缩醛磷脂生物学作用的研究进展

缩醛磷脂 (Ｐｌａｓｍａｌｏｇｅｎ)是存于哺乳动物组织内含烯醚键的甘油磷脂 ,它是在磷酸甘油酯的甘油骨架Ｃ 1上以醚键连接一个α、β不饱和碳氢链。即-Ｏ -ＣＨ =ＣＨ -Ｒ ,其全部结构为 :随着Ｘ的不同 ,其种类包括缩醛磷脂酰乙醇胺(Ｐｌａｓｍｅｎｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ)、缩醛磷脂酰胆碱 (Ｐｌａｓ ｍｅｎｙｌｃｈｏｌｉｎｅ)和缩醛磷脂酰丝氨酸 (Ｐｌａｓｍｅｎｙｌｓｅｒ ｉｎｅ)等。它们是研究磷脂代谢时被发现的一种醚磷脂。并发现缩醛磷脂在豚鼠的大脑和心脏中含量尤为丰富 ,但对其生物学作用还不完全清楚。随着研究工作的…     

霍乱肠毒素的纯化与鉴定

本法纯化的肠毒素有下列特点:1.纯化毒素与粗制毒素对抗血清呈现单一线条,并与标准抗血清完全融合。2.经免疫电泳、等电点聚焦电泳等方法测定其结果与美国制备肠毒素一致。3.本法所纯化的毒素与自然类毒素未分开,其家兔兰斑试验为IBD/0.002μg,回收率达35%,且杀弧菌抑制试验为阴性。     

大鼠胰岛分离纯化实验研究

目的介绍一种大鼠胰岛分离纯化方法。方法SD大鼠和Wistar大鼠共10只,以0.05%Ⅴ型胶原酶胆管灌注,经消化后用葡聚糖(dextran)不连续密度梯度法纯化胰岛。DTZ和AO/PI染色检测纯度及活性。结果胰岛收获量为(930±168)个,Ⅴ型胶原酶灌注及不连续密度梯度法可获得纯度高、活性好胰岛。结论以0.05%的胶原酶胆管灌注消化的方法可得纯度高、活性良好的胰岛。     

牙周炎患者龈下厌氧菌群的分离和鉴定

从24例正常人、34例成年人牙周炎和18例青少年牙周炎患者龈下分离和鉴定了23种共296株革兰氏阴性无芽胞厌氧菌。产黑色素类杆菌、牙龈类杆菌、伴放线嗜血杆菌、核梭杆菌、衣氏和梅氏放线菌是牙周炎患者龈下优势厌氧菌群。两类患者龈下韦荣氏球菌的检出率与正常人相似。实验结果还提示,牙周炎非为单一的病原体所引起,而是多种厌氧菌共同作用的结果。     

HBsAg和抗-HBsIgG的分离纯化及其ELISA药盒的研制

HBsAg阳性血清经PEG分级、DEAE DE22离子交换柱层析、羊抗-NHS固相柱和抗-HBs IgG固相柱纯化,得高活性的HBsAg(CEP≥1∶128,(280mm)/(260mm)=1.15);而高活性的抗-HBs(ID=1∶1024,(280mm)/(260mm)=1.29)必须用高滴度的抗血清,经硫酸铵分级、NHS固相柱和HBsAg固相柱分离,它们是制备敏感性高、特异性强的ELISA药盒的关键,同时药盒还与包被抗体和指示抗体如何合理搭配相关,如指示抗体为山羊抗-HBs,则包被抗体最好是豚抗-HBs.搭配效应的发现将有利于提高ELISA检测水平和药盒的经济效益.     

人胎盘泌乳素分离纯化及其鉴定的研究

本研究采用hPL-Sepharose 4B亲和层析技术,从胎盘匀浆中分离纯化出hPL抗原,经聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳、免疫电泳、双向交叉免疫试验,证实本室提纯的hPL抗原为单一成份。     

成年大鼠胰岛的分离纯化及体外培养

目的:探讨大鼠胰岛细胞分离纯化及体外培养方法。方法:胆总管内逆行灌注胶原酶Ⅴ,分次短时间消化胰腺,F ico ll 400间断密度梯度法纯化胰岛,所得胰岛进行培养鉴定。结果:大鼠胰腺消化后胰岛产量为1050±59个胰岛/胰腺,F ico ll 400纯化后产量为498±60个胰岛/胰腺,纯度可达70%,细胞存活率在93%以上,胰岛素释放试验显示高糖刺激后胰岛素释放量为低糖时的1.91倍,表明胰岛细胞功能良好。培养第13天,约有30%~40%胰岛存活,并具有完整的形态结构,胰岛素分泌量约降为最高值的30%。结论:该方法所得胰岛产量、纯度较高,功能良好,是一种较理想的胰岛细胞分离方法。普通培养条件适合胰岛的短期培养。     

合欢皮的脂溶性成分

目的：研究合欢皮（ＣｏｒｔｅｘＡｌｂｉｚｉａ）的化学成分及其生物活性。方法：用色谱法和光谱解析方法对树皮的亲脂性化学成分进行分离和结构测定。结果：共得６个化合物：（１）１（２９羟基二十九碳酸）甘油酯,（２）１（２４羟基二十四碳酸）甘油酯,（３）乙酸Δ１２乌苏烯３β醇酯,（４）二十二碳酸乙酯,（５）β谷甾醇,（６）α菠甾醇３ＯβＤ葡萄糖甙。结论：化合物（１）为新化合物,（２）为首次以单体形式获得,（３）为首次从合欢属植物中获得的乌苏烷型三萜,（４）为首次从合欢属植物中获得。     

粗叶悬钩子化学成分的分离鉴定

研究粗叶悬钩子化学成分。方法 :用色谱法和光谱解析方法对粗叶悬钩子叶的化学成分进行分离和结构测定。结果 :共得到 6个化合物 :粗叶悬钩子甙 (alcesefoliside ,1) ,金丝桃甙 (hyperoside ,2 ) ,3 氧化 6 羟基 紫罗兰醇 (vomifoliol ,3) ,β 谷甾醇 (β sitosterol ,4) ,胡萝卜甙 (daucosterol ,5 ) ,碳三十二醇 (dotriacontylalcohol ,6 )。 结论 :化合物 1为新化合物 ,其余化合物均首次从该植物中获得。     

木豆中牡荆甙与异牡荆甙的分离与鉴定

为进一步了解木豆（ＣａｊａｎｕｓｃａｊａｎＬ．Ｍｉｌｓｐ）嫩茎叶的化学成分,以溶剂法、结晶法及柱层析法从木豆中将牡荆甙（ｖｉｔｅｘｉｎ）与其异构体异牡荆甙（ｉｓｏｖｉｔｅｘｉｎ）分离,并以红外光谱法（ＩＲ）、紫外光谱法（ＵＶ）、质谱法（Ｍｓ）、１３Ｃ谱法（１３ＣＮＭＲ）、１Ｈ谱法（１ＨＮＭＲ）确定了两者的结构,其中异牡荆甙系首次从木豆中分得。     

胎大鼠脑内小胶质细胞的分离纯化和鉴定

 摘要：目的 分离纯化和鉴定胎大鼠脑内小胶质细胞,为小胶质细胞的研究奠定基础。方法 利用盐酸利多卡因注射液联合震荡培养法分离纯化胎大鼠脑内小胶质细胞,免疫荧光技术及流式细胞技术鉴定小胶质细胞的纯度。结果 通过盐酸利多卡因注射液联合震荡培养法,得到98%纯度的小胶质细胞。结论 盐酸利多卡因注射液联合震荡培养法是一种能获得较高纯度胎大鼠脑内小胶质细胞的方法。     

红曲菌株的分离纯化和鉴定

[目的]对红腐乳中的红曲菌进行分离纯化和鉴定。[方法]根据红曲菌嗜酸、耐乙醇的生长特性,用含乙醇的麦芽汁、含乳酸的大米培养基分离红腐乳汁中的红曲菌,并用对数稀释平板法进行纯化。纯化后的红曲菌显微观察确定其属别。依照其在MEA培养基上25℃培养的菌落形态特征鉴定到种。[结果]从红腐乳中分离的两个菌株经鉴定M-1属丛毛红曲菌(M.pilo-sus),M-3属红曲红曲菌(M.anka)。[结论]红腐乳中分离的纯培养为红曲属真菌。     

亲和层析法纯化溶栓素

目的 :探讨亲和层析纯化溶栓素的方法。方法 :采用高碘酸钠法制备溶栓素抗体的亲和层析介质纯化溶栓素。结果 :提纯的溶栓素经聚丙烯酰胺凝胶电泳 ( PAGE)鉴定为一条带 ,活性回收率为 49.5 %。结论 :亲和层析的高碘酸钠法是纯化溶栓素的一种分离速度快、特异性强、经济、安全可靠的方法 ,并适合于大规模纯化     

人血浆前白蛋白的分离和纯化

建立一种新的分离纯化人血浆前白蛋白（ＰＡ）的方法。由酚试剂沉淀后的血浆，通过离子交换树脂分离所得ＰＡ，用高效液相色谱仪（ＨＰＬＣ）进行纯化，经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测定，其分子量在５５０００左右，纯度达到电泳纯和免疫纯。此法步骤简单，用血量少，适用于实验室常规操作和临床人体研究。     

蛇床子中喔斯脑、欧芹属素乙的提取分离及鉴定

从蛇床果实的乙醇提取物中经柱层析、薄板层析、高效液相层析证明有八种成分,已测定其中喔斯脑(Qsthol,欧芹酚—7—甲醚)及欧芹属素乙(imperatonin)为主要成分,并分离得到单体,其它六种化合物因含量少,未进一步进行分离。     

~1PEP-1-p27mt融合蛋白的原核表达及纯化

目的:构建融合蛋白PEP-1-p27mt的原核表达质粒,并进行诱导表达和蛋白纯化。方法:通过PCR方法自pORF9-hp27mtv21质粒中扩增p27mt基因,克隆入中间载体pGEM-TEasy Vector。经XhoI和BamH1双酶切后,构建原核表达载体pET15b-pep-1-p27mt,经测序证实构建成功后转化EcoliBL21(DE3)pLysS,表达PEP-1-p27mt融合蛋白,经Ni-NTA树脂亲合层析,纯化产物进行SDS-PAGE及Western Blot分析鉴定。结果:成功构建PEP-1-p27mt融合蛋白原核表达载体,表达并纯化了相对分子量为32×103的PEP-1-p27mt融合蛋白。结论:PEP-1-p27mt融合蛋白表达载体的构建及目的蛋白的表达纯化,为体内应用细胞周期抑制蛋白诱导肿瘤细胞凋亡的研究提供了理论基础。     

狗血清IgM的提纯

本文参照人血清IgM提纯方法,进行狗血清IgM的提纯。将正常狗用新鲜绵羊红细胞免疫后,其血清用硫酸铵沉淀法提取γ-球蛋白,再用DEAE-纤维素过柱,取洗脱液的第三峰;然后又经Sephadex G200过柱,收集洗脱液的第一峰,透析,浓缩。采用此法能较稳定地提纯狗血清IgM。     

沙蚕纤溶酶的一种纯化方法

目的 从双齿围沙蚕体内提取并纯化一种新的纤溶酶。方法 应用硫酸铵沉淀、透析、凝胶柱层析（Sephadex G-100）以及电泳等生化手段对沙蚕纤溶酶进行分离纯化。用平板法测定它降解纤维蛋白的活性。结果 得到纯的沙蚕纤溶酶,测出其等电点为4．5左右,由两条边组成,其相对分子量分别为33000u和14400u。结论 该酶为首次从沙蚕中发现的一种新的纤溶酶。     

成年猪和大鼠胰岛分离纯化的实验研究

目的 选择最佳猪、鼠胰岛的制备方法。方法 采用不贩 胶原酶消化法及不连续密度梯度纯化法。结果 选出了制备适合猪、鼠胰岛的最佳方法。结论 由于猪、鼠胰腺结构的不同，制备胰岛细胞应采取不同的消化及纯化方法。     

当归多糖的分离、纯化及分析鉴定

目的　从新鲜中国当归 [Angelica sinensis(Oliv)Diels]中分离纯化出多个多糖组分 ,并对其理化性质进行分析鉴定 .方法　采用水煮—乙醇沉淀法从新鲜当归中提取当归总多糖 AP- 0 ;AP- 0用 80 g· kg- 1十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)沉淀得到当归多糖亚组分 AP- 1;CTAB处理后的上清用 10 g· kg- 1 H3BO3,2 mol· L- 1 Na OH处理得到当归多糖亚组分 AP- 2 ;所剩上清 ,用乙酸处理后 ,再用乙醇沉淀 ,得到当归多糖亚组分 AP- 3.总糖含量测定采用改良苯酚 -硫酸法 ;蛋白质含量测定采用 Serva Blue- G染料结合法 ;糖醛酸含量测定采用间羟基连苯法 .采用新华中速滤纸纸色谱和硅胶G薄层色谱分析多糖各组分的单糖组成 .高效凝胶过滤色谱和高效离子交换色谱分析多糖各组分的 Mr分布和电荷性质 .红外光谱法分析多糖各组分的糖苷键构成 .结果　 AP- 0总糖 970 g· kg- 1 ,其中糖醛酸 2 10 g· kg- 1 ,蛋白质 30g·kg- 1 ;AP- 1总糖 970 g· kg- 1 ,其中糖醛酸 172 g· kg- 1 ,蛋白质 30 g· kg- 1 ;AP- 2总糖 830 g· kg- 1 ,其中糖醛酸 2 5 7g·kg- 1 ,蛋白质 170 g· kg- 1 ;AP- 3总糖 970 g· kg- 1 ,其中糖醛酸 86 g· kg- 1 ,蛋白质 30 g· kg- 1 .AP- 0 ,AP- 1,AP- 2和 AP- 3主要由葡萄糖 ,阿拉伯糖和少量糖醛酸