中医三种治法对人肝癌细胞增殖及端粒酶活性的影响

目的:探讨中医活血软坚、益气养阴、清热解毒三种治法影响肝癌细胞增殖及端粒酶活性的特点和意义.方法:从临床治疗肝癌常用的活血软坚药中选取有代表性的丹参、川芎、鳖甲,益气养阴药中选取黄芪、枸杞子、女贞子,清热解毒药中选取半枝莲、白花蛇舌草,分别制成水煎剂,灌喂正常大鼠,采血制备药物血清.以正常鼠血清为阴性对照,将药物血清温育Bel-7402人肝癌细胞.噻唑蓝比色法测定细胞增殖,多聚酶链反应酶联免疫吸附(PCR-ELISA)法检测细胞端粒酶活性.结果:活血软坚药和益气养阴药均可抑制Bel-7402细胞的增殖,清热解毒药不能抑制Bel-7402细胞的增殖.活血软坚药、益气养阴药和清热解毒药均可抑制Bel-7402细胞端粒酶活性,且活血软坚药作用优于清热解毒药.结论:活血软坚法和益气养阴法均可抑制Bel-7402细胞的增殖,其主要机制可能是通过抑制Bel-7402细胞端粒酶活性.清热解毒法不能抑制Bel-7402细胞的增殖,但有一定的抑制细胞端粒酶活性的作用.     

抑制端粒酶活性能增加胃癌细胞对顺铂的敏感性

肿瘤细胞存在多药耐药现象和化疗药物的毒副作用是影响肿瘤化疗效果的主要原因。新近研究表明 ,表达于绝大多数肿瘤细胞而不表达于正常体细胞的端粒酶与化疗敏感性有关[1,2 ] 。在我们既往研究工作的基础上 ,我们观察了反义人端粒酶ＲＮＡ(ｈＴＲ)转染的ＳＧＣ 790 1胃癌细胞在端粒酶活性受抑制后对常用化疗药物顺铂敏感性的变化 ,探索胃癌联合化疗的新途径。一、材料与方法1 细胞培养 :人胃癌细胞系ＳＧＣ 790 1和反义人端粒酶ＲＮＡ转染的ＳＧＣ 790 1细胞 (790 1 ａｈＴＲ) [3] 均培养于含 10 %灭活的小牛血清、10 0 μｇ/ｍｌ链霉素、10…     

搏癌丸对人肝癌Hep-G2细胞端粒酶活性的影响

目的:研究中药复方搏癌丸对人肝癌细胞Hep-G2端粒酶活性的影响。方法:采用药物血清和细胞药理学方法,观察10％搏癌丸药物血清作用Hep-G2细胞48h后对端粒酶活性的影响。结果:人肝癌细胞Hep-G2细胞经10%搏癌丸药物血清培养48h后,其端粒酶活性被显著抑制(抑制率为66.6%),与无药血清对照组比较,有显著性差异,P<0.05。结论:搏癌丸能显著抑制端粒酶活性。     

顺铂和苦参素对人肝癌细胞株HepG2端粒酶活性的影响

观察顺铂、苦参素对人肝癌细胞株HepG2端粒酶活性的影响,进一步探讨两种药物的可能作用机制。采用人肝癌细胞株HepG2作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的药物对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析细胞周期的分布及凋亡;PCR-ELISA法检测端粒酶活性的变化。两种药物均具有抗HepG2细胞增殖、阻滞细胞周期、诱导凋亡及抑制端粒酶活性的作用。对端粒酶活性的抑制可能是两种药物发挥抗肿瘤作用的机制之一。     

茜草蒽醌对SMMC-7721肝癌细胞的抑制作用及分子机制

目的探讨茜草提取物蒽醌单体对人SMMC-7721肝癌细胞的抑制作用及分子机制。方法将茜草蒽醌作用于体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞,采用MTY法检测其对肝癌细胞生长的抑制作用,应用TRAP-PAGE银染半定量法和RT—PCR半定量法检测端粒酶活性及端粒酶亚单位即端粒酶相关蛋白1（TP1）基因、端粒酶RNA（hTR）基因、端粒酶催化亚单位（hTERT）基因变化。结果茜草蒽醌能抑制肝癌细胞的生长,呈现与浓度、时间的依赖趋势;降低端粒酶活性,使hTERT基因的表达量明显下降（P〈0．01）,而hTR、TP1基因的表达无显著变化（P〉0．05）。结论茜草蒽醌能显著抑制肝癌细胞的生长并抑制端粒酶的活性,可能与其下调hTERT基因的表达有关。     

三氧化二砷诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及对OPN表达的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）治疗肝癌的可行性及机制。方法将一定浓度梯度的As2O3与人肝癌细胞株SMMC-7721孵育后,采用MTT法、荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞增殖与凋亡变化,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝癌细胞株中骨桥蛋白基因（OPN mRNA）表达水平。结果As2O3作用后SMMC-7721细胞生长明显受抑,且呈时间-浓度依赖性;荧光显微镜下细胞呈典型的凋亡形态学改变;在流式细胞仪上可见“凋亡峰”,细胞周期阻滞于G2／M期;细胞OPN mRNA表达阳性,OPN mRNA表达水平明显下调。结论As2O3体外能有效抑制肝癌细胞株生长;其机制可能为诱导细胞凋亡、下调OPN mRNA表达。     

序贯治疗中,晚期肝癌的临床研究

本文经肝动脉化栓塞、超声介入局部注射顺铂配伍鱼肝油酸钠，同时口服中药肝宝康泰治疗中、晚期肝癌７６例，与单纯ＴＡＥ治疗对照组研究。     

刺五加皂甙对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响

目的研究刺五加皂甙(ASS)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用。方法体外培养人肝癌SMMC-7721细胞，用浓度0.25、0．5、1．0mg／ml的刺五加皂甙作用细胞，于12、24、48h后，用苏木素-伊红(HE)染色法及电镜技术观察凋亡细胞的形态，用琼脂糖电泳显示DNA凋亡梯带。结果ASS不促进肝癌细胞的调亡，且随着剂量和时间的增加诱发凋亡程度增高。结论ASS抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖，诱导细胞凋亡，对指导临床药物治疗肝癌具有重要的意义。     

胃癌病人端粒酶活性变化与化疗疗效关系的探讨

我们对1993年至1995年收治的147例手术及化疗胃癌病人的端粒酶活性与化疗疗效的关系进行了探讨。现将结果报告如下。一、病人与方法1.术后辅助化疗:经手术切除的原发性胃癌68例,中位年龄49岁,术后随机用5氟尿嘧啶(5ＦＵ)500ｍｇ/ｍ2、表阿霉素(ＥＰＩ)40ｍｇ/ｍ2、丝裂霉素Ｃ(ＭＭＣ)4ｍｇ/ｍ2与碘油混悬,腹腔动脉灌注,1～2次/3周,间隔3～4周,4～6次为1个疗程;对6例有恶性腹水者用顺铂40ｍｇ/ｍ2、5ＦＵ500ｍｇ/ｍ2及ＭＭＣ4ｍｇ/ｍ2行腹腔化疗,1次/周,4～6次为1个疗程。另选同期手术的23例原发性胃癌病人作对照。疗效判断按癌灶是否复发、…     

干扰素联用药物对胃癌细胞的抑制作用

目的研究不同剂量、不同的用药顺序等配伍方式，探讨干扰素与化疗药物体外联合应用，对人胃癌细胞株的抑制作用．方法以人胃癌细胞株ＦＧＣ８５作为靶细胞，用肿瘤细胞集落形成法进行药敏实验．分析了干扰素α２ｂ（ＩＦＮα２ｂ）与氟脲嘧啶、顺铂联合应用时，不同的配伍方式对人胃癌细胞株增殖的抑制作用．实验分组为：①化疗药物；②ＩＦＮα２ｂ；③化疗药物和ＩＦＮα２ｂ同时作用；④化疗药物继以ＩＦＮα２ｂ；⑤ＩＦＮα２ｂ继以化疗药物．结果ＩＦＮα２ｂ与氟脲嘧啶或顺铂联合应用对ＦＧＣ８５细胞增殖的抑制作用明显强于各单独应用，各组抑制率之间均有显著差异（Ｐ＜００１）；ＩＦＮα２ｂ降低氟脲嘧啶、顺铂的ＩＣ５０，并且有显著差异（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１）；加药顺序不同，抑制效果亦不同，以化疗药物继以ＩＦＮα２ｂ组最佳，ＩＦＮα２ｂ继以药物组最差，二者间有显著差异（Ｐ＜００１）．结论ＩＦＮα２ｂ与氟脲嘧啶、顺铂联合应用，可提高药物的抑瘤作用．     

健脾理气药诱导人肝癌细胞SMMC7721凋亡的研究

目的观察健脾理气药的诱导凋亡效应,为其临床应用进一步提供依据.方法采用血清药理学方法研究中药的体外效应.应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测含中药兔血清对肝癌细胞的抑制效应,以Annexin V标记法、DNA含量测定、电子显微镜方法检测含中药血清诱导凋亡及细胞周期阻滞效应.免疫组化法观察含中药血清对P53,P21WAF1/CIP1蛋白的影响,RT-PCR法观察含中药血清对P21WAF1/CIP1 mRNA表达水平的影响.结果含中药血清有一定的抑制肝癌细胞作用,其作用3 d的抑制率为6.6%,作用6 d的抑制率为36.2%.含中药血清作用2 d诱导9.8%±4.0%的肝癌细胞凋亡,使细胞周期阻滞于S期,并上调P53蛋白、P21WAF1/CIP1 mRNA及蛋白的表达.结论健脾理气药具一定的诱导凋亡及抑制肝癌细胞效应,上调p53,p21WAF1/CIP1基因的表达为分子机制.     

5-氟脲嘧啶腹腔化疗预防裸鼠人结肠癌细胞肝转移研究

目的探索预防大肠癌根治术后肝转移局部区域性辅助化疗新途径.方法利用裸鼠人结肠癌细胞肝转移模型观察术后早期大剂量大容积5-氟脲嘧啶腹腔化疗预防裸鼠经睥接种的人结肠癌细胞肝转移的疗效.结果术后早期5-氟脲嘧啶40 mg/生理盐水40 ml/kg,1次/d,连续2 d 的腹腔化疗可使裸鼠肝转移发生率降低40%,平均每只裸鼠肝转移瘤数目减少50.89%,平均每只裸鼠生存时间延长48.21%.结论腹腔化疗是一个预防大肠癌根治术后肝转移有效的辅助化疗新途径.     

棘霉素诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡的研究

目的研究棘霉素诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡的作用,探讨其抗肿瘤的作用机制。方法通过细胞计数获得不同浓度棘霉素作用SMMC7721细胞的生长抑制率,观察棘酶素对肝癌细胞生长的影响;通过流式细胞仪分析棘霉素对细胞凋亡和细胞周期的影响。结果棘霉素浓度〉10 ng/ml时可抑制SMMC7721细胞的生长。结论棘霉素在体外可诱导肝癌细胞凋亡,具有很强的抗肿瘤作用。     

Serum deprivation enhances DNA synthesis of human hepatoma SMMC7721 cells

ＳｅｒｕｍｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎｅｎｈａｎｃｅｓＤＮＡｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｍａＳＭＭＣ７７２１ｃｅｌｓＪＩＡＮＧＳｈｉＭｉｎｇａｎｄＸＵＺｈａｏＨｕｉＳｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓｌｉｖｅｒｎｅｏｐｌａｓｍｓ;ｃａｒｃ...     

Detection of telomerase activity in malignant neoplasms and nonmalignantepithelial tissues of human esophagus

AIM To study the expression of telomerase activity in malignant esophageal neoplasms and normal humanesophageal epithelia.METHODS Telomerase activity was assayed by the telomere repeat amplification protocol (TRAP)method. All the neoplasms and epithelia of esophagus were confirmed by routine pathological diagnosis.RESULTS Telomerase activity was assayed in 18 normal esophageal epithelial tissues and in 35 malignantneoplasms of esophagus, including 27 cases of esophageal carcinoma and 8 cases of cardiac carcinoma.Telomerase activity was detected in most of malignant neoplasms of esophagus (91.4%, 32/35) and in allthe normal esophageal epithelial tissues except one (18/19).CONCLUSION The results suggest that in addition to contributing to proliferation of immortal blast cellsand neoplastic cells, telomerase activity may also play a similar role in regeneration of normal epithelia ofhuman esophagus. The potential use of telomerase activity as a diagnostic marker in human esophagealneoplasm might not be suitable.