感染而致的宫内传播的相对危险度比值比（0R）分别为4．53、7．15、9．33和24．33，0R值从胎盘的母面至胎儿面有逐渐上升的趋势。结论新生儿宫内感染与孕妇乙肝感染状态有关，HBV宫内感染以经胎盘感染为主，感染胎儿的途径可能是通过细胞转移方式实现的，胎盘屏障对胎儿有一定的保护作用。HBeAg阳性、HBV DNA阳性及绒毛毛细血管内皮细胞（VCEC）感染是新生儿宫内HBV感染的危险因素。     

乙型肝炎病毒宫内感染的随访研究

了解发生乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的婴儿的转归情况．方法：对402名HBsAg阳性母亲的婴儿的宫内感染等情况进行远期随访．所有随访到的母亲和孩子的血清检测肝功能和HBV标志物、结果：随访到59对母亲和孩子．59例HBsAg阳性孕妇所生婴儿中,出生时5例HBsAg阳性,其中3例HBsAg持续阳性,且这3例HBsAg持续阳性的儿童全部为HBsAg、HBeAg阳性母亲所生;2例HBsAg阴转并产生抗-HBs;母亲HBV标志物血清学在分娩前后变化明显．结论：母亲HBeAg阳性是婴儿发生HBV宫内传播的主要危险因素,尤其是孕妇既往HBsAg携带分娩时HBeAg阳性是婴儿发生HBV宫内传播后形成乙肝病毒携带的危险因素;婴儿的免疫无应答应判定为宫内感染;HBsAg阳性母亲妊娠过程中乙肝加重,同时也增大了宫内感染的危险、     

慢性HBV携带研究进展

乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus，HBV）感染后最多的是HBV携带者。HBV携带者命名并不统一，但意义相同，分别有：慢性无症状HBV携带者（AsC）、慢性HBsAg携带者、无症状HBsAg携带者、HBV携带者等。2010年版中国《慢性乙型肝炎防治指南》中，将HBV携带者分为慢性HBV携带者和非活动性HBsAg携带者[1]。慢性HBV携带者是指血清HBsAg阳性，1年连续随访3次以上，血清ALT均在正常范围，HBeAg阳性或阴性， HBV DNA阳性者。其中一部分人可能发展为肝硬化。因此，对于这部分HBV携带者，应积极动员其行肝组织学检查。如肝组织学检查显示，Knodell肝炎活动指数≥4，或炎症坏死≥G2，或纤维化≥S2，则需要进行抗HBV治疗。非活动性HBsAg携带者是指血清HBsAg阳性， HBeAg阴性，抗-HBe阳性或阴性，HBV DNA阴性或低于检测低限，1年连续随访3次以上血清ALT均在正常范围者，肝组织学检查显示，Knodell肝炎活动指数＜4，这部分HBV携带者一般不需要进行特别治疗。全世界有超过3亿的慢性HBV携带者，主要分布在亚洲和西太平洋地区，其中1/3~1/4将发展致肝硬化和肝细胞癌（HCC），而HBV变异株感染者上述比例更高[2-3]，全世界53%的肝癌与HBV感染相关[4-5]。HBV引起的慢性肝病大多数无症状，只是在其漫长的感染过程中，间歇出现疲乏感或其它非肝病特定的症状。HBV感染时肝损害的发生及其严重程度受许多因素影响，HBV基因组特殊区域（前核心终止密码子，前S2启动密码子）和细胞毒性T淋巴细胞主要免疫表位的突变，均可影响肝损害的临床经过和病情严重程度[6]。慢性HBV携带者是一个相当复杂的群体，其病变谱包括从肝组织正常至肝硬化的不同表现，其感染状态包括免疫耐受的高感染状态至免疫清除的低感染状态。在我国，绝大多数慢性乙型肝炎是由慢性HBV携带者病情活动而发病的。     

HBsAg和HBcAg在慢性乙肝病毒携带者肝组织中的表达

目的 观察慢性乙肝病毒携带者血清标志物与肝组织HBcAg表达的相关性.方法 对80例慢性乙肝病毒携带者行快速经皮肝穿刺术取肝组织,免疫组化染色检查HBsAg,HBcAg.荧光定量PCR法检测血清HBV DNA.ELISA法检测血清HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc. 结果 血清HBsAg均阳性,血清HBeAg阳性者48例、HBeAg阴性者32例,血清HBV DNA阳性者50例、HBV DNA阴性者30例.肝组织HBsAg阳性者68例、肝组织HBcAg阳性者43例. 结论 慢性乙肝病毒携带者肝组织HBcAg表达与血清标志物HBV DNA、HBeAg有相关性.     

婴儿急性特发性血小板减少性紫癜与巨细胞病毒感染关系探讨

目的:探讨婴儿期急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)与人巨细胞病毒(CMV)感染及免疫功能的关系.方法:对52例ITP患儿(病例组)及32例正常婴儿(对照组)检测血清CMV-DNA及CMV-IgM、IgG抗体,比较两组差异;对52例ITP病例组患儿进行末稍血T细胞亚群检测,比较CMV-IgM阳性者与阴性者T细胞亚群差异;对CMV-IgM阳性者分更昔洛韦(GCV)治疗组和非GCV治疗组,比较两组治疗后末稍血血小板数量.结果:两组患儿CMV-DNA阳性数、CMV-IgM、IgG抗体阳性数比较,差异有统计学意义(均P<0.01);病例组CMV-IgM阳性者与阴性者T细胞亚群CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比较,差异有统计学意义(均P<0.01);对CMV-IgM阳性者加用GCV治疗,血小板计数有明显改善.结论:CMV是ITP的重要致病因素之一,在临床上建议对CMV相关性ITP加用GCV治疗.     

HBV宫内感染危险因素的病例对照研究

目的 探索乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的危险因素,为预防HBV宫内感染提供科学依据.方法 将2013年4月至2015年5月妊娠后经筛选HBsAg阳性312例孕妇作为研究对象,观察至婴儿出生后6个月,以HBsAg和(或)HBV DNA检测阳性婴儿的母亲为宫内感染病例组,其余婴儿的母亲为对照组,采用Logistic回归分析法对HBV宫内感染危险因素进行分析.采用问卷调查法收集基本资料,时间分辨免疫荧光分析法检测HBsAg,PCR方法检测HBV DNA的水平,自动生化分析仪检测ALT、AST、三酰甘油、胆固醇等肝功能指标.结果 单因素分析结果显示HBeAg、HBV DNA、羊水污染、孕期性行为与HBV宫内感染有关(P＜0.05).多因素Logistic回归结果显示:孕妇HBeAg阳性(OR=2.76,95％CI=1.19～7.94)、孕妇HBVDNA阳性(OR=9.62,95％CI=2.58～35.33)、孕期性行为(OR=1.53,95％CI=1.07～6.40)是宫内感染的危险因素.结论 孕妇HBeAg和HBV DNA阳性、孕期性行为可能是新生儿HBV宫内感染的高危因素.     

HBV-M阳性产妇乳汁中乙肝病毒检测分析

目的:检测乙肝病毒携带产妇初乳中的乙肝病毒携带情况,探索乳汁中HBV的感染率的变化。方法:采集93例孕期检查有一项以上乙肝血清学指标(HBV-M)阳性且肝功能正常产妇及10例HBV-M阳性健康产妇作对照,采用ELISA法检测其HBsAg。结果:HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)(大三阳)组排毒率最高(P<0.01)。结论:对HBV阳性尤其是大三阳产妇应慎重哺乳,以防婴儿感染。     

乙肝患者血清中HBV DNA测定及其意义

目的：了解HBV感染时，HBV DNA阳性的不同血清学指标组合情况。方法：对370份HBV DNA阳性的血清用ELISA方法进行血清学测定。结果：HBsAg、HBeAg、HBeAg、HBcAb均阳性的标本216例，占58.4％；HBsAg、HBcAb均阳性的标本63例，占17％；HBsAg、HBcAb均阳性的标本48例，占13％；HBsAg、HBeAg均阳性的标本30例，占8.1％；HBsAb、HBcAb均阳性的标本6例，占1.6％；HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb均阳性的标本6例，占1.6％；HBsAb阳性1例，占0.3%。结论：单凭HBsAg和HBeAg阳性来判断肝脏中HBV复制及有无传染性是不够的，是造成部分慢性乙肝漏诊；同时HBV DNA含量的监测，更有利于临床治疗方案的选择和疗效观察。     

新生儿巨细胞病毒感染的特点及诊治

目的了解新儿CMV感染的途径、特点及治疗状况.方法采用血清学用ELISA法,间接免疫荧光法检测患儿血清中CMV-IgM、IgG,并对其母同时检查.结果新生儿CMV感染CMV-IgM( )、部分CMV-IgG均为阳性.结论新生儿CMV感染均来自母亲,且多为先天性感染,症状重,采用更昔洛韦、凯时治疗有一定效果.