温热化疗对不同分化程度胃癌细胞株的作用

目的 研究湿热化疗对不同分化程度胃癌细胞株的细胞形态、增殖抑制和细胞周期的影响。方法 以中分化胃癌细胞株SGC7901和低分化胃癌细胞株MKN45为研究对象，用酸性磷酸酶法比较温热化疗对这两种胃癌细胞株的生长抑制作用，用流式细胞仪测定温热化疗后两种细胞株细胞周期的变化，于透射电镜下观察细胞形态的改变。结果 （1）温热化疗对中分化胃癌细胞株SGC7901的生长抑制作用优于低分化胃癌细胞株MKN45；（2）温热化疗可引起SGC7901细胞株G1期阻滞，S期细胞减少，对MKN45细胞周期的影响较小；（3）温热化疗后SGC790和MKN45在电镜下均有凋亡的典型特征，SGC7901细胞质中有大量空泡样改变。结论 温热化疗对不同分化程度的胃癌细胞株的作用不同，其疗效与胃癌细胞的分化程度有关。     

山柰挥发油对裸鼠原位移植人胃癌生长和细胞周期的影响

目的探讨山柰挥发油对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞增殖的抑制作用。方法建立裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞模型。105只裸鼠随机分为山柰挥发油乳剂高、中、低剂量组,乳剂溶媒对照组,生理盐水组,环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)组和空白对照组,每组15只。各组裸鼠予以相应药物实施干预。观察各组荷瘤裸鼠一般情况、肿瘤生长情况及抑瘤率。流式细胞仪检测肿瘤细胞周期分布及细胞凋亡情况。电镜下观察肿瘤细胞超微结构的变化。结果山柰挥发油乳剂高、中、低剂量组的抑瘤率分别为57.2%、28.0%和5.0%,肿瘤细胞主要被阻滞于G0/G1期,与空白对照组比较差异有统计学意义,且呈剂量依赖效应。电镜下观察山柰挥发油乳剂高剂量组和CTX组可见较多凋亡细胞,而山柰挥发油乳剂中、低剂量组凋亡细胞较少。结论山柰挥发油对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞具有较好的抑制增殖作用,且呈剂量依赖效应,其机制可能与调节胃癌细胞周期、促进G1期阻滞及诱导细胞凋亡相关。     

三氧化二砷体外诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对人胃癌SGC 790 1细胞抑制生长、诱导凋亡的生物学效应。方法 :光学显微镜观察细胞形态 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)还原法检测As2 O3 对该细胞株生长的影响 ,流式细胞仪 (FCM )及 3′ OH末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞。结果 :SGC 790 1细胞经As2 O3 作用后 ,细胞增殖受到明显抑制 ,且呈剂量和作用时间依赖关系 ,细胞周期分析显示G2 M期阻滞 ;FCM检测在细胞周期G1期前出现低于 2倍体的凋亡峰 ;TUNEL标记发现DNA链的断裂。结论 :As2 O3 能抑制人胃癌SGC 790 1细胞增殖 ,并诱导该细胞系凋亡 ,其发生机制可能与细胞周期阻滞有关。     

细胞周期蛋白D1与胃癌

细胞增殖周期失控是恶性肿瘤呈现无限制增殖的重要原因 ,研究显示细胞周期正调及负调因子表达紊乱与人类胃癌的发生、发展密切相关。调控细胞周期诸多因素的核心是细胞周期蛋白 (ｃｙｃｌｉｎ)与细胞周期蛋白激酶 (ｃｙｃｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅ ,ＣＤＫ) ,与肿瘤关系最密切者为ｃｙｃｌｉｎＤ。目前 ,ｃｙｃｌｉｎＤ基因已被认为是一种原癌基因 ,它与胃癌发生、发展关系的研究正在不断深入。1　ｃｙｃｌｉｎＤ的结构与表达ｃｙｃｌｉｎＤ有 3种即ｃｙｃｌｉｎＤ1、ｃｙｃｌｉｎＤ2和ｃｙｃｌｉｎＤ3,蛋白依次为 11ｑ13的ＣＣ…     

三氧化二砷诱导胰腺癌细胞周期阻滞与凋亡作用

应用三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）体外、体内诱导胰腺癌细胞，初步观察其对细胞生长、周期分布和凋亡的影响，探讨Ａｓ２Ｏ３治疗胰腺癌的可行性，为胰腺癌防治探索新途径。一、材料与方法１材料：人胰腺癌细胞株ＳＷ１９９０由美国加州大学引进，Ｂａｌｂ／ｃ纯系裸小鼠（...     

小归芍超临界提取物抑制胃癌细胞系BGC-823增殖的实验研究

目的探讨小归芍超临界提取物抑制胃癌细胞系人类胃癌细胞823(in human gastric carcinoma 823cell,BGC-823)增殖的作用。方法将终浓度为50、100、200 mg/L小归芍超临界提取物作用于胃癌细胞BGC-823细胞48 h,观察细胞变化并用四甲基偶氮唑蓝法分析细胞生长抑制、膜联蛋白V碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法检测细胞凋亡率的改变和PI法观察细胞周期的变化。结果①在一定浓度范围内,与对照组相比小归芍提取物能够明显抑制胃癌细胞BGC-823的生长,抑制率随剂量增加而增加,并能够增加细胞的凋亡率(P<0.05或P<0.01);②细胞增殖周期G1期比例明显升高(P<0.05或P<0.001)。结论小归芍超临界提取物可明显抑制胃癌细胞BGC-823的增殖,诱导凋亡以及对细胞周期G1期具有明显的阻滞作用。     

消炎痛对人胃癌上皮细胞BGC-823的作用

目的 :探讨非甾体类抗炎药 (NSAIDs)消炎痛 (indomethacin ,IND)对人胃癌细胞BGC - 82 3的作用 ,以期为非甾体类抗炎药对胃癌的防治作用提供理论依据。方法 :采用DNA条带分析以及流式细胞仪分别从定性及定量的角度观察不同浓度的消炎痛引起的BGC - 82 3细胞凋亡情况 ;MTT法分析不同浓度的消炎痛对BGC - 82 3细胞增殖的影响。结果 :低浓度的消炎痛可引起BGC - 82 3细胞的凋亡并且呈现量效关系 ;MTT分析发现 :消炎痛可抑制BGC - 82 3细胞的增殖 (P <0 .0 5)。结论 :NSAIDs有抑制胃癌细胞增殖、诱导其凋亡的作用 ,提示NSAIDs是一类预防胃肠道肿瘤的可行性药物     

三氧化二砷人外诱导人胃癌SGC0—7901细胞凋亡的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3)对人胃癌SGC－7901细胞和抑制生长,诱导凋亡的生物学效应,方法：光学显微镜观察细胞形态,四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法检测As2O3对该细胞株生长的影响,流式细胞仪（FCM）及3‘－OH末标记法（TUNEL）检测凋亡细胞,结果：SGC－7901细胞经As2O3作用后,细胞增残受到明显抑制,且呈剂量和作用时间依赖关系,细胞周期分析显示胃癌SGC－7901细胞增残,并诱导该细胞系凋亡,其发生机制可能与细胞周期阻滞有关。     

姜黄素对人胃癌BGC-823细胞体外生长的影响

目的:观察姜黄素(CCM)对人胃癌BGC-823细胞体外生长的影响。方法:将0、30、60、90、120μmol/L CCM分别与人胃癌BGC-823细胞共培养24、48 h。采用显微镜直接观察BGC-823细胞的形态变化,采用MTT比色法检测BGC-823细胞抑制率,流式细胞术(FCM)检测胃癌细胞周期分布,TUNEL法检测细胞凋亡率。结果:CCM作用后的BGC-823细胞伪足回缩,细胞变小、变圆,瘤巨细胞减少或不见瘤巨细胞。MTT检测显示CCM显著抑制BGC-823细胞的生长,FCM检测提示CCM影响胃癌细胞周期,使其阻滞于G2/M期。TUNEL法表明CCM可以诱导胃癌细胞出现凋亡(P0.05～P0.01)。结论:姜黄素抑制人胃癌BGC-823细胞的增殖,改变其细胞周期分布,诱导胃癌细胞凋亡。     

紫杉醇诱导人胃癌MGC803细胞凋亡作用研究

目的:研究胃癌发生过程中原位细胞凋亡活动以及紫杉醇对人胃癌细胞系MGC803诱导细胞凋亡的作用。方法:用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测了胃癌MGC803细胞凋亡,用紫杉醇处理培养胃癌细胞MGC803、显微镜下进行观察并且进行琼脂糖电泳,流式细胞仪检测细胞周期分布和端粒体酶活性检测。结果:癌旁对照组原位凋亡细胞增多,紫杉醇处理胃癌细胞可以诱导细胞产生典型的细胞凋亡变化。DNA发生断裂,琼脂糖电泳产生梯形条带,细胞阻滞于G2/M期,端粒体酶活性下降。结论:在体内肿瘤细胞凋亡降低,细胞分裂可加快,癌旁对照中细胞凋亡增多,体外紫杉醇可以诱导胃癌细胞系MGC803凋亡。     

白藜芦醇纳米微粒对体外人胃肿瘤MGC803细胞增殖和凋亡的影响

目的观察不同浓度白藜芦醇（RES）纳米微粒在不同时间段对人胃肿瘤MGC803细胞生长和凋亡的影响。方法应用MTT法测定不同浓度的RES纳米微粒、RES、5-FU对MGC803细胞分别在0、6、12、24、48、60 h的细胞生长抑制率。流式细胞仪分析MGC803细胞周期的改变,细胞免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达,检测端粒酶活性。结果MTT法显示不同浓度的RES纳米微粒可抑制MGC803细胞增殖（60μg/ml作用60h的抑制率达64%）,并且与浓度和时间均呈正相关,流式细胞仪细胞周期分析提示RES纳米微粒可将MGC803细胞阻滞于S期,细胞免疫组化法显示凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达下调,端粒酶活性水平下降。结论RES纳米微粒可诱导人胃肿瘤细胞MGC803发生凋亡,延长药物对胃肿瘤细胞的有效作用时间,载药纳米微球没有改变RES成分的生物学活性。     

姜黄素纳米微粒对体外胃癌MGC803细胞凋亡机制的影响

目的观察姜黄素纳米微粒对人胃癌MGC803细胞凋亡机制的影响。方法 MTT法建立细胞剂量效应曲线,光镜和电镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪分析MGC803细胞周期改变,免疫组化法检测凋亡相关Bcl-2蛋白表达。结果 MTT法显示,姜黄素纳米微粒抑制胃癌MGC803细胞增殖,呈现剂量-时间依赖性;光镜观察姜黄素纳米微粒组细胞损伤较轻,电镜下核周隙清晰,突触小泡较多;流式细胞仪法显示,姜黄素纳米微粒使胃癌MGC803细胞阻滞于G2/M期;免疫组织化学法显示,姜黄素纳米微粒使凋亡相关Bcl-2蛋白表达下调。结论姜黄素纳米微粒诱导人胃癌细胞MGC803凋亡并且延长药物对胃癌MGC803细胞作用时间。     

5-氟脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素诱导人胃癌细胞凋亡的体外研究

目的了解5-氟脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素分别及联合对人胃癌MGC－803细胞凋亡的诱导作用。方法用一定剂量的5-氟脲嘧啶。丝裂霉素和表阿霉素分别及三药联合与人胃癌细胞株MGC－803共同孵育12h后,应用光镜进行细胞形态学观察。细胞DNA经特异性荧光染色后,用流式细胞仪分析细胞周期变化。结果人胃癌MGC－803细胞经5-氧脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素作用后,出现典型的细胞凋亡形态学改变,定量分析凋亡细胞发生率分别为10．2％、9．1％和9．7％,而三药联合作用后凋亡细胞的发生率为21．4％。结论5-氟脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素可诱导人胃癌细胞林凋亡,三药联用可提高凋亡细胞的发生率。     

siRNA介导的E2F-1基因沉默对胃癌细胞MGC803中Rb蛋白表达水平的影响

目的 应用RNA干扰技术研究E2F-1基因沉默在人胃癌MGC803细胞中对Rb蛋白表达的影响.方法 将重组质粒E2F-1-siRNA转染MGC803细胞,筛选稳定株,利用RT-PCR检测转染前后细胞E2F-1 mRNA表达水平,并通过蛋白免疫印记法（Western blot）检测各组细胞E2F-1蛋白的表达水平来验证质粒转入胃癌细胞的情况.采用Western blot检测三组细胞中总Rb蛋白和磷酸化Rb蛋白的表达情况,计算出非磷酸化Rb蛋白表达情况,统计各组间的差异.结果 重组质粒E2F-1-siRNA成功转入胃癌细胞中;有效抑制了E2F-1 mRNA的表达,E2F-1蛋白水平显著下降,与阴性对照组及未转染组相比分别降低了83.2%和84.6%,去磷酸化Rb蛋白分别增加了61.22%（P〈0.05）和66.60%（P〈0.05）,差异有统计学意义.结论 沉默表达E2F-1基因后,可以有效降低Rb蛋白的水平,促进其活化形式去磷酸化Rb蛋白的产生.     

槐耳清膏联合顺铂改变胃癌SGC7901细胞周期分布的实验研究

目的观察槐耳清膏联合顺铂（DDP）作用于人胃腺癌SGC7901细胞后细胞周期的变化,并探讨其可能的作用机制。方法通过细胞流式实验,观察不同浓度槐耳清膏、DDP及两药联合作用于胃癌SGC7901细胞24h后细胞周期的变化情况,并通过Westernblot检测不同浓度的槐耳清膏、DDP及两药联合作用于胃癌SGC7901细胞后,细胞周期相关蛋白ATM、H2AX、cdc-2、CyclinB1等的表达情况。结果细胞流式实验结果显示,槐耳清膏能够阻滞SGC7901细胞于G2/M期,DDP能够阻滞SGC7901细胞于S期,而两药联用后S期和G2/M期都有阻滞。Westernblot实验结果显示,槐耳清膏、DDP均可上调p-ATM、γ-H2AX蛋白表达,同时下调CyclinB1蛋白表达,且两药联用后效果更加明显。结论槐耳清膏、DDP能够通过调节细胞周期相关蛋白的表达改变细胞周期,抑制细胞增殖,与槐耳清膏联用可提高DDP对胃癌的疗效。     

5-氮杂-2＇-脱氧胞苷对人胃癌细胞株BGC803生长及死亡相关蛋白激酶基因表达的影响

目的：探讨去甲基化药物5-氮杂-2＇-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对人胃癌细胞BGC803增殖、凋亡及对死亡相关蛋白激酶（DAPK）mRNA表达水平的影响。方法用不同浓度的5-Aza-CdR处理BGC803细胞,设立不含5-Aza-CdR的对照组及3个实验组：5-Aza-CdR 1μmol/L组、5-Aza-CdR 5μmol/L组、5-Aza-CdR 10μmol/L组。CCK-8检测细胞的增殖情况,AnnexinⅤ/PI双染及流式细胞术检测药物处理后细胞凋亡的情况,RT-PCR检测用药前后DAPK mRNA的表达水平变化。结果实验组BGC803细胞增殖速度显著低于对照组,细胞凋亡率显著升高（P〈0.05）。RT-PCR结果显示,BGC803细胞中DAPK基本无表达,5-Aza-CdR处理后,细胞中DAPK mRNA表达量显著高于对照组（P〈0.05）。结论5-Aza-CdR抑制BGC803细胞增殖,并促进细胞凋亡,可能与其诱导DAPK基因表达有关。     

金雀异黄素增加胃癌BGC-823细胞对5-氟尿嘧啶敏感性的研究

目的:研究金雀异黄素(genistein,Gen)对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)抑制BGC-823胃癌细胞活性的影响.方法:Gen与5-FU单独及联合作用于胃癌BGC-823细胞24、48及72 h后,采用MTT法测定细胞的活性;Gen与5-FU单独及联合处理胃癌BGC-823细胞72 h后,透射电镜观察细胞超微结构改变,免疫细胞化学法研究凋亡相关基因的蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果:20件μmol/LGen和10tμmol/L 5-FU联合应用对胃癌细胞的生长导致了更显著的增殖抑制作用(P＜0.01);Gen、5-FU单独及联合应用均可诱导BGC-823细胞凋亡;Gen、5-FU联合应用时对BGC-823细胞的凋亡相关蛋白Bcl-2表达下调和Bax表达上调的作用较单独时明显(P＜0.05).结论:金雀异黄素可能通过上调Bax的表达和下调Bcl-2的表达而增加BGC-823细胞的凋亡,增加5-FU的抗癌活性.金雀异黄素是一种无毒的抗癌药,其与5-FU合用于胃癌患者可能提高化疗的效果.有必要开展金雀异黄素和5-FU合用的临床试验来检验该假设.     

人胃癌MGC803细胞紫杉醇耐药细胞系初步建立的实验研究

目的：探讨胃癌MGC803对紫杉醇的耐药机制,初步建立人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系,研究耐药过程中的变化。方法：采用逐步递增紫杉醇浓度,间歇作用体外诱导法建立人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系MGC803/PA,做相关检测;MTT法测定药物敏感性;光学显微镜、电子显微镜、MTT法等方法观察其生物学指标的改变。结果：经过4个月建成人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系MGC803/PA,2、3、4个月的耐药指数分别为5.12、11.46、15.98,并且与其他多种抗癌药有不同程度的交叉耐药性,MGC803/PA的细胞形态逐渐发生改变,生长曲线逐渐改变。结论：MGC803/PA细胞具有耐药表型,且耐药性能稳定,MGC803/PA的增殖能力逐渐下降,MTT法及其电镜可以较早地提示MGC803/PA的耐药特征。